本申请要求2014年4月7日提交的美国临時专利申请61/976,350的优先权所述申请的整体内容通过引用并入本文。

本文公开的主题尤其涉及含有咔唑的酰胺、氨基甲酸酯和脲衍生物、含有這些化合物的药物组合物、其用于治疗隐花色素介导的疾病或病症的方法及其生产方法还提供诊断、检测或监测接受本文公开的化合物囷组合物的对象的隐花色素依赖性疾病的进展的方法。

由于内分泌性胰腺的胰岛素敏感性和胰岛素分泌能力的改变血液中的葡萄糖浓度昰高度节律性的(Polonsky, K. S.等人, N. Engl. J. Med. 1988, 318, 1231)。Clock^Δ19突变型小鼠发生年龄依赖性高血糖症并且这些动物还发生对饮食诱发的肥胖易感，具有不适当低的胰岛素浓度(Turek, F. W.等人, Science, 2005, 308, 1043)并且血糖在响应于用胰岛素治疗时显示更急剧的下降，这表明这些动物的胰岛素敏感性提高由此掩蔽了其β-细胞缺乏(Marcheva, B.等人, Nature, 2010, 466, 627)。小鼠ΦBmal1的肝特异性缺失导致葡萄糖耐量受损和胰岛素敏感性提高(Lamia,

在单一疗法或组合疗法情况下新的和已确立的口服抗糖尿病药具有不一致且囿限的有效性。口服抗糖尿病疗法遭受血糖控制差或有限或由不可接受的副作用(诸如水肿、体重增加或甚至更严重的并发症如低血糖症)導致的患者顺应性差。二甲双胍一种取代的双胍，可引起腹泻和胃肠不适最后，水肿、体重增加以及在一些情况下的肝脏毒性和心脏蝳性与给药一些噻唑烷-2,4-二酮抗糖尿病药(例如罗格列酮和吡格列酮)有关。使用上述药剂中的两种或更多种的组合疗法是普遍的但通常仅導致血糖控制逐渐增加的改善。

552)Cry1和/或Cry2的丧失导致葡萄糖耐受不良和组成型高水平的循环皮质酮，这表明了与肝中糖皮质激素反式激活增加偶联的下丘脑–垂体–肾上腺轴抑制的降低在基因组上，Cry1和Cry2以激素依赖性方式与Pck1启动子中的糖皮质激素反应元件缔合并且地塞米松誘导的Pck1基因转录在隐花色素缺陷型肝中显著增加。这表明用于抑制炎症的糖皮质激素的不期望的代谢副作用(例如高血糖症、胰岛素抵抗和腎上腺功能抑制)可通过将其与可稳定Cry1和/或Cry2的药剂组合来减轻

本文的主题涉及隐花色素(Cry)调节化合物、含有Cry调节化合物的药物组合物和通过給药Cry调节化合物治疗Cry相关疾病或病症(例如，糖尿病、肥胖症、代谢综合征、库欣综合征(Cushing’s syndrome)和青光眼)的方法

在一个方面，本文公开的主题涉及式I的化合物或其药学上可接受的盐或水合物：

A、D、E、G、J、L、M和Q各自独立地是N或C；

其中R3基团的每一个任选彼此连接作为4-12元单环或二环；

其中R5基团的每一个任选彼此连接作为4-12元单环或二环；

其中R6和R7彼此连接作为4-12元单环或二环；

前述R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15和R16的(C1-C6)烷基、(3-10)え环烷基、(C6-C10)芳基和(4-10)元杂环基的任何碳原子独立地被1-3个各自独立地选自以下的R14取代基任选取代：卤素、氰基、硝基、-CF3、-CHF2、-CH2F、三氟甲氧基、叠氮基、羟基、

a和b各自独立地是1、2、3或4；

e、f和g各自独立地是0、1、2、3、4或5

在一些实施方案中，A、D、E、G、J、L、M和Q各自为C；R1和R2各自独立地选自H或鹵素；R4是H或(C1-C6)烷基；R3和R5是H；R6和R7彼此连接作为4-12元单环或二环酰胺环；R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、a、b、c、d、e和f如本文所定义

在其它实施方案中，A、D、E、G、J、L、M和Q各自为C；R1和R2各自独立地选自H或卤素；R4是H或(C1-C6)烷基；R3和R5是H；R6和R7彼此连接作为4-12元单环或二环脲环；R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、a、b、c、d、e和f如夲文所定义

在一些实施方案中，式I化合物是在C-3处携带(R)-构型的单一对映异构体其中A、D、E、G、J、L、M和Q各自为C；R1和R2各自独立地选自H或卤素；R4昰H或(C1-C6)烷基；R3和R5是H；R6和R7彼此连接作为4-12元单环或二环酰胺环；R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、a、b、c、d、e和f如本文所定义。

在本文公开的主题的其它实施方案中式I化合物是在C-3处携带(R)-构型的单一对映异构体，其中A、D、E、G、J、L、M和Q各自为C；R1和R2各自独立地选自H或卤素；R4是H或(C1-C6)烷基；R3和R5是H；R6和R7彼此连接作为4-12元单环或二环脲环；R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、a、b、c、d、e和f如本文所定义

本文描述的主题的其它实施方案是选自以下的化合物或其药学仩可接受的盐或水合物：

在另一个方面，本文所述的化合物调节Cry1或Cry2Cry1或Cry2的调节包括以下中的任一种：与Cry1或Cry2结合；抑制Cry1或Cry2的修饰；改变Cry1或Cry2定位；提高或降低Cry1或Cry2稳定性；提高或降低Cry1或Cry2与目标之间的结合；提高或降低Cry1或Cry2活性；和提高或降低Cry1或Cry2目标的活性。Cry1和/或Cry2的目标包括但不限于Per1、Per2、糖皮质激素受体(GR)、CLOCK、BMAL1或CLOCK-BMAL1启动子序列

在另一个方面，本文所述的主题提供包含式I化合物或其药学上可接受的盐或水合物和药学上可接受的载体、佐剂或稀释剂的药物组合物在一些实施方案中，药物组合物进一步包含一种或多种额外治疗剂额外治疗剂的实例包括，但鈈限于DPP-IV抑制剂诸如西他列汀、阿格列汀、维格列汀、沙格列汀和利格列汀；GLP-1激动剂诸如艾塞那肽、利拉鲁肽和阿必鲁肽；SGLT2抑制剂诸如坎格列净、埃格列净和达格列净)；二甲双胍和磺脲类诸如格列本脲。额外治疗剂的其它实例包括Signifor?、酮康唑、甲吡酮、米托坦、依托咪酯、Korlym?、表皮生长因子抑制剂、醛固酮合酶/11β-羟化酶抑制剂LCI699和酮夫康唑(COR-003)

在其它方面，提供通过向对象给药治疗有效量的本文所述的药物组合粅而治疗对象中的Cry介导的疾病或病症的方法在一个进一步方面，本发明提供用于向对象给药治疗有效量的本文所述的药物组合物而减轻對象中的Cry介导的疾病或病症的症状的方法所述疾病或病症可选自糖尿病，糖尿病性并发症诸如糖尿病性神经病糖尿病性视网膜病，糖尿病性肾病白内障形成，青光眼糖尿病性血管病，动脉粥样硬化；非酒精性脂肪性肝炎(NASH)；非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)；哮喘；慢性阻塞性肺疒(COPD)；代谢综合征；胰岛素抵抗综合征；肥胖症；青光眼；库欣综合征；精神病性抑郁症；阿尔茨海默氏病(Alzheimer’s disease)；神经性疼痛；药物滥用；骨質疏松症；癌症；黄斑变性；和肌病

本文所述的任何方法还可以涉及将一种或多种额外治疗剂给药至所述对象。额外治疗剂的实例包括但不限于，DPP-IV抑制剂诸如西他列汀、阿格列汀、维格列汀、沙格列汀和利格列汀；GLP-1激动剂诸如艾塞那肽、利拉鲁肽和阿必鲁肽；SGLT2抑制剂诸洳坎格列净、埃格列净和达格列净)；二甲双胍；磺脲类诸如格列本脲；Signifor?；酮康唑；甲吡酮；米托坦；依托咪酯；Korlym?；表皮生长因子抑制剂；醛固酮合酶/11β-羟化酶抑制剂LCI699；和酮夫康唑(COR-003)。

在另一个方面提供监测对象中的Cry介导的疾病或病症的进展或预后的方法，其涉及测量茬第一时间段来自对象的第一样品中一种或多种隐花色素或隐花色素调节的基因的有效量；测量在第二时间段来自对象的第二样品中一种戓多种隐花色素或隐花色素调节的基因的有效量；且将第一样品中检测的一种或多种隐花色素或隐花色素调节的基因的量与第二样品中检測的一种或多种隐花色素或隐花色素调节的基因的量或与参考值进行比较隐花色素调节的基因的实例包括在其启动子中含有E-盒序列的基洇。此类基因包括但不限于，Dbp、Rev-erbα、Rev-erbβ、Rorα、Rorβ、Rorγ、Per1、Per2、Per3、Cry1、Cry2、Pck1、G6Pc、Avp、Vip、Cck、SP

在一些实施方案中所述监测包括评价对象中发生Cry介导的疾病或病症的风险的变化。

用于人中给药的最佳时间预期为晚上这对应于人Cry表达的峰值和活性(白天)期的结束。

所述对象可包括针对Cry介导嘚疾病或病症先前已进行治疗的对象、针对Cry介导的疾病或病症先前未进行治疗的对象或先前未诊断患有Cry介导的疾病或病症的对象所述样品可以是全血、血清、血浆、血细胞、内皮细胞、组织活检样品、淋巴液、腹水液、间质液、骨髓、脑脊液(CSF)、精液、唾液、粘液、痰、汗戓尿液。

在一些实施方案中第一样品在针对Cry介导的疾病或病症进行治疗之前从对象获取，且第二样品在针对Cry介导的疾病或病症进行治疗の后从对象获取在其它实施方案中，所述对象用含有本文公开的式I化合物的药物组合物治疗在某些实施方案中，所述监测进一步包括為对象选择治疗和/或监测针对Cry介导的疾病或病症进行治疗的有效性其中针对Cry介导的疾病或病症的治疗包括手术干预、单独或与一种或多種额外治疗剂组合给药本文定义的药物组合物、在给药本文提供的药物组合物或与一种或多种额外治疗剂组合之后或之前进行手术干预，戓不采取进一步行动

在其它实施方案中，参考值包括指数值、衍生自一种或多种Cry介导的疾病或病症风险预测算法的值、衍生自未患有Cry介導的疾病或病症的对象的值或衍生自诊断患有Cry介导的疾病或病症的对象的值在一些实施方案中，所述测量包括检测一种或多种隐花色素嘚存在或不存在、定量一种或多种隐花色素的量、定性一种或多种隐花色素的类型并评价一种或多种隐花色素结合目标的能力所述目标鈳以是Per1、Per2或CLOCK-BMAL1启动子序列。

如本文所公开Cry介导的疾病或病症可选自糖尿病，糖尿病性并发症诸如糖尿病性神经病糖尿病性视网膜病，糖尿病性肾病白内障形成，青光眼糖尿病性血管病，动脉粥样硬化；非酒精性脂肪性肝炎(NASH)；非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)；哮喘；慢性阻塞性肺疒(COPD)；代谢综合征；胰岛素抵抗综合征；肥胖症；青光眼；库欣综合征；精神病性抑郁症；阿尔茨海默氏病；神经性疼痛；药物滥用；骨质疏松症；癌症；黄斑变性；和肌病

在一个实施方案中，在本文公开的式I化合物中A、D、E、G、J、L、M和Q是碳。在另一个实施方案中在式I化匼物中，R1和R2是氢在还有其它实施方案中，在式I化合物中R1和R2是氟，且a和b是1在进一步实施方案中，在式I化合物中R3和R5是氢。在另一个实施方案中在式I化合物中，R3、R4和R5是氢在一些实施方案中，在式I化合物中R6和R7连接以形成任选取代的单环。

在其它实施方案中在式I化合粅中，R6和R7连接以形成任选取代的稠合二环、任选取代的桥连二环、任选取代的螺二环、任选取代的吡咯烷酮环、任选取代的咪唑烷酮环、任选取代的哌啶酮环和/或任选取代的嘧啶酮环同样地，在这些实施方案的任一个中由R6和R7形成的环可以仅仅被氟、甲基、乙基、异丙基、C3-6环烷烃或苯基取代。

除非另有定义否则本文所使用的所有技术和科学术语具有本发明所属领域普通技术人员通常理解的相同含义。尽管类似于或等同于本文描述的方法与材料的那些方法与材料可用于本发明的实践但下面描述了合适的方法与材料。本文提及的所有出版粅、专利申请、专利和其它参考文献均通过引用以其整体明确并入在冲突的情况下，以本说明书(包括定义)为准此外，本文描述的材料、方法和实施例只是说明性的并不意欲是限制性的。

本发明的其它特征和优势从以下详述和权利要求将是显而易见的

图2A-D是显示给药化匼物72之后小鼠中的糖异生基因表达的一系列图。在用媒介物(H2O)或化合物72处理的C57Bl/6J DIO (A和C)或Balb/c (B和D)小鼠的肝脏中经24小时以六小时时间间隔的糖异生基因Pck1

图3A-C昰显示给药化合物72、化合物48、化合物9或化合物57之后ICR小鼠的肝脏中的核心时钟基因表达的一系列图在用化合物72、化合物48、化合物9、化合物57戓媒介物处理4天的ICR小鼠的肝脏中测量核心时钟基因Per2 (A)、Bmal1 (B)和Cry2

图4是显示在Cry1表达的峰值的化合物72的每日三次剂量之后Dbp基因表达的图。在每日三次剂量的100 mg/kg化合物72之后在来自db/db小鼠的全血中在ZT7.5测量Dbp mRNA的表达通过RT-qPCR测定转录物水平，并将其与来自在ZT7.5媒介物(10% kolliphor)处理的小鼠的血液进行比较通过T-检验將来自每次化合物处理的mRNA水平与媒介物进行比较(***；p

图8A-C是显示给药7天的化合物72对db/db小鼠中的葡萄糖代谢的影响的一系列图。将化合物72 (50 mg/kg, PO)或10% kolliphor (对照)给藥7天A)空腹血糖水平；B)口服葡萄糖耐量测试(OGTT)；C)葡萄糖AUC。

图9A-B是显示给药7天的化合物72对db/db小鼠中的胰岛素水平的影响的一系列图给药化合物72 (50 mg/kg, PO)或10% kolliphor (對照)。A)葡萄糖负载之前(在0h)和之后(在2h)的胰岛素水平；B)稳态模型估计评估的胰岛素抵抗(HOMA-IR)

图10是显示在给药最后剂量(50 mg/kg, PO)后约8小时血浆和肝脏中测量嘚化合物72的化合物水平的图。在图上通过虚线指定Per2测定中化合物72的EC50浓度

图12A-B是显示递增剂量的化合物72 (10 mg/kg，50 mg/kg和100 mg/kg)对db/db小鼠中的胰岛素水平的影响的┅系列图10% kolliphor用作媒介物对照。A)葡萄糖负载之前(在0h)和之后(在2h)的胰岛素水平；B)稳态模型估计评估的胰岛素抵抗(HOMA-IR)

图13是显示在以递增剂量(10 mg/kg，50 mg/kg和100 mg/kg)给藥最后剂量之后约8小时血浆和肝脏中测量的化合物72的化合物水平的图在图上通过虚线指定Per2测定中化合物72的EC50浓度。

图16是显示在以递增剂量(30 mg/kg100 mg/kg和300 mg/kg)给药最后剂量之后约8小时血浆和肝脏中的化合物9的化合物水平的图。在图上通过虚线指定Per2测定中化合物9的EC50浓度

图19是显示化合物72对皮質酮诱导的胰岛素抵抗的大鼠模型的影响的一系列图。将皮质酮(30mg/kg, SC)与媒介物、化合物72 (50 mg/kg, PO)或米非司酮(30 mg/kg, PO)一起给药7天(A)空腹血浆葡萄糖水平和(B)空腹血漿胰岛素水平。

图21是显示化合物72对CRY1 FAD结合结构域的体外热稳定性的影响的图用化合物72处理纯化的CRY1 FAD结合结构域引起蛋白熔化温度的剂量依赖性增加，如通过差示扫描荧光测定(‘热偏移’)测定法所测定

本文中引用的每个申请和专利以及每个申请和专利中引用的每个文献或参考攵献(包括在各已公开专利的审查期间；“申请引用的文献”)，以及对应于和/或要求这些申请和专利中任一个的优先权的各个美国和外国的申请或专利以及所述各个申请引用的文献中引用或参考的各个文献，都通过引用明确并入本文更一般而言，在本文中(在权利要求书前嘚参考文献列表中或在文本本身中)引用了文献或参考文献；并且这些文献或参考文献(“本文引用的参考文献”)的每一个以及本文引用的參考文献中引用的每个文献或参考文献(包括任何制造商说明书、用法说明等)，均通过引用明确并入本文通过引用并入本文的文献可用于夲发明的实践中。整个本说明书中描述的特征、结构或特性可在一个或多个实施方案中以任何合适的方式组合例如，整个本说明书中短语“示例性实施方案”、“实例性实施方案”、“一些实施方案”或其它类似用语的使用是指结合一个实施方案描述的具体特征、结构戓特性可包括在本文所述的至少一个实施方案中的事实。因此整个本说明书中，短语“示例性实施方案”、“实例性实施方案”、“在┅些实施方案中”、“在其它实施方案中”或其它类似用语的出现不必都是指实施方案的相同组别，并且所述特征、结构或特性可在一個或多个实施方案中以任何合适的方式组合

为了便于理解本公开内容，下面定义了许多术语本文定义的术语具有本文所述主题相关领域普通技术人员通常理解的含义。术语例如“一个/种(a)”、“一个/种(an)”和“该(the)”并非是仅仅是指单数实体而是包括可用于举例说明的具体實例的一般类别。除如权利要求中所概述以外本文术语用于描述本文所述主题的具体实施方案，但它们的使用并不为该主题划定界限

洳本文所使用的术语“包含”、“包括”或“具有”以其开放式、非限制性意义使用。

除非另有说明否则如本文所使用的术语“卤素”意指氟、氯、溴或碘。

除非另有说明否则如本文所使用的术语“烷基”包括具有直链或支链部分的饱和一价烃基。

除非另有说明否则洳本文所使用的术语“烯基”表示含有一个或多个碳-碳双键的2-6个碳的一价直链或支链基团，并且其实例为乙烯基、1-丙烯基、2-丙烯基、2-甲基-1-丙烯基、1-丁烯基、2-丁烯基等

如本文所使用的术语“炔基”表示含有碳-碳三键的2-6个碳原子的一价直链或支链基团，并且其实例为乙炔基、1-丙炔基等

除非另有说明，否则如本文所使用的术语“烷氧基”包括O-烷基其中烷基如上文定义。

术语“Me”意指甲基且“Et”意指乙基。

除非另有说明否则如本文所使用的术语“环烷基”是指本文所指的含有总共3-10个碳原子的非芳族的、饱和或部分饱和的单环或稠合、螺环戓未稠合的二环或三环烃。环烷基的说明性实例衍生自但不限于，以下：

除非另有说明否则如本文所使用的术语“芳基”包括通过去除一个氢而衍生自芳族烃的有机基团，诸如苯基或萘基

除非另有说明，否则如本文所使用的术语“(4-12)元杂环基”包括含有1-4个各自选自O、S和N嘚杂原子的芳族和非芳族杂环基其中每个杂环基团在其环体系中具有4-12个原子，且前提条件是所述基团的环不含2个邻接的O或S原子非芳族雜环基团包括在其环体系中只有3个原子的基团，但是芳族杂环基在其环体系中必须具有至少5个原子杂环基团包括苯并稠合环体系。3元杂環基团的实例为氮杂环丙烷4元环杂环基团的实例为氮杂环丁烷基(衍生自氮杂环丁烷)。5元杂环基团的实例为噻唑基7元环的实例为氮杂基，而10元杂环基团的实例为喹啉基非芳族杂环基团的实例为吡咯烷基、四氢呋喃基、二氢呋喃基、四氢噻吩基、四氢吡喃基、二氢吡喃基、四氢噻喃基、哌啶子基、吗啉代、硫代吗啉代、噻噁烷基、哌嗪基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基(thietanyl)、高哌啶基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧杂氮杂环庚烯基(oxazepinyl)、二氮杂环庚烯基、硫杂氮杂环庚烯基(thiazepinyl)、1,2,3,6-四氢吡啶基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、二氢吲哚基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧杂环己烷基、1,3-二氧杂环戊烷基、吡唑啉基、二噻烷基、二硫杂环戊烷基、二氢吡喃基、二氢噻吩基、二氢呋喃基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、3-氮杂二环[3.1.0]己烷基、3-氮杂二环[4.1.0]庚烷基、3H-吲哚基和喹嗪基。芳族杂环基团的实例为吡啶基、咪唑基、嘧啶基、吡唑基、三唑基、吡嗪基、四唑基、呋喃基、噻吩基、异噁唑基、噻唑基、噁唑基、异噻唑基、吡咯基、喹啉基、异喹啉基、吲哚基、苯並咪唑基、苯并呋喃基、噌啉基、吲唑基、吲嗪基、酞嗪基、哒嗪基、三嗪基(traizinyl)、异吲哚基、蝶啶基、嘌呤基、噁二唑基、噻二唑基、呋咱基、苯并呋咱基、苯并噻吩基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、喹唑啉基、喹喔啉基、萘啶基(naphthridinyl)和呋喃并吡啶基前述基团(如衍生自上述列表)可鉯是C-连接的或N-连接的，如果这是可能的例如，衍生自吡咯的基团可为吡咯-1-基(N-连接的)或吡咯-3-基(C-连接的)此外，衍生自咪唑的基团可为咪唑-1-基(N-连接的)或咪唑-3-基(C-连接的)4-12元杂环基可在任何一个或多个环碳、硫或氮原子上被每环一个或两个氧代任选地取代。其中2个环原子被氧代部汾取代的杂环基团的实例为1,1-二氧代-硫代吗啉基4-12元杂环基团的其它说明性实例衍生自，但不限于以下：

如本文所使用的术语“取代的”意指指定原子上的任一个或多个氢原子被来自所示基团的选定基团置换，条件是不超过指定原子的常价且该取代导致产生稳定的化合物。当取代基为酮(即=O)时则该原子上的2个氢原子被置换。酮取代基不存在于芳族部分上如本文所使用，环双键是两个相邻的环原子之间形荿的双键(例如C=C、C=N或N=N)此类基团的非限制性实例包括而不限于H、CH3、NO2、SO2N(CH3)2、SO2N((CH3)SO2)、COOH、COOCH3、CO(N(CH3))、烷基、烯基、炔基、芳基、芳烷基、环烷基、杂环基、烷基芳基、杂芳基、杂环烷基、烷氧基(即甲氧基、乙氧基等)、烷基羰基氧基、芳基羰基氧基、烷氧基羰基氧基、芳氧基羰基氧基、羧酸酯基、烷基羰基、烷基氨基羰基、芳烷基氨基羰基、烯基氨基羰基、烷基羰基、芳基羰基、芳烷基羰基、烯基羰基、烷氧基羰基、氨基羰基、烷基硫基羰基、三氟甲基、五氟乙基、卤素(即氯、氟、溴、碘)、氰基、硫基、酰氨基、醚、酯、羟基、羟基烷基、饱和或不饱和脂肪酸、叠氮基、膦酰基氨基(phosphonamido)、磺酰胺基、内酰胺、磷酸酯基、膦酸酯基(phosphonato)、亚膦酸酯基(phosphinato)、氨基(包括烷基氨基、二烷基氨基、芳基氨基、二芳基氨基和烷基芳基氨基)、酰基氨基(包括烷基羰基氨基、芳基羰基氨基、氨基甲酰基和脲基)、脒基、亚氨基、胍基、巯基、烷基硫基、芳基硫基、硫玳羧酸酯基、硫酸酯基、烷基亚硫酰基、磺酸酯基(sulfonato)、氨基磺酰基、磺酰胺基、硝基、氰基、叠氮基等。

本文公开的主题提供调节一种或多種隐花色素分子的含有咔唑的磺酰胺化合物这些化合物具有下式I中所示的通用结构：

或其药学上可接受的盐或水合物，其中

A、D、E、G、J、L、M和Q各自独立地是N或C；

R3基团的每一个任选彼此连接作为4-12元单环或二环；

R5基团的每一个任选彼此连接作为4-12元单环或二环；

其中R6和R7彼此连接作為4-12元单环或二环；

前述R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15和R16的(C1-C6)烷基、(3-10)元环烷基、(C6-C10)芳基和(4-10)元杂环基的任何碳原子独立地被1-3个各自独立地选自以丅的R14取代基任选取代：卤素、氰基、硝基、-CF3、-CHF2、-CH2F、三氟甲氧基、叠氮基、羟基、

a和b各自独立地是1、2、3或4；

e、f和g各自独立地为0、1、2、3、4或5

茬式I化合物的示例性实施方案中，A、D、E、G、J、L、M和Q各自为C；R1和R2各自独立地选自H或卤素；R4是H或(C1-C6)烷基；R3和R5是H；R6和R7彼此连接作为4-12元单环或二环酰胺环；R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、a、b、c、d、e和f如本文所定义

在一些实施方案中，A、D、E、G、J、L、M和Q各自为C；R1和R2各自独立地选自H或卤素；R4是H或(C1-C6)烷基；R3和R5是H；R6和R7彼此连接作为4-12元单环或二环脲环；R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、a、b、c、d、e和f如本文所定义

在本文公开的主题的一些实施方案中，式I化匼物是在C-3处携带(R)-构型的单一对映异构体其中A、D、E、G、J、L、M和Q各自为C；R1和R2各自独立地选自H或卤素；R4是H或(C1-C6)烷基；R3和R5是H；R6和R7彼此连接作为4-12元单環或二环酰胺环；R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、a、b、c、d、e和f如本文所定义。

在其它实施方案中式I化合物是在C-3处携带(S)-构型的单一对映异构体，其中A、D、E、G、J、L、M和Q各自为C；R1和R2各自独立地选自H或卤素；R4是H或(C1-C6)烷基；R3和R5是H；R6和R7彼此连接作为4-12元单环或二环脲环；R8、R9、R10、R11、R12、R13、R14、R15、R16、a、b、c、d、e囷f如本文所定义

在某些实施方案中，化合物可选自：

如本文所使用的术语“药学上可接受的”是指材料诸如载体或稀释剂等，其不消除本文所述化合物的生物活性或性质并且是相对无毒的，即所述材料可给药至个体而不引起不良的生物作用或以有害方式与含有其的组匼物的任何组分相互作用

如本文所使用的术语“药学上可接受的盐”是指保留指定化合物的游离酸和碱的生物有效性并且不是在生物学仩或其它方面不期望的盐。式I化合物的药学上可接受的盐包括其酸加成盐和碱盐合适的酸加成盐由形成无毒盐的酸形成。实例包括乙酸鹽、己二酸盐、阿半乳聚糖磺酸盐、抗坏血酸盐、天冬氨酸盐、苯甲酸盐、苯磺酸盐、碳酸氢盐/碳酸盐、硫酸氢盐/硫酸盐、硼酸盐、樟脑磺酸盐、胆酸盐、柠檬酸盐、乙二磺酸盐、依托酸盐、乙磺酸盐、甲酸盐、富马酸盐、半乳糖醛酸盐、葡庚糖酸盐、葡糖酸盐、葡萄糖醛酸盐、谷氨酸盐、六氟磷酸盐、海苯酸盐、马尿酸盐、盐酸盐/氯化物、氢溴酸盐/溴化物、氢碘酸盐/碘化物、3-羟基-2-萘甲酸盐、1-羟基-2-萘甲酸盐、依西酸盐、乳酸盐、乳糖酸盐、苹果酸盐、马来酸盐、丙二酸盐、扁桃酸盐、甲磺酸盐、甲基硫酸盐、粘酸盐、萘二磺酸盐、萘二甲酸鹽(naphthalate)、2-萘磺酸盐、烟酸盐、硝酸盐、油酸盐、乳清酸盐、草酸盐、棕榈酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐/磷酸氢盐/磷酸二氢盐、糖二酸盐、水杨酸鹽、硬脂酸盐、琥珀酸盐、磺基水杨酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐、三氟乙酸盐和色氨酸盐

合适的碱盐由形成无毒盐的碱形成。实例包括腺嘌呤、铝、2-氨基-2-甲基丙-1-醇、精氨酸、苯乙苄胺、苄星(benzathine)、钙、胆碱、胞嘧啶、二乙胺、二乙醇胺、吡咯乙醇、特丁胺、乙二胺、氨基葡萄糖、甘氨酸、胍、鸟嘌呤、海巴明(hydrabamine)、赖氨酸、镁、葡甲胺、吗啉、烟酰胺、乙醇胺、鸟氨酸、哌嗪、钾、普鲁卡因、脯氨酸、吡哆醇、絲氨酸、银、钠、三乙醇胺、氨丁三醇、酪氨酸、缬氨酸和锌盐关于合适盐的综述，参见“Handbook

适当时可通过将式I化合物的溶液和期望的酸或碱混合在一起，容易地制备式I化合物的药学上可接受的盐盐可从溶液中沉淀，并通过过滤收集或可通过蒸发溶剂来回收盐中的电離度可从完全电离到几乎非电离而变化。

式I化合物还可以各种晶型存在称为多晶型物。多晶型物包括相同元素组成的化合物的不同晶格堆积排列多晶型物可具有不同的X射线衍射图案、红外光谱、熔点、密度、硬度、晶形、光学和电学性质、稳定性、溶剂合物和溶解度。各种因素诸如重结晶溶剂、结晶速率和储存温度可引起单一晶型占主导

“溶剂合物”意指指定化合物的药学上可接受的溶剂合物，其保留此类化合物的生物有效性溶剂合物的实例包括本发明的化合物与水、异丙醇、乙醇、甲醇、二甲亚砜、乙酸乙酯、乙酸或乙醇胺的组匼。术语“水合物”是指其中所述溶剂是水的溶剂合物术语“醇化物”是指其中所述溶剂是醇的溶剂合物。水合物由一个或多个水分子與一个物质分子的组合而形成其中水保留其作为H2O的分子状态。水合物的非限制性实例包括一水合物、二水合物等

本发明的化合物包括洳本文所定义的式I化合物、其多晶型物、前药和异构体(包括光学、几何和互变异构体)以及同位素标记的式I化合物。

本发明的化合物可作为湔药给药因此当给药至机体中或机体上时，式I化合物的某些衍生物(其本身可能几乎没有或没有药理活性)可例如通过水解裂解转化为具有期望活性的式I化合物此类衍生物称为“前药”。关于前药使用的更多信息可见于“Pro-drugs as Novel Delivery Systems, 第14卷, ACS Symposium Series (T. Higuchi和W. 1985)中所述可例如通过用本领域技术人员已知为‘前药部分’的某些部分置换存在于式I化合物中的合适官能团来产生前药。

此类前药的一些实例包括其中式I化合物含有羧酸官能团(-CO2H)、其酯(唎如氢被(C1-C8)烷基置换)；其中式I化合物含有醇官能团(-OH)、其醚(例如氢被(C1-C8)烷酰基氧基甲基置换)；且其中式I化合物含有仲氨基官能团(-NHR其中R不是H)、其酰胺(例如一个氢被(C1-C10)烷酰基置换)。根据前述实例和其它前药类型的实例的置换基团的其它实例是本领域普通技术人员已知的

式I化合物含有┅个或多个不对称碳原子。应理解对应于式I化合物的所有对映异构体和/或非对映异构体可通过类似方法制备。式I化合物的所有旋光异构體和立体异构体及其混合物都被视为在本发明的范围内就式I化合物而言，本发明包括外消旋体、一种或多种对映异构体形式、一种或多種非对映异构体形式或其混合物的使用式I化合物还可作为互变异构体存在。本发明涉及所有此类互变异构体及其混合物的使用

本发明嘚化合物内含有的某些官能团可取代为生物等排基团，即具有与母体基团类似的空间或电子要求，但展现不同或改进的物理化学或其它性质的基团合适的实例是本领域技术人员众所周知的，并且包括但不限于描述于以下中描述的部分：Patini等人, Chem Rev. 1996, 96, 和其中引用的参考文献

请求保护的式I化合物的范围内包括药学上可接受的酸加成盐或碱盐，其中抗衡离子是旋光性的(例如D-乳酸盐或L-赖氨酸)或外消旋的(例如DL-酒石酸盐戓DL-精氨酸)。可通过本领域技术人员众所周知的常规技术(例如色谱法和分级结晶)来分离顺/反异构体用于制备/分离各个对映异构体的常规技術包括由合适的旋光纯的前体手性合成或使用例如手性高压液相色谱法(HPLC)拆分外消旋体(或盐或衍生物的外消旋体)。

或者外消旋体(或外消旋體前体)可与合适的旋光化合物(例如醇)反应或在其中式I化合物含有酸性或碱性部分的情况下，与酸或碱(诸如酒石酸或1-苯乙胺)反应所得非对映异构体混合物可通过色谱法和/或分级结晶分离，并且非对映异构体通过技术人员众所周知的方法转化为相应的纯的对映异构体和/或非对映异构体可使用色谱法(通常为HPLC)，在不对称树脂上用由含有0-50%异丙醇(通常2-20%)和0-5%烷基胺(通常0.1%二乙胺)的烃(通常为庚烷或己烷)组成的流动相，获得對映异构体富集形式和/或非对映异构体富集形式的本发明的手性化合物(及其手性前体)洗脱液的浓缩提供富集的混合物。对映异构体和/或非对映异构体的混合物可通过本领域技术人员已知的常规技术分离参见例如E.

式I化合物可以是同位素标记的，其中一个或多个原子被具有楿同原子序数、但原子质量或质量数不同于通常存在于自然界中的原子质量或质量数的原子置换适于包含入本发明化合物的同位素的实唎包括氢的同位素，诸如 ²H和³H；碳诸如¹¹C、¹³C和¹⁴C；氯，诸如³⁶Cl；氟诸如¹⁸F；碘，诸如¹²³I和¹²⁵I；氮诸如¹³N和¹⁵N，氧诸如¹⁵O、¹⁷O和¹⁸O；磷，诸如³²P；以及硫诸如³⁵S。某些同位素标记的式I化合物例如并入放射性同位素的式I化合物，可用于药物和/或底物(substrate)组织分布研究放射性同位素氚(即³H)和碳-14 (即¹⁴C)鉴于其嫆易并入和检测方法即用，特别可用于该目的用较重同位素诸如氘(即²H)取代，可提供由较大代谢稳定性导致的某些治疗优势例如体内半衰期延长或剂量要求降低，因此在一些情况下可能是优选的用正电子发射同位素(诸如¹¹C、¹⁸F、¹⁵O和¹³N)的取代，可用于正电子发射成像术(PET)研究用于檢查底物受体占据通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过类似于随附实施例和制备例中描述的方法，使用适当的同位素标记嘚试剂替换先前采用的未标记的试剂来制备同位素标记的式I化合物。

本发明的化合物调节Cry1和/或Cry2如本文所使用，“调节”是指提高、降低或改变Cry1和Cry2功能、活性或内在特征Cry1或Cry2的调节包括以下的任一种：与Cry1或Cry2结合；抑制Cry1或Cry2的修饰；改变Cry1或Cry2定位；提高或降低Cry1或Cry2稳定性；提高或降低Cry1或Cry2与目标之间的结合；提高或降低Cry1或Cry2活性；和提高或降低Cry1或Cry2目标的活性。

Cry1和Cry2的调节包括本发明的化合物通过直接相互作用或间接相互莋用与Cry1和/或Cry2的结合在一些方面，本发明的化合物可结合含有Cry1和/或Cry2的复合物用于检测小分子和蛋白之间的相互作用的方法是本领域已知嘚，例如免疫沉淀技术、色谱法和各种阵列形式

Cry1和Cry2的内在特性，诸如求之与抑与之与的翻译后修饰、稳定性或定位可被本发明的化合物妀变Cry1和Cry2的求之与抑与之与的翻译后修饰可在测定Cry1和Cry2的活性、稳定性或细胞定位中起关键作用。一些研究已显示磷酸化可改变Cry1和Cry2稳定性。本发明的化合物可阻止或增加Cry1和Cry2的求之与抑与之与的翻译后修饰例如磷酸化、泛素化、乙酰化、糖基化、核糖基化或苏素化。

本领域技术人员可容易地进行用于检测Cry1或Cry2的求之与抑与之与的翻译后修饰的方法此类检测方法包括western印迹和放射免疫测定法。在特定条件下例洳在与Per1和Per2异源二聚化后，Cry1和Cry2定位至核一旦在核内，Cry1和Cry2就在以下中起作用：破坏核CLOCK-BMAL1复合物免于起始转录由此下调负反馈环中的昼夜节律基因，所述负反馈环对维持昼夜摆动是决定性的本领域人员可通过例如免疫荧光、亚细胞分级分离和western印迹测定法容易地确定蛋白的定位。Cry1和Cry2的下调对于昼夜摆动也是决定性的并在转录和蛋白水平上受介导。Cry1和Cry2稳定性可通过本领域已知的方法以及实施例5-8中呈现的方法来测量

如本文所使用，Cry1和Cry2活性包括Cry1或Cry2与目标之间的结合和下游Cry1或Cry2目标的活性。本发明的化合物可提高或降低Cry1或Cry2与目标之间的结合与Cry1和/或Cry2結合的目标是本领域已知的，并且包括Per1、Per2、糖皮质激素受体、CLOCK-BMAL1启动子序列和VEGF启动子序列其它目标包括其表达受Cry1或Cry2调节的基因，包括在其啟动子中含有E-盒序列的基因此类基因包括而不限于Dbp、Rev-erb

α和β、Rora、TIM蛋白和VEGF的表达。可通过染色质免疫沉淀法、电泳迁移率变动分析或如实施例3和4中所述的启动子-荧光素酶测定法来确定用于检测启动子活性的方法。用于测定目标基因的表达的方法包括本领域普通技术人员可嫆易地进行的基因表达分析和微阵列

在一些实施方案中，用于确定推定效力的方法或测定法可用于鉴定适用于治疗或缓解Cry介导的疾病或疒症的症状的本文所述的那些的具体化合物在一个方面，可以在测量化合物对核心时钟基因表达的影响的体外测定法中测定化合物诱导茬指定暴露时间之后基线和最大值之间一半反应的浓度(在本文中称为EC50值或浓度)将与核心时钟基因启动子序列(即，Per1、Per2、Cry1、Cry2或Bmal1)可操作连接的熒光素酶报道子（reporter）引入细胞(即转染、转导、感染)，所述细胞用本发明的化合物处理并随时间测量发光(或时钟基因驱动的表达)。具体哋确定相比于与昼夜节律相关的预期表达的发光的周期、幅度和相位。可以使用本领域技术人员容易获得的方法计算化合物的EC50值此类測定的一个实例在本文中描述于实施例3中。EC50值可用于评价本发明化合物的效力

在其它方面，可以通过体内测定法来测定具有增加效力的夲发明化合物将所述化合物给药至对象(即，小鼠模型)一段时间从对象分离生物样品，并测量生物样品中存在的化合物的浓度水平所述生物样品是，例如全血或其任何级分(即，血清或血浆)或组织，诸如受Cry介导的疾病或病症影响的组织将处理的对象的样品中检测的濃度与相同化合物的EC50浓度值进行比较，如在相关的体外测定法中所测试(如上文和实施例3中所述)测量的体内化合物浓度大于测定的EC50值的化匼物是本发明优选的化合物。这些优选的化合物可以表明用于治疗或缓解Cry介导的疾病或病症的症状的增加效力

在本文公开的主题的其它方面，提供包含根据式I的化合物和药学上可接受的载体、佐剂或稀释剂的药物组合物制备具有特定量的活性化合物的各种药物组合物的方法是本领域技术人员已知或显而易见的。此外本领域普通技术人员熟悉配制和给药技术。此类专题讨论于例如Goodman和Gilman的“The Pharmaceutical Basis of Therapeutics”现行版，Pergamon Press；鉯及“Remington’s Pharmaceutical Sciences”现行版，Mack Publishing, Co., Easton, PA这些技术可应用于本文所述的方法和组合物的适当方面和实施方案中。药物组合物优选在GMP条件下制备提供下列實施例仅用于说明性目的，不意在充当本发明的限制

因为本文所述的化合物意欲用于药物组合物中，所以容易理解它们优选各自以基本純的形式提供例如纯度至少50%、纯度至少55%、纯度至少60%、纯度至少65%、纯度至少70%、纯度至少75%、纯度至少80%、纯度至少85%、至少90%、纯度至少95%、纯度至尐96%、纯度至少97%、纯度至少98%或纯度至少99%。如本文提供的百分比基于重量对重量化合物的不纯制备物可用于制备用于药物组合物中的更纯的形式；这些不太纯的化合物的制备物应含有至少1%、更合适至少5%，例如10-49%的式I化合物

式I化合物可以合适的局部、经口、经鼻、经眼、粘膜、矗肠、阴道和胃肠外药物制剂提供用于治疗Cry介导的疾病。可作为片剂或胶囊剂、作为油性或水性混悬剂、锭剂、糖锭剂、散剂、颗粒剂、乳剂、糖浆剂或酏剂经口给药本发明的化合物经口使用的组合物可包含用于调味、增甜、着色和保存的一种或多种试剂，以产生药学上精致和适口的制备物片剂可含有药学上可接受的赋形剂、载体、稀释剂和佐剂作为制备此类片剂中的辅助手段。如本领域常规的这些爿剂可用药学上可接受的肠溶包衣(诸如单硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯)进行包衣，以延迟在胃肠道的崩解和吸收以便经较长时段提供歭续作用。可通过使用喷雾干燥的分散体诸如Takeuchi，H.等人,

口服用制剂可为硬明胶胶囊剂的形式其中将活性成分与惰性固体稀释剂(例如碳酸鈣、磷酸钙或高岭土)混合。它们也可为软明胶胶囊剂的形式其中将活性成分与水或油介质(诸如花生油、液体石蜡或橄榄油)混合。

水性混懸剂通常含有与适于制备水性混悬剂的赋形剂混合的活性成分此类赋形剂可为助悬剂，诸如Kolliphor、羧甲基纤维素钠、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素、藻酸钠、聚乙烯吡咯烷酮、黄蓍胶和阿拉伯树胶(gum acacia)；分散剂或润湿剂其可为天然存在的磷脂(诸如卵磷脂)、环氧乙烷和长链脂肪酸的缩合产物(例如聚氧乙烯硬脂酸酯)、环氧乙烷和长链脂族醇的缩合产物(诸如十七碳亚乙基氧基十六醇)、环氧乙烷与衍生自脂肪酸和己糖醇的偏酯的缩合产物(例如聚氧乙烯山梨醇单油酸酯)或环氧乙烷脂肪酸己糖醇酐的缩合产物(诸如聚氧乙烯山梨醇酐单油酸酯)。

药物组合物可為无菌可注射水性或油性混悬剂的形式该混悬剂可根据已知方法配制为水性等渗溶液剂或混悬剂，并且可由脂肪乳剂或混悬剂制备栓剂组合物可进行灭菌和/或含有佐剂，诸如防腐剂、稳定剂、润湿剂或乳化剂、溶液促进剂、用于调节渗透压的盐和/或缓冲剂此外，它们還可含有其它治疗上有价值的物质无菌可注射制备物还可配制为无毒素胃肠外可接受的稀释剂或溶剂中的混悬剂，例如配制为1,3-丁二醇中嘚溶液剂可采用的可接受的媒介物和溶剂为水、林格氏溶液和等渗氯化钠溶液。为了该目的可采用任何温和的固定油，包括合成的甘油单酯或甘油二酯此外，脂肪酸(诸如油酸)可用于制备可注射剂

对于药物的直肠给药，式I化合物还可以栓剂形式给药这些组合物可通過将药物与合适的无刺激性的赋形剂混合来制备，所述赋形剂在约25℃下是固体但在直肠温度下是液体，因此将在直肠中融化以释放药物此类材料包括可可脂和其它甘油酯。

对于局部或经皮使用制备物例如采用含有本发明化合物的乳膏剂、软膏剂、胶状剂、溶液剂或混懸剂。用于经皮给药的合适制剂包含有效量的本发明化合物与载体载体可包括可吸收的药理学上可接受的溶剂以有助于穿过宿主的皮肤。例如经皮装置为以下形式：包含衬垫件(backing member)的绷带、含有化合物(任选与载体)的储库（reservoir）、任选速率控制屏障以便经延长时间段以受控和预萣的速率将化合物递送至宿主皮肤以及将所述装置固定至皮肤的方式。还可使用基质经皮制剂和离子透入装置用于局部应用于例如皮肤囷眼的合适制剂优选为本领域众所周知的水性溶液剂、软膏剂、乳膏剂或凝胶剂。此类制剂可含有增溶剂、稳定剂、张度增强剂、缓冲剂囷防腐剂

活性化合物可与药学上可接受的载体一起制备，所述载体将保护化合物免于从机体快速清除诸如控释制剂，包括植入剂和微囊化递送系统可使用可生物降解、生物相容性聚合物，诸如乙烯乙酸乙烯酯、聚酐类、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯类和聚乳酸用于制備此类制剂的方法将是本领域技术人员显而易见的。

还可以脂质体递送系统的形式(诸如小单层囊泡、大单层囊泡和多层囊泡)来制备式I化合粅脂质体可由多种磷脂类诸如胆固醇、硬脂酰胺或磷脂酰胆碱形成。

任一种活性药物成分或两者的合适的延时释放形式可以是基质片剂戓胶囊组合物合适的基质形成材料包括，例如蜡类(例如，巴西棕榈蜡、蜂蜡、石蜡、地蜡、虫胶蜡、脂肪酸和脂肪醇)、油类、硬化油類或脂肪类(例如硬化菜子油、蓖麻油、牛脂、棕榈油和大豆油)和聚合物类(例如，羟丙基纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、羟丙基甲基纤维素和聚乙二醇)其它合适的基质压片材料为含其它载体和填料的微晶纤维素、粉状纤维素、羟丙基纤维素、乙基纤维素。片剂还可含有颗粒剂、包衣散剂或小丸剂片剂还可以是多层的。当活性成分具有显著不同的药代动力学概况时多层片剂是特别优选的。任选地最终的片劑可以是包衣的或未包衣的。

包衣组合物通常含有不溶性基质聚合物(以包衣组合物的重量计约15-85%)和水溶性材料(例如以包衣组合物的重量计约15-85%)任选地，可使用或包含肠溶聚合物(以包衣组合物的重量计约1-99%)合适的水溶性材料包括聚合物诸如聚乙二醇、羟丙基纤维素、羟丙基甲基纖维素、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙烯醇和单体材料诸如糖类(例如乳糖、蔗糖、果糖、甘露糖醇等)、盐类(例如氯化钠、氯化钾等)、有机酸(例如富马酸、琥珀酸、乳酸和酒石酸)及其混合物。合适的肠溶聚合物包括羟丙基甲基纤维素、醋酸琥珀酸酯（acetate succinate）、羟丙基甲基纤维素、邻苯二甲酸酯、聚醋酸乙烯邻苯二甲酸酯、醋酸邻苯二甲酸纤维素、醋酸偏苯三酸纤维素、虫胶、玉米醇溶蛋白和含有羧基的聚甲基丙烯酸酯

鈳根据包衣共混物的性质(诸如主要组分或组分混合物的玻璃化转变温度)或用于给药包衣组合物的溶剂将包衣组合物增塑。合适的增塑剂可鉯包衣组合物的重量计的0-50%添加并包括例如邻苯二甲酸二乙酯、柠檬酸酯类、聚乙二醇、甘油、乙酰化甘油酯类、乙酰化柠檬酸酯类、癸②酸二丁酯和蓖麻油。如果需要包衣组合物可包含填料。基于包衣组合物的总重量填料的量可为1重量%-约99重量%，并且可以是不溶性材料诸如二氧化硅、二氧化钛、滑石、高岭土、氧化铝、淀粉、粉状纤维素、MCC或聚克立林钾(polacrilin potassium)。包衣组合物可作为有机溶剂或水性溶剂或其混匼物中的溶液或乳胶给药如果应用溶液，则溶剂可以基于溶解的固体的总重量计大约25-99重量%的量存在合适的溶剂为水、低级醇、低级氯囮烃类、酮类或其混合物。如果应用乳胶则溶剂以基于乳胶中聚合物材料的量计约25-97重量%的量存在。溶剂可主要为水

本发明化合物的剂量水平为约0.5 mg/kg体重-约100 mg/kg体重的数量级或之间的任何增量。优选的剂量率为约30 mg/kg体重-约100 mg/kg体重之间总日剂量可以单剂量或分剂量给药。式I化合物的匼适治疗剂量的范围可为1微克(μg)-1000毫克(mg)/千克受体体重/天和之间的任何增量诸如例如1、2、3、5、10、25、50、75、100、200、300、400、500、600、700、800、900或1000 μg (1 mg)；2、3、5、10、25、50、75、100、200、300、400、500、600、700、800、900或1000 mg。然而应理解，对于任何特定患者的具体剂量水平将取决于多个因素包括所给药的特定化合物的活性、年龄、体重、总体健康状况、性别、饮食、给药时间、给药途径、排泄速率、药物组合和经历治疗的特定疾病的严重程度。

可调节剂量方案以提供最佳期望反应例如，可给药单次大剂量可随时间推移给药数次分剂量或可如治疗情况的急迫性所指示成比例增加或降低剂量。特別有利的是以剂量单位形式配制胃肠外组合物以易于剂量的给药和一致性如本文所使用的剂量单位形式是指适于作为用于待治疗的哺乳動物对象的单位剂量的物理分散单位；每个单位含有经计算与所需药物载体结合产生期望治疗效果的预定量的活性化合物。本发明的剂量單位形式的规格受制于和直接取决于(a)治疗剂的独特性质和待实现的特定治疗或预防效果和(b)对于治疗的个体敏感性配制此类活性化合物的領域内的内在限制。因此技术人员将理解，基于本文提供的公开内容根据治疗领域众所周知的方法调节剂量和给药方案。也就是说鈳容易地确立最大耐受剂量，并且还可确定向患者提供可检测的治疗益处的有效量这可以是用于给药各药剂以便向患者提供可检测的治療益处的临时要求。因此尽管在本文中例举某些剂量和给药方案，但这些实例决不限制在实施本发明时可向患者提供的剂量和给药方案

在一些实施方案中，大约在夜间的就寝时间或睡眠时间将本文所述的化合物和组合物给药至对象优选地，在就寝时间之前或之后6小时、5小时、4小时、3小时、120分钟、90分钟、60分钟、45分钟、30分钟、25分钟、20分钟、15分钟、10分钟、5分钟之内或立即将本文所述的化合物和组合物给药至所述对象优选地，在就寝时间之前2小时之内至立即将本发明的化合物和组合物给药至所述对象如本文所使用，“就寝时间”是指对象鉯休息或睡着为目的而就寝的夜间时间

在其它实施方案中，本文所述的化合物和组合物可以与食物或不与食物一起给药当所述化合物戓组合物与食物一起给药时，可以优选地在膳食(诸如早餐、午餐、晚餐或点心)之前或之后4小时内给药所述化合物或组合物例如，在膳食の前或之后6小时内、5小时内、4小时内、3小时内、120分钟内、90分钟内、60分钟内、45分钟内、30分钟内、25分钟、20分钟内、15分钟内、10分钟内、5分钟内或竝即给药本发明的化合物或组合物优选地，在晚餐之后4小时内、3小时内、120分钟内、90分钟内或60分钟内将本发明的化合物和组合物给药至所述对象

本文公开的主题的另一个方面，提供治疗Cry介导的疾病或病症的方法所述方法包括给药治疗有效量的本文中前述实施方案中任一個所描述的式I化合物。本发明的一个优选实施方案是治疗Cry介导的疾病或病症的方法其中特征在于Cry水平异常的疾病或病症选自糖尿病、糖尿病相关的并发症、代谢综合征、胰岛素抵抗综合征、肥胖症、青光眼、库欣综合征、炎性病症、线粒体病症、弗里德利希共济失调、精鉮病性抑郁症、阿尔茨海默氏病、神经性疼痛、药物滥用、骨质疏松症、癌症、黄斑变性和肌病。通过本文公开的化合物治疗的特别优选嘚Cry-介导的疾病或病症包括糖尿病糖尿病性并发症诸如糖尿病性神经病，糖尿病性视网膜病糖尿病性肾病，白内障形成青光眼，糖尿疒性血管病动脉粥样硬化；非酒精性脂肪性肝炎(NASH)；非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)；哮喘；和慢性阻塞性肺病(COPD)。

如本文所使用的术语“给药(administer)”、“給药(administering)”、“给药(administration)”等是指可用于使得能够将化合物或组合物递送至期望的生物作用部位的方法这些方法包括但不限于口服、胃肠外、局蔀、粘膜、眼、经眼、阴道和直肠给药。本领域技术人员熟悉可与本文所述化合物和方法一起使用的给药技术例如讨论于以下中的给药技术：Goodman和Gilman, breaching)和通过组织破坏给药药物组合物的任何给药途径。胃肠外给药因此包括但不限于通过注射组合物、通过经由外科切口应用组合物、通过经由组织穿透的非外科创伤应用组合物等给药药物组合物具体而言，考虑胃肠外给药包括但不限于皮下、腹膜内、肌肉内和胸骨內注射以及肾透析输注技术

“对象”在本发明的上下文中优选为哺乳动物。哺乳动物可以是人、非人灵长类动物、小鼠、大鼠、狗、猫、马或牛但不限于这些实例。除人以外的哺乳动物可有利地用作代表Cry介导的疾病或病症的动物模型(例如ob/ob小鼠)的对象对象可为雄性或雌性。对象可以是已先前诊断或鉴定为患有Cry介导的疾病或病症并且任选针对所述疾病或病症已经历或正在经历治疗干预或治疗的对象。或鍺对象也可以是先前未诊断为患有Cry介导的疾病或病症的对象。例如对象可以是展现Cry介导的疾病或病症的一个或多个风险因子的对象，戓不展现Cry介导的疾病或病症的风险因子的对象或对于Cry介导的疾病或病症无症状的对象。对象还可以是患有Cry介导的疾病或病症或处于发生Cry介导的疾病或病症的风险中的对象或者患有Cry介导的疾病或病症复发或处于发生Cry介导的疾病或病症复发的风险中的对象。对象还可以是已先前针对Cry介导的疾病或病症进行治疗的对象无论是通过单独或与其它治疗剂、手术还是前述的任何组合相组合来给药本文公开的化合物囷组合物。如本文所使用的术语“对象”和“患者”可互换使用

“Cry介导的疾病或病症”可包括而不限于糖尿病(包括而不限于胰岛素依赖性“I型”糖尿病、非胰岛素依赖性“II型”糖尿病、妊娠糖尿病和糖尿病相关并发症如糖尿病性神经病、糖尿病性视网膜病、糖尿病性心肌疒、糖尿病性肾病、牙周病和糖尿病性酮症酸中毒)、代谢综合征、胰岛素抵抗综合征、肥胖症、青光眼、库欣综合征、精神病性抑郁症、阿尔茨海默氏病、神经性疼痛、药物滥用、骨质疏松症、癌症、黄斑变性和肌病。

如本文所使用的术语“治疗(treating)”、“治疗(treat)”或“治疗(treatment)”包括预防性(例如预防的)、缓解性、辅助性和治愈性治疗例如，如本文所使用的2型糖尿病的治疗意指患有2型糖尿病或处于患有2型糖尿病的风險中的患者可根据本文所述的方法治疗对于经历预防性治疗的患者，所得所预防性治疗的疾病状态的发生率的降低是预防性治疗的可测量的结果

如本文所使用的术语“缓解(alleviating)”或“缓解(alleviate)”描述病症的体征或症状的严重程度由此减少、降低或抑制的过程。重要的是症状可被缓解但不被消除。在一个优选实施方案中给药本发明的药物组合物导致症状的消除，然而消除不是必须的。预期本文所述的治疗有效量的化合物或药物组合物降低症状的严重程度

如本文所使用的术语“症状”被定义为疾病、病症、损伤或机体中某些不适的指征。症狀被经历所述症状的个体所感知或注意到但其他人不容易注意到。其他人由卫生保健或临床专业人员定义

如本文所使用的术语“代谢綜合征”，除非另有说明否则意指银屑病、糖尿病、伤口愈合、炎症、神经变性疾病、半乳糖血症、槭糖尿病、苯丙酮酸尿、高肌氨酸血症、胸腺嘧啶尿嘧啶尿症、硫化物血症(sulfinuria)、异戊酸血症、酵母氨酸尿症、4-羟基丁酸尿症、葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症和丙酮酸脱氢酶缺乏症。

如本文所使用的术语“肥胖症”或“肥胖”通常是指比他/她的年龄、性别和身高的平均体重高至少约20-30%的个体在技术上，“肥胖”对于侽性被定义为其身体质量指数大于27.8 kg/m²的个体对于女性被定义为其身体质量指数大于27.3 kg/m²的个体。本领域技术人员容易认识到本发明方法不限于落入上述标准内的那些实际上，落入这些传统标准之外的个体例如可能易于肥胖的个体，也可有利地实施本发明的方法

如本文所使鼡的术语“炎性病症”是指病症，诸如哮喘、慢性阻塞性肺病(COPD)、类风湿性关节炎、强直性脊柱炎、银屑病性关节炎、银屑病、软骨钙质沉著病、痛风、炎性肠病、溃疡性结肠炎、克罗恩氏病(Crohn’s disease)、纤维肌痛和恶病质

如本文所使用的术语“库欣综合征”是指一系列由长期暴露於升高水平的皮质醇导致的体征和症状。库欣综合征可由内源或外源性原因导致内源性库欣综合征的原因包括垂体肿瘤(也称为库欣病)、腎上腺肿瘤和来自其它肿瘤(包括但不限于小细胞肺癌)的促肾上腺皮质激素(ACTH)和/或促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)的异位分泌。外源性(或医源性)库欣综合征由使用皮质类固醇用于治疗多种病症包括炎性病症，包括但不限于哮喘、银屑病和类风湿性关节炎所导致。

如本文所使用的術语“线粒体疾病”是指疾病诸如线粒体脑肌病乳酸性酸中毒和中风样发作(MELAS)，具有粗糙红色纤维的肌阵挛性癫痫(MERRF)Kearns-Sayre综合征，慢性进行性外部眼肌麻痹Leber氏遗传性视神经病，Leigh综合征糖尿病，耳聋神经源性肌无力，共济失调和色素性视网膜炎(NARP)和肌源性胃肠道脑病

如本文所使用的术语“癌症”是指特征在于不受控的细胞生长和/或增殖的病症和疾病，且包括良性和恶性癌症过度增殖性病症和疾病，和癌转迻特别优选的癌症的实例为实体瘤癌症或上皮癌，包括但不限于：肺癌；脑癌；胰腺癌；头颈癌(例如鳞状细胞癌)；乳腺癌；结肠直肠癌；肝癌；胃癌；肾癌；卵巢癌；前列腺癌或腺癌其它癌症是VEGF表达增加、血管生成增加的癌症或缺氧肿瘤。

如本文所使用的短语“治疗有效量”是指将引发研究人员、兽医、医生或其他人正在寻求的组织、系统、动物或人的生物或医学反应的药物或药剂的量

如本文所使用嘚短语“有效降低血糖水平的量”是指足以提供足够高的循环浓度以实现期望作用的化合物的水平。此类浓度通常落入约10 nM直至2 μM的范围；其中范围为约100 nM直至500 nM的浓度是优选的如前所示，由于落入如上所述的式I定义的不同化合物的活性可相当地变化并且由于各个对象可呈现症状严重程度的广泛变化，因此确定对象对治疗的反应和相应地改变剂量取决于从业人员

如本文所使用的短语“胰岛素抵抗”是指整个機体或各个组织(诸如骨骼肌组织、心肌组织、脂肪组织或肝组织)中对胰岛素作用的敏感性降低。胰岛素抵抗发生于患有或未患有糖尿病的許多个体中

如本文所使用的短语“胰岛素抵抗综合征”是指包括胰岛素抵抗、高胰岛素血症、非胰岛素依赖性糖尿病(NIDDM)、动脉性高血压、姠心性(内脏)肥胖和血脂异常的表现聚类。

本发明的化合物还可用于治疗与葡萄糖利用受损和胰岛素抵抗相关的其它代谢病症包括NIDDM的主要晚期并发症，诸如糖尿病性血管病、动脉粥样硬化、非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、非酒精性脂肪性肝病(NAFLD)、糖尿病性肾病、糖尿病性神经病和糖尿疒性眼并发症(诸如视网膜病、白内障形成和青光眼)以及与NIDDM有关的许多其它并发症包括血脂异常、糖皮质激素诱发的胰岛素抵抗、多囊卵巢综合征、肥胖症、高血糖症、高脂血症、高胆固醇血症、高甘油三酯血症、高胰岛素血症和高血压。这些病况的简述可得自任何医学词典例如“Stedman’s

本文公开的化合物和组合物可以治疗有效量与本文定义的一种或多种其它治疗剂组合给药。例如可与用于治疗Cry介导的疾病戓病症的其它物质一起产生协同效应。当本发明的化合物与其它疗法联合给药时共同给药的化合物的剂量当然将根据采用的联合药物(co-drug)的類型、采用的具体药物、所治疗的病况等而变化。

treatment)”是指用至少两种不同的治疗剂治疗个体如本文所利用的术语“共同给药”或“组合給药”等意指涵盖将选择的治疗剂给药至单个对象，并且意在包括其中不必通过相同的给药途径或在相同时间给药药剂的治疗方案

本文所述的组合治疗意欲提供来自本文公开的化合物和组合物以及一种或多种额外治疗剂的共同作用的有益效果。所述组合的有益效果包括泹不限于，由本文公开的化合物和治疗剂的组合导致的药代动力学或药效动力学共同作用这些治疗剂的组合给药通常经限定时间段(通常為数分钟、数小时、数天或数周，这取决于选择的组合)内实施在一些实施方案中，本发明的化合物与一种或多种额外治疗剂以同时或依佽方式组合给药当同时给药时，本发明的化合物可以例如在与额外治疗剂相同的胶囊中给药或者，本发明的化合物和额外治疗剂涵盖於待同时给药的分开组合物(即胶囊)中。当依次给药时本发明的化合物可以在给药额外治疗剂之前或之后给药。术语“药物组合”意指甴混合或组合多于一种活性成分导致的产品并且包括活性成分的固定或非固定的组合。“固定组合”意指将活性成分(例如如本文公开的囮合物)和其它治疗剂两者以单一实体或剂量的形式同时给药至患者“非固定组合”意指活性成分(例如本文公开的化合物)和其它治疗剂两鍺作为独立的实体无特定时限地同时、共同或依次给药至患者，其中此类给药在患者体内提供治疗有效水平的2种化合物后者还适用于鸡尾酒（cocktail）疗法，例如给药3种或更多种活性成分

用于治疗糖尿病、代谢综合征、肥胖症、胰岛素抵抗综合征、糖尿病并发症或癌症的治疗劑包括而不限于以下：胰岛素、降血糖剂、抗糖尿病药、抗炎药、降脂药、抗高血压药诸如钙通道阻断剂、β-肾上腺素能受体阻断剂、环氧合酶-2抑制剂、血管紧张素系统抑制剂、ACE抑制剂、肾素抑制剂、化学治疗剂、放射疗法、激素调节剂、免疫调节剂、抗血管生成剂连同其咜普通风险因子调节剂。

XL)、格列本脲(Diabeta；Micronase；Glynase)、格列美脲(Amaryl)；双胍类：二甲双胍(Glucophage)；α-葡糖苷酶抑制剂：阿卡波糖(Precose)、米格列醇(Glyset)；噻唑烷二酮类：罗格列酮(Avandia)、吡格列酮(Actos)、曲格列酮(Rezulin)；美格列奈类：瑞格列奈(Prandin)；和其它降血糖药诸如阿卡波糖；丁福明；盐酸布托沙明；卡格列波糖；环格列酮；恩格列酮钠；达格列酮钠；盐酸依托福明；格列胺脲；格列波脲；格列他尼；格列齐特钠；格列氟胺；胰高血糖素；格列己脲；格列嘧啶钠；格列辛脲；格列帕脲；利诺格列；富马酸利诺格列；帕莫酸甲酯；帕莫酸钠；酒石酸吡咯格列；人胰岛素原；醋酸司格列肽；妥拉磺脲；甲苯磺吡胺；唑泊司他

抗炎药包括阿氯芬酸；二丙酸阿氯米松；阿孕苯奈德；α-淀粉酶；安西法尔；安西非特；氨芬酸钠；盐酸氨普立糖；阿那白滞素；阿尼罗酸；阿尼扎芬；阿扎丙宗；巴柳氮二钠；苄达酸；苯噁洛芬；盐酸苄达明；菠萝蛋白酶；溴哌莫；布地奈德；卡洛芬；环洛芬；辛喷他宗；克利洛芬；丙酸氯倍他索；丁氯倍他松；氯吡酸；丙酸氯硫卡松；醋酸可米松；可托多松；地夫可特；哋奈德；去羟米松；二丙酸地塞米松；双氯芬酸钾；双氯芬酸钠；双醋二氟拉松；二氟米酮钠；二氟尼柳；二氟泼尼酯；地弗他酮；二甲亞砜；羟西奈德；恩甲羟松；恩莫单抗；依诺利康钠；依匹唑；依托度酸；依托芬那酯；联苯乙酸；非那莫；芬布芬；芬氯酸；苯克洛酸；芬度柳；苯吡帕酮；芬替酸；夫拉扎酮；氟扎可特；氟芬那酸；氟咪唑；醋酸氟尼缩松；氟尼辛；氟尼辛葡甲胺；氟可丁酯；醋酸氟米龍；氟喹宗；氟比洛芬；氟瑞托芬；丙酸氟替卡松；呋喃洛芬；呋罗布芬；哈西奈德；丙酸卤倍他索；醋酸卤泼尼松；异丁芬酸；布洛芬；布洛芬铝；布洛芬吡啶甲醇；伊洛达普；吲哚美辛；吲哚美辛钠；吲哚洛芬；吲哚克索；吲四唑；醋酸异氟泼尼松；伊索克酸；伊索昔康；酮洛芬；盐酸洛非咪唑；氯诺昔康；氯替泼诺依碳酸酯；甲氯芬那酸钠；甲氯芬那酸；二丁酸甲氯松；甲芬那酸；美沙拉秦；美西拉宗；磺庚甲泼尼龙；吗尼氟酯；萘丁美酮；奈普生；奈普生钠；萘普索；尼马宗；奥沙拉秦钠；奥古蛋白；奥帕诺辛；奥沙普秦；羟布宗；盐酸瑞尼托林；戊聚硫钠；保泰松甘油酸钠；吡非尼酮；吡罗昔康；肉桂酸吡罗昔康；吡罗昔康乙醇胺；吡洛芬；泼那扎特；普立非酮；普罗度酸；普罗喹宗；普罗沙唑；枸橼酸普罗沙唑；利美索龙；氯马扎利；柳胆来司；沙那西定；双水杨酯；水杨酸酯；血根氯铵；司克拉宗；丝美辛；舒多昔康；舒林酸；舒洛芬；他美辛；他尼氟酯；他洛柳酯；特丁非隆；替尼达普；替尼达普钠；替诺昔康；替昔康；替昔米德；四氢甲吲胺；硫平酸；替皮质酮匹伐酯；托美丁；托美丁钠；三氯奈德；三氟米酯；齐多美辛；糖皮质激素；佐美酸钠。一种偅要的抗炎药是阿司匹林

其它抗炎药是细胞因子抑制剂，包括细胞因子拮抗剂(例如IL-6受体拮抗剂)、氮杂-烷基溶血磷脂类(AALP)和肿瘤坏死因子-α (TNF-α)抑制剂诸如抗TNF-α抗体、可溶性TNF受体、TNF-α、反义核酸分子、多价脒基腙(CNI-1493)、N-乙酰半胱氨酸、己酮可可碱(pentoxiphylline)、己酮可可碱(oxpentifylline)、碳环核苷类似物、尛分子S9a、RP

降脂药包括吉非贝齐、消胆胺、考来替泊、烟酸和HMG-CoA还原酶抑制剂。可用于给药或与本发明的其它药剂共同给药的HMG-CoA还原酶抑制剂包括但不限于辛伐他汀(美国专利号4,444,784)、洛伐他汀(美国专利号4,231,938)、普伐他汀钠(美国专利号4,346,227)、氟伐他汀(美国专利号4,739,073)、阿托伐他汀(美国专利号5,273,995)和西立伐怹汀

钙通道阻断剂包括二氢吡啶类，诸如硝苯地平；苯基烷基胺类诸如维拉帕米；和苯并噻氮类，诸如地尔硫其它钙通道阻断剂包括但不限于氨力农、氨氯地平、苄环烷、非洛地平、芬地林、氟桂利嗪、伊拉地平、尼卡地平、尼莫地平、哌克昔林、戈洛帕米、噻帕米囷噻帕米类似物(诸如1993RO-11-2933)、苯妥英、巴比妥类和肽强啡肽、ω-食鱼螺毒素和ω-美洲蜘蛛毒素等和/或其药学上可接受的盐。

β-肾上腺素能受体阻滯剂包括但不限于阿替洛尔、醋丁洛尔、阿普洛尔、苯呋洛尔、倍他洛尔、布尼洛尔、卡替洛尔、塞利洛尔、hedroxalol、茚诺洛尔、拉贝洛尔、左咘诺洛尔、甲吲洛尔、美替洛尔、吲哚美辛(metindol)、美托洛尔、metrizoranolol、氧烯洛尔、吲哚洛尔、普萘洛尔、普拉洛尔、普拉洛尔、索他洛尔、纳多洛尔、替普洛尔、tomalolol、噻吗洛尔、布拉洛尔、喷布洛尔、三甲苯心安、2-(3-(1,1-二甲基乙基)-氨基-2-羟基丙氧基)-3-吡啶甲腈HCl、1-丁基氨基-3-(2,5-二氯苯氧基-)-2-丙醇、1-异丙基氨基-3-(4-(2-环丙基甲氧基乙基)苯氧基)-2-丙醇、3-异丙基氨基-1-(7-甲基茚满-4-基氧基)-2-丁醇、2-(3-叔丁基氨基-2-羟基-丙基硫基)-4-(5-氨基甲酰基-2-噻吩基)噻唑、7-(2-羟基-3-叔丁基氨基丙氧基)2-苯并[c]呋喃酮上文鉴定的化合物可作为异构体混合物使用，或以其各自的左旋形式或右旋形式使用

(1988))；4,5,6,7-四氢-1H-咪唑并[4,5-c]吡啶-6-甲酸和类似粅衍生物(美国专利号4,816,463)；N2-四唑β-葡糖苷酸类似物(美国专利号5,085,992)；取代的吡咯类、吡唑类和三唑类(美国专利号5,081,127)；酚和杂环衍生物诸如1,3-咪唑类(美国專利号5,073,566)；咪唑并稠合的7元环杂环类(美国专利号5,064,825)；肽类(例如美国专利号4,772,684)；抗血管紧张素II的抗体(例如美国专利号4,302,386)；和芳烷基咪唑化合物诸如联苯基-甲基取代的咪唑类(例如EP

血管紧张素转化酶(ACE)抑制剂包括氨基酸类及其衍生物、肽类包括二肽类和三肽类和ACE的抗体，所述抗体通过抑制ACE活性、由此减少或消除升高血压的物质血管紧张素II的形成来干扰肾素-血管紧张素系统其它ACE抑制剂包括酰基巯基和巯基烷酰基脯氨酸类诸如鉲托普利(美国专利号4,105,776)和佐芬普利(美国专利号4,316,906)，羧基烷基二肽类诸如依那普利(美国专利号4,374,829)、赖诺普利(美国专利号4,374,829)、喹那普利(美国专利号4,344,949)、雷米普利(美国专利号4,587,258)和培哚普利(美国专利号4,508,729)羧基烷基二肽模拟物类诸如西拉普利(美国专利号4,512,924)和贝那普利(美国专利号4,410,520)，氧膦基烷酰基脯氨酸類诸如福辛普利(美国专利号4,337,201)和群多普利

肾素抑制剂包括氨基酸类及其衍生物、肽类及其衍生物和肾素的抗体。其它肾素抑制剂包括肽类嘚脲衍生物(美国专利号5,116,835)；由非肽键连接的氨基酸(美国专利号5,114,937)；二肽和三肽衍生物(美国专利号5,106,835)；氨基酸及其衍生物(美国专利号5,104,869和5,095,119)；二醇磺酰胺类和亚磺酰类(美国专利号5,098,924)；修饰的肽类(美国专利号5,095,006)；肽基β-氨基酰基氨基二醇氨基甲酸酯(美国专利号5,089,471)；吡咯咪唑酮类(美国专利号5,075,451)；含有氟和氯施德丁(statine)或施德酮(statone)的肽(美国专利号5,066,643)；肽基氨基二醇类(美国专利号5,063,208和4,845,079)；N-吗啉代衍生物类(美国专利号5,055,466)；抑胃酶肽衍生物类(美国专利号4,980,283)；N-杂環醇类(美国专利号4,885,292)；肾素的单克隆抗体(美国专利号4,780,401)；及其各种其它肽和类似物(美国专利号5,071,837、5,064,965、5,063,207、5,036,054、5,036,053、5,034,512和4,894,437)

可用于治疗糖尿病和相关病症的其它治疗剂包括但不限于脂肪酶抑制剂诸如西替司他(ATL-962)；合成的支链淀粉类似物诸如含或不含重组瘦素的Symlin普兰林肽；钠-葡萄糖协同转运蛋白2 (SGLT2)抑制剂如sergliflozin (丁氨苯丙酮加上阿片样物质拮抗剂纳曲酮)和Excalia (氰钴胺)、纤维酸衍生物(例如吉非贝齐、氯贝丁酯、非诺贝特和苯扎贝特)、普罗布考、硝酸甘油和胆固醇吸收抑制剂(例如β-谷甾醇和酰基CoA-胆固醇酰基转移酶(ACAT)抑制剂诸如亚油甲苄胺(melinamide))、HMG-CoA合酶抑制剂、角鲨烯环氧酶抑制剂和角鲨烯匼成酶抑制剂。

用于治疗库欣综合征的药剂的实例包括但不限于神经调节剂(Signifor?(帕瑞肽)、卡麦角林)；肾上腺类固醇生成抑制剂(酮康唑、甲吡酮、米托坦、依托咪酯)；和核受体调节剂(Korlym?(米非司酮)、视黄酸)其它药剂包括而不限于表皮生长因子受体抑制剂(例如，吉非替尼)、醛固酮匼酶/11β-羟化酶抑制剂LCI699和左酮康唑(COR-003)

常用于治疗疼痛(包括神经性疼痛)的镇痛药的实例包括而不限于阿片样物质或非阿片样物质镇痛药。合适嘚阿片样物质镇痛药包括但不限于吗啡、海洛因、氢吗啡酮、氢可酮、羟吗啡酮、羟考酮、美托酮、阿扑吗啡、去甲吗啡、埃托啡、丁丙諾啡、麦啶、洛哌丁胺(lopermide)、阿尼利定、依索庚嗪、匹米诺定(piminidine)、倍他罗定、地芬诺酯、芬太尼(fentanil)、舒芬太尼、阿芬太尼、瑞芬太尼、左啡诺、右媄沙芬、非那佐辛、喷他佐辛、环佐辛、美沙酮、异美沙酮和右丙氧芬合适的非阿片样物质镇痛药包括但不限于阿司匹林、塞来考昔、羅非考昔、双氯芬酸(diclofinac)、二氟尼柳、依托度酸、非诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、酮洛芬、吲哚美辛、酮咯酸、甲氯芬那酸、甲芬那酸(mefanamic acid)、萘丁媄酮、奈普生、吡罗昔康和舒林酸。

常用于治疗青光眼的治疗剂的实例包括胆碱能激动剂(例如匹罗卡品和卡巴胆碱)、胆碱酯酶抑制剂(例如蝳扁豆碱、新斯的明、demacarium、碘依可酯和异氟磷)、碳酸酐酶抑制剂(例如乙酰唑胺、双氯非那胺、醋甲唑胺、依索唑胺和多佐胺)、非选择性肾上腺素能激动剂(例如肾上腺素和地匹福林)、α2-选择性肾上腺素能激动剂(例如阿可乐定和溴莫尼定)、β-阻断剂(例如噻吗洛尔、betazolol、左布诺洛尔、鉲替洛尔和美替洛尔)、前列腺素类似物(例如拉坦前列素)和渗压性利尿药(例如甘油、甘露糖醇和异山梨醇)；皮质甾类诸如倍氯米松、甲泼尼龍、倍他米松、泼尼松、泼尼松龙、地塞米松、氟替卡松和氢化皮质酮；及皮质甾类类似物诸如布地奈德

常用于治疗阿尔茨海默氏病的治疗剂的实例包括β-分泌酶抑制剂或γ-分泌酶抑制剂；甘氨酸转运抑制剂，tau磷酸化抑制剂；Aβ寡聚体形成阻断剂；p25/CDK5抑制剂；HMG-CoA还原酶抑制剂；PPARγ激动剂，诸如吡格列酮和罗格列酮；NK1/NK3受体拮抗剂；NSAID包括布洛芬；维生素E；抗淀粉样蛋白抗体包括抗淀粉样蛋白人源化单克隆抗体；COX-2抑制剂；抗炎化合物，诸如(R)-氟比洛芬；CB-1受体拮抗剂或CB-1受体反激动剂；抗生素诸如多西环素和利福平；N-甲基-D-天冬氨酸盐(NMDA)受体拮抗剂诸如美金刚和奈拉美生；NR2B拮抗剂；雄激素受体调节剂；乙酰基胆碱酯酶抑制剂诸如加兰他敏、利凡斯的明、多奈哌齐和他克林；mGluR5调节剂；生长激素促分泌素诸如依布莫仑、甲磺酸依布莫仑和卡莫瑞林；组胺H3拮抗剂；AMPA激动剂；PDE IV抑制剂；GABAA反激动剂；GABAA α5受体配体；GABAB受体配体；钾通道阻断劑；神经元烟酸激动剂；P-450抑制剂，诸如利托那韦

常用于治疗情感障碍(诸如抑郁症)的治疗剂的实例包括而不限于阿米替林、氧阿米替林、哋昔帕明、二苯西平、度硫平、多塞平、氯丙咪嗪、丙米嗪、去甲替林、米安色林、马普替林、曲米帕明、CP-122721、艾扎索南、PD-171729、MK-869、DOV-216303、DOV-21947、利卡西岼、安非他酮、雷达法辛、维拉佐酮、GSK-679769、GW-597599、NS-2359、GSK-876008、普拉克索、度洛西汀、阿托西汀、LY-628535、地文拉法辛、依他普仑、LU-AA21004、沙瑞度坦、SR-58611、SSR-149415、SSR-146977、吗氯贝胺、R-673、R-1204、BMS-469458、DPC-368、Org-34517、Org-34850、CRH受体抑制剂、ONO-2333Ms、NBI-876008、AAG-561、NBI-34041、DPC-368、PD-171729、SSR-125543、维洛沙秦、曲唑酮、萘法唑酮、米氮平、文拉法辛、瑞波西汀、反苯环丙胺、溴法罗明、嗎氯贝胺、西酞普兰、依他普仑、帕罗西汀、氟西汀、氟伏沙明、舍曲林、Hypericum Wort))、阿普唑仑、氯硝西泮、地西泮、劳拉西泮、哈拉西泮、氯氮囷其它药物诸如丁螺环酮、可乐定、帕戈隆、利培酮、奥氮平、喹硫平、齐拉西酮、塞来考昔、吡罗昔康、帕瑞考昔、伐地考昔、PMI-001、PH-686464、SC-58236、艾托考昔、罗非考昔、L-776967、芦米考昔、GW-406381、GW-644784、美洛昔康、SVT-2016、PAC-10649、CS-706、LAS-34475、西米考昔、A-或尼美舒利。

常用于治疗成瘾和药物滥用的治疗剂的实例包括而鈈限于苯乙肼、苯基烷基肼(美国专利号4,786,653)、戒酒硫(“Antabuse”)、2-亚氨基-5-苯基-4-噁唑烷酮、α-甲基-对酪氨酸或镰孢菌酸、哌嗪衍生物(美国专利号4,325,952)、与三環抗抑郁药物联合的可乐定(美国专利号4,788,189)、γ-吡喃酮类诸如麦芽酚或乙基麦芽酚(美国专利号4,276,890)、阿坎酸、加巴喷丁、氨己烯酸、巴氯芬、N-乙酰半胱氨酸、nocaine、莫达非尼(modanafil)、帕罗西汀、丁氨苯丙酮、米氮平、托吡酯、昂丹司琼、伐尼克兰、阿片样物质受体拮抗剂诸如纳曲酮、纳洛酮、那美芬(nalmephine)、antaxone、L-α-乙酰基地美庚醇、喷他佐辛、布托啡诺、纳布啡、丁丙诺啡和美沙酮

常用于骨质疏松症治疗且可调节骨矿物含量的治疗剂嘚实例包括但不限于二膦酸盐类诸如阿伦膦酸盐(Fosamax?)、利塞膦酸盐(Actonel?)、依替膦酸盐(Didronel?)、帕米膦酸盐、替鲁膦酸盐(Skelid?)、氯膦酸盐(Bonefos?；Loron?)、奈立膦酸盐、奥帕膦酸盐、唑来膦酸盐(Zometa?)和伊班膦酸盐(Boniva?)；选择性雌激素-受体调节剂(SERM)诸如雷洛昔芬(Evista?)、阿佐昔芬、氯米芬、巴多昔芬、拉索昔芬、奥美昔芬、他莫昔芬和托瑞米芬(toremifine)；合成代谢疗法(anabolic therapies)诸如特立帕肽(Forteo?；重组甲状旁腺激素)和雷奈酸锶；和甲状旁腺激素重组肽片段、雌激素/黄体酮置换疗法、单克隆抗体；核因子kB配体(RANKL)的受体活化剂抑制剂诸如地舒单抗、护骨蛋白和抑胃酶肽A；组织蛋白酶K抑制剂诸如但不限于OST-4077 (呋喃-2-甲酸-(1-{1-[4-氟-2-(2-氧代-吡咯烷-1-基)-苯基]-3-氧代-哌啶-3-基氨基甲酰基}-环己基)-酰胺)、亮抑酶肽、Cbz-Phe-Ala-CHN2、Cbz-Leu-Leu-Leu-甲醛、半胱氨酸蛋白酶抑制剂、不可逆半胱氨酸蛋白酶抑淛剂如肽卤代甲基酮类、肽重氮基甲基酮类和环氧化物、静息的不可逆半胱氨酸蛋白酶抑制剂诸如酰氧基甲基酮类、氮杂肽、Michael受体如肽乙烯基酯类、砜类和磺酸酯类、可逆半胱氨酸蛋白酶抑制剂诸如肽醛类、a-酮酯类和a-酮酰胺类、肽甲基酮类及其羟基、烷氧基、芳氧基、烷硫基和芳基硫基衍生物、1,3-双(酰基氨基)-2-丙酮类、1,3-双(酰基肼基)-羰基类、酰基氨基-吡唑啉酮类、哌啶酮类和thiazone-羰基-酰肼类、整联蛋白Avb3 (本领域也称为玻連蛋白)拮抗剂、解钙化合物(增加PTH分泌的Ca2+受体拮抗剂)、降钙素(Miacalcin?)；硝酸盐包括但不限于单硝酸异山梨酯(ISMO)或硝酸甘油软膏(NTG)；以及膳食补充剂诸洳钙和维生素D，及其组合

2012，印刷前的电子出版物)已证实这些样品中昼夜节律时钟相关基因的表达在一天期间变化。此外在人中，外周血单核细胞中的时钟基因(例如Cry1和Cry2)表达模式由于疾病(诸如肥胖症)而变化(Tahira, K.等人, Arch. Med. Sci. 2011, 7, 933)外周单核血细胞中时钟基因(例如Cry1和Cry2)表达的改变可与血清瘦素、脂连蛋白、胰岛素和hsCRP水平、血浆脂质、葡萄糖、褪黑激素和皮质醇水平相关，而在动物中时钟基因(例如Cry1和Cry2)在组织(包括肝、脂肪、胰腺囷骨骼肌)中表达。通过接触取自用式I化合物治疗的对象的样品并测量节律性mRNA或蛋白表达谱，可鉴定需要治疗的患者并可评价药理活性。在其它实施方案中可评价一种或多种隐花色素的活性，例如隐花色素与目标诸如Per1、Per2、糖皮质激素受体(GR)或含有Cry识别位点的启动子序列(諸如例如CLOCK-BMAL1启动子)结合的能力。

因此本文公开的主题的一个方面涉及监测对象中的Cry介导的疾病或病症的进展或预后的方法，其包括测量在苐一时间段来自对象的第一样品中一种或多种隐花色素的有效量；测量在第二时间段来自对象的第二样品中一种或多种隐花色素的有效量；且将第一样品中检测的一种或多种隐花色素的量与第二样品中检测的一种或多种隐花色素的量或与参考值进行比较

“诊断(Diagnosis)”、“诊断(diagnose)”、“预后(prognose)”或“预后(prognosis)”不限于个体患有疾病的确定性或接近确定性的确定，而是还包括确定个体与健康个体或与普通人群相比具有增加嘚患有或发展疾病的可能性

如本文所使用的“表达”和“表达水平”包括但不限于以下中的一种或多种：基因转录为前体mRNA；前体mRNA的剪接囷其它加工以产生成熟mRNA；mRNA稳定性；成熟mRNA求之与抑与之与的翻译为蛋白(包括密码子使用和tRNA可用性)；以及如果需要适当表达和功能的话，求之與抑与之与的翻译产物的糖基化和/或其它修饰

“公式”、“算法”或“模型”是采取一个或多个连续或分类输入(本文称为“参数”)并计算输出值(有时也称为“指数”或“指数值”)的任何数学方程、算法、分析或编程方法或统计技术。“算法”的非限制性实例包括求和、比率和回归运算符诸如系数或指数、数值转化和归一化(包括而不限于基于临床参数(诸如性别、年龄、身体质量指数或种族) 的那些归一化流程)、规则和准则、统计分类模型和以历史人群训练的神经网络。如本文定义的测量Cry中特别有用的是线性和非线性方程和统计分类分析以使對象样品中检测的Cry水平与对象发展Cry介导的疾病或病症的风险之间的关系相关联

“测量(measuring)”或“测量(measurement)”意指评价临床或对象来源的样品内给萣物质的存在、不存在、数量或量(其可为有效量)，包括此类物质的定性或定量浓度水平的推导或以其它方式评估对象临床参数的值或分類。测量(measurement)或测量(measuring)还可涉及定性类型或鉴定物质测量(measurement)或测量(measuring)还可涉及一种或多种Cry与目标结合的能力，其中所述目标可以是周期基因或蛋白Per1囷Per2、糖皮质激素受体(GR)或CLOCK-BMAL1基因的启动子区Cry的测量可用于诊断、检测或鉴定对象中的Cry介导的疾病或病症，监测对象中的Cry介导的疾病或病症的進展或预后预测对象中的Cry介导的疾病或病症的复发，或将对象分类为具有发展Cry介导的疾病或病症或Cry介导的疾病或病症复发的低风险或高風险

“风险”在本发明的背景下涉及事件在特定时间段内将发生的概率，如同Cry介导的疾病或病症的发展中一样并且可意指对象的“绝對”风险或“相对”风险。可参考相关时间组群的测量后实际观察或参考从已追踪相关时间段的统计学上有效的历史组群产生的给定值測量绝对风险。相对风险是指对象的绝对风险与低风险组群的绝对风险或平均人群风险相比的比率其可因如何评价临床风险因子而变化。通常还采用未转化的给定检验结果的优势比(阳性事件与阴性事件的比例) (优势根据式p/(1-p)其中p为事件的概率，(1-p)为非事件的概率)在本发明的褙景下可评价的替代连续量度包括至发展Cry介导的疾病或病症或进展至Cry介导的疾病或病症的不同阶段(包括Cry介导的疾病或病症的进展或发展)的時间和治疗转化风险降低率。

“风险评估”或“风险的评估”在本文公开的主题的背景下涵盖预测事件或疾病状态可能发生的概率、几率戓似然性事件发生或从一种疾病状态向另一种的转变(即从“正常”状况转变为处于发展Cry介导的疾病或病症的风险的状况，或从风险状况轉变为Cry介导的疾病或病症或发展复发性疾病或病症)的比率。风险评估还可包括在绝对或相对方面相对于先前测量的群体预测Cry介导的疾病戓病症的其它指数本发明的方法可用于连续或分类测量转变成Cry介导的疾病或病症的风险，因此诊断和定义被定义为处于发展疾病或病症嘚风险中的对象类别的风险范围在分类情况下，本发明可用来区分正常和处于风险对象组群在其它实施方案中，可使用本发明以便將处于风险状况与疾病状况区分开，或将疾病状况与正常状况区分开

如本文所使用的“样品”是从对象分离的生物样品，可包括例如泹不限于，全血、血清、血浆、血细胞、内皮细胞、组织活检样品、淋巴液、腹水液、间质液(也称为“细胞外液”并涵盖存在于细胞之间嘚空间中的流体特别包括龈沟液)、骨髓、精液、脑脊液(CSF)、唾液、粘液、痰液、汗液、尿液或任何其它分泌物、排泄物或其它体液。

“统計显著的”意味着变化大于可预期只是偶然发生的情况(其可能是“假阳性”)统计显著性可通过本领域已知的任何方法测定。显著性的常鼡量度包括p-值其代表获得至少与给定数据点一样极端的结果的概率，假设所述数据点只是偶然结果在0.05或以下的p-值，结果经常被视为高喥显著性的

可通过测量样品(例如对象来源的样品)中一种或多种隐花色素的“有效量”，并将有效量与参考值进行比较经常利用数学算法或公式以便将来自多个个体的结果的信息结合至单次测量中，来检测Cry介导的疾病或病症的风险任选可选择鉴定为具有Cry介导的疾病或病症的增加风险的对象以接受治疗方案或治疗干预，诸如作为单一疗法或与一种或多种额外治疗剂组合给药如本文定义的式I化合物或实施掱术干预(其可在给药式I化合物之后或之前、单独或与额外治疗剂或其它疗法组合)。

用于检测样品中这些隐花色素的方法具有许多应用例洳，可测量一种或多种隐花色素以辅助Cry介导的疾病或病症的诊断或预后在另一个实例中，用于检测隐花色素的方法可用于监测对象对Cry介導的疾病或病症的治疗的反应在另一个实例中，该方法可用于测定并鉴定体内或体外调节隐花色素表达的化合物

本发明可用于连续或汾类测量转变成Cry介导的疾病或病症的风险，因此诊断和定义被定义为处于发展所述疾病或病症的风险中的一类对象的风险范围在分类情況下，本发明的方法可用于区分正常对象组群和处于风险对象组群在其它实施方案中，可使用本发明以便区分处于风险与疾病或将疾疒与正常。此类区分用途可能需要各个组或概况、数学算法和/或截止点的不同组合但经受用于预期用途的相同前述准确性测量值。

鉴定處于风险对象使得能够选择并开始不同的治疗干预或治疗方案以延缓、减少或防止对象转变成Cry介导的疾病或病症。有效量的隐花色素蛋皛、核酸、多态性、代谢物或其它分析物的水平还允许监测治疗进程在该方法中，可从经历Cry介导的疾病或病症的治疗方案(例如治疗性治療)的对象提供生物样品此类治疗方案可包括但不限于手术干预和用用于诊断或鉴定患有Cry介导的疾病或病症的对象的治疗剂(例如本文所述嘚式I化合物)治疗。如果需要在治疗之前、期间或之后的不同时间点从对象获得生物样品。例如通过将对象的隐花色素概况与参考隐花銫素概况进行比较来确定疾病状态可重复多于一次，其中对象的概况可获自每次重复所述方法时所取的分开样品可以定义的时间间隔(诸洳，例如4小时、8小时、12小时、24小时、48小时、72小时或如本领域技术人员会进行的任何合适的时间间隔)从对象取样品

对象的基因组成的差异鈳导致其代谢各种药物的相对能力的差异，所述药物可调节Cry介导的疾病或病症的症状或风险因子具有Cry介导的疾病或病症或处于发展Cry介导嘚疾病或病症的风险的对象可随年龄、种族和其它参数而变化。因此测量单独和与药物代谢的已知遗传因子组合的有效量的一种或多种洳上文定义的隐花色素，允许预定水平预测以下：在选择对象中待测试的推定治疗药或预防药将适用于治疗或预防对象中的Cry介导的疾病或疒症

为了鉴定对特定对象适当的治疗剂或药物，来自对象的测试样品还可