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洛阳益生润精细化学有限公司年产3000吨水溶性聚合物（WPS改性多糖）项目批文公示
洛环审〔号关于洛阳益生润精细化学有限公司年产3000吨水溶性聚合物项目环境影响报告书的批复洛阳益生润精细化学有限公司：&&& 你公司委托中铝国际工程股份有限公编制的《洛阳益生润精细化学有限公司年产3000吨水溶性聚合物（WPS改性多糖）项目环境影响报告书》（以下简称《报告书》）、专家技术评审意见、孟津县环保局初审意见收悉，经研究，批复如下：&&& 一、本项目位于洛阳市孟津县华阳产业聚集区炎黄达到西段北侧，东临洛阳华张石化材料有限公司，西邻洛阳绿能生物科技有限公司，主要建设内容包括为1个主生产车间（2条生产线），配电室、循环水站、冷冻水站、化验室、原料及成品仓库等；生活设施为综合办公楼（含宿舍）、职工食堂等。项目总投资9600万元，环保投资431万元。&&& 二、该《报告书》评价目的明确，重点突出，内容全面，提出的环保措施可行，我局原则同意项目《报告书》。&&& 三、你公司应向社会公众主动公开经批准的《报告书》，并接受相关方的垂询。&&& 四、你公司在后续建设过程中应全面落实《报告书》提出的各项环境保护措施，各项环境保护设施与主体工程同时设计、同时施工、同时投入使用，并重点做好以下工作：&&& （一）施工期应采取有效措施，减少因地面开挖、物料装卸、运输等过程产生的二次扬尘；在运输车辆出入口处设置车辆冲洗设备，对驶出车辆进行冲洗，严谨车辆带泥（土）上路；产生的剩余弃土、建筑垃圾要妥善处理，不得随意倾倒。&&& （二）地面冲洗废水、化验废水及生活污水经一体化生化处理装置（调节池+厌氧池+好氧池+斜板沉淀池）处理，达到《污水综合排放标准》（GB）表4三级标准后，与循环系统排污水一起经厂区总排口排入集聚区污水处理厂处理；要规范化建设排污口，做到便于监管、便于监测。&&& （三）精制提纯产生的离心液、回收的反应母液（主要成分是异丙醇），在蒸馏回收异丙醇过程中应采用两级冷凝回收（常温循环水冷却+冷冻水冷却），冷凝回收后的不凝尾气再通过两级淋洗塔洗涤吸收后，废气通过25m高排气筒排放；真空干燥机生产的废气（异丙醇和水），应通过上述废气净化工艺处理后排放。&&& 生产过程中，要严格按环评提出工艺进行生产，确保两级冷凝装置、两级淋洗塔的正常工作，以减少异丙醇的排放。&&& （四）粉碎机废气经两级旋风分离回收物料后，与拼混、包装过程中产生的含尘废气一起通过袋式除尘器处理，满足《大气污染物综合排放标准》（GB）二级标准要求后，通过25m高排气筒排放。&&& （五）采取有效的隔声降噪措施，厂界噪声要满足《工业企业厂界环境噪声排放标准》（GB）3类标准要求。&&& （六）废分子筛属一般工业固废，由供应厂家回收；生活垃圾厂区内统一收集后，定期由环卫部门清运至垃圾填埋场填埋。&&& （七）该项目应制定完善的环境风险事故应急预案，严格落实《报告书》中提出的各项环境风险防范措施。按环评要求，污水处理站、废水池、罐区等设施要进行防渗处理。&&& （八）该项目涉及规划、国土、文物保护等相关事项，以相应行政主管部门审批意见为准。&&& 五、该项目主要污染物控制指标，以建设项目主要污染物总量指标备案表为准（项目编号：）。&&& 六、项目建设完成后，建设单位应按规定程序向洛阳市环保局申请试生产和环境保护验收，验收合格后，方可正式投入运行。&&& 七、孟津县环保局负责本项目日常环境监督管理工作，监督项目环保“三同时”的落实。&&&&&&&&&&&&&&&&&&& &&&&&&&&& &&&&&&&&&日&&抄送：市污染防治科、市环境监察支队&
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标题: 重金求助关于离子交换树脂层析柱分离中性多糖的操作，先行谢谢各位
摘要: [重金求助关于离子交换树脂层析柱分离中性多糖的操作，先行谢谢各位] 小弟最近在做一个活性物质分离纯化，发酵一种真菌，上清液中含有活性物质，是一中性多糖，想通过离子交换树脂法来进一步除杂，因第一次研究，望有经验的师兄师姐们帮帮忙。。。谢谢非常查阅的关于离子交换树脂的文献，知道硼酸与多糖产生反应形成有阴离子的复合物，因而用阴离子交换树脂，现在小弟有以下几个问题：1 阴离 关键词:[多糖 硼酸 柱子 硼酸溶液 树脂 洗脱 阴离子交换树脂]……
小弟最近在做一个活性物质分离纯化，发酵一种真菌，上清液中含有活性物质，是一中性多糖，想通过离子交换树脂法来进一步除杂，因第一次研究，望有经验的师兄师姐们帮帮忙。。。谢谢非常
查阅的关于离子交换树脂的文献，知道硼酸与多糖产生反应形成有阴离子的复合物，因而用阴离子交换树脂，现在小弟有以下几个问题：
1.阴离子交换树脂我应该选哪种类型，应该选什么样的柱子，树脂量一般是多少？
2.进样前，样品怎样处理，进样时应保持怎样的浓度，也即是稀释到几十毫升还是保持浓缩后的几毫升进样？
3.硼酸与中性多糖反应是在样品进样前放在一起处理，还是用硼酸处理柱子中的阴离子交换树脂？
4.我查过一篇文献，讲的是进过样后用分别用水，0.05 M硼酸溶液、0.08 M硼酸溶液和0.5 M NaOH溶液洗脱。。。。。要是用硼酸处理柱子树脂，应该用多少浓度的硼酸啊。。。NaOH溶液是起柱子再生作用吗？
5.带有硼酸和中性多糖的流分怎么进行检测和分离开啊
问题比较多， 先在此谢谢回复有没有知道的，拜托了。。。回复你不应该发在这里去科学版面发吧那里有纯化人才回复1、选哪种类型的树脂要通过实验筛选，柱子的大小与树脂装量由发酵液的处理量决定，一般一个批次的发酵液要一次处理清楚
2、浓缩液进样
3、.硼酸与中性多糖反应是在样品进样前放在一起处理
4、硼酸是解析液，NaOH溶液是起柱子再生作用回复那如题用的是0.05 M硼酸溶液、0.08 M硼酸溶液洗脱，那用的样品硼酸处理液是不是浓度比0.05 M小的硼酸溶液平衡处理啊。。。还有一般硼酸溶液用多少浓度处理啊，对于小柱子样品进样多少效果好啊。。。
还有就是用硼酸处理了样品，是不是柱子不用硼酸处理了，用水洗至平衡，然后进硼酸处理过的样品啊。。。。。。麻烦了，谢谢回复
那如题用的是0.05 M硼酸溶液、0.08 M硼酸溶液洗脱，那用的样品硼酸处理液是不是浓度比0.05 M小的硼酸溶液平衡处理啊。。。还有一般硼酸溶液用多少浓度处理啊，对于小柱子样品进样多少效果好啊。。。
还有就是用 ... 处理样品的硼酸浓度不一定比0.05小，因为硼酸还要与样品反应，但上柱的溶液一定小于0.05.还有......正确回复祝福一下！回复祝福一下！回复祝福 ~~祝福回复1.阴离子交换树脂我应该选哪种类型，应该选什么样的柱子，树脂量一般是多少？—— 一般用DEAE基团的，我们用GE的DEAE-sepharose 6 F.F. ,树脂用量跟样品量有关
2.进样前，样品怎样处理，进样时应保持怎样的浓度，也即是稀释到几十毫升还是保持浓缩后的几毫升进样——— 进样量还是几毫升为好。
3. 硼酸溶液没用过，不清楚回复建议使用纤维素DEAE-52，树脂分离效果不好，只有脱色作用，DEAE-sepharose 6 F.F.对蛋白较好，但对多糖效果不怎样，较难摸索条件回复建议使用DEAE-52，而DEAE-sepharose 6 F.F对蛋白效果较好，对糖的分离效果不好回复
1.阴离子交换树脂我应该选哪种类型，应该选什么样的柱子，树脂量一般是多少？—— 一般用DEAE基团的，我们用GE的DEAE-sepharose 6 F.F. ,树脂用量跟样品量有关
2.进样前，样品怎样处理，进样时应保持怎样的浓度， ... 我现在DEAE-sepharose 6 F.F，也用请问您在纯化是怎么确定上样量的，我的在水洗脱时有多糖，不能确定是中性糖还是酸性唐回复一篇文章说明不了问题，也许是我孤陋寡闻吧，多糖纯化见多了，还没见到用硼酸洗脱的，既然是中性多糖，如果分子量不是很大的话，上DEAE-52，用水就可以洗脱下来，接下来用氯化钠洗脱。再说，不论哪种菌和植物，都含有多种糖，你只说一种中性多糖，有点片面了，很多文章都是针对自己纯化的某一种糖来写的。还有我不知你的样品处理得到粗多糖了没有，有没有测一下含糖量？最好先处理得到干燥粗多糖。回复你先搞清楚，主要杂质是什么，例如，蛋白质。然后看什么条件能够吸附杂质而不吸附多糖，把多糖洗下，杂质蛋白就吸附在柱子上了。其他带电杂质也是这个道理。
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电话：021-绞股蓝多糖对化学性肝损伤的保护作用--《山东大学》2008年硕士论文
绞股蓝多糖对化学性肝损伤的保护作用
【摘要】：
肝脏是腹腔内最大的实质性器官,担负着人体的重要生理功能。肝损伤是临床常见的症状,若医治不当会引发多种并发症,如感染、肝创面胆漏、继发性出血等,甚至导致肝纤维化、肝硬化及肝肿瘤等,严重危害人类的健康。目前,临床尚缺乏理想的特异性防治药物。
绞股蓝Gynostemma pentaphyllum(Thunb.)Makino(GP)为葫芦科绞股蓝属多年生草质藤本植物。现代药理学研究表明绞股蓝具有多种药理活性,如抗肿瘤、降血脂、降血糖、抗衰老等。但是目前的研究主要集中在绞股蓝皂苷上,对绞股蓝中其它成分则研究较少。
在预实验的基础上,本课题对绞股蓝粗多糖进行了分离纯化,对绞股蓝多糖的结构和性质进行了分析,并分别以HL-7702细胞、大鼠肝原代细胞和小鼠为研究对象,通过四氯化碳和酒精肝损伤模型的建立,在细胞水平和动物水平上研究了绞股蓝多糖对化学性肝损伤的保护作用,测定给药后谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物岐化酶(SOD)或还原型谷胱甘肽(GSH)的活性,光镜下观察组织病理学变化。论文主要内容如下:
1、绞股蓝多糖的分离纯化及其性质分析:绞股蓝粗多糖初步纯化之后,经DEAE-Sephrose离子交换柱、Superdex 200凝胶柱分离,收集各组分,再经Sephadex G-25脱盐,最后冷冻干燥得绞股蓝精制多糖GPS-2、GPS-3。我们继续对GPS-2、GPS-3的纯度、分子量等性质进行了初步研究。
2、绞股蓝多糖对HL-7702细胞化学性肝损伤的保护作用:本课题以HL-7702细胞为研究对象,探讨GPS-2和GPS-3在细胞水平对肝损伤的保护作用。实验结果表明GPS-3对化学性肝损伤具有明显的保护作用,而GPS-2对化学性肝损伤的保护作用不明显。故在以后的实验中,只对GPS-3对化学性肝损伤的保护作用进行了研究。
3、GPS-3对肝原代细胞化学性肝损伤的保护作用:由于HL-7702细胞为永生化的肝细胞株,虽然具有部分肝细胞的特性,但和正常肝细胞相比还是存在较大差异,故本章节以大鼠肝原代细胞为研究对象探讨GPS-3对肝损伤的保护作用。
4、GPS-3对小鼠化学性肝损伤的保护作用:本章在动物水平继续探讨GPS-3对化学性肝损伤的保护作用,各生化指标和病理学切片图表明GPS-3具有明显的抗化学性肝损伤作用。
综上所述可知,GPS-3在细胞水平和动物水平对化学性肝损伤都具有良好的保护作用,是一种具有广泛研究和开发价值的生物活性成分,其肝保护作用机制还有待进一步的研究。
【关键词】：
【学位授予单位】：山东大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2008【分类号】：R285.5【目录】：
ABSTRACT13-15
符号说明15-17
1 绞股蓝概况17-19
1.1 绞股蓝的分布及科属17
1.2 绞股蓝的化学成分及药理活性17-19
1.2.1 绞股蓝皂苷药理活性研究17-18
1.2.2 绞股蓝多糖药理活性研究18
1.2.3 绞股蓝黄酮的药理活性研究18-19
1.3 绞股蓝的临床应用及开发前景19
2 化学性肝损伤19-24
2.1 肝损伤与肝病19-20
2.2 化学性肝损伤的作用机制20-21
2.3 化学性肝损伤模型的建立21-24
3 化学性肝损伤的治疗24-25
3.1 氧自由基清除剂24-25
3.2 肝药酶诱导剂25
3.3 钙通道阻滞剂25
3.4 肝细胞生长因子及肝细胞刺激因子25
4 本课题的研究内容、意义和创新点25-27
第一章 绞股蓝多糖的分离纯化及分子量测定27-39
1 实验材料27
2 试剂和仪器27-28
3 实验方法28-30
3.1 绞股蓝多糖的制备28-29
3.2 绞股蓝多糖的分离29-30
3.2 1 DEAE-Sephrose离子交换柱层析29
3.2.2 凝胶柱层析分离29-30
3.2.3 脱盐30
3.3 绞股蓝多糖纯度检查30
3.4 绞股蓝多糖分子量的测定30
4 结果30-35
4.1 绞股蓝粗多糖的制备30
4.2 绞股蓝多糖的分离30-33
4.2.1 DEAE-Sephrose离子交换柱层析30-31
4.2.2 凝胶柱层析分离31-33
4.2.3 脱盐33
4.3 绞股蓝多糖纯度检查33-34
4.4 绞股蓝多糖分子量的测定34-35
5 讨论和总结35-39
第二章 绞股蓝多糖对HL-7702细胞化学性肝损伤的保护作用39-53
1 实验材料39
2 试剂和仪器39
3 方法39-41
3.1 细胞培养39-40
3.2 GPS-2和GPS-3对四氯化碳肝损伤的保护作用40-41
3.2.1 CCL_4诱导培养HL-7702细胞损伤病理模型的制备40
3.2.2 细胞的分组和药物的添加40
3.2.3 细胞存活率检查40
3.2.4 ALT、AST、MDA、SOD活性的测定40
3.2.5 Hoechst33342细胞凋亡形态学染色40-41
3.3 GPS-2和GPS-3对酒精性肝损伤的保护作用41
3.3.1 酒精最佳损伤浓度的确定41
3.3.2 药物的添加和酒精损伤41
3.3.3 细胞存活率检查41
3.3.4 ALT、AST、MDA、SOD活性的测定41
4 结果41-50
4.1 GPS-2和GPS-3对四氯化碳肝损伤的保护作用41-47
4.1.1 CCl_4诱导培养HL-7702细胞损伤病理模型的制备41-42
4.1.2 GPS-2和GPS-3对HL-7702细胞存活率的影响42-43
4.1.3 GPS-2和GPS-3对CCl_4损伤后AST、ALT活性的影响43-45
4.1.4 GPS-2和GPS-3对CCl_4损伤MDA和SOD活性的影响45-46
4.1.5 Hoechst33342细胞凋亡形态学染色结果46-47
4.2 GPS-2和GPS-3对酒精性肝损伤的保护作用47-50
4.2.1 酒精最佳损伤浓度的确定47
4.2.2 GPS-2和GPS-3对HL-7702细胞存活率的影响47-48
4.2.3 GPS-2和GPS-3酒精损伤后AST和ALT活性的影响48-49
4.2.4 GPS-2和GPS-3对酒精损伤后MDA和SOD活性的影响49-50
5 讨论和总结50-53
第三章 绞股蓝多糖对大鼠肝原代细胞化学性损伤的保护作用53-65
1 实验材料53
2 试剂和仪器53-54
3 方法54-58
3.1 药物及试剂的配制54
3.2 鼠尾胶原的制备54-55
3.3 培养板的预处理55
3.4 大鼠肝细胞原代培养55-56
3.5 GPS-3对CCl_4致肝原代细胞损伤的保护作用56-57
3.5.1 GPS-3对肝原代细胞的影响56
3.5.2 CCl_4对肝原代细胞最佳损伤浓度和最佳损伤时间的确定56
3.5.3 GPS-3对CCl_4致肝细胞损伤后细胞活力的影响56-57
3.5.4 GPS-3对CCl_4致肝细胞损伤后酶活力的影响57
3.6 GPS-3对酒精致肝原代细胞损伤的保护作用57-58
3.6.1 GPS-3对酒精致肝细胞损伤后细胞活力的影响57
3.6.2 GPS-3对酒精致肝细胞损伤后酶活力的影响57-58
4 结果58-63
4.1 大鼠肝细胞原代培养58
4.2 GPS-3对大鼠肝原代细胞的影响58
4.3 GPS-3对大鼠肝原代细胞CCl_4损伤的保护作用58-61
4.3.1 CCl_4对肝原代细胞最佳损伤浓度和损伤时间的确定58-59
4.3.2 GPS-3对CCl_4致肝细胞损伤后细胞活力的影响59
4.3.3 GPS-3对CCl_4致肝细胞损伤后酶活力的影响59-61
4.4 GPS-3糖对大鼠肝原代细胞酒精性肝损伤的保护作用61-63
4.4.1 GPS-3对酒精致肝细胞损伤后细胞活力的影响61
4.4.2 GPS-3对酒精致肝细胞损伤后酶活力的影响61-63
5 总结和讨论63-65
第四章 绞股蓝多糖对小鼠化学性肝损伤的保护作用65-75
1 实验材料65
2 试剂和仪器65
3 实验方法65-67
3.1 GPS-3对CCl_4肝损伤的保护作用65-66
3.1.1 CCl_4肝损伤模型的建立及给药65-66
3.1.2 血清ALT、AST检测66
3.1.3 肝脏组织中MDA及GSH检测66
3.1.4 肝组织病理切片的制作66
3.1.5 数据处理66
3.2 GPS-3对酒精肝损伤的保护作用66-67
3.2.1 酒精肝损伤模型的建立及给药66
3.2.2 血清ALT、AST检测66
3.2.3 肝脏组织中MDA及GSH检测66-67
3.2.4 肝组织病理切片的制作67
3.2.5 数据处理67
4 结果67-73
4.1 GPS-3对小鼠CCl_4肝损伤的保护作用67-70
4.1.1 GPS-3对CCl_4肝损伤小鼠血清ALT及AST活性的影响67-68
4.1.2 GPS-3对CCl_4肝损伤小鼠肝组织MDA及GSH活性的影响68-69
4.1.3 GPS-3对CCl_4损伤后小鼠肝脏病理组织学变化的影响69-70
4.2 GPS-3对酒精性肝损伤小鼠的保护作用70-73
4.2.1 酒精性肝损伤小鼠的一般情况观察及死亡率70
4.2.2 GPS-3对酒精性肝损伤小鼠血清ALT及AST活性的影响70-71
4.2.3 GPS-3对酒精性肝损伤小鼠肝组织MDA及GSH活性的影响71-73
4.2.4 GPS-3对酒精致肝损伤后小鼠肝脏病理组织学变化的影响73
5 总结和讨论73-75
总结和展望75-77
参考文献77-83
攻读硕士学位期间发表的文章84-85
学位论文评阅及答辩情况表85
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