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中国科学院年研究生入学试题《生物化学与分子生物学》附答案
　　中国科学院年研究生入学试题《生物化学与分子生物学》附答案
　　中国科学院2002年研究生入学试题《生物化学与分子生物学》
　　一、是非题：15题，每题1分，共15分。答&是&写&＋&，答&非&写&－ &，写在题后的（）中。
　　1．维生素对人体的生长和健康是必需的，但人体不能合成维生素。 （ ）
　　2．能被某种振奋分子识别，并与其特异和共价结合的原子，原子团和分子，称为配基。 （ ）
　　3．当不同分子大小的蛋白质混合物流经凝胶柱层析时，小分子物质因体积小最先被洗脱出来。 （ ）
　　4．酶的最适pH与酶的等电点是两个不同的概念，但两者之间有相关性，两个数值通常比较接近或相同。 （ ）
　　5．对于一个酶而言，其过渡态的底物类似物与底物的物相比较，是更有效的竞争性抑制剂。 （ ）
　　6．Km值是酶的牲常数之一，与酶浓度、pH值、离子强度等条件或因素无关。 （ ）
　　7．磷脂酶A水解脂生成磷脂酸。 （ ）
　　8．NAD 不能由细胞浆通过线粒体内膜进入线柆体内，而NADH能在通过线粒体内膜后被氧化。 （ ）
　　9．寡霉素是线粒体ATP合成酶的抑制剂。 （ ）
　　10．核苷磷酸化酶催化腺苷的磷酸化，生成腺嘌呤和核糖－5－磷酸。 （ ）
　　12．肿瘤RNA病毒的复制过程为RNA－＞DNA－＞RNA。 （ ）
　　13．肾上腺素能与细胞膜上专一受体结合，这种激素 受体复合物能直接活化环化酶，使细胞cAMP浓度增加，引起级联反应。 （ ）
　　14．维生素E是一种抗氧化剂，对线体膜上的磷脂有抗自由的作用。 （ ）
　　15．吡哆醛、吡哆胺和吡哆醇的磷酸酯都可以作为转氨的辅酶。 （ ）
　　二、选择题：20题，每题1分，共20分。请将选择答案的号码填入（）中。
　　1．为稳定胶原三股螺旋结构，三联体的每三个氨基酸的位置必须是： （ ）
　　①丙氨酸；②谷氨酸；③甘氨酸
　　2．分离含胡二硫键的肽段可以用 （ ）
　　①　SDS PAGE电泳；②对角线电泳；③琼脂糖电泳
　　3．引起疯牛病（牛海绵脑病）的病原体是： （ ）
　　①一种DNA；②一种RNA；③一种蛋白质；④一种多糖
　　4．胰岛素等激素的受体以及上成或表皮生长因子的受体都是一种： （ ）
　①激酶；②脱氢酶；③转氨酶
　　5．在酶的可逆抑制剂中，不影响酶的二级常数（Kcat/Km）的是： （ ）
　　①竞争性抑制剂；②非竞争性抑制剂；③反竞争性抑制剂；④都不是
　　6．所谓&多酶体系&是指一个代谢过程中几个酶殗了一个反应链体系，多酶体系中的酶通常具有以下性质。 （ ）
　　① 只是在功能上相互有联系，在结构上互不相关，不存在相互作用；② 不仅在功能上相互有联系，在结构上也有相互联系，形成复合体；③ 上述两种情况都存在。
　　7．所谓&代谢物&指的是下面哪一条? （ ）
　　① 特指代谢反应中的反应物；② 特指代谢反应中的产物；
　　③ 特指代谢反应中的中间物；④ 所有代谢反应中的反应物、中间物和产物都称为代谢物。
　　8．有的酶存在多种同工酶形式，这些同工酶所催化的反应： （ ）
　　① 并不完全相同；② 完全相同，而且反应的平衡常数也相同；
　　③ 完全相同，但由于每种同工酶活性不同，反应平衡常数可以不相同。
　　9．脂肪肝是一种代谢疾病，它的产生主要是由于： （ ）
　　① 肝脏脂肪水解代谢障碍；② 肝脏蛋白不能及时将肝细胞脂肪排出；
　　③ 肝脏细胞摄取过多游离脂肪酸；④ 肝脏细胞膜脂肪酸载体异常
　　10．线粒体ATP/ADP交换载体在细胞内的作用是： （ ）
　　① 需能传送；② 促进传送；③ ATP、ADP的通道；④ ATP水解酶
　　11．辅酶Q是线粒体内膜： （ ）
　　① NADH脱氢酶的辅酶；② 琥珀酸脱氢酶的辅酶；③ 二羧酸载体；④ 呼吸链的氢载体
　　12．线粒体蛋白的跨膜传送是一种： （ ）
　　① 类似细胞膜的吞噬作用；② 蛋白质解折叠后传送；
　　③ 通过对各个蛋白质专一的载体传送；④ 膜内外同类蛋白质交换
　　13．Poly d（A－T）的Tm值较poly d（G C）为： （ ）
　　① 高；②低；③相同
　　14．反密码子为IGC，可识别密码子： （ ）
　　① GCA；；②GCG；；③ACG
　　15．RNA形成二级结构的碱基对，除了A－U和G－C外，还有： （ ）
　　① A C；②A G；③G U
　　16．RNA用强碱水解，产生： （ ）
　　① 2' 和5' 核苷酸混合物；② 2' 和3' 核苷酸混合物；③ 3' 和5' 核苷酸混合物；
　　17．能与受体结合，形成激素 受体复合物，进入细胞核调节基因表达的激素是： （ ）
　　① 甲状腺素② 肾上腺素；③ 溏皮质激素；④ 前列腺素
　　18．原核生物基因转终止子在终止点前均有： （ ）
　　① 回文结构；② 多聚A序列；③ TATA序列；④ 多聚T序列
　　19．能专门水解DNA RNA杂交分子中RNA的酶是 （ ）
　　① DNA聚合酶I：② 逆转录酶；③ Rnase A；④ 核酸外切酶III
　　20．真核生物中，存在于核仁中的RNA聚合酶是： （ ）
　　① RNA聚合酶I；②RNA聚合酶II；③RNA聚合酶III
　　三、填空题：9题，每空格答对1分，共15分
　　1． 已知三种超二级结构的基本组合形式___，___，___。
　　2． Western印迹法的原理是用___鉴定蛋白质的一种方法。
　　3． 酶容易失活，如何保存酶制品是一个很重要的问题。通常酶制品的保存方法有___和___等。
　　4． 红细胞膜带3蛋白是一种___。
　　5． 肝素是一种____，它的主要药理作用是____。
　　6． 细胞核内除了DNA外，还发现至少有二类小分子RNA，它们是核小分子RNA和____。
　　7． 核酸变性时，紫上吸收值增高，叫___效应。
　　8． 限制性内切酶特异识别和切割DNA分子中的回文结构，形成末端有粘性末端和___末端。
　　9． 内质网分为两种类型，一种是粗糙内质网，为________的场所；另一种为光滑型内质网，与____和____合成有关。
　　四、问答题：10题，每题5分，共50分。
　　1． 根据氨基酸通式的R基团极性性质，20种常见的氨基酸可分成哪四类?
　　2． 简述蛋白质翻译后的加工过程
　　3． 葡萄糖酵解过程的第一步是葡萄糖磷酸化形成6 磷酸葡萄糖，催化这一步反应有两种酶，已糖激酶和葡萄糖激酶。己糖激酶对葡萄糖的Km值远低于平时细胞内葡萄糖浓度，而葡萄糖激酶的Km值比较接近平时细胞内葡萄糖浓度。此外，己糖激酶受6 磷酸葡萄糖强烈抑制，而葡萄糖激酶不受6 磷酸葡萄糖的抑制。上述描述，请你说明两种酶在调节上的特点是什么?
　　4． 请解释什么是酶的活力和酶的比活力，并说出活力的比活力两个指标在酶的纯化过程中分别可以反映什么?
　　5． 写出葡萄糖酵解生成丙酮酸过程中的步骤（写出九步即可）。（A卷此题不同，大概是讲为什么会得脂肪肝的原理）
　　6． 写出氧化磷酸化的五个作用部位不同的抑制剂，并写出各处的抑制部位。
　　7． 真核生物mRNA的3' 末端有一段poly（A），5' 末端有一个&帽子&，&帽子&的结构特点是什么?
　　8． 5－磷酸核糖－1－焦磷酸（PRPP）是一个重要的代谢中间物，试举出二个反应合例子。
　　9． 试列出tRNA分子上与多肽合成有关的位点。
　　10。真核生物转录前水平的基因调节主要有哪些方式。
　　中科院02年研究生入学试题 生化B答案
　　1 －　 2 －　 3 －　 4 －　 5 ＋　 6 －　 7 － 生成溶血磷脂　 8 －　 9 ＋　 10 －　 11　 12 －有的为RNA－＞RNA
　　13 －　 14 ＋　 15
　　1 C 2 B 3 C 4 A 5 C 6 C 7 D 8 C 9 B 10 A 11 D 12 B 13 B 14 A 15 C 16 B 17 C 18 A 19 B 20 A
　　1、&&、&&、&&&　 2、抗原抗体结合的专一性　 3、低温　 干燥　 4、糖蛋白（阴离子交换蛋白） 5、多聚阴离子　 抗凝血　 6、snoRNA　 7、增色效应 8、平末端　 9、光面内质网　 脂质　 胆固醇
　　1、不带电荷的极性氨基酸、带正电荷的极性氨基酸、带负电荷的极性氨基酸、非极性氨基酸。
　　2、（1）末端端修饰 细菌的多肽N末端都是甲酰甲硫氨酸，真核生物的多肽N末端都是甲硫氨酸，通常N末端的甲酰甲硫氨酸或甲硫氨酸以及更多的N末端氨基酸残基都要被除去。真核生物的多肽的N末端残基还要进一步的乙醇化。羧基端的再修饰也时有发生。
　（2）切除信号序列。
　（3）非末端氨基酸的修饰 丝氨酸、苏氨酸残基的磷酸化；赖氨酸、谷氨酸残基的甲基化；谷氨酸、天冬氨酸的羧基化。
　（4）糖基化工厂 糖蛋白的末冬酰氨，丝氨酸、苏氨酸和糖基结合。
　（5）附加异戊二烯基团。许多真核生物蛋白质的半胱氨酸残基和异戊二烯基团以硫醚键结合。
　（6）添加辅基 这些辅基和解键共价结合，如血红素，叶绿素、生物素等。
　（7）前体修饰。有些蛋白生物合成时是以前体蛋白或多蛋白形式出现的要通过蛋白酶的切割，成为较小的活性分子。
　（8）形成二硫键
　　3、同一种底物的同一种反应，有两种酶存在，但两种酶的活性调节能力不同：已糖激酶对6－碳糖不加选择，肌肉中的已糖激酶为别构酶，特别受其产物6－磷酸葡萄糖的强烈负反馈抵制；葡萄糖激酶则对D－葡萄糖有专一性，为诱导酶，活性不被6－磷酸葡萄糖抑制，在进食后血糖升高时，可以促使葡萄糖转变成糖原储存起来。
　　4、酶活力也叫酶活性，可以用酶活力单位表示，酶活力是由酶自身催化一定反应的的能力决定的，比活力是指单位质量的酶制剂的酶活力单位数，酶的比活力反应酶的纯度。
　　5、生化下P67
　　6、生化下P129
　　7、真核生物mRNA的5'端有一个帽子结构。这一结构的最大特点是7－甲基鸟嘌呤核苷和mRNA的5'端通过5'－5'三磷酸酯键相连，另外靠近这一帽子结构的第一和第二核苷酸的2&羟基甲基化；真核mRNA的3&末端有一个多聚A尾，这些结构都是转录后加上去的。
　　8、生化下P393 P397
　　9、有4个关键的位点
　　（1）反密码子
　　（2）携带氨基酸的3&末端的氨基酸臂
　　（3）和核糖体上的蛋白质相互作用的二氢鸟嘧啶环和T&PC环
　　（4）氨酰t－RNA合成酶的结合位点
　　10、生化下P571
　　中国科学院2003年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》卷
　　一．是非题（共25分）
　　1．多肽链的共价主链形式可以是双链或单链（）
　　2．分子量相同的两种蛋白质，如分子中酪氨酸和色氨酸残基数亦相同，，其摩尔消光系数可能不同（）
　　3．胰岛素元的降血糖活性是胰岛素的1/10左右（）
　　4．苯丙氨酸是人体必需氨基酸（）
　　5．丝－酪－丝－甲硫－谷－组－苯丙－赖－色－甘十肽经胰蛋白酶部分水解后，溶液中将有两种肽段存在（）
　　6．核酸在pH3．5的缓冲液中电泳时，是从正极向负极运动的（）
　　7．核糖体上蛋白质生物合成时，催化肽键合成的是核糖体RNA（）
　　8．tRNA转录后加工有剪接反应，它是有蛋白质催化的（）
　　9．核酸降解成单核苷酸时，紫外吸收值下降（）
　　10．RNA连接酶的底物是RNA，DNA连接酶的底物是DNA（）
　　11．DNA的复制方法有多种，滚动式复制方式通常以双向方式进行（）
　　12．色氨酸操纵子（trpoperon）中含有衰减子序列（）
　　13．对正调控和负调控操纵子而言，诱导物都能促进基因的转录（）
　　14．RecA蛋白只能与单链DNA结合，并发挥NTP酶活性（）
　　15．在克隆载体pBSK质粒中，利用完整的lacZ基因作为筛选标记，白色转化菌落表明重组质粒含有插入片断（）
　　16溶菌酶水解的底物是N－乙酰氨基葡萄糖的聚合物（）
　　17．激素受体都具有酪氨酸受体结构域（）
　　18．在底物的浓度达到无限大又没有任何效应剂存在的条件下，酶催化反应为零级反应（）
　　19．蛋白质可接离的基团都来自其侧链上的基团（）
　　20．蛋白质的等电点和它所含的酸性氨基酸残基和碱性氨基酸残基的数目比例有关（）
　　21．心碱脂是一种在中性pH下带正电荷的磷脂（）
　　22．生物膜上有许多膜固有蛋白，他们的跨膜肽段大多呈&螺旋结构（）
　　23．生物膜以脂双层结构为骨架，虽然细胞的不同膜由不同的磷脂组成，但脂双层的两个单层的磷脂组成是基本一致的（）
　　24．NADH氧化时的P/O比值时3（）
　　25．生物膜是离子与极性分子的通透屏障，但水分子是例外（）
　　二．选择题（共20分）
　　1．胰岛素的功能单位是　　　　　　　 单体； 二体； 四体； 六体
　　2．1mol/L硫酸钠溶液的离子浓度为　　　 2；　 3；　 6；　 8
　　3．某蛋白质的pI为8，在pH6的缓冲液中进行自由界面电泳，其泳动方向为
　　像正极方向泳动； 没有泳动；　 向负极方向泳动；　 向正负极扩散
　　4．今有A，B，C，D四种蛋白质，其分子体积由大到小的顺序是A＞B＞C＞D，在凝胶过滤柱层析过程中，最先洗脱出来的蛋白质一般应该是　 A； B； C； D
　　5．噬菌体展示可用来研究：　 A蛋白质－蛋白质相互作用； B蛋白质－核酸相互作用； C 核酸－核酸相互作用；
　　D噬菌体外壳蛋白性质
　　6．DNA合成仪合成DNA片断时，用的原料是（ ）4种dNTP； 4种NTP； 4种dNDP； 4种脱氧核苷的衍生物
　　7．酒精沉淀核酸时，下列何种长度核苷酸不能被沉淀（）　 10； 20； 50； 100
　　8．反密码子IGC可以识别的密码子是（） GCG； GCA； ACG； ICG
　　9．真核RNA聚合酶2最大亚基C末端重复序列的功能是
　　磷酸化使RNA聚合酶2与其它转录因子解离，促进转录的起始与延伸；
　　乙酰化使RNA聚合酶2与组蛋白竞争结合与DNA上，促进转录的起始与延伸；
　　甲基化使RNA聚合酶2活化，促进转录的起始与延伸；
　　三者都有
　　10．GAL4因子能够结合于基因的上游调控序列并激活基因的转录，它的DNA结合结构域属于（）
　　锌指结构； 亮氨酸拉链结构；　 螺旋－环－螺旋结构； 螺旋－转角－螺旋结构
　　11．NA聚合酶1的功能是（）　 转录tRNA和5sRNA基因；　 转录蛋白质基因和部分snRNA基因；
　　只转录rRNA基因；　 转录多种基因
　　12．在真核细胞内，着丝粒是指
　　两个构成染色体DNA分子的连接区域；
　　一段高度重复的序列与组蛋白结合形成异染色质区；
　　染色体DNA上的一段特殊序列，能够促进与纺锤体的相互作用；
　　大约430bp长的一段序列，两端为两段高度保守的序列
　　13．下列哪种酶的巯基参与催化肽键断裂反应（ ）羧肽酶Y； 胃蛋白酶； 木瓜蛋白酶； 胰凝乳蛋白酶
　　14．达到反应平衡时，决定酶催化反应中底物转化为产物比率的参数是
　　酶的比活力高低； 酶的Vmax大小； 酶的转化数； 酶的Km
　　15．自然界通过光合作用生成大量的植物干物质，其中含量最高的是
　　淀粉；木质素；纤维素；半纤维素
　　16．能催化蛋白质的谷氨酸及天冬氨酸的羧基侧肽键断裂反应的酶是
　　枯草杆菌蛋白酶；　 胃蛋白酶； 嗜热菌蛋白酶； 金黄色葡萄糖球菌v8蛋白酶
　　17．下列化合物中哪一个是线粒体氧化磷酸化的解偶联剂
　　氯霉素；抗酶素A； 2，4－二硝基苯酚；&－羟基丁酸
　　18．蛋白激酶A催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化，它是
　　酪氨酸残疾； 组氨酸残基； 丝氨酸残基； 门冬氨酸残基
　　19．钠钾ATP酶催化一分子ATP水解时，同时
　　泵出2Na＋，泵入2K＋；　 泵出3Na＋，泵入3K＋；　 泵出2Na＋，泵入3K＋；　 泵出3Na＋，泵入2K＋；
　　20．动物细胞质中游离Ca＋2的浓度大约是细胞外的
　　1/；1/50；1/10
　　三．填空（共25分）
　　1．肌红蛋白分子中的辅基含有&&离子（金属），在正常状态下，该离子的化合价为&&
　　2．在朊病毒致病过程中，其分子中的&&结构转变为&&结构，从而使其分子产生&&
　　3．Northern杂交是用&&鉴定&&
　　4．真核生物主要有三类DNA聚合酶：DNA聚合酶1，DNA聚合酶2和DNA聚合酶&&；他们分别催化rRNA，mRNA，和&&的转录
　　5．&&通过结合反式因子，改变染色质DNA的结构而促进转录
　　6．&噬菌体侵入大肠杆菌细胞后通过&&重组而进入溶源状态
　　7．在同源重组过程中，常常形成&&中间体
　　8．大肠杆菌DNA依赖的RNA聚合酶由&2&&&&五个亚基组成，&&亚基与转录启动有关
　　9．天然染色体末端不能与其他染色体断裂片断发生连接，这是因为天然染色体的末端存在&&结构
　　10．真核生物的基因组中有许多来源相同，结构相似，功能相关的基因，这样的一组基因称为&&
　　11．酶活性调节控制包括，酶的别构调节（或正负反馈调节），可逆的化学修饰，酶原活化，激活蛋白或抑制蛋白的调控。此外，还有&&和&&调控等
　　12．多酶复合体具有自身调节的机制，第一步反应一般是限速步骤，可被其他反应产物&&。这种作用被称之为&&，催化这步反应的酶往往是&&。
　　13．紧密偶联的线粒体内膜在状态4时的跨膜电位为&&伏特
　　14．磷酸酯酶C水解磷脂酰胆碱，生成&&和&&
　　15．蛋白质识别磷酸化酪氨酸残基的结构域是&&
　　16．表皮生长因子受体与胰岛素受体分子的结构域功能的共同特点是受体的胞内区都具有&&
　　四．问答题（10*8）
　　1．某一单链蛋白质，经过实验测得，在20摄氏度时其解折叠反应（N＜＝＞D，其中N为该蛋白质的折叠态，D为非折叠态）的平衡常数是1．0*10^（－8），试求该种蛋白质在该条件下折叠反应的自由能．（R＝1．9872cal/（mol*K）或R＝8．3144J/（mol*K））
　　2．何谓蛋白质组，简述其研究特点。
　　3．请你尽可能多地列举RNA生物功能的种类
　　4．说明基因芯片的工作原理及其在生物学研究中的意义
　　5．简述反转录（还原）病毒HIV的结构特征及其可能的致病机理
　　6．简述真核生物染色体上组蛋白的种类，组蛋白修饰的种类及其生物学意义
　　7．如何用实验证明双功能酶所催化的2种化学反应是否发生在同一催化部位
　　8．为什么说体外蛋白质复性或折叠与细胞内蛋白质折叠的机制是不同的
　　9．试管内偶联线粒体加琥珀酸与ADP产生状态3呼吸耗氧时，在分光光度计下检测到线粒体内源NAD＋还原。这有那几种可能的机制?最后证明是何种机制
　　10．信号转导中第二信使指的是什么?试举两个第二信使的例子与他们在细胞内的主要作用。
　　中国科学院2003年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学与分子生物学》参考答案（答案为网友所提供非正式答案，仅供参考）
　　1． dG''＝－2．303RTlnK．
　　2．蛋白质组，蛋白质组学及研究技术路线（转自37度医学网，谢谢！！）
　　基因组（genome）包含的遗传信息经转录产生mRNA，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的mRNA称为转录子组（transcriptome）。很显然，不同细胞在不同生理或病理状态下转录子组包含的mRNA的种类不尽相同。mRNA经翻译产生蛋白质，一个细胞在特定生理或病理状态下表达的所有种类的蛋白质称为蛋白质组（proteome）。同理，不同细胞在不同生理或病理状态下所表达的蛋白质的种类也不尽相同。蛋白质是基因功能的实施者，因此对蛋白质结构，定位和蛋白质－蛋白质相互作用的研究将为阐明生命现象的本质提供直接的基础。
　　生命科学是实验科学，因此生命科学的发展极大地依赖于实验技术的发展。以DNA序列分析技术为核心的基因组研究技术推动了基因组研究的日新月异，而以基因芯片技术为代表的基因表达研究技术为科学家了解基因表达规律立下汗马功劳。在蛋白质组研究中，二维电泳和质谱技术的黄金组合又为科学家掌握蛋白质表达规律再铸辉煌。蛋白质组学（proteomics）就是指研究蛋白质组的技术及这些研究得到的结果。
　　蛋白质组学的研究试图比较细胞在不同生理或病理条件下蛋白质表达的异同，对相关蛋白质进行分类和鉴定。更重要的是蛋白质组学的研究要分析蛋白质间相互作用和蛋白质的功能。
　　蛋白质组学的研究内容包括：
　　1．蛋白质鉴定：可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术，利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。
　　2．翻译后修饰：很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化，糖基化，酶原激活等。翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式，因此对蛋白质翻译后修饰的研究对阐明
　　3．蛋白质功能确定：如分析酶活性和确定酶底物，细胞因子的生物分析/配基－受体结合分析。可以利用基因敲除和反义技术分析基因表达产物－蛋白质的功能。另外对蛋白质表达出来后在细胞内的定位研究也在一定程度上有助于蛋白质功能的了解。
　　4对人类而言，蛋白质组学的研究最终要服务于人类的健康，主要指促进分子医学的发展。如寻找药物的靶分子。很多药物本身就是蛋白质，而很多药物的靶分子也是蛋白质。药物也可以干预蛋白质－蛋白质相互作用。
　　在基础医学和疾病机理研究中，了解人不同发育、生长期和不同生理、病理条件下及不同细胞类型的基因表达的特点具有特别重要的意义。这些研究可能找到直接与特定生理或病理状态相关的分子，进一步为设计作用于特定靶分子的药物奠定基础。
　　不同发育、生长期和不同生理、病理条件下不同的细胞类型的基因表达是不一致的，因此对蛋白质表达的研究应该精确到细胞甚至亚细胞水平。可以利用免疫组织化学技术达到这个目的，但该技术的致命缺点是通量低。LCM技术可以精确地从组织切片中取出研究者感兴趣的细胞类型，因此LCM技术实际上是一种原位技术。取出的细胞用于蛋白质样品的制备，结合抗体芯片或二维电泳－质谱的技术路线，可以对蛋白质的表达进行原位的高通量的研究。很多研究采用匀浆组织制备蛋白质样品的技术路线，其研究结论值得怀疑，因为组织匀浆后不同细胞类型的蛋白质混杂在一起，最后得到的研究数据根本无法解释蛋白质
　　在每类细胞中的表达情况。虽然培养细胞可以得到单一类型细胞，但体外培养的细胞很难模拟体内细胞的环境，因此这样研究得出的结论也很难用于解释在体实际情况。因此在研究中首先应该将不同细胞类型分离，分离出来的不同类型细胞可以用于基因表达研究，包括mRNA和蛋白质的表达。　LCM技术获得的细胞可以用于蛋白质样品的制备。可以根据需要制备总蛋白，或膜蛋白，或核蛋白等，也可以富集糖蛋白，或通过去除白蛋白来减少蛋白质类型的复杂程度。相关试剂盒均有厂商提供。
　　蛋白质样品中的不同类型的蛋白质可以通过二维电泳进行分离。二维电泳可以将不同种类的蛋白质按照等电点和分子量差异进行高分辨率的分离。成功的二维电泳可以将种蛋白质进行分离。电泳后对胶进行高灵敏度的染色如银染和荧光染色。如果是比较两种样品之间蛋白质表达的异同，可以在同样条件下分别制备二者的蛋白质样品，然后在同样条件下进行二维电泳，染色后比较两块胶。也可以将二者的蛋白质样品分别用不同的荧光染料标记，然后两种蛋白质样品在一块胶上进行二维电泳的分离，最后通过荧光扫描技术分析结果。　胶染色后可以利用凝胶图象分析系统成像，然后通过分析软件对蛋白质点进行定量分析，并且对感兴趣的蛋白质点进行定位。通过专门的蛋白质点切割系统，可以将蛋白质点所在的胶区域进行精确切割。接着对胶中蛋白质进行酶切消化，酶切后的消化物经脱盐/浓缩处理后就可以通过点样系统将蛋白质点样到特定的材料的表面（MALDI－TOF）。最后这些蛋白质就可以在质谱系统中进行分析，从而得到蛋白质的定性数据；这些数据可以用于构建数据库或和已有的数据库进行比较分析。实际上像人类的血浆，尿液，脑脊液，乳腺，
　　心脏，膀胱癌和磷状细胞癌及多种病原微生物的蛋白质样品的二维电泳数据库已经建立起来，研究者可以登录www．expasy．ch/www/tools．html等网站进行查询，并和自己的同类研究进行对比分析。
　　LCM－二维电泳－质谱的技术路线是典型的一条蛋白质组学研究的技术路线，除此以外，LCM－抗体芯片也是一条重要的蛋白质组学研究的技术路线。即通过LCM技术获得感兴趣的细胞类型，制备细胞蛋白质样品，蛋白质经荧光染料标记后和抗体芯片杂交，从而可以比较两种样品蛋白质表达的异同。
　　传统的蛋白质研究注重研究单一蛋白质，而蛋白质组学注重研究参与特定生理或病理状态的所有的蛋白质种类及其与周围环境（分子）的关系。因此蛋白质组学的研究通常是高通量的。适应这个要求，蛋白质组学相关研究工具通常都是高度自动化的系统，通量高而速度快，配合相应分析软件和数据库，研究者可以在最短的时间内处理最多的数据。
　　中科院2003生物化学大题 （上海命题 ） 参考答案（续）由我作出， 仅供参考而已！！
　　3．RNA功能很多，比如：翻译模板（MRNA），连接子（TRNA），ribozyme，Gene
　　silencing，翻译阻遏（micRNA），构成翻译机器rRNA－－－－－－－－一些也是ribozyme但是不全是，RNA的剪接/切，RNA
　　editing（如guideRNA），Genome，DNA复制引物等．
　　4． 基因芯片是最重要的一种生物芯片，是指将大量探针分子固定于支持物上，然后与标记的样品进行杂交，通过杂交信号的强弱判断靶分子的数量。用该技术可将大量的探针同时固定于支持物上，所以一次可对大量核酸分子进行检测分析，从而解决了传统核酸印迹杂交技术操作复杂、自动化程度低、检测目的分子数量少、效率低等不足。它能在同一时间内分析大量的基因，使人们准确高效地破译遗传密码。这将是继大规模集成电路后又一次意义深远的科技革命。转自：生物谷，谢谢！！
　　5．HIV有两条＋RNA衣壳和包膜，其受体为CD4，为反转录病毒，侵染后，整合入淋巴细胞GENOME，并引起淋巴细胞凋亡．
　　6。组蛋白的类型和修饰及意义；
　　7。如何证明双功能酶催化的两个反应是不是在同一个催化位点；
　　8。蛋白质体内外的折叠复性有何不同；
　　9。有关呼吸状态3时，NAD＋被还原的机制；
　　10。第二信使，举例说明作用机制。参考答案：
　　6．修饰有Pi化，甲基化，乙先化等，意义：我查了一份材料但是现在不在手边，我自己不知道，
　　等几天我补上．组蛋白的类型尽人皆知，还有些类H1 PROTEINS．
　　7．考1）双功能酶（2）活性中心（或催化位点）的测定．
　　双功能酶：在生物体内共价修饰后有不同与未共价修饰的不同时的酶活性的酶．不要把共价
　　修饰答成化学修饰，这可能被抓住－－－－－－－－－可以被理解为人工修饰．
　　活性中心（或催化位点）的测定．对共价修饰的不同的酶与未共价修饰的用同样的方法测定
　　活性中心（或催化位点）的测定，看是不是一样，比如定点突变，X－RAY，动力学等．
　　8．主要是两点；
　　一．体外 PROTEIN FOLDING是从头FOLDING；体内FOLDING是边翻译边FOLDING，两者最后都要
　　调整．二．体外PROTEINFOLDING是从变性条件下开始FOLD，而且无PPI，PDI分子伴侣的帮助；体内FOLDING不是从变性条件下开始FOLD，而且有PPI，PDI分子伴侣的帮助．
　　9．答略． 。10．第二信使就是胞内信使，举例说明：略．
　　中国科学院2004年研究生入学试题《生化与分子生物学》试题
　　一．是非题：30分，是写&＋&，非写&－&
　　1． 目前已知的G蛋白都是由&和&&亚基组成的．
　　2． 作为膜脂的鞘糖脂的功能主要与能量代谢有关．
　　3． 生物膜中脂质的流动性受胆固醇含量的影响．
　　4． 磷脂的代谢转化主要是与三酯酰甘油的合成和利用有关．
　　5． 人是最高等生物，其基因组的碱基对数目（2．9*10#9）是动物界中最大的．
　　6． 有两个核酸制剂A和B，A的A250/A280＝2．0，B的A250/A280＝1．5，因此可判定制剂A的纯度比制剂B的要高．
　　7． 真核生物mRNA的两端都有3'－羟基．
　　8． DNA半不连续复制是指复制时一条链的合成方向是5'－－－＞3'．而另一条链的合成方向为3'－－－＞5'．
　　9． 一个真核细胞内基因编码所用的密码子是通用的．
　　10． 人类基因组中有大量重复序列，如SINE，ALu等序列．
　　11． 端粒的序列在同一细胞各条染色体上都是相同的．
　　12． 在遗传作图中，1厘摩（cM）相当于1Mb的碱基长度．
　　13． 一个酶催化正反应和逆反应的Kcat或Km值可以不同，但Kcat/Km比值通常是相同的．
　　14． 信号肽的结构有一些特征，目前发现的信号肽序列都是位于多肽连的N端．
　　15． 构成淀粉，纤维素和半纤维素的基本单位都是葡萄糖．
　　16． ELISA和Western印迹两种方法都是应用抗体检测抗原的实验手段．
　　17． 生物膜的基本结构是脂双层．其中的二个单层的脂质组成大体上是相同的．
　　18． Na＋，K＋－ATP酶在水解一分子ATP时使2个K＋由细胞外进入细胞内，同时使2个Na＋由细胞内达到细胞外．
　　19． 脂质体不是一种细胞器．
　　20． 寡霉素是氧化磷酸化的抑制剂，既抑制呼吸也抑制磷酸化，但是它对呼吸的抑制可以被解偶联剂所解除．
　　二．选择题，每题1．5分共45分．
　　1． 类二十碳烷（eicosanoid）的主要前体是
　　A．前列腺素； B．亚油酸； C花生四烯酸； D棕榈酸．
　　2． 还加氧酶（cyclooxygenase）参与下述何种分子的合成?
　　A．白三烯； B．血栓烷； C．亚油酸； D，血小板活化因子．
　　3． 肌醇三磷酸（IP3）作用与受体，从而调节
　　A．G蛋白的活性； B．Ca2＋通道； C．PKG的活性； D．腺苷酸环化酶的 活性．
　　4． 磷脂酶D催化磷脂酰胆碱水解的产物是
　　A．二酯酰甘油； B．磷脂酸； C磷酸胆碱； D．溶血磷脂酸．
　　5． 一氧化氮（NO）受体是
　　A．G蛋白偶联受体； B．鸟苷酸环话么酶；C．腺苷酸环化酶； D蛋白酪氨酸激酶．
　　6． 已知佛波醇酯（TPA）可以强烈地活化
　　A．蛋白酪氨酸激酶； B．G蛋白； C．蛋白激酶C； D．蛋白激酶B．
　　7． 能与DNA结合使DNA失去模板功能，从而抑制复制和转录的是
　　A．5－氟尿嘧啶； B．放线菌素； C．利福霉素； D．a－饿膏蕈碱．
　　8． 氨基酸在叁入肽链前需要被ATP活化，氨基酸活化的场所是
　　A．内质网； B．线粒体； C．核糖体； D．细胞质．
　　9． 真核生物mRNA的帽子结构中，m7G与多核苷酸链通过三个磷酸基联接 的方式是
　　A．2'－－5'； B．3'－－5'； C．3'－－3'； D．5'－－5'．
　　10． 与tRNA中的反密码子为GCU相配对的mRNA中的密码子是
　　A．UGA； B．CGA； C．AGU； D．AGI．
　　11． 能校正＋1依码突变基因的是
　　A．突变型氨酰tRNA合成酶； B．含突变型反密码子的tRNA；
　　C．含四个碱基的反密码子的tRNA； D．能切割一个核苷酸的酶．
　　12． 用[a－－32P]dATP标记一个DNA片段，需要用
　　A．多核苷酸激酶； B．DNA连接酶； C．DNA聚合酶； D．逆转录酶．
　　13． DNA甲基化是基因表达调控的重要方式之一，甲基化位点是
　　A．CpG岛上的C的3位； B．CpG岛上的G的3位；　 C．CpG岛上的C的5位； D．CpG岛上的G的7位．
　　14． 遗传学的三大定律是
　　A．连锁定律．分离定律．独立分配定律； B．隐性定律．自由组合定律．独立分配定律； C．重排定律．突变定律．减数分裂定律； D．质量性状定律．数量性状定律．混合性状定律．
　　15． 非孟得尔式遗传可以由以下的原因引起
　　A．核外基因的存在； B．转座子的激活； C．逆转录病毒的插入； D．同源重组．
　　16． 人类某些神经系统 疾病主要与下列那种核苷酸序列的不正常扩增 有关
　　A．三核苷酸序列； B．具有回文结构的六核苷酸序列； C．CpG序列； D．SINE序列．
　　17． 基因参与凋亡的许多证据最初来源于对线虫（C．elegens）发育的研 究，这些参与凋亡调控的基因称为Ced基因，其中和人类基因Bcl 2同 源的是
　　A．Ced 3； B．Ced 5； C．Ced 7； D．Ced 9．
　　18． 根据F2代出现极端表型的频率可以估算数量性状基因的数目，如果 这一频率为0．0143，则该性状由
　　A．2对基因控制； B．3对基因控制； C．4对基因控制； D．5对基因控制；
　　19． Lineweaver－Burk双倒数作图法和求抑制剂Ki的Dixon作图法分别采 用
　　A．1/v对于1/[S]作图和1/v对1/[I]作图； B．1/v对于1/[S]作图和1/v对[I]作图；
　　C．1/v对于[S]作图和1/v对1/[I]作图；　 D．1/v对于1/[S]作图和v对1/[I]作图．
　　20． 在含金属酶中，最常见的金属是
　　A．铜； B．铁； C．锌； D．镁．
　　21． 英国科学家完成牛胰岛素的氨基酸序列测定工作和中国科学家完成 牛胰岛素的人工合成工作分别在
　　A．20世纪40年代和20世纪50年代；B．20世纪50年代和20世纪60年代 C．20世纪50年代和20世纪50年代；D．20世纪60年代和20世纪70年代
　　22． 催化糖原合成的三种酶是
　　A．糖原磷酸化酶，糖原合酶，糖原分支酶； B．UDP葡萄糖焦磷酸酶，糖原磷酸化酶，糖原分支酶；
　　C．UDP葡萄糖焦磷酸酶，糖原磷酸化酶，糖原合酶；D．UDP葡萄糖焦磷酸酶，糖原合酶，糖原分支酶 ．
　　23． 蛋白质在处于等电点时的溶解度
　　A．最小； B．最大； C．与等电点没有关系．
　　24． 酵母双杂交系统被用来研究
　　A．哺乳动物功能基因的表型分析； B．酵母细胞的功能基因； C．蛋白质的相互作用； D．基因的表达调控．
　　25． 凝集素是一类蛋白质，它们能专一地识别
　　A．某个氨基酸残基或特定肽段序列； B．某个糖基或特定寡糖链；C．某个核糖核苷酸或特定寡核糖核苷酸序列；
　　D．某个脱氧核糖核苷酸或特定寡脱氧核糖核苷酸序列．
　　26． 2003年诺贝尔化学奖授予研究生物膜上通道蛋白的科学家，他们阐 明了
　　A．Cl'通道与Na＋通道； B．Cl'通道与Na＋通道； C．K＋通道与H2O通道； D．乙酰胆碱通道与GABA通道．
　　27． 蔗糖与麦芽糖的区别在于
　　A．麦芽糖是单糖； B．蔗糖是单糖； C．蔗糖含果糖； D．麦芽糖含果糖．
　　28． 下述化合物中不属于胆固醇衍生物的是
　　A．雌性激素； B．胆酸； C．黄体酮； D．前列腺素．
　　29． 抗霉素A是一种抑制剂，它抑制
　　A．线粒体呼吸链复合物I； B．线粒体呼吸链复合物II； C．线粒体呼吸链复合物III； D．线粒体ATP合成酶．
　　30． 细胞色素C是重要的呼吸链组份，它位于
　　A．线粒体内膜的内侧； B．线粒体内膜的外侧；C．线粒体外膜； D．细胞质内．
　　三．简答题：每题5分，共25分
　　1． 当细胞中某一个蛋白激酶被活化，结果却发现细胞中有一个蛋白质 的磷酸化水平没有提高，反而降低了．请问这个结果可不可信?如何解释?
　　2． 根据结构与催化机制（而不是根据被驱动的离子类型），说出三类驱 动离子的ATP酶的名称．
　　3． 简述磷脂酶C催化磷酯酰肌醇4，5－二磷酸的水解产物可引发的信号 传递事件．
　　4． 有一寡聚核糖核苷酸片段：ApCpCpCpCpApGpGpGpUpUpUpApGp，请分别 写出用牛胰核糖核酸酶A，核糖核酸酶T1和碱处理得到的完全降解物．
　　5． 简述平衡致死系统作为一种隐性纯合致死突变品系保存方式的原理
　　四．问答题：每题10分，共50分．
　　1． 已知细胞质膜中脂分子组成的复杂性远远超过它们作为单纯的生物 或物理屏障所需的程度，你认为这有什么生物学意义?
　　2． 一个可逆抑制剂对酶的抑制常数（K1）是否就等于当酶的活性被抑制 到50%时的抑制剂浓度?请你通过对一个竞争性抑制剂和一个非竞争 性抑制剂的酶动力学分析，对上述问题做出解答．
　　3． 目前已得到原子分辨率结构的蛋白质膜蛋白的比例不到1%，请问解 吸膜蛋白空间结构的难度在那里?测定膜蛋白原子分辨率空间结构 的方法有那些?
　　4． 简述表观遗传变异（epigenetic variation）的概念与意义，并举例 两种主要表现形式．
　　5． 严重急性呼吸综合症（Severe Acute Respiratory Syndrome，SARS）
　　的病原体被称为SARS病毒．就你所知，简单回答SARS病毒的类属，结 构特征和生物特性．
　　中科院04年研究生入学试题 生化答案
　　1 －　 2 －　 3 ＋　 4 －　 5 － c值悖论和N值悖论　 6 ＋　 7 ＋　 8 －　 9 － 叶绿体和线粒体中的可能会不同。 10 ＋　 11 ＋　 12 －　 13 －　 14 －　 15 － 半纤维素不是　 16 ＋　 17 －　 18 －　 19 ＋　 20 ＋
　　1 C 2 A单加氧酶催化什么反应也要知道 3 B 4 B　 5 B　 6 C　 7 B　 8 D　 9 D　 10 C　 11 C　 12 C 如果是&32p－dATP就要用核酸激酶　 13 C　 14 A　 15 A　 16 A　 17 D　 18 B　 19 B　 20 C　 21 B　 22 D　 23 A　 24 C 25 B　 26 B　 27 C　 28 D　 29 C　 30 B
　　1、（1）结果是可以信的
　（2）可能的情况：a 被活化的蛋白激酶并不直接作用于上述蛋白质 b 被疾化的蛋白激酶能疾化上述蛋白的磷酸化酶或者抑制上述蛋白的激酶。
　　2、V型 P型 F型
　　3、参照课本 （信号传递一直是重点，要滚瓜烂熟）
　　4、ApGpGpGpUp＋ApCp＋ApGp＋3Cp＋2Up牛胰核酸酶A专一性切割嘧啶核苷酸的3'－磷酸酯键核糖核酸酶T1鸟苷酸的磷酸酯键碱处理的降解所有核苷酸的2'和3'磷酸酯键
　　5、紧密连锁或中间具有到位片段的相邻基因由于生殖细胞的同源染色体不能交换，所以可以非等位基因的双杂合子，保存非等位基因的纯合隐性致死基因，该品系被称为平衡致死系．
　　1、答题要点：指出它们作信号传递分子或者信号传递分子的生成、储存与转化的物质形式的作用
　　2、（1）动力学方程无抑制剂时　　　 V＝Vmax[S]/{Km＋[s]}竞争性抑制剂存在时　 V＝Vmax[S]/{Km（1＋[I]/K1）＋[S]}非竞争性抑制剂存在时 V＝Vmax[S]/{（Km＋[S]）（1＋[I]/K1）}
　（2）对于非竞争性抑制剂而言对酶的抑制常数（K1）是否就等于当酶的活性被抑制到50%时的抑制剂浓度，而对于竞争性抑制剂上述说法不成立。
　　3、难度：膜蛋白的表达、分离和纯化都比水溶性的要难，很难获得单晶。方法：X－射线衍射，电子衍射三维重组。
　　4、表观遗传现象是指基因表达发生改变但不涉及DNA序列的变化，观遗传变异包括基因沉默、DNA甲基化、核仁显性、基因组印记等方面．
　　5、SARS病毒属冠状病毒科冠状病毒属[答出是一种冠状病毒也可给2分]带包膜的正链RNA球形病毒[答出是一种正链RNA病毒也可给2分]大小为70到130nm，基因组约为29Kb。含有多种独立的基因，转录合成一系列病毒结构蛋白和非结构蛋白，结构蛋白有：核衣壳蛋白（N蛋白）、跨膜糖蛋白（M蛋白）、刺突糖蛋白（S蛋白）等。非结构蛋白有聚合蛋白等，复制不经DNA中间体，周期是（＋）RAN－＞（－）RNA－＞（＋）RNA
　　中国科学院05年攻读硕士学位研究生入学试题《生物化学及分子生物学》
　　一、 判断题 20题，20题，每题1．5分，共30分．
　　1、 鞘磷脂的代谢过程主要与细胞质膜的流动有关与细胞生物活性分子的生成调节无关。
　　2、 蛋白质的修饰与其运输和定位有关，而与其降解代谢无关。
　　3、 蛋白质的豆蔻酰化是蛋白质脂肪酸化的一种形式。
　　4、 可逆性膜锚定与蛋白激酶参与的信号转到有关，而与G蛋白（如Ras）参与的信号转导无关。
　　5、 蛋白质溶液出现沉淀与蛋白质变性存在必然的关系。
　　6、 Km值是酶的特性常数之一，与酶的浓度、pH、离子强度等条件或因素无关。
　　7、 一个酶的非竞争性抑制剂不可能与底物结合在同一个部位。
　　8、 蛋白质泛素化（ubiquitination）过程需要三种蛋白质（酶）的参与，其中之一是泛素－－蛋白连接酶。
　　9、 往线粒体悬液中加入NADH可以还原线粒体的辅酶Q。
　　10、 膜上有些七次跨膜受体在与配基结合时会形成二体。
　　11、 低浓度不含钾离子的等渗缓冲液中悬浮着内含0．154M氯化钾的脂质体，此时往悬浮液中加入缬氨霉素，悬浮液的pH会下降。
　　12、 内质网系膜结合的钙ATP酶在催化ATP水解时促进Ca2＋/2H＋交换。
　　13、 辅酶I（NAD＋ ）、辅酶II（NADP＋）、辅酶A（CoA）、黄素单核苷酸（FMN）和黄素腺嘌呤二核苷酸（FAD）中都含有腺嘌呤（AMP）残基。
　　14、 端粒酶（telomerase）是一种RNA蛋白质复合物，其作用机制是以RNA为模板，由蛋白质催化逆转录； 所以广义上说，端粒酶是种逆转录酶。
　　15、 Tm是DNA的一个重要特性，其定义为：使DNA双螺旋90%解开时所需的温度。
　　16、 与DNA双螺旋相反方向缠绕而形成的超螺旋叫做&负超螺旋&。
　　17、 细菌中的插入序列（IS）具有转座能力，能随机插入到任一DNA序列中，在靶点两侧形成一段短的正向重复序列。
　　18、 细菌代谢酶的诱导和合成途径中酶的阻遏，调节蛋白都对操纵子起负调控作用。
　　19、 真核RNA聚合酶II最大亚基C末端重复序列上的乙酰化导致RNA聚合酶II与其它转录的起始与延伸。
　　20　 卫星DNA是一类高度重复序列，通常由串联重复序列组成。
　　二、选择题：30题，30题，每题1．5分，共45分．
　　1、磷脂分子的代谢可直接产生　　 A．肌酸；B．氨基酸；C．甾体激素；D．信号传导分子
　　2、鞘磷脂分子的代谢不产生。　 A．磷脂酰肌醇；B，神经酰胺；C，鞘胺醇；D，乙酰胆碱。
　　3．直接受cAMP调节的分子是　　 A蛋白激酶C；B，蛋白激酶A； C，蛋白激酶G；D蛋白激酶B
　　4体内一氧化氮合成前体是　　 A，脂类分子；B，核苷酸；C，精氨酸；D，尿素
　　5一氧化氮的受体是一种　 A；G蛋白偶联受体； B，腺苷酸氧化酶；C，鸟苷酸环化酶；D，丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶
　　6，对于一个正协同效应别构酶当有激活剂（正调节物）存在下，其协同性　　 A，减小；B，增加；C，不变
　　7，亲核催化中酶蛋白上最常见的提供亲核基团的残基是
　　A，His，Ser，Cys；B，His，Lys，Arg； C，Asp，Glu，Phe；D，Asn，Gln，Trp
　　8，&自杀性底物&指的是　　 A，一种可逆抑制剂；B，一种亲核标记试剂；C，一种不可逆抑制剂。
　　9，表面生长因子（EGF）受体和转化生长因子&（TGF&）受体
　　A，皆为蛋白酪氨酸激酶；B，皆为蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶；C，分别为蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶和蛋白酪氨酸激酶；D，分别为蛋白酪氨酸激酶和蛋白丝氨酸/苏氨酸激酶。
　　10，磷酸果糖激酶是葡萄糖酵过程中最关键的调节酶，ATP与该酶的关系
　　A，既是底物又是别构激活剂 ； B，既是底物又是别构抑制剂；C，只是底物；D，只是别构抑制剂。
　　11，底物分子上引进一个集团以后，导致酶与该底物结合能增加，此时酶反应速度增大，原因是
　　A，增加的结合能被用来降低Km；B，增加的结合能被用来增加Km；C，增加的结合能被用来降低反应活化能；
　　D，增加的结合能被用来增加反应活化能。
　　12，在接近中性pH条件下，即可为氢离子受体，也可为氢离子供体的基团是（　 ）
　　A． His－咪唑基 ； B，Cys－巯基；C，Lys－&－氨基； D，Arg－胍基
　　13，细胞质内蛋白质浓度为（W/V）为（　 ）　　　 A，0．1%左右；B，0．5%左右 C，2．5%左右 D，＞10%
　　14，细胞色素C的
　　15，一氧化碳抑制呼吸链的位点在（　 ）
　　A，琥珀酸脱氢酶； B，NADH脱氢酶； C，还原辅酶Q－细胞色素c氧化还原酶；D，细胞色素c氧化酶
　　16，正常细胞质膜上磷脂酰丝氨酸的分布（　 ）
　　A，在脂双层的内外二层大致相当；B，主要在脂双层的内层；C，主要在脂双层的外层；
　　17，分泌红细胞生成素（EPO）的组织或器官是（　 ）　 A，肝；B，肾；C，骨髓；D，脾。
　　18，甘油醛－3－磷酸脱氢酶与（　 ） A，糖酵解；B，甘油磷脂中的甘油合成；C，尿素循环；D，脂肪酸氧化
　　19，用双脱氧末端终止法（即SangerDNA测序法）测定DNA序列，要除去DNA聚合酶中的（　 ）
　　A，核酸内切酶活性；B，5&到3&外切酶活性；C，3'到5'外切酶活性
　　20，DNA甲基化作用位点通常是CpG岛（CpG island）上的（　 ）
　　A，C的3位（生成m3CpG）；　 B，C 的5位（生成m5CpG）
　　C，G的3位 （生成Cpm3G）；　 D，G的7位（生成Cpm7G）。
　　21，含有胸腺嘧啶的RNA种类是（　 ）　 A，rRNA；　 B，mRNA；　 C，tRNA；　 D，snRNA
　　22，大肠杆菌中负责DNA复制的酶是（　 ）
　　A，DNA聚合酶I（Kornborg酶）；B，DNA聚合酶II C，DNA聚合酶III D，DNA聚合酶IV
　　23，B型右旋DNA的螺旋距比Z型左旋DNA（　 ） A，大；　 B，小； C，相同；
　　24，催化核糖－5－磷酸和ATP合成5－磷酸核糖－1－焦磷酸（PRPP）的酶是
　　A，磷酸核糖激酶；B，磷酸核糖酶；C，磷酸核糖焦磷酸激酶；D，ATP激酶
　　25，乳糖操纵子的阻遏蛋白与DNA结合的结构域有（　 ）
　　A，锌指（zinc finger）结构；B，亮氨酸拉链（leucine zipper）结构；
　　C，螺旋－环－螺旋（helix－loop－helix）结构；D，螺旋－转角－螺旋（helix－turn－helix）结构
　　26，逆转录病毒（retrovirus）的逆转录酶在宿主细胞中合成负链DNA所用的引物是（　 ）
　　A，tRNA　 B，mRNA　 C，rRNA　　 D，5SrRNA
　　27，真核RNA聚合酶III的功能是（　 ）
　　A，转录tRNA和5SrRNA等小rRNA基因；B，转录蛋白质基因和部分snRNA基因
　　C，只转录rRNA基因；D转录多种基因
　　28，在DNA重组过程中，RecA蛋白能促进交换的DNA是（　 ）
　　A，同源双链DNA；B同源单链与双链子DNA；C同源单链DNA；D同源单链DNA与双链DNA
　　29，生长激素（GH）属于（　 ）
　　A，固醇类激素；　 B，脂肪酸衍生物激素；　 C，含氮类激素；　 D，糖类激素；
　　30，青霉素的抗菌作用主要是通过（　 ）
　　A，抑制细胞膜合成；B，抑制细胞壁合成；C，破坏其内酰胺环；D，干扰DNA合成；
　　三、简答题；5题，每题5分，共25分。
　　1，简述SH2与SH3结构域的功能。
　　2，某一酶催化单底物反应，S1 和S2都是该底物，已知它们的Kcat（或Vmax）和Km 值，在S1和S2同时存在并且浓度相同的情况下，请给出该酶催化S1和S2 反应速度之比的表达式。
　　3，依序写出三羧酸循环中的酶。
　　4，解释下列非编码RNA（non－coding RNA）名词：（1）核仁小RNA（small nucleolar RNA，snoRNA）；（2）干扰小RNA（small interfering RNA，siRNA）；（3）微RNA（microRNA，miRNA）。
　　5，生物体存在大量的mRNA前体的&选择性剪接（alternative splicing）' 过程。什么是选择性剪接?有几种方式?
　　四、问答题：5题，每题10分，共50分。
　　1、阐述磷脂酶A2 催化的反应与信号转导的关系。
　　2、在存化某一个蛋白质的过程中，有一个分子量比目标蛋白质小的蛋白质与目标蛋白质一同被提纯。请举出两种办法证明或排出这两个分子量小的蛋白质是目标蛋白质的部分产物。
　　3、试论述非离子型去垢剂增溶膜蛋白的机制。
　　4、阐诉逆转录转座子与逆转录病毒的异同点。
　　5、阐述酵母转录激活因子GAL4 的调控方式及其在酵母双杂合系统（yeast two hybrid system）中的应用
　　中科院05年研究生入学试题 《生化与分子生物学》答案
　　1 － 如血小板活化因子在凝血过程中的作用　 2 － 泛素化就可了引起蛋白质的降解　 3 ＋ 蛋白质的脂肪酸化修饰常见的有：异戊二烯化 和两种酰化，豆蔻酰化是两种酰化形式之一，能增加特定G蛋白的&亚基对膜结合的&、&亚基的亲和力。　 4 ＋　 5 － 结晶也出现沉沉，但是和变性无关。　 6 － Km是特征常数，其大小只与酶的性质有关而与酶的浓度无关，但是随着pH、离子浓度等条件有关。　 7 ＋ 酶的可逆性抑制剂的定义就是与酶的活性部位之外的位点结合且与底物没有共同之处的抵制剂。　 8 ＋ 其余两种酶是泛素激活酶和泛素携带蛋白。　 9 － NADH不能穿过线粒体内膜。　 10 －　 11 ＋ 缬氨霉素介导K＋的单向运输，脂质体内K＋浓度降低后，平衡向解离放出H＋的方向移动，所以pH会下降。　 12 － 吸收钙，但不是促进交换。　 13 － FMN不含　 14 ＋　 15 － 使DNA双螺旋50%解开时所需的温度。　 16 －　 17 － 通常有一定的选择性。　 18 － 也有正调控　 19 － 磷酸化　 20 ＋
　　1 D　 2 A 磷脂酰肌醇是甘油磷脂。　 3 B　 4 C　 5 C　 6 B 我看的几份答案都这么说，我也不是很明白。 7 A Ser的羟基 His的咪唑基 Cys的巯基　 8 C 自杀性底物是Kcat型抵制剂。　 9 D　 10 B 该酶受到高浓度ATP的抑制。　 11 C　 12 A
　　13 D 在细胞质基质中蛋白质含量约为20%－30%，形成一种粘稠的胶体　 14 D 细胞色素c的pI是10．25　 15 D　 16 B 磷脂酰丝氨酸 磷脂酰乙醇胺公布在外膜，鞘磷脂的卵磷脂公布在内膜　 17 B　 18 A　 19 B　 20 B　 21 C　 22 C　 23 B　 24 C　 25 D　 26 A　 27 A　 28 D　 29 C　 30 B
　　1、SH2结构域能选择结合不同位点的磷酸化酪氨酸残基，sh3能选择结合富含Pro的序列。这两种结构域能作为接头蛋白上的结构域行使信息传递的功能，但其本身没有催化活性。
　　2、[ES1]/[ES2]＝Km2/Km1　　　　　　　 （1）　　　　　 V1/V2＝Kcat1*[ES1]/Kcat2*[ES2]　　　　 （2）
　把（1）代入（2）就能得结果（06年的第四题第3小题基本和这题是一模一样的，只要把活力换算成Kcat就可以了。）
　　3 柠檬酸酶合酶 乌头酸酶、异核酸酶脱氢酶、&－酮戊二酸脱氢酶系、琥珀酰CoA合成酶、琥珀酸脱氢酶、延胡索酸酶、苹果酸脱氢酶
　　4 （1）参加rRNA前体的甲基化、假尿苷化和切割的一类小RNA
　（2）dsRNA经过核内分解产生长度为21－23个核苷酸即小干扰RNA．siRNA可直接诱导基因沉默。
　（3）是一类大的非编码小RNA。长度约为42个核苷酸，它们被认为以其它基因为目标，并调节它们的表达。
　　5 选择性剪切是一个基因转录产物在不同的发育阶段、分化细胞和生理状态下，通过不同的剪切方式可以得到不同的mRNA和翻译产物。方式有1、剪接产物缺失一个或几个外显子2、剪接产物保留一个或几个内含子3、外显子中存在3'或5'剪接点，从而部分缺失该外显子4、内含子中存在3'或5'剪接点，从而保留部分内含子。
　　1、主要就是磷脂酶A2能切割磷脂形成花生四烯酸，花生四烯酸是一系列生物活性物质的前体，具体内容课本上很容易找到，具体在哪一页我回学校后翻翻课本再告诉大家。
　　2 （1）制备两种蛋白的抗体，进行交叉免疫印迹。
　（2）进行全测序，比较序列一致性。
　（3）进行酶切图谱分析。
　　3　 非离子型去垢剂为两亲性分子，在油水混合物中可形成微团，当浓度高于临界微团浓度的时候，形成以去垢剂为主并掺有膜脂和膜蛋白的混合微团，也就增溶了膜蛋白。
　　4　 相同点：以RNA中介反转录为DNA，可以将NDA宿主细胞的基因组上，有长末端重复序列。
　不同点：逆转录转座子在插入位点上形成短的正向重复序列，不发独立感染的方式传播，其中的非病毒超家族不能编码转座酶，逆转录病毒的转录以tRNA为引物，DNA整合到宿主染色体上的位点是随机的。
　　5　 GAL4由两个结构域组成，一个是dna结合结构域，一个是转录激活结构域。
　可为将编码侍测蛋白 X的DNA序列同编码GAL4结合结构域的DNA序列克隆在一个载体上，表达产生X－GAL4杂合蛋白，将编码蛋白质Y的DNA序列同编码转录激活结构域的DNA序列克隆在一个载体上，表达产生Y－GAL4杂合蛋白。这两种杂合蛋白都有核定位序列，当用这两种载体同时转化酵母细胞后，表达产生的两种蛋白都定位在核内。如果x蛋白和y蛋白有相互作用，则各自所带和蛋白就会重新组合成为一个完整的转录因子，该因子同酵母的GAL1基因上游的激活序列结合，使报告基因表达
　　中　国　科　学　院
　　2006年攻读硕士学位研究生入学试卷
　　《生物化学与分子生物学》
　　（本试卷共8页，满分150分，答案一律写在答题纸上，试卷上答题无效）
　　一、是非题：20题，每题1．5分，共30分。答&是&写&＋&，答&非& 写&－&。
　　1．　　蛋白质变性的实质是非共价键断裂，天然构象解体，但共价键未发生断裂。
　　2．　　有些抗生素是多肽或其衍生物。
　　3．　　&自杀性底物&是指在亲和标记中使用共价修饰剂。
　　4．　　糖原磷酸化酶只催化1－4糖苷键的磷酸解。
　　5．　　到目前为止发现的信号转导蛋白G蛋白都是三种亚基构成的。
　　6．　　红外光谱可以研究蛋白质溶液的构像。
　　7．　　丙氨酸具有活学活性。
　　8．　　线粒体内膜固有蛋白大多是由线粒体编码的。
　　9．　　转录因子ⅢA（TFⅢA）能与5SRNA以及5SRNA基因调控区结合，因而5SRNA能对自身的合成进行负反馈调节。
　　10．酶催化的反应速度总是随着底物浓度的升高而加快。
　　11．线粒体呼吸链复合物Ⅱ的三维结构已被我国科学家解析。这个复合物催化琥珀酸脱氢辅酶Q还原的同时产生跨膜质子移位。
　　12．去垢剂是一类既有亲水部分又有疏水部分的分子。
　　13．质量性状是由单个基因支配，而数量性状是由多个基因决定的。
　　14．生物体的遗传性状完全是由基因序列决定的。
　　15．脑细胞有CD4表面受体，所以HIV病毒也能感染脑细胞。
　　16．线粒体基因采用的密码子与细胞的密码子有不同。
　　17．原核生物的mRNA的翻译起始区有一个SD序列，它与23SRNA的3。端结合而起始翻译。
　　18．葡萄糖－6－磷酸脂酶是高尔基体的标志酶。
　　19．孟德尔遗传定律核摩尔根遗传定律分别反映了位于不同染色体和相同染色体上的基因的遗传规律。
　　20．限制性内切酶是识别同时切割某特定DNA序列的酶。
　　二、选择题：30题，每题1．5分，共45分。
　　1．肌原纤维中的粗丝和细丝___________。
　　A．分别由肌动蛋白和肌球蛋白组成
　　B．分别由肌球蛋白和肌动蛋白组成
　　C．皆由肌动蛋白组成
　　D．皆由肌球蛋白组成
　　2．参与蛋白质组成德氨基酸是L－型的，其多肽链折叠成的螺旋结构_________。
　　A． 大多数是右手螺旋
　　B． 大多数是左手螺旋
　　C． 右手和左手螺旋个占50%
　　D． 随机构成
　　3．DNA切口平移所用的酶为__________。
　　A． Klenow酶　　　　B． Taq酶
　　C．DNA聚合酶　　　 D． DNA链接酶
　　4．一个分子的人血红蛋白分子中，含有的Fe离子的数目为________。
　　A．一个　　 B． 二个　　 C． 三个　　　D． 四个
　　5．如果花的红色和黄色是由一对等位基因决定，杂交子一代最不可能出现______的花。
　　A． 红色　　 B． 黄色　　 C． 橙色　　 D． 白色
　　6．胶原蛋白由若干胶原分子组成，主要形成_________结构。
　　A．&－螺旋　　　　　　　　B． &－折叠
　　C． &－折叠和三股螺旋　　 D． 三股螺旋
　　7．柠檬酸循环的化学反应式为：
　　A． 乙酰－CoA＋3NAD＋＋FAD＋H2O&CoASH＋3NADH＋2H＋＋FADH2＋2CO2
　　B． 乙酰－CoA＋3NADH＋FAD＋H2O&CoASH＋3NAD＋＋2H＋＋FADH2＋2CO2
　　C． 乙酰－CoA＋3NAD＋＋FAD＋Pi＋GDP＋2 H2O&CoASH＋3NADH＋2H＋＋FADH2＋GTP＋2CO2
　　D． 乙酰－CoA＋3NADH ＋FAD＋Pi＋GDP＋2 H2O&CoASH＋3NAD＋＋2H＋＋FADH2＋GTP＋2CO2
　　8．蛋白质芯片技术基本上是基于_________方法中的原理。
　　A．Northern blot　　　B． Western blot
　　C． Southern blot　　　D． Eastern blot
　　9．引起双倒数作图斜率与纵轴截距都改变的可逆抑制剂可以被判断为________。
　　A． 竞争性抑制剂　　　 B． 非竞争性抑制剂
　　C． 混和型抑制剂　　　 D． 非竞争性或混和型抑制剂
　　10．酶促合成Ile－tRNA的反应经过Ile－AMP中间体：
　　Ile ＋ ATP & Ile－AMP ＋ PPi；Ile－AMP ＋ tRNA & Ile－tRNA ＋ AMP。若以此反应从32P标记的PPi合成32P标记的ATP，除了aa－tRNA合成酶外，还需要________。
　　A． ATP和32PPi　　　　 B． tRNA，ATP， 32PPi
　　C． Ile，ATP，32PPi　　 D． Ile， AMP，32PPi
　　11．两株高矮不同的亲本进行杂交，子一代的株高比高的亲本还要高，决定株高的基因是_________。
　　A． 显性基因　　　　　B． 隐性基因
　　C． 共显性基因　　　　D． 数量性状基因
　　12．用于氨基酸分析的双向纸层析属于_________。
　　A． 交换层析　　　　B． 亲和层析
　　C． 分配层析　　　　D． 薄层层析
　　13．SDS聚丙稀酰胺凝胶电泳用来测定蛋白质（酶）的表观分子量的依据是_____。
　　A．电泳迁移率与蛋白质的电荷性质（等电点）相关
　　B．电泳迁移率与蛋白质的分子构像相关
　　C． 电泳迁移率与蛋白质分子量的对数值线性相关
　　D． 电泳迁移率与蛋白质分子量线性相关
　　14．酶的纯化过程与中最需要关注的指标是_________。
　　A． 总蛋白量变化和总活力变化
　　B． 蛋白质浓度变化和比活力变化
　　C． 比活力变化和总活力变化
　　D． 总活力变化和蛋白质浓度变化
　　15．钠钾ATP酶催化钠离子与钾离子跨膜传送，每水解一分子ATP有_______。
　　A．2个Na＋由细胞内到细胞外，2个K＋由细胞外到细胞内
　　B． 2个K＋由细胞内到细胞外，2个Na＋由细胞外到细胞内
　　C． 3个Na＋由细胞内到细胞外，2个K＋由细胞外到细胞内
　　D． 3个K＋由细胞内到细胞外，2个Na＋由细胞外到细胞内
　　16．苍术苷是一种抑制剂，它抑制________。
　　A． 钠钾ATP酶　　　 B． 线粒体ATP合成酶
　　C． Ca2＋ATP酶　　　　 D． 线粒体ADP－ATP传送载体
　　17．在遗传病基因的定位克隆中，一般利用疾病基因和标记基因之间的______关系来定位目标基因。
　　A． 自由组合　　 B． 相互分离　　 C． 相互连锁　　 D． 显隐性
　　18．Dixon作图法求可逆抑制剂的抑制常数是针对________。
　　A． 竞争性抑制剂　　　 B． 非竞争性抑制剂
　　C． 反竞争性抑制剂　　 D． 混和型抑制剂
　　19．硫胺素焦磷酸的主要作用是_______。
　　A． 促进乙酰辅酶A生成
　　B． 作为脱梭酶的辅酶
　　C． 是辅酶Q的前体
　　D． 促进脂肪酸的&氧化
　　20．细菌ABC转运蛋白的功能包括_______。
　　A． 促进药物扩散传送进入细菌
　　B． 利用ATP的能量将药物传送到细菌外
　　C． 将分泌蛋白传送到细胞外
　　D． 促进脂多糖的分泌
　　21．磷酸果糖激酶是糖酵解途径中的关键调节酶，对其调节的正确描述是：
　　A． 果糖2，6－二磷酸与果糖1，6－二磷酸都是其催化发应的产物
　　B． 果糖2，6－二磷酸是其一个调节剂，有效激活其活性
　　C． ATP是其底物，不会对其产生抑制作用
　　D． 柠檬酸是其一个有效的激活剂
　　22．青霉素的作用是抑制________。
　　A． 二磷脂酰甘油的合成
　　B． 膜上磷脂交换蛋白
　　C． 聚糖肽转肽酶
　　D． D－氨基酸氧化酶
　　23．________不是证明核酸是遗传物质的研究。
　　A． 孟德尔的豌豆实验
　　B． 艾弗里的肺炎球菌实验
　　C． 贺希和切斯的噬菌体实验
　　D． 康拉德的烟草花叶病毒实验
　　24．由核DNA编码的膜蛋白是在________上合成的。
　　A． 核膜　　　　　B． 高尔基体
　　C． 内质网系　　　D． 膜蛋白质合成小泡
　　25．&噬菌体缺失突变体的DNA长度从17&m变成15&m，此突变体缺失了______碱基对。
　　A． 6．67&103　　 B． 5．88&103　　　C． 5．55&103　　　D． 5．26&103
　　26．端粒酶是一个核蛋白复合体。它能够________为模板合成DNA。
　　A． 不用DNA或RNA
　　B． 用核蛋白复合体中的DNA
　　C． 用核蛋白复合体中的RNA
　　D． 用核糖体中的RNA
　　27．反基因寡核苷酸（三螺旋形成寡核苷酸）抑制蛋白质表达是由于________。
　　A． 抑制靶基因的转录　　　 B． 抑制靶mRNA前体的加工
　　C． 抑制靶mRNA的翻译　　　D． 促进靶mRNA的降解
　　28．用放射性同位素只标记细菌DNA而不标记RNA，需在培养基中加________。
　　A． [&－32P]dATP　　 B． [&－32P]ATP　　 C． [3H]TdR　　　D． 32Pi
　　29．CDP－胆碱是________反应的活化分子。
　　A． 从神经酰胺合成鞘磷脂　　　　　 B． 从葡萄糖合成糖原
　　C． 从丝氨酸合成磷脂酰丝氨酸　　　 D． 从神经酰胺合成脑苷脂
　　30．纯显性基因玉米穗长20cm，纯隐性基因玉米穗长4cm，每个基因的表现值为4cm，则纯显性基因数有________个。
　　A． 3　　　B． 4　　　 C． 5　　　 D． 6
　　三、简答题：5题，每题5分，共25分。
　　1． 一个多肽的一级结构为Leu－Pro－Ser－Trp－Ala。试描述该多肽在20℃，0．01M Tris－HCl，pH7．0缓冲液中测得的紫外吸收光谱和荧光发射谱。
　　2． 请概述胰岛素如何调节糖原代谢以及胰岛素缺乏与糖尿病的内在关系。
　　3． 举出两种测定线粒体内膜细胞色素氧化酶的方法与原理。
　　4． 有15N同位素标记的DNA研究复制机制。如果DNA复试是全保守的，则在普通的培养基中生长一代和二代后，15N在预期的子代DNA中的分布是如何的?
　　5． 从生物A中得到了一个基因的DNA序列和其编码的蛋白质的氨基酸序列；从生物B中得到了一个不同基因的DNA序列和其编码的蛋白质序列。试从DNA序列和蛋白质序列的结构特点以及DNA和蛋白质的关系，说明生物是进化来的，而不是不同起源的。
　　四、问答题；5题，每题10分，共50分。
　　1． 蛋白质中疏水作用力主要由何驱动?疏水作用力与温度有何相关性，并解释之。
　　2． 某酶分别催化两种不同的底物发生同样的反应。如果该酶对底物A的Km与Vmax值为0．1mM和100U/mg（1U的酶为每分钟转换1&m底物的酶量），对底物B的Km与Kcat值为5&m和50min－1，该酶的分子量为50kDa。假设两种底物同时存在且浓度相同，该酶催化两种底物的速度之比如何?
　　3． 试述胆固醇在人体中的三种生物学功能，列出胆固醇从乙酰辅酶A合成过程中的五个中间物，并说明LDL和HDL在胆固醇代谢中的作用。
　　06年生物化学试题答案（版权所有 请勿转载）
　　一，选择题
　　1，（－）如：变性有时包括二硫键（共价键）的断裂如经典牛胰RNase变性和复性，以及抗体《上册P234，243。》 2，＋ 如：杆菌肽 3，－ Kcat型专一性不可逆抑制剂，这种抑制剂是根据酶的催化过程来设计的，它们与底物类似，既能与酶结合，也能被催化发生反应，在其分子中具有潜伏反应基团（latent　reactive　group），该基团会被酶催化而活化，并立即与酶活性中心某基团进行不可逆结合，使酶受抑制。此种抑制专一性强，又是经酶催化后引起，被称为自杀性底物。
　　4，（＋）下册177 5，－ 反例 Ras蛋白　6， ＋用红外光谱研究血清白蛋白在水溶液中的二级结构构象的变化　7，＋　8，－ 9，＋　10，－ 11，－ 12，＋　13，＋　14，－　15，＋ 单核巨噬细胞：因其表面也具有CD4 受体，所以也易被HIV 侵犯，研究发现被HIV 感染的单核巨噬细胞有播散HIV 感染的作用，它可以携带HIV 进入中枢神经系统。在脑细胞中受HIV 感染的主要是单核&巨噬细胞，如小胶质细胞。16，＋　17，－与核糖体小亚基16sRNA结合
&18，－19，＋ 20，（＋）
　　二，选择题
　　1，B 2，A 3，C《现代遗传学P334》 4，D 5，D
　　6，D 7，C 8，B 9，D《上册371－373》10，D
　　11，D《现代遗传学》 12，C 13，C《上册P298》 14，C 15，C
&16，D 17，C《现代遗传学P257》 18，D 19，B上P441 20，B
　　21， B22，C 《上册P545》23，A 24，C 25，B（17－15 ）*/3．54＝5880
　　26，C 27，A三链DNA结构在生物体内的存在意义和可能的生物学功能。如第三条寡聚核苷酸链（简称ODN）可以通过作用于控制基因转录的转录子、增强子和启动子区，增强或抑制基因的表达； 28，C 29，A 30，B（20－4）/4＝4
　　三，简答题
　　1，　该肽含有Trp是芳香族氨基酸，在近紫外区有吸收峰，&max＝280，会在280nm左右波长下有吸收峰。由于吸收辐射能而被提升到激发电子态的分子通过激发能的非辐射转移即荧光发射。因此荧光的波长要比激发光长。芳香族氨基酸如Trp，荧光发射光谱在348nm附近有发射峰，呈现较弱的荧光。
　　2，答：。当胰岛素与其受即受体酪氨酸激酶体结合后，就激活胞内的酪氨酸蛋白激酶活性。激活一系列激酶，最终使蛋白磷酸酶1 （PP1）活化。蛋白磷酸酶1 （PP1）使糖原合酶和糖原磷酸化酶去磷酸化。即糖原合酶被激活而磷酸化酶失活。表现出的整体的生物学效应就是促进糖原合成，抑制分解。
　　糖尿病的发生直接原因是由于血中胰岛素含量的不足。胰岛素缺乏，葡萄糖不能正常进入细胞，滞留在血液中。而此时胰高血糖素的浓度超过胰岛素的浓度，一方面导致肝脏中过果糖－2，6－二磷酸的浓度下降，使糖酵解受到抑制，又刺激了葡糖异生作用，另一方面又加速了糖原的降解，产生的过量葡萄糖也进入血液，这样就造成血液中的糖浓度很高，通过肾脏时，多余的糖无法被肾小管重吸收而排入尿中导致了糖尿病。
　　（具体的途径见下P192，P558和上P564）
　　3．方法一：分光光度法。主要利用底物或产物在紫外或可见光部分的光吸收不同。选择一适当波长，测定反应过程中反应进行情况。细胞色素C再还原和氧化型的光吸收不同。当细胞色素氧化酶氧化细胞色素C时，测定光吸收的变化就可以测定酶的活力了
　　方法二：同位素测定法。 用放射性同位素的底物，经酶作用所产生的产物，通过适当的分离，测定产物的脉冲数换算出酶的活力。用氧18 标记的氧气作为底物，经酶作用后被还原为含氧18 的水。反应后将底物产物分离，测定脉冲数换算成酶活力。
　　（此外还有：在体外构建的系统中，一用膜片钳技术测膜两侧的膜电位变化；二是测pH计测酸碱度变化。pH法，氧电极法 ）
　　4．如果是全保留复制机制，生长一代产生两种DNA分子各一个。一个分子双链是N15，另一个双链是N14。生长二代，产生4个分子两种DNA，一分子全部含N15和3分子全部含N14。没有杂合的。
　　5答： DNA均有由含ATCG四种碱基的脱氧核糖核甘酸组成，蛋白质均由20种氨基酸组成；在DNA序列与氨基酸组成对比上，三个dNTP对应一个氨基酸，且有些相同的氨基酸对应相同的三连密码子，可以推测DNA指导蛋白质合成基本上使用同一套遗传密码，两者DNA有相同的上游控制序列，相同的起始密码子和终止密码子。在这个意义上说明生物是由进化而来的，而不是不同起源。
　　四，问答题：
　　1答：介质中球状蛋白质的折叠总是倾向与把疏水残基埋藏在分子的内部，这一现象称为疏水作用。它在稳定蛋白质的三维结构方面占有突出地位。
　　疏水作用其实并不是疏水基团之间有什么吸引力的缘故，而是疏水基团或疏水侧链出自避开水的需要而被迫接近。蛋白质溶液系统的熵增加是疏水作用的主要动力。当疏水化合物或基团进入水中，它周围的水分子将排列成刚性的有序结构，既所谓的笼形结构。与此相反的过程的过程（疏水作用）使排列有序的水分子被破坏，这部分水分子被排入自由水中，这样水的混乱度增加，既熵增加，因此疏水作用是熵驱动的自发过程。
　　疏水作用在生理温度范围内随温度升高而加强，T的升高与熵增加具有相同的效果，但超过一定的温度后50～60，又趋减弱。因为超过这个温度疏水基团周围的水分子有序性降低，因而有利于疏水基团进入水中。
　　2．；在生理条件下，大多数的酶不被底物所饱和。且底物浓度与Km相比要小的多
　　v ＝[Kcat/Km] [E] [S]
　　Kcat 指一定条件下，每个单位时间内每个酶分子转化的底物分子数。
　　KcatA 可以用Vmax换算过来
&KcatA＝100U/mg ＝ 100umol/mg ．min ＝ 100umol ． 50kDa /0．001mol；＝ 5000/min
　　Va/Vb＝ [KcatA/KcatB] ．[KmA/KmB]＝5
　　3答：胆固醇的功能：a 生物膜的组成成分，对调节膜流动性有很大作用。b作为激素的前体。 在体内转化为类固醇激素，例如：雌雄性激素，和肾上腺皮质激素等。c形成胆汁盐促进脂类在小肠的消化吸收。
　　胆固醇合成中的五个中间物：乙酸，甲羟戊酸，异戊二烯衍生物（异戊酰焦磷酸，二甲烯丙基焦磷酸），角鲨烯，羊毛固醇。
　　LDL介导胆固醇的转运，将胆固醇从血液运送到靶组织细胞内；抑制靶组织的胆固醇及LDL受体的合成。
　　HDL可以减少胆固醇的沉积，防止血栓形成。HDL可以回收从死亡，衰老细胞，更新的细胞膜被降解血浆脂蛋白等释放到血浆中的胆固醇。其上的蛋白将其酯化为胆固醇酯并将它转移到LDL中。
　　4先制备编码rRNA前体的DNA 片段，可以将编码这个前体的DNA克隆到大肠杆菌质粒中，扩增后提取质粒。在体外构件一个RNA转录体系，转录出RNA前体。提取体系中RNA， 在分有或无四膜虫蛋白质两组别， 其中一组用加热，有机溶剂和蛋白酶来变性蛋白质，纯化前rRNA。待反应充分后，电泳分离，分别观察结果，如果发现在有无蛋白质的条件下，前体RNA都被分成几个不同的条带而且带型一样，可以证明该前体RNA能自我剪接，而且不受四膜虫蛋白质影响．然后可以用电泳来检测条带，是否发生了自剪切．条带可剪切回收，分析RNA序列，得到剪接位点．
　　5答：最可能的原因是该转录因子是二聚体，且由相同的两个亚基构成。可以分离纯化蛋白质，用SDS－PAGE鉴定，如果凝胶上只有一条带且分子量为40kDa，即可证明。
　　根据氨基酸的序列，相互作用自281到344，每七个氨基酸有一个亮氨酸，且在该蛋白序列中富含脯氨酸和谷氨酸，这些特点说明该转录因子可能是亮氨酸拉链，依赖亮氨酸侧链间的疏水相互作用形成二聚体。
　　可以采用基因工程技术，定点突变每七次出现的亮氨酸残疾，如果不能再形成二聚体便可以证明该推测。（或X衍射测结构，直接分析）
　　中国科学院研究生院
　　2007年招收攻读硕士学位研究生入学统一考试试题
　　科目名称：生物化学与分子生物学
　　考生须知：
　　1．本试卷满分为 150 分，全部考试时间总计 180 分钟。
　　2．所有答案必须写在答题纸上，写在试题纸上或草稿纸上一律无效。
　　一、名词解释　　（每题 4 分，共 20 分）
　　1．　重组修复
　　2．　转座子
　　3．　C4 途径
　　4．　正前馈作用和正反馈作用
　　5．　RNA 剪接和可变剪接
　　二、单项选择题 （每题1分，共20分，请在答题纸上标清题号，并将答案写在题号后）
　　1． 下列各项中，不属于细胞代谢的中间产物的是：
　　A． 葡萄糖－6－磷酸　 B． 丙酮酸　 C． 胆固醇　D． 乙酰辅酶 A
　　2． 在真核生物细胞周期的四个时相中，用于准备 DNA 合成的是：
　　A． M 期　B． G1 期　 C． S 期　 D． G2 期
　　3． 下列各项中，不属于真核生物基因表达转录前水平调节的过程是：
　　A． RNA 编辑　B． 染色质丢失　C． 染色体 DNA 的修饰和异染色质化 D． 基因重排
　　4． 下列各项中，尚未获得诺贝尔奖的是：
　　A． DNA 双螺旋模型　B． PCR 仪的发明　C． RNA 干扰技术 D．抑癌基因的发现
　　5． 下列事件中，不属于表观遗传调控的是：
　　A． DNA 甲基化 B．组蛋白乙酰化 C． mRNA加尾　D． RNA 干扰
　　6． 大肠杆菌中，参与转录终止调控的是：
　　A． TATA box　　B． &因子　 C． snoRNA　 D． RNaseP
　　7． 正转录调控系统中，调节基因的产物被称为：
　　A． 阻遏蛋白　B． 诱导因子　C． 激活蛋白　D． 增强子
　　8． 既可利用上游启动子，又可利用下游启动子的 RNA 聚合酶是：
　　A． RNA 聚合酶 I　B． RNA 聚合酶 II　C． RNA 聚合酶 III D． RNA 聚合酶 IV
　　9． 用来研究蛋白质－蛋白质间相互作用的实验技术是：
　　A． 酵母双杂交技术　B． 原位杂交技术　C． RACE 技术 D． SAGE技术
　　10． 能够引起细胞内蛋白降解的反应是：
　　A． 泛素化　B． 去泛素化　C． 磷酸化 D． 去磷酸化
　　11．双缩脲发应用来测定：
　　A． 肽　B． 糖　C． RNA　　 D． DNA
　　12． 抗霉素 A 对呼吸链（电子传递链）抑制的作用点在：
　　A． NADH 脱氢酶附近　B．琥珀酸脱氢酶　C． 细胞色素氧化酶 D． 细胞色素 b 附近
　　13． 氨基酸在掺入肽链前必须活化，氨基酸的活化部位是：
　　A． 内质网的核糖体　B． 可溶的细胞质　C． 高尔基体　D． 线粒体
　　14． T4 DNA 连接酶催化的连接反应需要能量，其能量来源是：
　　A． ATP　　 B． NAD　C． GTP　 D．乙酰 CoA
　　15．组蛋白的修饰可引起核小体的解离，这种修饰是：
　　A． 糖基化　B． 腺苷化　C． 磷酸化　D． 乙酰化
　　16． 磷酸化酶激酶活性的发挥依赖于：
　　A． 镁离子　B．钙离子　C．氯离子　D．锌离子
　　17．胰岛素的功能单位是：
　　A．单体　B．二体　C．四体　D．六体
　　18． DNA 合成仪合成 DNA 片段时用的原料是：
　　A． 4 种 dNTP　B． 4 种 NTP　C． 4 种 dNDP　D． 4 种脱氧核苷的衍生物
　　19． 蛋白激酶 A 催化蛋白质上氨基酸残基的磷酸化，它是：
　　A．丝氨酸残基　B．组氨酸残基　C．酪氨酸残基　D．门冬氨酸残基
　　20． 端粒酶是一种蛋白质－RNA 复合物，其中 RNA 起：
　　A．催化作用　B．延伸作用　C．模板作用　 D．引物作用
　　三、判断题　　（每题 1 分，共 30 分，请在答题纸上标清题号，并将答案写在题号后，其中表述正确的写&对&，表述错误的写&错&）
　　1．　糖酵解作用是葡萄糖在无氧条件下转变为丙酮酸所经历的一系列反应，在此过程中净生成两个 ATP 分子。
　　2．　在 C3 植物中 CO2固定是由核酮糖－1，5－二磷酸羧化酶催化的，反应在叶绿体的基质中进行。
　　3．　乙酰辅酶 A 是脂肪酸分子所有碳原子的唯一来源。它来自于糖的氧化分解或氨基酸的分解。这些过程是在线粒体内进行的，脂肪酸合成的酶也存在于线粒体内。
　　4．　从胆固醇向胆酸的转化是胆固醇降解最重要的机制，对这个过程的调控是由线粒体的 7&－羟化酶来执行的。
　　5．　大肠杆菌 RNA 聚合酶全酶由 4 个亚基（&2&&&）组成。
　　6．　在原核细胞中，起始密码子 AUG 可以在 mRNA 上的任何位置，但一个 mRNA上只有一个起始位点。
　　7．　蛋白质生物合成过程中，tRNA　　　在阅读密码时起重要作用，他们的反密码子
　　用来识别 mRNA 上的密码子。
　　8．　单糖都含有手性碳原子，因而都具有旋光性。
　　9．　青霉素通过抑制转肽干扰新的细胞壁形成而起抑菌作用。
　　10．　脂蛋白是由脂质和蛋白质以共价键结合而成的复合体。
　　11．　所有信号肽的位置都在新生肽的 N 端。
　　12． 蛋白质主链的折叠形成由疏水作用维系的重复性结构称为二级结构。
　　13． 错配修复和重组修复因为发生在 DNA 复制之后，因此称为复制后修复。
　　14． 免疫球蛋白基因在淋巴细胞发育过程发生两次特异位点重排，首先是轻链基因发生 V－J 重排，然后是重链基因发生 V－D－J 重排。
　　15． RNA 聚合酶催化的反应无需引物，也无校对功能。
　　16． 细胞周期的时间控制是由蛋白激酶系统对细胞外信号做出反应，改变其活性而实现的
　　17． 外显子的序列多保守，而内含子的序列变化较大。
　　18． 核糖体的主要作用是参与蛋白质的修饰。
　　19． 表观遗传效应是不可遗传的。
　　20． 选择性剪切是真核生物特有的现象。
　　21． 当多个密码子编码同一个氨基酸时，这些密码子可以在第二位或第三位碱基上不同。
　　22． 一般认为，RNA 聚合酶并不直接识别启动子区的碱基对本身，而是通过氢键互补的方式加以识别。
　　23． 大肠杆菌在多种碳源同时存在的条件下，优先利用乳糖。
　　24． 微小 RNA （microRNA）　　　 是通过引起 DNA 甲基化来调节基因表达的。
　　25． 癌基因可分为病毒癌基因和细胞转化癌基因两大类。
　　26． 鸟枪法是一种检测单核苷酸多态性（SNP）的常用方法。
　　27． 乙肝病毒的基因组是一个有部分单链区的环状双链DNA分子，两条单链长度不一样
　　28． 泛素不属于热休克蛋白。
　　29． DNA 甲基化永久关闭了某些基因的活性，这些基因在去甲基化后，仍不能表达。
　　30． 对靶蛋白的磷酸化是细胞内最重要、最普遍的酶活性调节方式。
　　四、简答题　（每题 5 分，共 30 分）
　　1． 什么是反义 RNA?真核生物中反义 RNA 调节基因表达的机理是什么?
　　2． 简述原核生物与真核生物 mRNA 的主要差别。
　　3． 设计 PCR 引物的主要原则是什么?
　　4． 以雌二醇为例，简述类固醇激素发挥作用的主要机制。
　　5． 核酸的紫外吸收有何特点?实验中如何利用这一特点研究核酸?
　　6． 线粒体在真核生物的电子传递和氧化磷酸化中的作用是什么?
　　五、 问答题　（每题 10 分，共 50 分）
　　1． 真核生物蛋白质的翻译后加工有哪些?
　　2． 酶的分离纯化主要过程及注意事项是什么?
　　3． 大肠杆菌乳糖操纵子的主要结构和阻遏蛋白的作用机制是什么?
　　4． 请列举出 5 种真核生物中存在的 RNA　并概括它们的功能。
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