哪里有感受态细胞试剂盒凋亡的试剂盒 先谢谢大家!

产品名称:Annexin V
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&Annexin V Kits- 细胞凋亡检测试剂盒&的 详 细 说 明
细胞凋亡检测试剂盒 Annexin V Kits 检测细胞凋亡 Annexin V Kits
ANNEXIN V ELISA kit
BMS306FI/100T
ANNEXIN V ELISA kit
&&细胞膜磷脂不对称性的丧失发生在细胞凋亡的早期。Annexin V 结合带负电荷的磷脂如磷脂酰丝氨酸 (PS)。 &&Annexin V与暴露于细胞膜外层的PS的这种结合,已被作为检测细胞凋亡的一种方法。Annexin V可以被荧光标记,并常常与propidium iodide (PI) 一起经由流式细胞仪测定以衡量细胞膜的完整性。 &&因此,没有Annexin V 结合或 PI 染色的细胞代表健康的、有活力的细胞。呈现Annexin结合但没有PI 染色的细胞可见于凋亡早期――细胞膜完整但有PS暴露。由于膜通透而结合Annexin V 和 PI 的细胞可见于凋亡晚期或细胞坏死。 &&&&&&&
创办于2013年,是一家专业经营标准物质、标准品、化学试剂及相关技术服务创新型高科技企业,坐落于人才荟萃的上海张江高科技园区。
自公司成立以来,一直以"客户满意"为公司核心价值观,产品主要应用于制药、生物、食品、环境、材料和农业等领域。凭借世界一流的产品和服务,甄准生物与广大客户建立了长期稳定的战略合作关系,被众多企业和科研机构认定为“指定供应商”,得到了政府部门的关怀和有力支持。本着始终拥有的创业激情和服务热忱,甄准生物已成长为我国重要的标准物质和标准品领域集成服务的领导者、中国最大的标准物质/标准品供应商之一。
甄准生物集后发优势与众多国际一流品牌合作,并陆续成为他们在中国区的总代理或者一级代理,现合作的优质供应商有:美国AccuStandard、APSC、MPBio、Sigma-Aldrich、NIST,爱尔兰Reagecon、Megazyme,英国LGC、Ultra,日本和光(WAKO)、Shodex,德国Dr.E、PSS 等。同时,还提供美国USP标准物质、欧洲药典标准物质EDQM、加拿大TRC标准物质等。
甄准生物的快速成长更是得益于各领域广大客户的支持,如:
上海交通大学、复旦大学、南京大学、中国药科大学、江南大学、东南大学、苏州大学、中国科学技术大学、北京大学、清华大学、中国科学院、中国医学科学院、北京出入境检验检疫局、南通亿富邦医疗器械有限公司等。
甄准生物将一如既往,关注您的研发生产项目,为您提供最高性价比产品和服务。
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产品信息完整度:32%
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DXY All Rights Reserved.细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒
细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒
&产品编号: C1052
&产品包装: 50次
&产品价格: 312.00元
产品简介:
&&&&碧云天生产的细胞周期与细胞凋亡检测试剂盒(Cell&Cycle&and&Apoptosis&Analysis&Kit)是一种采用经典的碘化丙啶染色(Propidium&staining,即PI&staining)方法进行细胞周期与细胞凋亡分析的检测试剂盒。
&&&&碘化丙啶(Propidium,简称PI)是一种双链DNA的荧光染料。碘化丙啶和双链DNA结合后可以产生荧
光,并且荧光强度和双链DNA的含量成正比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。
&&&&碘化丙啶染色后,假设G0/G1期细胞的荧光强度为1,那么含有双份基因组DNA的G2/M期细胞的荧光强
度的理论值为2,正在进行DNA复制的S期细胞的荧光强度为1-2之间。凋亡细胞由于细胞核发生浓缩以及发生DNA片段化(DNA&fragmentation)导致部分基因组DNA片断在染色过程中丢失,因此凋亡细胞碘化丙啶染色后呈现明显的弱染,即荧光强度小于1,在流式检测的荧光图上出现所谓的sub-G1峰,即凋亡细胞峰。
&&&&细胞发生凋亡时,由于胞浆和染色质浓缩、核碎裂,产生凋亡小体,使细胞的光散射性质发生变
化。在细胞凋亡的早期,细胞对前向角光散射的能力显著降低,对侧向光散射的能力增加或没有变化。在细胞凋亡的晚期,前向和侧向光散射的信号均降低。因此可通过流式细胞仪测定细胞光散射的变化观察细胞凋亡情况。
&&&&本试剂盒通常应用于培养的贴壁或悬浮细胞的细胞周期与细胞凋亡检测。如果用于组织的细胞周期
与细胞凋亡检测,则必须把组织消化成单细胞状态,才可以进行检测。
&&&&本试剂盒足够检测50个样品,每个样品的细胞数量可以为10-100万。
包装清单:
染色缓冲液
碘化丙啶染色液(20X)
RNase A(50X)
保存条件:
&&&&-20℃保存,一年有效。C1052-2碘化丙啶染色液(20X)需避光保存。本试剂盒可4℃保存,一个月内
注意事项:
&&&&本试剂盒需使用流式细胞仪进行检测。
&&&&需自备PBS和70%乙醇,可以向碧云天订购。
&&&&荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。
&&&&碘化丙啶对人体有刺激性,请注意适当防护。
&&&&为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用说明:
1. 细胞样品的准备:
&&&a. 对于贴壁细胞:小心收集细胞培养液到一离心管内备用。用胰酶消化细胞,至细胞可以被轻轻用移
&&&&&&液管或枪头吹打下来时,加入前面收集的细胞培养液,吹打下所有的贴壁细胞,并轻轻吹散细胞。
&&&&&&再次收集到离心管内。1000g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充
&&&&&&分,可以适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,
&&&&&&以避免吸走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离
&&&&&&心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50微升左右的PBS,以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管
&&&&&&底以适当分散细胞,避免细胞成团。
&&&b. 对于悬浮细胞:1000g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以
&&&&&&适当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的培养液,以避免吸
&&&&&&走细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS,重悬细胞,并转移到1.5毫升离心管内。再次离心沉淀细胞,
&&&&&&小心吸除上清,可以残留约50微升左右的PBS,以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细
&&&&&&胞,避免细胞成团。
2. 细胞固定:加入1毫升冰浴预冷70%乙醇中,轻轻吹打混匀,4℃固定2小时或更长时间。固定12-24小时
&&&可能效果更佳。1000g左右离心3-5分钟,沉淀细胞。对于特定的细胞,如果细胞沉淀不充分,可以适
&&&当延长离心时间或稍稍加大离心力。小心吸除上清,可以残留约50微升左右的70%乙醇,以避免吸走
&&&细胞。加入约1毫升冰浴预冷的PBS,重悬细胞。再次离心沉淀细胞,小心吸除上清,可以残留约50微
&&&升左右的PBS,以避免吸走细胞。轻轻弹击离心管底以适当分散细胞,避免细胞成团。
3. 碘化丙啶染色液的配制:参考下表,根据待检测样品的数量配制适量的碘化丙啶染色液:
染色缓冲液
碘化丙啶染色液(20X)
RNase A(50X)
Final volume
&&&注:配制好的碘化丙啶染色液短时间内可以4℃保存,宜当日使用。
4. 染色:每管细胞样品中加入0.5毫升碘化丙啶染色液,缓慢并充分重悬细胞沉淀,37℃避光温浴30分
&&&钟。随后可以4℃或冰浴避光存放。染色完成后宜在24小时内完成流式检测,最好能在当日完成流式检
5. 流式检测和分析:用流式细胞仪在激发波长488nm波长处检测红色荧光,同时检测光散射情况。采用适
&&&当分析软件进行细胞DNA含量分析和光散射分析。
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使用本产品的文献:
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&& Mol Cell Biochem. -2):79-86.
37.Sun X, He Y, Ma TT, Huang C, Zhang L, Li J.
&& Mol Cell Biochem. -2):11-23. doi: 10.-013-1895-0. Epub 2013
&& Nov 16.
38.Huang J, Zhang H, Yu Y, Chen Y, Wang D, Zhang G, Zhou G, Liu J, Sun Z, Sun D, Lu Y,
&& Zhong Y.
&& Biomaterials. ):550-66. doi: 10.1016/j.biomaterials.. Epub
&& 2013 Oct 15.
39.Sun H, Zhang G, Dong F, Wang F, Cao W.
&& Cell Reprogram. ):196-205. doi: 10.1089/cell.. Epub 2014 May 6.
40.Lei Y, Huang T, Su M, Luo J, Korteweg C, Li J, Chen Z, Qiu Y, Liu X, Yan M, Wang Y, Gu
&& Lab Invest. 2014 Sep 29. doi: 10.1038/labinvest..
41.Yuan W, Kuai R, Ran R, Fu L, Yang Y, Qin Y, Liu Y, Tang J, Fu H, Zhang Q, Yuan M, Zhang
&& Z, Gao F, He Q.
&& J Biomed Nanotechnol. ):1563-73.关注今日:16 | 主题:461862
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即送15丁当
【求助】请问凋亡试剂盒哪个公司的比较好
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这个帖子发布于10年零304天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
请做过凋亡的前辈推荐下,哪个公司的凋亡试剂盒质量比较好,价格也合理。
不知道邀请谁?试试他们
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本人认为TUNEL染色酶标的要比荧光的好,前者可在镜下同时观察组织细胞的形态、阳性部位,便于对结果的分析。根据本人使用结果建议:ONCOGENE的TdT-FragELTM DNA FRAGMENTATION DETECTION KIT( Cat# QIA33)试剂盒包含全部所需试剂及阳性对照片,染色结果较清晰。ROCHE的In Situ Cell Death Detection Kit,POD. (Catalog Number: 11 684 817 910)试剂盒首先是荧光检测,后用酶标抗荧光素抗体、POD显色,染色结果也很好。国产的大多是自行拼装的,步骤繁复,因而较易出错,有时试剂亦无保证。附图为细胞爬片TUNEL(Roche)套色。
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我用过晶美的annexin-v/pi双染凋亡检测试剂盒,20次大概600元左右,感觉还行。
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我们有位老师用过晶美的,1000左右好象不是进口的,说效果不好,请其他高手指教
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宝赛既便宜又好,北医的公司。我们实验室一直用,不错。而且是市面上最便宜的。
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宝赛偶知道,是北医的,它的不贵,好像20次的580,当时想买,后来其他同学买了晶美的,一起用了,效果还行,不知到flydusty 战友那位老师说效果不好的原因在哪里?偶也想知道一些?因为还有几次要做。谢谢!
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宝赛的确实非常好!!!比BD的都好!
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建议promega的,一流!
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宝赛公司,不知道在重庆有代理吗,怎么联系?请教:myowneye6788
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宝赛的能染完后直接用荧光显微镜照相观察吗,我们这里没有流失细胞仪
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怎么没人回答,大家帮忙回答一下吗,快毕业了,比较着急
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可以照,我们这里照过,不过AnnexinV-FITC的荧光有点弱。
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本人认为TUNEL染色酶标的要比荧光的好,前者可在镜下同时观察组织细胞的形态、阳性部位,便于对结果的分析。根据本人使用结果建议:ONCOGENE的TdT-FragELTM DNA FRAGMENTATION DETECTION KIT( Cat# QIA33)试剂盒包含全部所需试剂及阳性对照片,染色结果较清晰。ROCHE的In Situ Cell Death Detection Kit,POD. (Catalog Number: 11 684 817 910)试剂盒首先是荧光检测,后用酶标抗荧光素抗体、POD显色,染色结果也很好。国产的大多是自行拼装的,步骤繁复,因而较易出错,有时试剂亦无保证。附图为细胞爬片TUNEL(Roche)套色。
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关于丁香园供应日本同仁Annexin V,FITC 凋亡检测试剂盒-北京诺博莱德科技有限公司
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【简单介绍】
日本同仁Annexin V,FITC 凋亡检测试剂盒产品名称:Annexin V,FITC 凋亡检测试剂盒英文名称:Annexin V,FITC Apoptosis Detection Kit品牌:日本同仁化工货号:AD02-05规格:盒储存条件:0-5℃货期:现货
【详细说明】
日本同仁Annexin V,FITC 凋亡检测试剂盒&产品名称:Annexin V,FITC 凋亡检测试剂盒英文名称:Annexin V,FITC Apoptosis Detection Kit品牌:日本同仁化工货号:AD02-05规格:盒储存条件:0-5℃货期:现货&细胞凋亡是指为维持有机体内环境稳定,由基因控制的细胞自主的有序的死亡。正常情况下,任何细胞在形成过程中发生的异常都会通过凋亡消除。例如,体内的癌细胞增长为肿瘤的过程会受细胞凋亡的引导而被抑制。然而,在抑癌基因p53出现问题时,凋亡就不会诱导发生,从而导致癌细胞的不断增长。 细胞凋亡可以通过细胞形态的变化或生物化学的变化来检测。目前常用的指标有caspase活性变化、DNA碎片、磷脂酰丝氨酸的外翻等。Annexin V染色的细胞可以用于检测细胞凋亡早期的细胞膜变化。在细胞凋亡早期,膜磷脂酰丝氨酸由脂膜内侧翻向外侧。 Annexin V是一种Ca离子依赖性磷脂结合蛋白,可以与磷脂酰丝氨酸特异结合。用绿色荧光FITC标记的Annexin V通过流式细胞仪或荧光显微镜可以检测到细胞凋亡的发生。碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,PI只能透过凋亡晚期和死细胞的细胞膜,因此Annexin V和PI结合使用,可以区分凋亡早晚期的细胞及死细胞。&操作流程-悬浮细胞的操作流程诱导凋亡的操作步骤1.制备细胞 (Jurkat cell) 悬液 (1×106 cells/ml)2.加入终浓度为1 ?g/ml的凋亡诱导剂 (Staurosuporine)3.在37℃下培养3.5 h。* Staurosuporine用于诱导Jurkat cell凋亡。最佳诱导条* Staurosuporine用于诱导Jurkat cell凋亡。最佳诱导条件请根据实验的细胞类型与诱导剂调整。&& Annexin V染色操作步骤1. 将细胞悬液转移到离心管中,1,000 rpm离心3 min,去除上清液。2. 加入PBS,1,000 rpm离心 3 min,去除上清液。再重复本步操作一遍。3. 用之前准备好的1×Annexin V Binding Solution制备细胞终浓度为1×106 cells/ml的细胞悬液。* 细胞悬液体积根据实验目的自行调整,一般推荐不少于500 ?l细胞悬液。4. 取100 ?l步骤3中制备的细胞悬液,加入到一个新的tube中。5. 向细胞悬液中加入5 ?l Annexin V,FITC结合物,再加入5 ?l PI Solution。6. 室温下避光培养15 min。7. 加入400 ?l 1×Annexin V Binding Solution,请在1 h内检测。&-贴壁细胞的操作流程诱导凋亡的操作步骤1. 制备细胞 (Caco-2) 悬液 (1×106 cells/ml)将细胞悬液接种到培养皿或者培养板中。2. 在5% CO2培养箱中37℃预培养。3. 加入终浓度为25 ?mol/ml的凋亡诱导剂 (Cisplatin)。4. 37℃培养4 days。* Cisplatin用于诱导Caco-2 cell凋亡。最佳的诱导条件请根据实验的细胞类型与诱导剂调整。Annexin V染色操作步骤1. 吸取培养皿或培养板中的上清液丢弃或转移至微型管中保存。2. 用PBS洗细胞2次,丢弃或收集清洗液保存。3. 用胰蛋白酶消化细胞。 4. 用适量的培养基或PBS将细胞悬液转移至离心管中,如果第一步的上清液和第二步的清洗液没有丢弃,可以一并加入。5. 1,000 rpm离心3 min,弃上清。6. 加入PBS后1,000 rpm离心3 min,弃上清。重复本步操作一遍。7. 加入预先配好的1×Annexin V Binding Solution,制成终浓度为1×106 cells/ml的细胞悬液。* 细胞悬液体积根据实验目的自行调整,一般推荐不少于500 ?l细胞悬液。8. 取100 ?l步骤7中的细胞悬液,加入到新的tube中。9. 向细胞悬液中加入5 ?l Annexin V, FITC结合物,再加入5 ?l的PI Solution。10. 室温下避光培养15 min。11. 加入400 ?l 1×Annexin V Binding Solution,请在1 h内检测。备注:1. 上清液及清洗液中可能含有细胞或凋亡细胞,可以收集一起处理。&&&&& 2. 离心后如果无法判断tube中是否含有细胞?可以保留上清液,以防检测时没有细胞,进而得不到实验结果。-设定对照1. 未染色细胞。2. Annexin V, FITC染色细胞 (没有PI)。3. PI染色细胞 (没有Annexin V-FITC)。-流式细胞仪检测1. 加样到流式细胞仪检测,激发波长Ex = 488 nm;发射波长Em = 530 nm。2. Annexin V-FITC的绿色荧光通过FITC通道 (FL1) 检测;PI的红色荧光通过PI 通道 (FL2或FL3) 检测 (建议使用FL3)。-荧光显微镜检测& 将细胞悬液滴到玻片上,置于显微镜上使用合适的滤光片检测。* 由于EDTA会对细胞膜的特定部位有损伤,建议使用不含EDTA的胰酶消化贴壁细胞。注意事项1. PI有潜在的致癌性,操作时请特别注意并采取必要的防护措施。2. Annexin V,FITC和PI均对光敏感。所有染色过程和培养过程均需避光。3. 若细胞收集过程中使用胰酶,需设法去除残留的胰酶,这些胰酶会消化并降解Annexin V, FITC,最终导致染色失败。
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