RNA提取蛋白质分离纯化化时应注意什么?

RNA的分离纯化--《遗传》1987年02期
RNA的分离纯化
【摘要】:正 一、哺乳类细胞总RNA的提取 1.从培养细胞中提取 (1)准备10瓶(底面积为4.5×8.5cm~2)长得半满的培养细胞(约10~7个细胞)。 (2)吸去瓶中培养液,各加入5ml新鲜培养液,37℃培养4小时左右。 (3)吸去培养液,各加入5ml预冷的1×PBS溶液
【作者单位】:
【关键词】:
【正文快照】:
一、哺乳类细胞总RNA的提取(6)用注射器套卜9号针头,抽打细胞裂解液,至 1.从培养细胞中提取溶液粘度消失为止。 (1)准备10瓶(底面积为呼.sxs.sem,)长得半(7)加人1.49氯化艳,再用GTC调体积至7ml。满的培养细胞(约10,个细胞)。(s)混匀样品,使氯化艳充分溶解。 (2)吸去瓶中培养液
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京公网安备74号怎样将dna与rna分离纯化_百度作业帮
怎样将dna与rna分离纯化
怎样将dna与rna分离纯化
盐析法 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 利用这一特点 选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解 而使杂质沉淀 或者相反 以达到分离目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小 在DNA溶解度最低时 DNA从溶液中析出 而其他杂质还留在溶液中 达到粗提取的目的酶水解法 采用RNase(可以买)水解杂质RNA如果混入DNase酶可以采用100度加热15min使其失活 RNase不会失活 反之采用DNase可以提取RNA 混了RNase、时加入蛋白酶K或加碘乙酸钠RNA 提取与检测_图文_百度文库
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RNA 提取与检测
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以DNA的分离纯化为例,阐述生物大分子分离纯化的基本原则原理和注意事项
以DNA的分离纯化为例,阐述生物大分子分离纯化的基本原则原理和注意事项
首先最重要的一点事保证大分子物质不变性,否则分离纯化的工作将毫无意义,对于分离dna如果,是从生物体中直接提纯,要注意提取溶液的浓度,根据你所想要的A型或者B型来选配盐水,ph当然很重要,稍微偏碱性有利于提纯.如果从rna和dna的混合物种分离,直接使用弱碱性的缓冲液进行电泳就行.此外,就是要提取周期短.周期越长提取效果越差步骤尽量简洁.过于繁琐的步骤会让生物大分子活性降低,尤其提取酶的时候尤其重要当然一定的纯度也是必须的考虑因素,根据实验需要,提纯也需要不同的纯度,自然方法有差异提纯过程中的副产物也是需要考虑的因素.要保证他们不能影响提纯工作的进行
DNA一般都与蛋白质结合在一起,RNA也是这样。在0.14mol/L的氯化钠溶液中,DNA与蛋白质复合体的溶解度最小,这样可以将DNA与RNA分开,利用有机溶剂除去其中的 蛋白质,就得到比较纯的DNA了核酸分离提取的原则是什么?_百度知道
核酸分离提取的原则是什么?
核酸包括DNA、 RNA两种分子, 在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。
真核生物的染色体DNA为双链线性分子, 原核生物的“染色体”、
质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子; 有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子, RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,
不同类型的RNA分子可以具有不同的结构特点, 如真核mRNA分子多数在3’端带有poly(A)结构,
至于病毒的DNA、 RNA分子,
其存在形式多种多样,有双链环状、
单链环状、
双链线状及单链线状等。HYGROMYCIN B &
&生物帮上面有详细介绍。
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核酸分离提取的原则
核酸包括DNA、RNA两种分子,在细胞中都是以与蛋白质结合的状态存在。真核生物的染色体DNA为双链线性分子,原核生物的“染色体”、质粒及真核细胞器DNA为双链环状分子;有些嗜菌体DNA有时为单链环状分子,RNA分子在大多数生物体内均是单链线性分子,不同类型的RNA分子可以具有不同的结构特点,如真核mRNA分子多数在3’端带有poly(A)结构,至于病毒的DNA、RNA分子,其存在形式多种多样,有双链环状、单链环状、双链线状及单链线状等。
95%的真核生物DNA主要存在于细胞核内,其它5%为细胞器DNA,如线粒体、叶绿体等。RNA分子则主要存在于细胞质中,约占75%,另有10%在细胞核内,15%在细胞器中,RNA以rRNA的数量最多(80%-85%),tRNA及核内小分子RNA占10%-15%,而mRNA分子大小不一,序列...
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