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马铃薯是世界上仅次于小麦、水稻、玉米的第四大粮食作物，目前广泛种植于世界各地。由马铃薯Y病毒（PVY）等引起的病毒性退化导致世界马铃薯产量每年至少减产20%。研究表明，表达病毒外壳蛋白基因（PVY-CP）的转基因马铃薯能显著延缓病害症状的发展和危害程度。目前，该转基因抗病毒马铃薯已经在云南试种成功。请回答下列问题（1）PVY-CP在基因工程中称为___________。在基因表达载体中，除了要有PVY-CP外，还必须有启动子、终止子和____________。将PVY-CP导入马铃薯细胞采用最多的方法是____________。（2）取40株转基因马铃薯作为实验组，另取40株
作为对照组，种植于相同且适宜的条件下，接种
，观察发病情况，以确定转基因马铃薯是否具有抗性以及抗性的程度。（3）成功获得抗PVY马铃薯后，可采用植物细胞工程进行大批量繁育，其理论依据是
；一些分化的马铃薯细胞，经过激素的诱导，可以
形成具有分生能力的薄壁细胞，进而形成__________，再进一步培养成植株。 
（1）目的基因 标记基因 农杆菌转化法
（2）非转基因马铃薯 PVY
（3）植物细胞全能性 脱分化 胚状体或丛芽
试题分析：
（1）PVY-CP在基因工程中被称为目的基因，在基因工程操作中，最关键的步骤是构建基因表达载体，一个基因表达载体的组成有：启动子、目的基因、终止子、标记基因；而将基因表达载体导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法、花粉管通道法，其...
考点分析：
考点1：基因工程、生物技术的安全性和伦理问题
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乳酸菌常用于制作酸奶等发酵食品。研究发现，乳酸菌还可产生乳酸菌素，抑制肉制品中致病菌和腐败菌的生长，起到生物防腐的作用。请回答（1）制作酸奶是利用乳酸菌在
（填“有氧”或“无氧”）条件下，将牛奶中葡萄糖、乳糖分解成乳酸，同时将奶酪蛋白水解为短肽和
，不仅易被人体吸收，也适用于乳糖不耐症人群。若牛奶中含有抗生素，会影响酸奶的制作效果，原因是
。（2）纯化乳酸菌时可选用平板划线法或
接种，还需要设置未接种乳酸菌的培养基作为对照，若对照组培养基表面没有菌落生长，说明
。（3）为探究不同种乳酸菌的抑菌效果，将稀释倍数相同的等量乳酸菌培养液滴加在长满致病菌的平板上，一段时间后，会出现以滴点为中心的抑菌圈，实验结果如下表。① 实验的自变量是
。②由实验结果可知，乳酸菌对________（填致病菌）的抑菌效果比较突出；在生产应用中，不宜采用
号菌株进行防腐。 
果蝇的野生型和突变型受常染色体上的一对等位基因控制。某研究小组利用一对野生型果蝇进行多次杂交实验，F1中野生型和突变型的比值总是接近3：1。现用F1中的一对突变型果蝇杂交，F2中出现了一只野生型雄果蝇。研究发现，该雄果蝇的出现是由于另一对常染色体上的某对等位基因发生突变产生了抑制基因，使突变型性状恢复为野生型性状，这种突变称为假回复突变。回答下列问题（1）遗传学研究常用果蝇作为实验材料，原因是
。（2）F1中突变型个体的出现不可能由基因突变引起，理由是
。（3）在发生假回复突变前，果蝇野生型和突变型这对相对性状的遗传遵循的遗传规律是
。（4）要判断抑制基因的显隐性，可用该雄果蝇与多只
雌果蝇杂交，若子代
，则抑制基因是显性基因：若子代
，则抑制基因是隐性基因。（5）若在假回复突变个体中仍能检测到突变型基因控制合成的mRNA，则抑制基因是通过影响基因表达的过程来使突变型恢复为野生型的。 
查干湖位于吉林省西部松花江畔，在20世纪50～60年代湖水面积很大，70年代末期逐渐缩小趋于干涸。为改善生态环境，当地政府引松花江水入湖，给查干湖注入了新的生命。回答下列问题：（1）查干湖生态环境恢复过程中，发生的演替类型属于
；生态环境的恢复，使当地旅游业得到空前发展，体现了生物多样性的
价值。（2）查干湖的浮游植物属于生态系统组成成分中的
；该湖泊中的鱼类，由于食物种类和栖息场所的不同分布于不同水层，这属于群落的
结构。（3）当湖泊受到轻微污染时，能通过物理沉降、化学分解和
很快消除污染，说明生态系统具有自我调节能力，其基础是
。（4）在查干湖的早期恢复过程中，要向湖中投放现成的有机物质，防止该生态系统崩溃，从能量流动的角度分析，原因是
乙型肝炎是由于感染乙型肝炎病毒（HBV）所致，若不及时治疗将发展为肝硬化甚至肝癌。回答下列问题（1）HBV侵入人体后，可引起机体产生的特异性免疫是____。（2）为及时发现是否感染HBV，可用人工培养抗原来检测血清中的抗体。这种检测方法的基本原理是______________。从免疫系统的组成看，抗体属于
，它是由___细胞产生的。（3）预防乙型肝炎的有效措施是注射疫苗。注射的疫苗作为_____________，可刺激机体发生特异性免疫反应，产生相应的
细胞和抗体等，从而获得对该病毒的长期免疫力。 
某生物小组以新鲜菠菜叶为材料进行叶绿素提取的探究实验，结果如下表： 实验一实验二二氧化硅粒径/目用量/g205010020013579叶绿素含量（mg/l）0．6130．6990．5930．5920．4900．6480．6100．5750．553注：“目”表示颗粒大小的单位，且目数越大粒径越小；“叶绿素含量”表示每克叶中叶绿素的提取量。回答下列问题（1）以上实验的目的是_______________________。（2）提取叶绿素的实验原理是
，实验中二氧化硅的作用是
。（3）依据实验一的结果，实验二最好选用粒径为
的二氧化硅。在实验二中，粒径大小属于
变量。（4）若实验使用的菠菜培养于缺镁培养液中，则提取到的叶绿素含量将
（填“上升”、“下降”或“不变”）。 
题型：综合题
难度：简单
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马铃薯的组织培养
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你可能喜欢夏季收获的马铃薯处于休眠状态，若要一年两季栽培马铃薯，需要解除休眠。导致马铃薯休眠和解除其休眠的植物激素分别是A．脱落酸和赤霉素B．脱落酸和细胞分裂素?C．生长素和细胞分裂素D．乙烯和赤霉素A辽宁省大连市20中学年高二上学期期中考试生物试题答案江苏农业科学２００７年第１期一８５一不同激素对马铃薯组培苗生长特性及酶活性的影响吴晓玲，姚新灵，柳金凤（宁夏大学生命科学学院，宁夏银川７５００２１）摘要：研究不同激素配比对马铃薯组培苗生长特性和酶活性等的影响，结果表明，在试验期间，以Ｍ２处理（ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５ｍ（Ｌ６一ＢＡ）的马铃薯株高和鲜重最大，过氧化物酶活力最高，而Ｍ３处理（ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ）的植株根数和叶绿素含量最多，硝酸还原酶活性最高。因此马铃薯组织培养的最ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５～１．０ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ。佳激素配比为：ＭＳ＋０．２关键词：马铃薯；组织培养；激素；叶绿素；过氧化物酶；硝酸还原酶中图分类号：￥５３２．０３５．３文献标识码：Ａ文章编号：１００２—１３０２（２００７）０１—００８５—０３马铃薯的产量和品质对其产业化发展至关重要。生产上绝大多数是利用块茎进行无性繁殖，而马铃薯生产中普遍存在种性退化现象，退化植株长势衰弱，株形矮化，分枝减少，薯块变小，产量逐年下降。造成退化的原因有多种，综合而言，主要是薯块生长锥细胞发生阶段性衰老，导致种性退化，而病毒和细菌病害的侵染，以及肥水、营养条件不良等都会加剧其退化程度。研究发现，有３０多种病毒感染马铃薯，并引起品种退化，严重影响马铃薯生产。因此提高马铃薯产量和质量已迫在眉睫，植物组织培养技术的发展为此提供了技术支持。通过微茎尖组织培养技术能使马铃薯脱除病毒…。但许多脱毒苗在组培过程中很难成活，主要是因为没有找到适宜的培养基配方。所以在马铃薯组培过程中常存在成活率低等的问题。本研究旨在选择马铃薯组培的最佳培养基配方，并在试验过程中观测马铃薯组培幼苗的生物学特性及生理特性，为大规模生产马铃薯幼苗提供依据。１材料与方法１．１仪器与试剂仪器：分光光度计、电子顶载天平、研钵、容量瓶、小漏斗、真空气泵（注射气筒）、离心机、滴管、移液管、量筒、试管、保温箱（恒温水浴）、烧杯。试剂：９５％乙醇、石英砂、碳酸钙粉、磷酸缓冲溶液、愈创木酚溶液、双氧水、三氯乙酸、亚硝酸钠标准溶液、对氨基苯磺酸溶液、ｄ一萘胺溶液、硝酸钾异丙醇磷酸缓冲液的混合液。１．２材料试验材料为青薯２１５，于２００４年１１月１７日将带芽马铃薯种到花盆当中，定期浇水，备用。１．３试验方法１．３．１试验设计使用的基础培养基为ＭＳ培养基。３种激素：赤霉素（ＧＡ）、萘乙酸（ＮＡＡ）、细胞分裂素（６一ＢＡ），设５种组合。Ｍ１：ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＧＡ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ；Ｍ２：ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ：Ｍ３：ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ；Ｍ４：ＭＳ＋０．１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ；Ｍ５：ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ。ｐＨ值均为５．８，琼脂０．８％，蔗糖３％。１．３．２消毒与接种配好培养基后，接种前对马铃薯愈伤组织进行清洗，灭菌水冲洗３次，用７０％酒精浸泡２～３ｍｉｎ，灭菌水冲洗３次，再用０．１％升汞浸泡２—３ｍｉｎ，灭菌水冲洗４次，放人灭菌好的铺有几层滤纸的培养皿里，将酒精里浸泡的镊子和解刨刀在酒精灯上反复灼烧灭菌，待冷却后将外植体植入配好的培养基上，整个操作必须靠近酒精灯旁，以免污染。每种处理重复５瓶，每瓶接外植体５块。１．３．３培养条件置于ＺＲＸ一１０００ＤＣ智能人工气候培养柜（杭州钱江仪器设备有限公司制造）中，光照１５００ｌｘ，１２收稿日期：２００６—０７—２１基金项目：国家自然科学基金项目资助（编号：３０１６００１０）。作者简介：吴晓玲（１９７３～），女，宁夏同心人，硕士，讲师，从事细胞工程方面的研究和教学工作。Ｔｅｌ：（０９５１）２０６２１２９；Ｅ—ｍａｉｌ：ｗｕｘｉａｏｌ＠／ＩＸＵ．ｅｄｕ．ｃｎ。ｈ光照，１２ｈ黑暗，相对湿度７０％，万方数据　一８６一江苏农业科学２００７年第１期供氧充分。１．４试验方法及数据统计试验开始每间隔２ｄ测１次株高。鲜重＝出瓶物鲜重一接种时外植体鲜重。用分光光度法测定叶绿素含量心Ｊ，愈创木酚法测定过氧化物酶活性拉１，第４２ｄ用活体法测定硝酸还原酶活性旧ｏ。２结果与分析２．１不同激素配比对马铃薯株高的影响马铃薯组培苗自２２ｄ后开始增长缓慢，说明培养基内的营养成分已经减少。在生长期内，以Ｍ２处理（ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ）植株最高，Ｍ３次之（图１）。可能是Ｍ２处理的激素配比水平可促使细胞分裂、扩大，使马铃薯茎增粗，抑制顶芽生长，抑制衰老，促进腋芽萌发，诱导芽的分化ＨＪ。ＧＡ具有促进植物增高的作用，但Ｍ１处理添加了ＧＡ后，在后期植株并没有明显增高，反而低于其他处理，可能是ＧＡ促进细胞分裂的作用时间较短，也可能本试验浓度不适宜。ｍ口ｍ４，’鲁０｛Ⅱ叵蜷一一岫．．豳４咀囟７且幽ｍ日艮援经ｒ岫目日目夔州扎圳鹾丝●阮编翰剧笸图１不同激素萄比对马铃薯组培苗株高的影响２．２不同激素配比对马铃薯植株鲜重的影响由图２可知，不同激素配比对马铃薯幼苗鲜重的影响各不相同，其中以Ｍ２处理的马铃薯鲜重最高，Ｍ３处理次之，而Ｍ４处理最小。这可能是因为Ｍ２处理的激素配比较适合马铃薯生长，而Ｍ４处理的ＮＡＡ浓度较低，仅为０．１ｍｇ／Ｌ，使其鲜重最低，可见适宜浓度的ＮＡＡ在促进马铃薯苗增重方面具有重要作用。试验过程中还发现Ｍ１处理马铃薯幼苗的叶片数较多，这可能是因为赤霉素具有促进完整植株生长的作用Ｈ－。１－４囱出ｊ１．２一１．Ｏｏ０．８１１Ⅲ｜１０．６滋０．４０．２０■＿■Ｍ１Ｍ２雾Ｍ３霍均ｌＭ４Ｍ５处理图２不同激素配比对马铃薯鲜重的影响万　方数据２．３不同激素配比对马铃薯根数的影响由表１可知，在激素６一ＢＡ浓度相同的情况下，各处理根数顺序为Ｍ５＝Ｍ３＞Ｍ２＞Ｍ１＝Ｍ４，这说明在一定范围内，ＮＡＡ浓度越大根数越多，这是因为ＮＡＡ起着诱导生根的作用Ｈ１，而加入赤霉素的培养基中其根数也有明显增加，这跟赤霉素有刺激器官生长的作用有关∞ｊ，６一ＢＡ相对ＮＡＡ对马铃薯幼苗根数的影响较小，且６一ＢＡ对根的生长一般起抑制作用”ｊ，所以随其浓度越大，增加的根数越少。表１不同激素配比对马铃薯根数的影响培养时间马铃薯根数（条／株）（ｄ）Ｍ１Ｍ２Ｍ３Ｍ４Ｍ５１８３４５４６３２６７８６８注：１１月２７日接种，１２月１５日转接，此Ｉ司为１８ｄ，１２月２９日取出，此间共为３２ｄ。２．４不同激素配比对马铃薯叶绿素含量的影响由图３可知，Ｍ３处理的马铃薯叶绿素含量最多，其次为Ｍ５、Ｍ１、Ｍ２，Ｍ４最低。叶绿素含量越多，植物光合作用越强，越有利于植物的生长。茎叶中叶绿素含量与光合强度以及氮素营养也有密切关系。因此，测定植物叶绿素含量便成为研究植物光合作用与氮代谢必不可少的手段，在作物育种，科学施肥，看叶诊断中有广泛的应用∞Ｊ。５种培养基内叶绿素含量的差异还与激素配比有着密切关系。加入６一ＢＡ，能减少叶绿素分解，延缓叶片衰老∞Ｊ，所以随其浓度增大，叶绿素含量也增大，ＮＡＡ较６一ＢＡ对叶绿素含量的影响较小。攀１．０警０．８ｏ０．６姗１０．４羹ｎｏＩ越翻一鉴锄Ｍ１Ｍ２Ｍ３Ｍ４Ｍ５处理图３不同激素配比对马铃薯叶绿素含量的影响２．５不同激素配比对马铃薯叶绿素ａ／ｂ的影响叶绿素ａ／ｂ的比值高低，受物种、环境条件等因素的影响。一般耐阴植物叶绿素ａ／ｂ的比值较低，能强烈地利用蓝光，适应于阴处生长，其光合能力较强。由表２可知，不同激素配比的培养基中叶绿素ａ／ｂ值以Ｍ２处理（ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌｍｇ／ＬＮＡＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ）处理最小，说明一定范围内ＮＡＡ和６一ＢＡ６一ＢＡ）最大，Ｍ５（ＭＳ＋０．５吴晓玲等：不同激素对马铃薯组培苗生长特性及酶活性的影响一８７一表２不同激素配比对马铃薯叶绿素ａ／ｂ的影响处理Ｍ１Ｍ２Ｍ３Ｍ４Ｍ５Ｆ叶绿素ａ／ｂ０．９０１０．９４９０．８１４０．８５６０．７０３６．７９５“的浓度越大，叶绿素ａ／ｂ值越小，光合能力越低。２．６不同激素配比对马铃薯过氧化物酶活性的影响过氧化物酶在植物体内普遍存在，是活性较高的一种酶。它与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化等有密切关系，在植物生长发育过程中，其活性不断发生变化。因此，过氧化物酶活性可以反映某一时期植物体内代谢的变化¨ｊ。由表３可知，Ｍ２处理的过氧化物酶含量最高，达４５．００Ｕ／（ｇ?ｍｉｎ），说明其对活性氧的清除能力最强，可能是因为Ｍ２处理的激素配比活化了马铃薯的酶系统，协调了内源激素水平。而Ｍ１处理加入赤霉素，其酶活性仅次于Ｍ２，这是因为赤霉素可刺激植物体内生物素的合成∞Ｊ。其他３种培养基过氧化物酶活性相对较低，可能是因为细胞分裂素浓度过高（均为１．０ｍｇ／Ｌ），反而抑制了细胞清除活性氧的能力。据报道，细胞分裂素６～ＢＡ除有解除顶端优势的作用，促进侧芽生长外，还似乎与生长素有对抗作用∞ｏ。表３不同激素配比下的马铃薯过氧化物酶活性之．７．不同激素配比对马铃薯硝酸还原酶活力的影响硝酸还原酶是氮素同化中的关键酶，它对植物的光合作用和能量代谢均有重要影响。因此，硝酸还原酶是作物营养和选种的双指标¨Ｊ。由图４可知，Ｍ３处理硝酸还原酶活性最高，Ｍ５次之，其他处理相对较少，说明Ｍ３更适合马铃薯再生苗的生长，此时马铃薯对氮素的同化能力最强。而ＮＡＡ浓度对酶含量影响较小。加入赤霉素的培养基中硝酸还原酶的活性也相对较高，因为赤霉素可以促进许多水解酶的活性，使贮藏物质分解，提供了植物生长所需的物质和能量，也可激活转化酶的活性¨一。万　方数据各处理马铃薯组培苗株高和鲜重均呈上升趋势，以Ｍ２处理（ＭＳ＋０．２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋０．５ｍｇ／Ｌｍｇ／ＬＮＡＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ）、Ｍ５处理（ＭＳ＋０．５ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１．０ｍｇ／Ｌ６一ＢＡ）植株根数最多，这是因为萘乙酸ＮＡＡ有诱导生根的作用ＨＪ，其浓度越大，根数越多。Ｍ３处理叶绿素含量最多，这是因为６一ＢＡ可的激素配比更有利于马铃薯幼苗的生长。Ｍ２处理的过氧化物酶活力最大，细胞分裂素６一ＢＡ与生长’’出版社，２００２：１２６—１２７．版社，２０００：１２１—１２３．［３］邹琦．植物生理生化实验指导［Ｍ］．北京：中国农业出版社，１９９５．２００３：１５１—１５２，２３—２７．１９８６：４２—４３．８０３讨论６一ＢＡ）马铃薯植株最高。Ｍ３（ＭＳ＋０．２减少叶绿素分解，延缓叶片衰老，这与刘钟栋的报道一致。川，随其浓度增大，叶绿素含量越多。因此，Ｍ３素有对抗作用∞Ｊ，而过氧化物酶又与呼吸作用、光合作用及生长素的氧化有密切关系心Ｊ，所以，６一ＢＡ浓度越小，过氧化物酶含量越多。Ｍ３处理的硝酸还原酶活性最高，对氮素的同化能力最强。参考文献：［１］朱建华，彭士勇．植物组织培养实用技术［Ｍ］．北京：中国计量［２］李合生．植物生理生化实验原理与技术［Ｍ］．北京：高等教育出［４］潘瑞炽．植物组织培养［Ｍ］．３版．广州：广东高等教育出版社，［５］裘文达．园艺植物组织培养［Ｍ］．上海：上海科学技术出版社，［６］周云龙．植物生物学［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９９９．［７］刘钟栋．植物生理学［Ｍ］．北京：高等教育出版社，１９８９：７９—不同激素对马铃薯组培苗生长特性及酶活性的影响作者：作者单位：刊名：英文刊名：年，卷(期)：被引用次数：吴晓玲， 姚新灵， 柳金凤宁夏大学生命科学学院,宁夏银川,750021江苏农业科学JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES次 参考文献(7条) 1.朱建华.彭士勇 植物组织培养实用技术 20022.李合生 植物生理生化实验原理与技术 20003.邹琦 植物生理生化实验指导 19954.潘瑞炽 植物组织培养 20035.裘文达 园艺植物组织培养 19866.周云龙 植物生物学 19997.刘钟栋 植物生理学 1989 本文读者也读过(10条)1. 刘小凤.吴云锋.胡想顺.LIU Xiao-feng.WU Yun-feng.HU Xiang-shun 不同浓度NAA和KT对马铃薯组培苗的影响及方程模型[期刊论文]-西北农业学报)2. 孙秀梅.Sun Xiumei 马铃薯组织培养过程中异常苗的形成原因及其对策[期刊论文]-中国农学通报)3. 连荣芳 马铃薯组织培养中常见的污染类型及防治措施[会议论文]-20044. 崔翠.王季春.何凤发.周清元.刘希忠.李文斌 不同MS和B 9浓度对马铃薯脱毒试管苗生长的研究[期刊论文]-西南农业大学学报)5. 龚晓洁.GONG Xiao-jie 几种防褐剂对马铃薯愈伤组织培养褐化现象的抑制效应[期刊论文]-安徽农业科学)6. 司怀军.王蒂.戴朝曦.王清 我国马铃薯组织和细胞培养研究进展[期刊论文]-中国马铃薯. 张智策.张凤芸 马铃薯组织培养环境调控初探[期刊论文]-中国马铃薯)8. 盛继群.钟晓玲 马铃薯组织培养简化脱毒技术[期刊论文]-孝感学院学报)9. 石晓云.王僧虎.SHI Xiao-yun.WANG Seng-hu 马铃薯组培苗壮苗培养的研究[期刊论文]-黑龙江农业科学2010(6)10. 张富荣.郝文胜.赵永秀.Zhang Furong.Hao Wensheng.Zhao Yongxiu 赤霉素在马铃薯组织培养中的应用[期刊论文]-中国马铃薯) 引证文献(2条)1.徐涌.孙骏威.陈珍 不同植物生长调节物质处理对吴茱萸组织培养的影响[期刊论文]-浙江农林大学学报 .薛龙.杨雅萍.徐娅梅.韩占伟.李学才 不同浓度赤霉素浸种对马铃薯实生苗生长发育的影响[期刊论文]-农业科技通讯 2011(3) 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