HT-29人结肠癌早期症状细胞来源?

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HT-29人结肠癌细胞
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动物细胞培养的条件
HT-29人结肠癌细胞体外培养需要满足以下条件
1、营养物质:细胞体外培养所需营养物质与体内基本相同,需要有葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等。通常还需加入血清、血浆等一些天然成分。
2、无菌、无毒的环境:首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境,即对培养液和所有的培养用具进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素以防培养过程中的污染。
3、温度和pH:细胞体外培养的适宜温度一般与动物的体温相近。多数细胞生存的适宜pH为7.2~7.4。
4、气体环境:HT-29人结肠癌细胞培养所需气体主要有O2和CO2,O2是细胞代谢所必需的,CO2的主要作用是维持培养液的pH。进行细胞培养时,通常采用培养皿或松盖培养瓶,将其置于含95%空气加5% CO2的混合气体的培养箱中进行培养。
HT-29人结肠癌细胞关于客户在收到细胞后正确的处理方法:
有经验和刚刚从事细胞培养工作的人员都应该认真仔细地询问下细胞提供方提供的建议,提前了解所要培养细胞的详细资料,准备好细胞所要用到的培养基和相关试剂,虽然所有的贴壁,半贴壁或者悬浮细胞处理方式差不多,但是不同的实验室培养条件和处理力度还有试剂的批间差这些问题存在,也会导致对细胞处理不当,或者环境的不适应而造成细胞的死亡。
1.收到细胞,第一时间要镜检:观察细胞形态是否正常,对于贴壁细胞则要注意看贴壁情况是否很好,观察细胞密度,有疑议及时咨提供细胞的技术人员。由于运输的时间或者温度的变化,很多贴壁细胞在盛满培养基的瓶子里生长的状态和平时会有点不一样,主要是贴壁牢固问题。比如293T,平时贴壁就不是很牢,在装满的培养基瓶子里面,会发生大片的脱落,细胞聚集在一起,但是细胞生长还是正常的,通过离心收集,加以胰酶的消化,重新打散,又可以正常的贴壁生长。
2.当通过上一步的观察,细胞初步没有任何问题时,进行下一步操作。当收到的细胞密达到80%左右时,则处理如下:弃除瓶中大部分培养基,仅保留5到10mL培养所需的常规培养基;或更换新鲜的培养基,置于培养箱中,随后每天观察。细胞在低于正常生长温度情况下,会调整为静止期,或者慢速生长期,必须恢复37度的环境至少3个小时左右,才能重新调整到接近对数生长期的状态,在对数生长期进行细胞的传代会大大增加传代的成功率,和细胞的存活率。
3.如果经第一步观察发现细胞密度超过90%,并且细胞状态很好时,则复温后2个小时需要立即传代。传代的比例应依据不同的细胞而定。对于生长比较快,状态稳定,不易受外界影响的细胞可以一次多传几瓶;对于生长较慢,细胞比较薄,状态容易波动的细胞类型,一次少传些,保证每瓶细胞密度大些,便于稳定生长。至于一些比较陌生的细胞,第一次处理也可以依照第二种情况。
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CYP2E1(cytochrome P450 2E1)&&抗细胞色素P450ⅡE1抗体
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HT-29细胞[人结肠癌细胞]
细胞学名:人结肠癌细胞;HT-29
组织来源:结肠癌细胞
培养条件:HT-29细胞[人结肠癌细胞]McCoy&s5A+10%FBS
形态:贴壁;上皮细胞样
历史前景:该细胞是1964年由FoghJ用移植培养方法和含15%FBS的F12培养液从原发性肿瘤分离的。近来,已建株的培养细胞用含血清的McCoy&s5A培养基培养。该细胞系在裸鼠中成瘤,也能在类固醇处理的地鼠中成瘤。该细胞可合成IgA、CEA、TGF&结合蛋白和黏液素;表达尿激酶受体,但没有检测到血浆酶原活性;不表达CD4,但细胞表面表达半乳糖神经酰胺(HIV的可能替代受体)。该细胞系癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、Myb、sis、fos阳性;p53基因过表达,并且在273位密码子处发生G&A突变,导致Arg&His替换。
HT-29细胞[人结肠癌细胞]操作台的灭菌处理:
1)无菌室及无菌操作台(laminarflow)用紫外灯照射30-60分钟灭菌,70%ethanol擦拭无菌操作抬面,并开启无菌操作台风扇运转10分钟。
2)细胞用的培养基如有相同切记不可共享培养基,以避免失误混淆或细胞间污染。 (注:实验操作应在抬面之中央无菌区域,勿在边缘之非无菌区域操作。)
培养细胞将复合细胞计数要求的细胞悬液分装入培养瓶内,将培养瓶放入37℃和5%CO2的培养箱内2-4小时(或者24-48小时)后换液继续培养培养,换液的时间由细胞情况而定。&
HT-29细胞[人结肠癌细胞]复苏因严格遵守&快速融化&原则:必须将冻存在-196℃液氮中的细胞快速融化至37℃,使细胞外冻存时的冰晶迅速融化,避免冰晶缓慢融化时进入细胞形成再结晶,对细胞造成损害。
Cs-(018)-002300 大兔晶状体上皮细胞/细胞株
,规格: &5&100000cells/瓶
Cs-(018)-002301 大兔淋巴成纤维细胞/细胞株 ,规格: &5&100000cells/瓶
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Cs-(018)-002359 低分化鼻咽癌细胞/细胞株系,SUNE-1细胞/细胞株 ,规格: &5&100000cells/瓶
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本产品网址:/b2b/shfengshou/sell/itemid-.html请问我的HT-29人结肠癌细胞为何会长脚(癌细胞,结肠,传代,培养基) - 细胞实验 - 生物秀
标题: 请问我的HT-29人结肠癌细胞为何会长脚(癌细胞,结肠,传代,培养基)
摘要: [请问我的HT-29人结肠癌细胞为何会长脚(癌细胞,结肠,传代,培养基)] 上海中科院购买的HT-29人结肠癌细胞,上个月养的很好的,2周前突然长脚,而且越长越多。长脚之后的细胞长的很快,有时1天就需要传代,但贴壁不牢。后来复苏一瓶,传代3次之后也挺好了,不过今天发现又有长脚的趋势……我用的McCoy5a+10%FBS的培养基,0 25%胰酶+0 03EDTA消化。提供一个线索,二氧化碳的孵育箱打开之后,关上门有时CO2的的值会跳到7%点多,但之后又可以恢复到5%。不过实 关键词:[癌细胞 结肠 传代 培养基 孵育 二氧化碳 胰酶]……
上海中科院购买的HT-29人结肠癌细胞,上个月养的很好的,2周前突然长脚,而且越长越多。长脚之后的细胞长的很快,有时1天就需要传代,但贴壁不牢。后来复苏一瓶,传代3次之后也挺好了,不过今天发现又有长脚的趋势……我用的McCoy5a+10%FBS的培养基,0.25%胰酶+0.03EDTA消化。提供一个线索,二氧化碳的孵育箱打开之后,关上门有时CO2的的值会跳到7%点多,但之后又可以恢复到5%。不过实验室的老师说,不用理会他的数值,问题不大。。。请高手指点下啊~
回复没有人知道吗?顶上去……我把培养基配新的了,也换了个孵箱,仍然长~,但是长脚的贴壁不牢,我在换液的时候,会多吹几下,能吹下来一部分,但还是不知道是什么原因啊……回复二氧化碳的值会跳到7%点多,但之后又可以恢复到5%。这与你培养的细胞结果无关。本来该细胞为贴壁生长细胞,可生长伪足。这是细胞的正常生长状态,不影响你的实验回复二氧化碳的值会跳到7%点多,但之后又可以恢复到5%。这与你培养的细胞结果无关。本来该细胞为贴壁生长细胞,可生长伪足。这是细胞的正常生长状态,不影响你的实验回复二氧化碳的值会跳到7%点多,但之后又可以恢复到5%。这与你培养的细胞结果无关。本来该细胞为贴壁生长细胞,可生长伪足。这是细胞的正常生长状态,不影响你的实验可是长了伪足之后,贴壁不牢呢~~而且生长极快……回复贴壁不牢是缺少粘附分子或是培养基的营养不够所致。细胞生长快说明你的细胞好,无任何微污染回复贴壁不牢是缺少粘附分子或是培养基的营养不够所致。细胞生长快说明你的细胞好,无任何微污染哦,好的,谢谢指导呢~~回复你咋养的呢?为什么我的细胞不长脚,涨的也慢,4天也涨不到50%回复你咋养的呢?为什么我的细胞不长脚,涨的也慢,4天也涨不到50%就用McCoy5a养的啊,这个细胞貌似只是在刚复苏的时候长的慢,一般1:3传代,就能长的不错了,太稀的话很难长……回复LZ是上海的么,能否给点HT-29,急需,十分感谢!!我有caco-2细胞。
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