DH5a的基因型表示方法怎么分析

谁能提供jm109这种菌种的说明(菌种,基因型,生物学特性,表现型) - DNA技术 - 生物秀
标题: 谁能提供jm109这种菌种的说明(菌种,基因型,生物学特性,表现型)
摘要: [谁能提供jm109这种菌种的说明(菌种,基因型,生物学特性,表现型)] 谁能提供关于jm109的详细说明,包括基因型,表现型,以及这种菌种的来源和生物学特性。本人由于写这个方面的资料,在网上也很难查到,望各位大侠能给予帮助,小弟先谢了。 关键词:[菌种 基因型 表现型 生物学特性]……
谁能提供关于jm109的详细说明,包括基因型,表现型,以及这种菌种的来源和学特性。本人由于写这个方面的资料,在网上也很难查到,望各位大侠能给予帮助,小弟先谢了。
JM109和DH5JM109E. coli JM109在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化或用M13 phage载体进行转染时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和JM109 F"编码的lacZDM15相结合,从而显示b-半乳糖苷酶活性 (a-互补性)。利用这一特性, 可以很容易鉴别重组体菌株。因为具有F"质粒,除可用于制作基因库、进行亚克隆等之外,也可作为M13载体DNA的宿主,制备单链DNA。E. coli DH5aE. coli DH5a在使用pUC系列质粒载体进行DNA转化时,由于载体DNA产生的LacZa多肽和DH5a编码的lacZDM15相结合,从而显示b-半乳糖苷酶活性 (a-互补性)。利用这一特性, 可以很容易鉴别重组体菌株。DH5a可以用于制作基因库、进行亚克隆等。由于DH5a具有deoR变异,可以作为较大质粒的宿主菌使用。如果想知道这两种的本质区别,就得从遗传标记上入手:JM109: recA1,endA1 gyrA96, thi-1,hidR17,supE44,relA1,Δ(lac-proAB)/F"[traD36,proAB+,lac 1q,lacZΔM15]DH5a:F-,φ80dlacZΔM15,Δ(lacZYA-argF)U169,deoR,recA1,endA1,hsdR17(rK+,mk+),phoA,supE44,λ-,thi-1,gyrA96,relA1dam缺失内源GATC腺嘌呤甲基化功能。dam菌株有较高的重组频率,不断地发挥DNA修复功能,难以转入Dam修饰的质粒。用于制备对某些限制性内切酶(如Bcl I)切割敏感的DNA。dcm缺失内源CCWGG胞嘧啶甲基化功能。用于制备对某些限制性内切酶(如Ava II)切割敏感的DNA。dnaJ一种伴侣蛋白被失活。这种缺失可以稳定E. coli菌株中表达的某些突变蛋白。dut 无dUTPase活性。同ung一起可催化尿嘧啶掺入到DNA上。适用于某些寡核苷酸突变实验。endA非特异性核酸内切酶 I活性缺失。应用endA菌株可制备出高质量的DNA。e14一种可切割的类前噬菌体元件,存在于K-12中,但在很多衍生菌株中丢失。e14带有mcrA 基因,因此 e14- 菌株也属于 McrA-型。F低拷贝数的自传递型质粒。Fˊ因子带有部分E. coli染色体DNA,特别是如Fˊlac-proA+B+上的lac操纵子和proAB。glnV见 supE.hflA增加了λ噬菌体感染时的溶源化几率。hsdR,hsdS不含有特定序列甲基化的DNA可被EcoK I或EcoB I 视为异物并被消化降解。这些酶识别不同的序列,由hsdRMS的不同等位基因编码。 hsdR 突变体去除了消化功能但保留了保护性甲基化功能 (r-m+),而hsdS 突变体则去除了这两种功能 (r-m-)。后者制备的DNA转入野生型菌株时将被消化掉。 见E. coli K12.lacIqlac 阻遏物过度表达,更加彻底地关闭lac启动子(Plac)启动的基因表达。lacZ无?-半乳糖苷酶活性。lacY无半乳糖渗透酶活性。Δ(lac) = 缺失;lac有四种常见的缺失:Δ(lacZ)M15表达一条能与许多种质粒编码的lac alpha功能上互补的片段。只有当宿主带有ΔM15时,才能在X-Gal培养基上呈现蓝斑。ΔU169,ΔX111和ΔX74 都缺失了染色体上的整个lac操纵子,它们之间的区别在于侧翼DNA的缺失量有所不同。ΔX111 还缺失 proAB基因,因此在基本培养基上生长时应补加脯氨酸,除非其带有Fˊlac proA+B+。lon缺失了降解异常蛋白质的蛋白酶活性。一些真核蛋白质在lon菌株中很稳定。E. coli B菌株中一般无Lon基因。malBmalB区域包含malEFG 和malK lamB malM基因。Δ (mal 表示该区域的大部分或全部基因缺失,因此不能表达麦芽糖结合蛋白(MalE)。mcrA,mcrBC能影响甲基化胞嘧啶特异性限制系统。某些带有甲基化胞嘧啶的DNA序列能被Mcr+破坏(切割)。 dcm-修饰过的DNA 不受Mcr+影响。Δ(mcrC-mrr)缺失以下六种基因: mcrC-mcrB-hsdS-hsdM-hsdR-mrr; mcrA随e14丢失。 见E. coli K12。mrr需要胞嘧啶或腺嘌呤甲基化功能的限制系统被缺失。然而, dam- , dcm-或 EcoK I修饰的 DNA 不受Mrr+影响。依赖胞嘧啶甲基化而发挥的活性也称为McrF (3)。 见E. coli K12。Prc见tsp。recA缺失了同源重组功能;特别适用于含有同向重复>50 bp的序列。recB,recC缺失了核酸外切酶V的核酸外切酶活性和重组活性。recB recC 菌株(sbcB- 或sbcA-)中的同源重组明显减少。反向重复序列在recB recC菌株中的稳定性也增强,特别是同时也为sbcB sbcC型时。另外,质粒复制可能有所变化。recD缺失了核酸外切酶V的外切酶活性,但重组活性增强。λ基因中的反向重复序列能在recD 菌株中复制传播。另外,质粒复制可能有所变化。recF去除了质粒之间的同源重组功能。recJ去除了质粒之间的同源重组功能。rpoH(也称为htpR) 除lon基因型外,这个热休克转录因子的缺失也使一些应激诱导性蛋白酶不能表达。从而使高温下在rpoHam supCts菌株中表达的一些重组蛋白质更稳定。sbcB缺失了核酸外切酶I活性。带有recB recC和sbcB的菌株通常也属于sbcC型。这种四突变体菌株便于重组,而且λ基因中的反向重复序列易于增殖,然而质粒复制可能有所异常。sbcC通常与recB recC sbcB 同时存在。然而仅带有sbcC的菌株便于重组,而且在λ基因和质粒中的反向重复序列均能稳定繁殖。supC(ts)带有热敏感的酪氨酸插入赭石抑制因子ochre (UAA)和琥珀抑制amber (UAG)的菌株。这些菌株中的无义突变仅在低温下被抑制。现称为tyrT。supE带有可插入谷氨酰胺的琥珀(UAG)抑制因子tRNA的菌株;为一些噬菌体载体生长所需。现称为 glnV。supF带有可插入酪氨酸的琥珀 (UAG)抑制因子 tRNA的菌株;为一些S7或S100λ噬菌体(如λgt11)的裂解性生长所需。现称为 tyrT。traD显著减少F因子的自我传递。tsp该缺失去除了一种胞质蛋白酶。此蛋白酶可在细胞裂解后降解分泌型蛋白或胞内高表达蛋白。现称为prc。tyrT见supC, supF.ung缺失了尿嘧啶N-糖基化酶活性。 Ung+菌株无催化尿嘧啶掺入DNA中的功能,产生一个无碱基位点。参见dut。(P1)细胞中带有一个P1前噬菌体。这种菌株表达P1限制系统。(P2)细胞中带有一个P2前噬菌体。可通过Red+ Gam+λ (Spi- selection)进行筛选。(Φ80)细胞中带有人字型前噬菌体Φ80。某些菌株中含有缺陷型Φ80前噬菌体,该前噬菌体中lac M15基因缺失。(Mu)Mu前噬菌体;Mud表示该噬菌体缺陷型。回复谢谢tzd兄的资料,很有用处,感谢。回复有时可以自己搜搜看。
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