目的：观察原代培养的大鼠II型肺泡上皮细胞（AECII）暴露于香烟烟雾提取物（CSE）不同时间凋亡率的变化，以及AECII中Hrd1、内质网应激（ERS）相关因子、ERS诱导性凋亡相关因子的表达变化；观察Hrd1基因沉默/过表达对上述变化的影响；探索Hrd1在COPD关于肺结构细胞凋亡的发病机制中所起的作用。方法：原代及传代培养大鼠AECII；制备CSE；用携带Hrd1干扰序列/编码序列的慢病毒侵染AECII沉默/过表达Hrd1基因；在10%CSE刺激AECII的0h、3h、6h、12h、24h、48h时间点：Hoechst染色检测干预前后细胞凋亡率、Realtime-PCR、Western blot技术检测干预前后Hrd1、PERK、P-PERK、eIF2α、P-eIF2α、IRE1、P-IRE1、ATF6、caspase12、JNK、P-JNK、CHOP的表达；结果：1.传至第3代培养的细胞，其形态、生长特征及生理学特性与原代培养细胞无明显差异。2. Hoechst染色显示：暴露于10%CSE的大鼠AECII其凋亡率随着刺激时间的延长不断升高；敲除Hrd1基因组细胞各时间点凋亡率较野生型明显增加；过表达Hrd1基因组细胞凋亡率较野生型明显降低。3.Westen blot结果显示：10%CSE作用不同时间PERK、eIF2α以及IRE1总蛋白的表达差异无统计学意义（P＞0.5），野生型细胞P-PERK的表达从3h组开始升高，12h达到高峰，后逐渐降低但仍高于对照组水平，P-eIF2α随着CSE暴露时间的延长呈递增趋势；沉默Hrd1基因后，P-PERK的表达从3h组有所升高，6h开始即表达稍降并随着CSE作用时间的延长显著降低，而P-eIF2α蛋白的表达则随着作用时间的延长呈持续下降趋势；过表达Hrd1基因后，P-PERK蛋白的表达随着作用时间的延长不断减少，而P-eIF2α的表达从3h组稍有升高，12h组最高，随后根据CSE作用时间的延长显著降低。野生组P-IRE1的表达随着CSE暴露时间的延长呈递增趋势；沉默组P-IRE1的表达从3h开始逐渐升高，12h达高峰，24h、48h表达均下降；过表达组P-IRE1的表达随着作用时间的延长不断增加。野生组ATF6α的表达随着CSE暴露时间的延长呈递增趋势；沉默组ATF6α蛋白的表达则随着作用时间的延长呈持续下降趋势；过表达组ATF6α的表达从3h开始逐渐降低，6h最低，12h开始表达增加并在24h、48组持续增加。4. Westen blot结果显示：10%CSE作用不同时间总JNK蛋白的表达与对照组相比差异无统计学意义（P＞0.5），P-JNK的表达随着CSE暴露时间的延长呈递增趋势，caspase12的表达从3h组开始升高，12h达到高峰，随后逐渐降低但仍高于对照组水平。CHOP蛋白的表达在野生组随着CSE暴露时间的延长不断增加，在沉默组从3h组开始升高，12h达最高峰，之后随着CSE作用时间的延长逐渐下降但表达始终高于对照组，在过表达组随着CSE作用时间的延长持续升高。结论：1.在适宜的培养条件下，离体培养的第3代AECⅡ能够维持相对稳定的分化表型，可以用于探索在体AECII的凋亡机制。2. CSE能够诱导AECII发生ERS并通过ERS介导细胞凋亡，PEAK/IRE1/ATF6三条跨膜信号通路均参与了CSE诱导的ERS，Caspase12/JNK/CHOP三条ERS凋亡信号通路均参与介导CSE诱导的AECII凋亡。3. Hrd1对CSE诱导的AECII凋亡具有保护作用。
[Objective] To observe the apoptosis rate of primary cultured rats aleolar type IIepithelial cells (AECII) exposed to cigarette smoke extract (CSE) at different time. Toevaluate the expression change of Hrd1，endoplasmic reticulum stress (ERS) relatedfactors and ERS induced apoptosis(ERSIA) related factors of AECII. To observe theimpact of Hrd1gene intervention to the expression levels of factors above in AECIIexposed to CSE. To explore the effect of hrd1in the pathogenesis of COPDconcerning lung structure cell apoptosis.[Methods] Primary and subcultured of AECII; Preparation of CSE;Silence orupregulate Hrd1gene by infect AECII via lentivirus carried interference or encordingsequence.At different times of rat AECII exposed to10%CSE,apoptosis rate weredetected before and after infection by hoechst；Hrd1, PERK, P-PERK, eIF2α, P-eIF2α,IRE1, P-IRE1, ATF6, caspase12, JNK, P-JNK and CHOP expression were assayed atdifferent times of AECII exposed to10%CSE before and after cell infection. ThemRNA expression was measured by Realtime-PCR and protein expression levelsassayed by Western blot technique inspection.[Results]：1. There is no obvious morphologic and physiologic difference between theoriginal generation and the third generation of AECII.2. Hoechst staining shows: apoptosis rate of AECII exposed to10%CSE rising.The apoptosis rate of infected cell increased significantly compared with wild type atevery different time point. The apoptosis rate of infected cells was lower than wildtype cells at corresponding time group.3.Westen blot results showed that the total PERK,eIF2α and IRE1proteinexpression had no statistically significant differences between the control group and the CSE groups(P$$0.5). P-PERK expression beginning to rise from3h group, the12hgroup is peak, then gradually reduced but still higher than the control group, P-eIF2α,P-IRE1and ATF6expression keep increasing with the extension of time exposed toCSE. After successfully knocked down hrd1gene,P-PERK protein expression with alittle increase at3h group then decreased to the bitter end, P-eIF2α and ATF6αprotein expression was a consistent decline With prolonged CSE stimulation, P-IRE1expression gradually began to rise from3h group, the12h group of peak,24h,48hexpress decreased.Under the condition of Hrd1gene upregulated, P-PERK proteinexpression with the role the extension of time was
P-eIF2gradually began to rise from3h group, the12h group of peak,, then according to theextension of CSE effect time s P-IRE1expression incre ATF6express gradually began to reduce from3h group,6h group isminimum,12h group start increasing and hold on in24h and48h groups.4. The total JNK protein expression is similar to PERK while P-JNK and CHOPto P-IRE1,caspase12to P-PERK. After successfully knocked down hrd1gene, CHOPprotein expression from3h group beginning to rise, the12h is highest,with role afterthe extension of time of CSE gradually declined but expression always higher thanthose in the control group. Under the condition of Hrd1gene upregulated, CHOPprotein expression continue to rise by CSE effect.[Conclusion]：1. As supportted with appropriate in vitro culture conditions, the3rd generationAEC Ⅱ is capable to maintain relatively stable diferentiation phenotype, and couldbe used in vitro experiments.2. CSE could induce AECII suffered ERS and apoptosis, PEAK/IRE1/ATF6three transmembrane signal pathways are engaging in the CSE induced ERS,Caspase12/JNK/CHOP three signaling pathways are involved in the AECIIapoptosis induced CSE mediated.3. Hrd1plays an important role in protecting AECII from apoptosis inducedby CSE.
本类论文推荐
本类求购排行
作者：麦洪珍&&年度：2008
作者：魏智民&&年度：2010
作者：裴广胜&&年度：2012
作者：张建玲&&年度：2012
作者：王文俊&&年度：2013
作者：张冰&&年度：2012
作者：李珍&&年度：2013
作者：张平&&年度：2012
作者：雷翠翠&&年度：2012
作者：周凌燕&&年度：2012早期胃腺癌与胃粘膜上皮细胞内β-葡糖醛酸酶免疫电镜比较研究--《临床与实验病理学杂志》1998年01期
早期胃腺癌与胃粘膜上皮细胞内β-葡糖醛酸酶免疫电镜比较研究
【摘要】：目的：早期胃癌与胃粘膜上皮细胞内β－葡糖醛酸酶（β－Ｇ）免疫电镜定位、定量，并进行比较，探索β－Ｇ在两者之间的差异。方法：采用低温包埋、紫外线照射、胶体金标记、免疫电镜技术。结果：β－Ｇ定位于早期胃癌细胞与胃粘膜上皮细胞中的溶酶体与内质网内，早期胃癌细胞中β－Ｇ量多于胃粘膜上皮细胞。结论：结果提示β－Ｇ的增多可能与癌细胞旺盛的机能活动和异常的形态结构有关。
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：R735.2【正文快照】：
早期胃腺癌与胃粘膜上皮细胞内β┐葡糖醛酸酶免疫电镜比较研究１张弘２杨波１于安民摘要目的：早期胃癌与胃粘膜上皮细胞内β－葡糖醛酸酶（β－Ｇ）免疫电镜定位、定量，并进行比较，探索β－Ｇ在两者之间的差异。方法：采用低温包埋、紫外线照射、胶体金标记、免疫电镜技
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式，仅支持PDF格式
【引证文献】
中国期刊全文数据库
杨波,张弘,朱善德,杜晓炬,李顺明,于众,冯新莉,蒲菲菲,康健;[J];世界华人消化杂志;1999年12期
【同被引文献】
中国期刊全文数据库
张弘,温海彦,杨波,于安民,康麟,于光宇;[J];中国医科大学学报;1998年05期
【相似文献】
中国期刊全文数据库
李昌吉;;[J];预防医学情报杂志;1987年02期
王玲;[J];医学临床研究;1989年04期
胡灿辉,王玲;[J];医学临床研究;1991年03期
戴冬秋,陈峻青,任常山,张文范;[J];中国医科大学学报;1991年02期
蔡访勤;;[J];中国微生态学杂志;1992年03期
夏晓东;;[J];国外医学.药学分册;1993年04期
张弘,杨波,于安民;[J];临床与实验病理学杂志;1998年01期
周晓光,杨杰,杨琳琳,吴婕翎;[J];中华儿科杂志;1999年03期
杨春俊;[J];临床与实验病理学杂志;1999年06期
杨波,朱善德,于众,张弘,杜晓炬,康健,蒲菲菲;[J];世界华人消化杂志;1999年05期光面内质网_百度百科
特色百科用户权威合作手机百科 收藏 查看&光面内质网
光面内质网为表面不带有核糖体的内质网为管状结构是细胞内脂类物质进行合成的场所外文名smooth endoplasmic reticulum,存&&&&在各种类型细胞中作&&&&用脂类合成的重要场所对应物质类固醇、糖类等
光面内质网(smooth endoplasmic reticulum, SER)无核糖体附着的内质网称为光面内质网通常为小的膜管和小的膜囊状而非扁平膜囊状广泛存在于各种类型的细胞中包括合成的内分泌腺细胞肌细胞肾细胞等与光面内质网相对应的是粗面内质网 其作用光面内质网是脂类合成的重要场所它往往作为出芽的位点将内质网上合成的蛋白质或脂类转运到合成类固醇
光面内质网多是管泡状仅在某些细胞中很丰富并因含有不同的酸类而功能各异
①类固醇激素的合成在分泌类固醇激素的细胞中光面内质网膜上有合成胆固醇所需的酶系在此合成的胆固醇再转变为类固醇激素
②脂类代谢小肠吸收细胞摄入甘油及甘油一酯在光面内质网上酯化为甘油三酯摄取的脂肪酸也是在光面内质网上被分解或者再度酯化光面内质网还可以参与脂肪酸的去饱和作用
③解毒作用的光面内质网含有参与解毒作用的各种酶系某些外来药物有毒代谢产物及激素等在此经过氧化还原水解或结合等处理成为无毒物质排出体外
贮存与调节
④离于贮存与调节横纹肌细胞中的光面内质网又称其膜上有钙泵可将中的Ca2+泵入贮存起来导致肌细胞松弛在特定因素作用下贮存的Ca2+释出引起肌细胞收缩胃底腺壁细胞的光面内质网有氯泵当分泌时将CIˉ释放参与盐酸的形成光面内质网的功能多种多样即参与糖原的合成又能合成磷脂糖脂以及糖蛋白中的糖成分此外还在甾类的合成中起重要的作用故在合成甾类激素的细胞中特别丰富光面内质网含有脱甲基酶脱羧酶脱氨酶葡糖醛酸酶以及混合功能氧化酶等因而光面内质网能分解甾体能灭活药物和毒物并使其能被排除如肝细胞肠上皮细胞的光面内质网参与脂肪的运输心肌细胞的光面内质网肌浆网则参与心肌的刺激传导
在生理状态下随着细胞功能的升降光面内质网SER的数量也呈现相应改变但亦可出现完全相反的情况例如在某些疾病如淤胆时从形态结构上看肝细胞光面内质网显著增生但其混合功能氧化酶的活性反而下降这实际上是细胞衰竭的表现
肝细胞的光面内质网具有生物转化作用能对一些低分子物质如药物毒品毒物等进行转化解毒并将间接胆红素转化为直接胆红素
许多成瘾药物和嗜好品如巴比妥类吸毒嗜酒等可导致肝细胞光面内质网的增生长期服用口服避孕药安眠药抗糖尿病药等也能导致同样后果在HBsAg阳性肝炎时内光面内质网明显增生在其管道内形成HBsAg.由于光面内质网的大量增生这种肝细胞在光学显微镜下呈毛玻璃外观故有毛玻璃细胞之称并可为地衣红orcein着染
在细胞损伤时光面内质网也可出现小管裂解为小泡或扩大为大泡状在药物及某些芳香族化合物主为致癌剂的影响下光面内质网有时可在胞浆内形成葱皮样层状结构即副核医学教.育网搜集整理可为细胞的适应性反应结构较松或为变性性改变结构致密光面内质网增生
光面内质网增生光面内质网与产生固醇物质解毒激素灭活等功能有关如解毒作用增强内增多肾上腺皮质瘤内滑面内质网也多
肌浆网水肿肌浆网
水肿肌浆网亦属光面内质网与肌肉收缩及钙离子释放回收有关肌细胞缺氧中毒时可出现水肿
新手上路我有疑问投诉建议参考资料 查看为什么光面内质网上不含核糖体，粗面内质网上含有核糖体呢？_百度知道
为什么光面内质网上不含核糖体，粗面内质网上含有核糖体呢？
提问者采纳
···它就这么分的，没核糖体的内质网光溜溜的叫光面，有核糖体的内质网粗粗拉拉，所以叫粗面······总而言之，人是根据内质网的长相才把它们分成光面和粗面的······
其他类似问题
核糖体的相关知识
其他1条回答
下载知道APP
随时随地咨询
出门在外也不愁应激性溃疡大鼠血浆EGF水平和胃上皮细胞凋亡的变化_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
评价文档：
5页¥2.005页¥2.002页¥1.004页¥2.004页¥2.00 4页¥2.004页¥3.002页¥1.002页¥1.003页¥2.00
应激性溃疡大鼠血浆EGF水平和胃上皮细胞凋亡的变化|
把文档贴到Blog、BBS或个人站等：
普通尺寸(450*500pix)
较大尺寸(630*500pix)
你可能喜欢