在western blot中电泳时电泳中溴酚蓝的作用为什么呈红色

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2012-02-10 07:59 标签： 电泳中溴酚蓝的作用
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【求助】western blot 电泳 溴酚蓝弥散
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下面是8%的胶下面是15%的胶 各位大侠，为什么用15%的胶总会出现溴酚蓝弥散的现象，而同时跑的8%的胶就不会出现这种情况，都是80V电压跑的
不知道邀请谁？试试他们
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中药学专业 请问你找到原因了吗？我也遇到同样的问题 15%的试试120V电压
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15%的试试120V电压 我是12%的胶，您是觉得电压太小所以会弥散？
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按照我的经验，跑胶的缓冲液有可能有问题。
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中药学专业
我是12%的胶，您是觉得电压太小所以会弥散？嗯，电压大些会好些
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不知道哦。会不会是溴酚蓝里有杂质颗粒，过滤下会好些？
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感觉是不是，分离胶浓度高，跑的慢，时间长，溴酚蓝就弥散了
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请问你找到原因了吗？我也遇到同样的问题
15%的试试120V电压
15%的应该要用到160或者180吧，我平常12%的120V也会有点弥散
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解决没有楼主，我也出现这种问题
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溴酚蓝都这样蛋白更是惨不忍睹，赶紧120
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关于丁香园western blot 一抗孵育,为什么不可以将一抗和分析的蛋白样品一起先孵育,后page 电泳,这样更节约一抗?
在SDS-PAGE电泳前,一般样品加入上样缓冲液中并煮沸5~10分钟,让蛋白样品变性并带上一定电荷,使蛋白迁移速度只与分子量相关,这样才能将不同的蛋白通过电泳尽量的区分开来.这个过程中,会打断一些分子间的相互作用,包括抗体和蛋白样品间的相互作用,也许是没人这么做的原因.
谢谢，我想也是，不过每次上样前样品都要煮吗？也就是我前面煮过的，在冰箱中放置了2~3后，再次上样，还需煮吗？
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扫描下载二维码sds－page电泳时溴酚兰下有紫红色条带是什么原因？ - 实验交流 - 生物秀
标题: sds－page电泳时溴酚兰下有紫红色条带是什么原因？
摘要: sds－page电泳时溴酚兰下有紫红色条带是什么原因？请教各位：sds－page电泳时溴酚兰下有紫红色条带是什么原因？我和别人一起做，只是加的蛋白样本不一样，怎么别人的没有呢？是不是我的上样缓冲液有问题？还是蛋白变性的问题？ 关键词:[条带 电泳 上样缓冲液]……
请教各位：sds－page电泳时溴酚兰下有紫红色条带是什么原因？我和别人一起做，只是加的蛋白样本不一样，怎么别人的没有呢？是不是我的上样缓冲液有问题？还是蛋白变性的问题？
溴酚兰在酸性条件下颜色是黄色，可能和你样品的ph有关系，你可以稍微点一滴氢氧化钠在里面，就没有关系了，溴芬兰只是指示剂的作用，不加也没有关系。
我也遇到过，据说是什么先导离子，原因说实在的我也不太清楚，只是这并不影响实验结果。刚跑电泳时，我也有类似的想法。
谢谢各位！我现在换用师姐的loading buffer没有紫红色条带出现了。可现在又有个问题是样本跑出来的条带是一条直线，每个孔间的间隔很小似乎看不出来。我用的是5％层积胶，10％分离胶4C过夜再加样。是不是层积胶有问题，还是加样的问题？（每孔20ul上样)
有可能是你上样量太大，还有上样前注意离心。应该与层积胶没有关系。
在浓缩胶时，先导离子是cl离子，随后的是Gly，蛋白质被压在中间，所以有浓缩作用；在进入分离胶之前带压成一条线，这时，Gly开始超过蛋白跑在前头，因此在分离胶蛋白得以扩散分离。你那紫红色可能是pH的原因，你测一下样品中的pH，应保持碱性。
想请教一下，跑sds－page时，蛋白量对电泳结果有什么影响，以前我总以为量越大越好，条带清楚嘛。
这个问题我清楚，其实非常简单，是因为你的溴酚蓝不纯，其中含有红色杂质。除去方法：将溴酚蓝加入少量水中，配制成饱和溶液，然后离心将液体吸除，再加入少量水，重复操作两三次，就可以去掉更易溶于水的紫红色杂质了。这是利用二者的溶解度差异，当然你得损失部分溴酚蓝。不过这个紫红色杂质不影响电泳，完全不用担心。
偶今天跑电泳时溴酚蓝下0.4cm处有一条黄线，很是莫名奇妙？且这次用的6×sds煮样品时产生了大量的沉淀，不知是不是6×sds有问题了。
是不是用的细胞，如果是就是因为培养液里的酚红的缘故
请教一下各位高手.偶今天第一次跑SDS-PAGE很不理想,Marker也没有跑好,可能与我的胶的浓度太低有关,可是染色后样品一条带都没有,想请教一下,细胞裂解后跑胶染色应该是什么带型?会不会我的加样buffer的问题?我的加样Buffer加溴酚兰以后是兰色,这个ph值对吗?对实验的影响大吗?
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电话：021-SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时为什么要在样品中加少许溴酚兰和一定浓度的蔗糖溶液
群群我爱你9毇
溴酚蓝呈蓝色,而蛋白质是白色,在SDS-凝胶中不明显,再次,溴酚蓝的相对分子量比蛋白质(绝大部分)小,电泳时速度比蛋白质稍快,因此可用作指示,当溴酚蓝到达电泳槽底部(可看蓝色调带),则电泳结束.若无溴酚蓝,不好蛋白质电泳到槽底的时间.如果所有的蛋白质都电泳到了底部,还有意义吗?就没有区别出其移动速度(对应于相对分子质量).
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扫描下载二维码western电泳出现尖角
你是不会拔梳子的时候损坏胶了做胶的时候没做好,样品浓度不一样
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