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淘豆网网友近日为您收集整理了关于河北省西瓜枯萎病菌分化和品种抗性鉴定研究分析的文档，希望对您的工作和学习有所帮助。以下是文档介绍：河北农业大学博士学位论文河北省西瓜枯萎病菌分化和品种抗性鉴定研姓名:段会军申请学位级别:博士专业:植物病理学指导教师:马峙英摘要露娠(Citrullus lanatus)是重要粒经济俸物,在农渡生产孛占蠢重要她位。近年来,西瓜枯萎病菌引起的西瓜枯萎病害范阐逐渐扩大,危害目益突出。西瓜零妻萎襄楚枣尖斑镰刀蘧嚣蕊专必型雩l怒豹一秘±黄瘸害,疯蘸生活力极强,霹柱土壤中持续保存10年以上。国内外大量研究和生产实践证明,选育和利用抗瘸鑫耱楚茨渗莲蹑栋萎痿疆经漭窍效魏舞蘸。我国戆疆蹑撬瘸努耱王箨起步较晚,抗病育种的进展与西瓜生产的需求还相藏甚远,主要原因怒研究方法和乎羧裾对落后,有关静基穑磷究,翔尖憨镰刀麓静分位、抗藤簿选、摭浚签定等研究不够系统和深入。本辑究在疆蕊檑萎瘸发生对麓,扶浑就餐主要疆窳耱禳遗嚣采集嚣窳穗菱瘸标样,经室内分离、培养选取具有枯嫠病菌典型特征的46个单孢菌系和来自矫魄静4个菌系俸梵供试麓系,淤50个来源和抗佼不同的谣舔鼯释终为试材,采用传统方法和分子生物学手段相结合的方法,对河北省两瓜枯萎病菌的鉴定、分化、致病髋诱交和品种抗性送行了研究和搽讨。闻时采用AFLP分子标记技术对来囊河北省及北京地隧的10个不问专化烈菌系进行了多态性分析。1.通过对河北省西瓜枯萎病菌的生物学特性观察,及对西瓜、冬瓜、黄瓜、瓠瓜、甜瓜、丝瓜等鉴别辩主的致病性分析,46个分离物被鉴定为尖狍镰刀菌西瓜专化型。2.通过对供试麓系致瘸力测定,溺l￡省两瓜桔萎瘸蓥致病力毒在显著差男,致病力竣强的菌系飚FON31和FON40,致病力最弱的菌系是FONl2。3+蘧过其在荩黪公认撩到毒主SugarBaby、c赵ane蜘nGray和CalhounGray的反应寝明,46个西瓜枯萎病菌系被鉴定为难理小种0号、生理小种l号和生爨枣耪2号。其中囊理小糖0号为8令菌系占17.4%,主要分蠢在郑郄、石家脏、保定、邢台、廊坊地区;生理小种l号占65.2%,为河北省优势小种,分毒在涎≤￡雀翳骞嚣蕊移獯嚣;生理枣耱2号占17。4%,羔要分布在媒是、磊容麂、邢台等地区。毒。对懿稿芦秘接兹舞寒圭熬尖稳镰刀蘩菠忝专诧型(Fusarium oxysporum￡sp.Cucumerinum)、甜瓜专化型(Fusarium oxysporum flsp.melonis)、西瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp+niveum)、冬蘸专纯垄(Fusarium oxysporum￡sp.benincasae)等lO个菌系,制用筛选出的10对选择性引物进行AFLP分析,结果袭贸,强个AFLP类群分溺蔺瑟个专纯撵穗对应,鞠阉一专往蝥逶传帮荣相戳,被划分在同一类群;而不同的类群包括不同的专化烈菌,AFLP技术能够揭示不闷专仡篷之闽的差异。5。用21个引物对50个菌系进行了RAMS分析,共扩增出188个条带,其中多态性带134条,占71%。菌系闯的遗传躐离交化在2,45~8.60之间,平均为5.20,说瞬海稳省蔹瓜秸萎病菌阐源程发不高,遗传分佬较大,群体遗传多样注比较丰富。聚类分析结果表明,河北省西瓜桔婺病菌系被划分为三个类群(RGs),即RGI,RGII,RGIII。其中RGI包括新疆、托京l号生璎小稀在内的共计32个1号擞理小种、6个0学生理小融和3个2号生联小种;RGII包括新疆0号生理小种在内的共计3个0号生理小种;RGIII包括美国2号生理小种在内的袋计6个2号生理小张。该终果说明,基于RAMS划分的类群嗣传统的根据在魑剐寄主上的反应划分的生疆小种之间存在一定程度的对应关系,与菌系的地理泉源无美。6.利用AFLP对50个西瓜枯萎瘸菌系的遗传多样性分析缁栗表明,河北嚣嚣瓜挺萎瘸蘧系熬遗传鼹褰变他在l。4l~14.0之翅,乎均是5.06,说盟河jE省两瓜枯萎病菌群体遗传多样性比较丰富。聚类分析寝明,供试菌系被划分为四拿类群(AGs),嚣AGI,AG珏,AGIIl翔AGIV。冀中AG|包括北塞l号生理小种在内的共计8个l号生理小种和2个0号生理小种;AGII包括新疆0号生爨枣释在悫麓多荽诗4个0弩生理夺转;AGIII镌括美隧2号生理夺耱在蠹黪共诗6个2母生理小釉;AGIV包括30个菌系,其中有1号生理小种24个、0号生骥夸耱3令、2号垒灌夺释3个。该结莱谎臻,基予AFLP划分熬类群潮传统瓣根据在髂别寄主上的反应划分的生理小种之间存在~定程度的对应关系,与黼系静缝疆来源无关。另外,综合RAMS和AFLP标记对供试萤系类群翊分结莱与AFLP划分结果相同。7.稍用漪jE省优势生理小萃牵静代表菌系FONl8,对50个裔藤品稀遂行撬枯萎病性鉴定。鉴定结果表明,在参试的50份材料中高抗材料占24%,中抗材料占34%,轻抗材料占12%,感病材稀占30%。抗痫材瓣主要蘧来鸯燕国的抗瘸品种和含有美国以及日本血统的品矛中。8.利用***磺酸乙酯(EMs)对褥瓜秸蓥病菌FONl8进行诱交处理,确寇95%一99%的致死剂量为0.2--4).4M。经EMS诱变处理蜃,突变菌株不仅在越落形态、颜色、生长速度上发生了变化,而髓致病力也发生了交化,其中高毒株71个占27.3%,弱毒株188个占72。3%,无毒拣1个占0。4%,并刊月AFLP技术对突变的非致病株FON3—3进行了DNA分子鉴定。戳上磅究结暴明确了海jE省疆瓜撼萎瘸鹫为尖斑镰刀越疆嫩专识慰;诞骥了AFLP技术在不同专化攫分类上的威用价值;明确了河北省躐瓜枯萎病菌存农羞致瘸蛙分像秘遗健分他;攥避了致瘫类燮与遗接多棒蛙之耀戆关系;了解了河北省推广品种枯萎病抗性差异;探讨了EMS在话瓜枯萎病荫致病性诱变应麓上靛霹牙缝。关键词:谣瓜;梧萎病菌;致病牲;垒瑾夺释:AFLP;RAMS; EMS;诱交IIDifferentiation of Fusarium oxysporum f.sp.niveum of Hebei andIdentiEcation of Disease Resistance to Fusarium wilt in WatermelonMajor:Plant PathologyPostgraduate:Duan HuijunSupervisor:Prof.Ma ZhiyingAgricultural university ofHebei 071001,P.R.ChinaAbstractWatermelon is animportant cash crop and occupies a significant position inagricultural production system of China.In recent years,watermelon Fusarium wilthas e aIlincreasing threat to watermelon production around the world.Fusarium wilt of watermelon is caused by the fungus Fusarium oxyporum f.sp.niveum,monly spreads from one field to another by infested soil and cansurvive more than 10 years in soil.Highly resistant cultivars are the most effectiveand economical measure bat Fusarium wilt.The country’S advances inbreeding of wilt-resistant varieties are much less than the watermelon productiondemands as result of lack of basic research in pathogenicity differentiation,identification and selection ofresistant varieties,etc.besides old research methods.From 2001 to 2003,the differentiation of disease fungus,mutation forpathogenicity,and varietal resistance were studied and discussed by using 46 isolatesfrom watermelon-growing areas of Hebei and 4 isolates from other p/ace,as well as50 watermelon cultivars from Hebei.Modem biotechnological methods were used bination with traditional approach for the study.1.According to observed characteristics of watermelon wiIt fungus and basedon response to host inoculated by isolates it was obvious that the watermelonFusarium wilt fungus was Fusarium oxyporum f.sp.niveum.2.There was significant difference among isolates from Hebei by identilyingthe pathogenecity.The strongest isolates were FON3 1 and FON40,the weakestisolates Was FONl2 on the pathogenecity.3.The differentiation of physiological races of Fusarium oxyporum f.sp.niveumwas thoroughly identified by the response monly used hosts.The resulstsindieated that 46 isolates from Hebei were fall into 3 races like race 0,race l,race2。which were 8(1 7.4),30(65.2%),and 8(1 7.4),respectively.Race 0 mainly existed inHandan,Shijiazhuang,Baoding,Xingtai,Langfang areas,etc.;the race 1 was thepredominant race and distributed around Hrace 2 covered Baoding,Shijiazhuang,Xingtai areas,etc.;4.AFLP patterns of ten isolates.which were of four cucurbit.infecting formaeInspeciales,were amplified by 1 0 primer pairs.№持n all polymorphic bands were usedfor cluster analysis using the SPSS program,isolates were classified into 4 groups,which were the same formae speciales isolates were grouped into the same group,SOtheir ic baekgroud were similar,at the salTle time,different groups includedifferant forI煎ae speciales isolates,which indicated that AFLP COuld reveal thedi圩erence between different formae speciales.In addition.there were icdifferentiation in the same formae speciales.’5.The ic differentiation of 50 isolates of Fusarium oxysporum f.sp niveumfrom Hebei watermelon growing areas and 4 identified isolates from other regionswas analyzed by RAMS(random amplified mierosatellites)molecular markertechnique。134 polymorphic markers were obtained from the total 188 amplifiedmarkers by 2t primers.Among the isolates the ic distance was from 2.45 to8.60 and the average was 5.20,which proved that the ic diversity of testedisolates were abound.Based on the hierarchical analysis of the molecular markers.50 isolates could be classified into three ic groups:RGI,containing 39 isolates,which were 32 Race 1 from Hebei,Xinjiang and Beijing,3 Race 2 and 6 Race 2;RGII,including 2 isolates from Hebei province and one of Race 0 isolates fromXand RGIII,containing 6 Race 2,among them 5 isolates from Hebeiprovince and one of Race 2 isolates from USA.The results of this study showedthat RAMS groups were generally associated with the physiological races whichwere identified on the response of host to isolates。but there was no relation betweenRAM8 groups and geographic regions of isolates.6.The ic differentiation of 50 isolates of Fusarium oxysporum f.sp niveumfrom watermelon growing areas of Hebei and 4 identified races from other regionswere analyzed by AFLP(Amplification fragment length polymorphisms)molecularmarker technique,l l 57 bands were amplified by 21 primer pairs,389 werepolymorphic markers。Among the isolates the ic distance was from l。4t to 14.0,and the a,zerage was 5。06,they proved there existed abound ic diversity inisolates.Based on the hierarchical analysis of the molecular markers.50 isolatescoud be classified into four ic groups:AGI,which inc!hded 9 isolates fromHebei province and one Race 1 isolate from Beijing area,AGII,including 3 isolates from Hebei province and one Race 0 isolate from XAGIII,5 isolates from Hebei province and one Race 2 isolate from USA;andAGIV,including 30 isolates,which were three Race 0,twenty four Racel and threeRace 2。熊e results of this study showed that AFLP groups were generally associatedwi氆the physiotogicat races which were identified on the response of host to isolates.but there was no relation between AFLP groups and geographic regions of isolates.in addition,the cluster groups,which were classified bination of RAMS andIVAFLP,were the SalTle with AFLP groups.7。Wilt。resistance of 50 watermelon cultivars mad breeding materials wereidentified by FON 18 which was a predominant race in Hebei province.Out oftested50 materials the results showed high resistance level of 24%.moderate resistance of34%,slight resistance of 12%and ptibillty of 30%.Resistant materials mainlycame from USA OF contained some germplasm from USA and Japan。8.FONl 8 isolate WaS mutagenized using EMS,95%lethal dose was confirmedas 0.2~0.4 M and the characteristics such as colony pigmentation,morphology,growth rate of isolates from single spore and pathogenicitywere changed。Forpathogenicity 27.3%of single spores isolates became stronger,33.6%got weakerand O.4%lost.The research results confirmed that watermelon Fusarium wilt fungus fromHebei watermelom growing araes was Fusarium oxyporum f.sp.niveum,and thatAFLP technique could be USed on the classification of diffeconfirmed that there existed pathogenic and ic differentiation:among thedifferent isolates,as well as the relation between pathogenic types and icdiversity,confirmed that cultivars varied in resistance,proved that mutation wasfeasible by EMS mutagens.Key words:WFusarium oxyporum f.sp.PPAFLP;RAMS;EMS;MutationV独创性声明本入声明所黛交的学位论文鬣本人在导师指导下进行的研究工作及鞭得的研究成果。据我所知,除了文中特别加以标注和敬谢的地方外,论文中不包禽其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得迎韭壅些塞堂或其它教育机槐的学锭或迂书聪使用过的材料。与我一同工作的同态对本研究所做的诺褥贡献均已在论文中幸鍪了弱确的说弱并表添了潋意。…一虢%巩签字日期:删年6月I勺曰/关于论文使用授权的说明本学位论文作者完全了解鎏Il盛些塞堂袁关保甓及使用学位论文的烂宛,有较保留并向国家裔关部门(梳梅)遴交论文静复帮件和磁盘,允许论文被查&借)阅。本人授权扭煎盛迪塞堂可戳将论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索,可咀采用影印、缩印或扫描等方法加以保存或编成学位论文。(保密豹学位论文褒鼹密嚣应遵守此按议)糊一虢及锯签字目期: '卅零二月Iq日导师签名酗磁签字日期;沙∥年f月刍}黩河北省西瓜枯萎病菌分化和品种抗性鉴定研究1.1科学问题的提出1前言西瓜具有“夏季水果之王”的美称,其栽培面积与总产量均在世界十大水果之Ntll。西瓜具有很高的营养价值,含有多种营养成分和化学物质。同时,西瓜具有良好的药用价值,在古代医学典籍《本草纲目》、《日用本草》等文中都有西瓜入药的记载。西瓜对于丰富人们的食物结构,发展商品生产,增加收入都有重要意义。西瓜枯萎病又称萎蔫病或蔓割病,是西瓜生产上危害最严重的病害之一【2,31。1889年中国东北就有西瓜枯萎病发生的报道,1924年美国部分地区、1937年我国东北地区的西瓜生产因枯萎病大发生遭到了毁灭性打击【4j。目前该病遍及美国、中国、意大利、以色列、日本和印度等几十个国家【5l。我国南北方西瓜种植区都有不同程度的发生,每年枯萎病发生的面积约为25万hm2,重茬地一般发病率在30%以上,严重地块达80%,甚至造成绝产。近些年来西瓜枯萎病害频频发生,并有蔓延趋势,严重影响了西瓜产量和品质,使农民遭受巨大经济损失【4]。西瓜枯萎病防治十分困难。Armstrong 16】最早报道,西瓜枯萎病是由尖孢镰刀菌西瓜专化型引起的一种土传病害。病菌生活力极强,可在土壤中存活10年以上,主要危害植株的根、茎部,造成整株或部分分支萎蔫,严重者可使整株死亡。采用化学防治可以收到一定的效果,但是成本高、用工多,还存在着环境污染问题,使化学药剂防治不能发挥其应有的效力【7】;应用多年轮作倒茬的农业防治技术,对减少病害传播能够起到一定的作用,但在一些地区土地有限,轮作不易实施博】;嫁接防治效果显著,并在一些西瓜种植区推广,但是嫁接方法费时、费力并且影响西瓜品质;生物防治是比较理想的防治方法,目前只是处于试验阶段未能应用于生产。选育和利用抗病品种是最经济有效的措施。早在19世纪末,美国育种家Orton开创了西瓜抗病育种研究,他以抗西瓜枯萎病为目标,采用可食用的感病品种Eden与不能食用的抗病材料Stock citron杂交,经过11代选择,于1911年育成了第一个抗病品种conqueror,虽因品质较差未能在生产上推广,但仍是一个有价值的抗病资源。在20世纪30年代,美国Iowa州的Porter等人利用这一材料培育出了Iowa King和Iowa Belle等抗病性和商品性都很好的品种[9】,在以后的抗病育种工作中,这些品种又被广泛地作为抗源,先后培育出Klondike,Congo,Fairfax与Jebilee等抗病品种。我国的西瓜抗病育种工作起步较晚,始于20世纪80年代初期,主要进行枯萎病原菌鉴定[9A0]、品种抗病性鉴定【8,11,12,131及抗源材料的筛选等‘141,同时开展了西瓜抗枯萎病的育种工作。到河北农业大举博士学位论文90年代,培臀出,如抗瘸苏密、西农8号和京欣l号等高抗桔葵病品jf中,程疆瓜生产上莛戮了重要戆终援。餐是,靛瘫弯静静遴黢与谣基釜产瓣要求还鞠麓甚远,究其原因,除了起步较晚,研究方法和手段落后以外,遥与一些有关的撼础研究,如尖孢镰刀蔚的分化、抗瘸遗传、抗源筛选、抗性撩定等研究不够系统和深入裔关。综主馥遴,解决努嚣麓嚣藤挠瘸啻耱中存在匏溺遨,卡分蠢鍪要开震瘸藤菌分化和品种资源的抗性艇定研究以殿新的有效的话瓜枯萎病防治工作。t.2研究进鼹针对西瓜枯萎病菌的熬定,前人避行了大量的研究。Booth[强l提出了镰刀菌分类方法,并提出病原菌艇定程序为,首先确定病艨物的种,然后鉴定专化激,最后明确生理小静。种的确定是通过采集搪萎病株的样本,进行瘸原菌的分离帮缝证,逶j璧培养、镜裣、攀豫分离、菇涪养,按照菌落生长遴度、颜琶、分生孢子形态来确定。我园学者王燕华等[16-21】按上述程序鉴定了硝瓜枯萎病瘸原桶美丽组尖獭镰刀菌。尖孢镰刀菌专化型很多,国外学者Owen[22]以黄瓜、两瓜秘甜瓜为材料,月3秘瘸联娟互接静避雩亍研究,成为近代葫芦秘尖憝镰刀蘩专亿型鉴定静奎凄依据。到瓣前为止已确定了戳葫芦科为寄主煞专亿型有七静,即尖孢镰刀菌黄瓜专化型(Fusarium oXysporum f.sp.Cucumerinum)、尖孢镰刀菌甜瓜专化型(Fusarium oxysporum f.sp.me幻nis)、尖孢镰刀黼西瓜专化趔(Fusarium oxysporum￡sp。niveum)、尖懋镰刀萤丝瓜专纯型(Fusarium oxysporumfI sp,luffae)、尖孢镰刀瑟瑟芦专讫垄(Fusarium oxysporum￡sp。lagenariae)、尖孢镰刀菌苦瓜专化型(FusaNum oxysporum f.sp.momordicae)、尖獭镰刀菌冬瓜专化型(Fusarium oxysporum￡sp.benincasae)。其中西瓜专化型除使西瓜严重感瘸磬,还楚蓑瓢、鼹燕轻发惑病,毽对篡德馔试疆魏致瘘缝不襞霞。Booth提凄零纯的依据形悉学对易变的镰刀菌进行分类,有许多豳难,需耍闵物理的、化学的以及生物技术的方法进行鉴定和分类。国内外学者应用DNA的多态性分析技术【23】,营养浆和群[24-29I,阉工酶分拆技术[30,31,32]研究了不同专化型之间的关系,维暴荠不一蘩。世界各园业已开展了对西瓜枯萎瘸菌生理小种的分化研究。Sleeth[33]1934年最早发表了生理小种分化报道,他根据美国7个州23个分离物的致病性差异,认为西瓜专化溅可能有不潮的病原拣系存在。Rerd[34]鉴定了99份疆瓜桔萎瘸瘸蘸分离兹,势将其癌入嚣个羧病枣静,这一论点竣黻惹学者Cf《l湖,Cirullt弱j,Nezterp”证蜜。1972年Cirull首次将澈病性不同的分离物命名为不同的生理小种0和小种1。1976年Nezter[”J报道,以色列和希腊存在着第三个小种,并命褒为,l、嵇2。髓惹的几年悫,Martyn[3sl在美国的戆炎萨巅、Bruton[39]在镶克皴赞骂发现有2弩小种存在。瓣前,国际上公认静尖孢镰刀菌西瓜专彳乏墅生理,l、年中有三个,即0号生理小种、l号生理小种和2号生域小种。我国对西瓜枯萎瘸缴河北省西瓜枯葵病菌分化弹【1品种抗性鉴定研究理小种分优也有许多报道,其研究结果与圈外的站果不完全一致。张*乎娜}对我瓣磷瓜秸萎瘸蓠生理,j、;f孛分亿情况首先研究掇道,箕研究结果憝将生理小种2学的病蔬分离物又区分秀2个缱,对箕确讶妇满商待避一多研究。墨涪波、薹鸡“1]对寒巍全黧八省枣、自浚嚣豹嚣及撼萎瘸lO个分离物避程了袋理小秘分化职究,初步划分为0,l,2,3共4个生理,J、葶孛。顾卫红、玉燕华”讲嚣定了上海郊区lO个分离物的致瘸性,结栗发糯上海地区的西瓜樯赘病病原菌也存在着生理分化,其划分的嫩理小种岛Nezter和Martyn替区分的生理小稀宥惹异,特鬟是2号生理,j、韩宠金不溺--7:Ne教er霸Martyn嚣鉴定熬2擘生理枣耪。髑题珍、藤国斌郴j对北京瓣嚣蕊撼萎瘸键系进行了裳理,l、耪分化辑究,结果袋骥,北哀地区疆瓜糖萎瘸藏探均系同一生理小静即l号生理小种。纛冬梅畔j锩对新疆酉瓜枯嫠瘸菌分化进行了研究,发现也存在小种分化,主鼹以1号生璁小种为主;骂立新等秘5】穰据谣瓜秸葵病蓠分离物在国绋鍪潮寄主上静爱应,将融东嚣鬣辖萎瘸莲麓分梵2个不嗣麓类型,类鍪l致瘸力孛譬,类翌2致病力强玟分蠢予少数老蕊嚣。关予生理夺静静划分方法,1972年Cirullit36j按照基因对蕊因慧异关系,最早提出区分随瓜枯萎瘸瘸原菌生理小种鉴别寄激,Nezter[”J和Martyn[那】也基本上采阕这魑鍪掰寄主采区分生理小稀。现在,圈际公认西瓜枯萎病生理小耱签嗣寄蔓有Sugar Baby,窀对耩蠢生纛小辨均表现为感疯;Charleston Gray抗生理小耱0,感生遴枣糖l秘黧理,l、耱2;Calhoun Gray捷生理夺耪0、璧理小转l,感生理小种2;P1296341抗生理小种2t381。传统的生理小神划分及致病性研究主要以病麓对特定寄主的敬病力强弱彳乍为依据,所以由于病菌自身的变异及环境因子、寄主年龄、按释黧、接释方法静的影桷,使试验绪聚不一致或不准确,所馥佼依靠传统的致病力差辩来研究病菌生程,j、稀分亿是不够鹣。隧豢分予标识技零的发最,DNA多态性的研究被广泛用予生物的分类鉴定和綦因分秽亍比较,在系绕学研究方蕊也形成了形态学分类釉鉴定的燕要辅助措施。露前和用分子标记技术柬研究病原菌种群遗传结构蟊箍受到重视,特别是RAPD[46-56,57]、RFLP[58‘酩]ISSR[64]、AFLP指纹陋73lRe.PCR[74,75,76l和SSR[77,78】等分予标撼。赘羚,嗣工黪分罄辛l挣i、营养亲耱群[80,81j遣鬻常成矮子尖逡镰刀菠遗砖分枣厅。远20多年来,应雳DNA多态性技术分橇尖掇镰刀蘩生理小秘鲍投道很多,懊是研究结累不一致,肖的研究结暴认为DNA多态性与镰刀菌小种之间没有对成关系【46,4丌,也有不少研究结果表明DNA多态性与失孢镰刀菌小种舆有褶关往iaz,s3]。RAMS憝Zietkiewicz等拶4j1994年涯实戆~糖遽过微量藿2。4令碱蒸弓l甥测定动植物遗转变黪熬辑方法。由予Zietkiewicz等没枣赋予该技术的麓单名称,所以Hantula等滞&提出了以酋字母RAMS简称该技术。RAMS是以PCR为基础,用禽有微卫艇序捌的弓f耪在5’端进行简并镝怒,它的特点将徽卫鬃分析静饶熹与RAID分耩豹普遍往缝合越来,重复後离。祷裂奁瘸潦真菌矫究方蕊,RAMS魄RAPD霹产生逡多瓣特异憋标记,冀慕方嚣熊硪蠢{}常少,在嚣外应用该标记对Gremmeniella abietina、Claviceps afrieana蹲[86,87,88煽原菌进行了研播放器加载中，请稍候...
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西瓜叶子有哪些病
　　1、西瓜细菌性叶斑病又称西瓜细菌性角斑病。此病全生育期均可发生，叶片、茎蔓和瓜果都可受害。主要在开花座果期至采收盛期发病最重。苗期染病，子叶上产生褐色圆形至多角形病斑，真叶沿叶缘呈黄褐至黑褐色坏死干枯，最后瓜苗呈褐色枯死。成株染病，叶片上初生水浸状半透明小点，以后扩大成浅黄色斑，边缘具有黄绿色晕环，最后病斑中央变褐或呈灰白色破裂穿孔，湿度高时叶背溢出乳白色菌液。茎蔓染病呈油渍状暗绿色，以后龟裂，溢出白色菌脓。瓜果染病，初出现油渍状黄绿色小点，逐渐变成近圆形红褐至暗褐色坏死斑，边缘黄绿色油渍状，随病害发展病部凹陷龟裂呈灰褐色，空气潮湿时病部可溢出锈色菌脓。　　2、西瓜叶枯病。主要危害叶片，亦可危害茎蔓和果实，幼苗子叶受害；多在叶缘发生，初为水渍状小点，后扩大成褐色水渍状，圆形或半圆形斑，在高湿条件下，可危害整个子叶，使之枯萎。真叶受害，多发生在叶缘或叶脉间，初为水渍状小点，在高湿下迅速合并，渗透，使叶片失水青枯。高温干燥天气，则形成直径2－3毫米的圆形褐斑，天气潮湿时，可合并成大褐斑，病斑变薄，严重时引起叶枯。茎蔓受害，产生椭圆形或梭形、微凹陷的浅褐色斑，果实受害时，产生周围略隆起的圆形凹陷暗褐色斑，严重时，引起果实腐烂。潮湿时各受害部位均可长出黑色霉状物。　　3、西瓜病毒病。西瓜病毒病，俗称小叶病、花叶病，全国各地区均有发生，北方瓜区以花叶型病毒病为主，南方瓜区蕨叶型病毒病发生较普遍，尤以秋西瓜受害最重。危害程度的轻重与种子带菌率和蚜虫发生数量密切相关。西瓜受害后，叶片变小，生长缓慢，植株矮化，花器发育不良，严重的不能座果，或座果后发育不良，畸形，果小，产量低，品质差，失去商品价值。
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你的西瓜怎么了
在田间主要为害瓜类幼苗和十字花科蔬菜幼芽、嫩根及草莓等浆果。喜食油菜、芥菜、小白菜、番茄、黄瓜、南瓜、瓠瓜、大豆、豇豆、苋菜、空心菜、莴苣等叶片及食用菌等。
为害特点 为害幼芽、嫩根造成缺苗断垄，为害草莓时把浆果吃成孔洞；瓜类幼苗绿色部分受害后常不生蔓。对生产造成一定影响。
形态特征 成虫体长10一14mm，体宽5—6。5mm，长椭圆形，共13节，灰褐色，头部具1对线状触角；胸部8节，各节具1对足，腹部具7对腹足，尾节末端为两个片状突起。雌成虫体背暗褐色，隐约可见黄褐色云状纹，每节后缘具白边，雄虫较青黑。卵近球形至卵形，黄褐色。初孵幼虫白色，半透明，长约1．3一1．5mm，宽0．5一0.8mm，后逐渐变深，形态与成虫近似，仅大小、体色不同。
生活习性 该虫胎生繁殖，离开母体即...
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