[转载]鳞翅目用药大全
新型杀虫剂
茚虫威国际通用名称：indoxacarb茚虫威是美国杜邦公司(E.I.du Pont de
Nemours and Company)新近开发生产的一种杀虫剂。可有效防治粮、棉、果、蔬等作物上的多种害虫。
　　商品名凯恩、通用名称 茚虫威 indoxacarb
其他名称安打(Avatar) 制剂 30％全垒打水分散粒剂、15％安打悬浮剂 理化性质
15％安打悬浮剂为白色液体，密度1.039，常温下贮存稳定，保质期为2年作用机理：全垒打通过阻断昆虫神经细胞内的钠离子通道，使神经细胞丧失功能全垒打具有触杀和胃毒作用，对各龄期幼虫都有效。药剂通过接触和取食进入昆虫体内，0-4小时内昆虫即停止取食，随即被麻痹，昆虫的协调能力会下降(可导致幼虫从作物上落下)，一般在药后24-60小时内死亡。
康宽有效成分：20%氯虫苯甲酰胺产品性能：杜邦公司研制本品为酰胺类新型内吸杀虫剂，具有独特的作用机理，胃毒为主，兼具触杀，对鳞翅目害虫特效。兼具高渗透性、高传导性、高化学稳定性、高杀虫活性和导致害虫立即停止取食等作用特点作用机理：通过高效激活昆虫鱼尼丁（肌肉）受体。过度释放细胞内钙库中的钙离子，导致昆虫瘫痪死亡,对鳞翅目害虫的幼虫活性高，杀虫谱广，持效性好。根据目前的试验结果对靶标害虫的活性比其它产品高出10－100倍.并且可以导致某些鳞翅目昆虫交配过程紊乱，研究证明其能降低多种夜蛾科害虫的产卵率
垄歌有效成分：20%氟虫双酰胺生产企业：日本农药株式会社作用机制与康宽一样。
福戈40%氯虫·噻虫嗪防治对象：可高效防治水稻螟虫、稻纵卷叶螟、稻飞虱、稻象甲等多种害虫
艾法迪是巴斯夫在今年隆重上市的一个重量级产品，成份为24%氰氟虫腙SC&&&&&&
这个产品和凯恩是称为钠离子通道阻碍剂。昆虫运动，比如要吃东西，它必须由中枢神经发出指令，传到运动神经，运动神经再通过肌肉运动产生象张嘴，咀嚼等动作。而昆虫中的钠离子是中枢神经和外围神经传递信号必须依靠的物质，钠离子通过
“ 钠离子通道 ”
将中枢神经的信号传递给运动神经，现在凯恩和艾法迪这些药剂把这个通道给阻碍了，钠离子就通不过去，中枢神经的信号也就传不到运动神经上去，就不能指挥昆虫运动了。这样昆虫就处于瘫痪状态，不仅不能活动，嘴巴也不能动，最后在又闷热又饥渴的情况下活活饿死。这个就是这类药剂的作用机理。（菊酯类农药作用类似，不过不是阻碍钠离子通道，而是将其长期打开引起反复触发而使神经传递不正常
苯基吡唑类杀虫剂
氟虫腈（Fipronil）商品名称锐劲特(Regent)。氟虫腈是一种苯基吡唑类杀虫剂，杀虫谱广，对害虫以胃毒作用为主，兼有触杀和一定的内吸作用，其杀虫机制在于阻断昆虫γ-氨基丁酸和谷氨酸介导的氯离子通道,从而造成昆虫中枢神经系统过度兴奋。
　　因此对蚜虫、叶蝉、飞虱、鳞翅目幼虫、蝇类和鞘翅目等重要害虫有很高的杀虫活性，对作物无药害。该药剂可施于土壤，也可叶面喷雾。施于土壤能有效地防治玉米根叶甲、金针虫和地老虎。叶面喷洒时，对小菜蛾、菜粉蝶、稻蓟马等均有高水平防效，且持效期长　锐劲特是一种对许多种类害虫都具有杰出防效的广谱性杀虫剂，它对、鳞翅目、、鞘翅目等害虫以及对环戊二烯类、类、类杀虫剂已产生抗药性的害虫都具有极高的敏感性。
丁烯氟虫腈&&丁烯氟虫腈该化合物是由大连瑞泽农药股份有限公司创制的苯基吡唑类杀虫剂。化学名称：5-(N-2-甲基-2-丙烯基)氨基-1-(2,6-二氯-4-三氟甲基苯基)-4-三氟甲基亚磺酰基吡唑-3-腈。丁烯氟虫腈对菜青虫、小菜蛾、螟虫、粘虫、褐飞虱、叶甲等多种害虫具有较高的活性，特别是对水稻、蔬菜害虫的活性显现了与锐劲特同等的效力，而且对鱼低毒。
氟铃脲属，是几丁质合成抑制剂，具有很高的杀虫和杀卵活性，而且速效，尤其防治棉铃虫。用于棉花、马铃薯及果树防治多种鞘翅目、双翅目、同翅目昆虫。①对食叶害虫应在低龄幼虫期施药。钻蛀性害虫应在产卵盛期、卵孵化盛期施药。该药剂无内吸性和渗透性，喷药要均匀、周密。
　　②不能与碱性农药混用。但可与其他杀虫剂混合使用，其防治效果更好。
　　③对鱼类、家蚕毒性大，要特别小心。
杀铃脲　杀铃脲系列产品是一种昆虫几丁质合成抑制剂，它是苯甲酰脲类的昆虫生长调节剂。它对昆虫主要是胃毒作用，有一定的触杀作用，但无内吸作用，有良好的杀卵作用。杀铃脲属低毒杀虫剂，原药对鼠急性口服LD50≥5000mg/kg，对兔眼粘膜和皮肤无明显刺激作用。试验结果表明，在动物体外无明显的畜积毒性，未见致癌、致畸、致突变作用。本品主要用于防治金纹细蛾、菜青虫、小菜蛾、小麦粘虫、松毛虫等鳞翅目和鞘翅目害虫，防治效果均达到90%以上，并且药效期可达30天，对鸟类、鱼类、蜜蜂等无毒，不破坏生态平衡。产品特点　　杀铃脲属苯甲酰脲类的昆虫生长调节剂。它能抑制昆虫几丁质合成酶的活性，阻碍几丁质合成，即阻碍新表皮的形成，使昆虫的蜕皮化蛹受阻，活动减缓，取食减少，甚至。主要以胃毒为主，兼有一定的触杀作用，对绝大多数动物和人类无毒害作用，且能被微生物所分解，成为当前调节剂类农药的主要品种。
大环内酯类
甲维盐全称英文名称为Proclaim○R(banleptm)甲维盐可以增强神经质如谷氨酸和γ一氨基丁酸(GABA)的作用，从而使大量氯离子进入神经细胞，使细胞功能丧失，扰乱神经传导，幼虫在接触后马上停止进食，发生不可逆转的麻痹，在3-4天内达到最高致死率。由于它和土壤结合紧密、不淋溶，在环境中也不积累，可以通过Translaminar运动转移，极易被作物吸收并渗透到表皮，使施药作物有长期残效，在10天以上又出现第二个杀虫致死率高峰，同时很少受环境因素如风、雨等影响
多杀霉素又名多杀菌素(Spinosad)是在刺糖多胞菌(Saccharopolyspora
spinosa)发酵液中提取的一种大环内酯类无公害高效生物杀虫剂它的作用机理被认为是烟酸乙酰胆碱受体的作用体，可以持续激活靶标昆虫乙酰胆碱烟碱型受体，但是其结合位点不同于烟碱和吡虫啉。多杀菌素也可以影响GABA受体，但作用机制不清。可使害虫迅速麻痹、瘫痪，最后导致死亡。其杀虫速度可与化学农药相媲美。安全性高，且与目前常用杀虫剂无交互抗性为低毒、高效、低残留的生物杀虫剂，既有高效的杀虫性能，又有对有益虫和哺乳动物安全的特性，最适合无公害蔬菜、水果生产应用。是一种低毒、高效、广谱的杀虫剂对害虫具有快速的触杀和胃毒作用，对叶片有较强的渗透作用，可杀死表皮下的害虫，残效期较长，对一些害虫具有一定的杀卵作用。无内吸作用。能有效的防治鳞翅目、双翅目和缨翅目害虫，也能很好的防治鞘翅目和直翅目中某些大量取食叶片的害虫种类，对刺吸式害虫和螨类的防治效果较差。对捕食性天敌昆虫比较安全，因杀虫作用机制独特，目前尚未发现与其他杀虫剂存在交互抗药性的报道。对植物安全无药害。适合于蔬菜、果树、园艺、农作物上使用。杀虫效果受下雨影响较小。
特异性昆虫生长调节剂
灭幼脲商品名称：扑蛾丹、蛾杀灵、劲杀幼灭幼脲属苯甲酰脲类昆虫几丁质合成抑制剂，为昆虫激素类农药。通过抑制昆虫表皮几丁质合成酶和尿核苷辅酶的活性，来抑制昆虫几丁质合成从而导致昆虫不能正常蜕皮而死亡。影响卵的呼吸代谢及胚胎发育过程中的DNA和蛋白质代谢，使卵内幼虫缺乏几丁质而不能孵化或孵化后随即死亡；在幼虫期施用，使害虫新表皮形成受阻，延缓发育，或缺乏硬度，不能正常蜕皮而导致死亡或形成畸形蛹死亡。对变态昆虫，特别是鳞翅目幼虫表现为很好的杀虫活性
定虫隆又名抑太保、7899　定虫隆是一种新型广谱性杀虫剂，以胃毒作用为主，兼有触杀作用，无内吸作用。对害虫药效高，但药效较慢，一般5-7天后发生药效。对有机磷、拟除虫菊脂类、氨基甲酸脂类等农药产生抗性的害虫有良好的防效。主要剂型
&虫酰肼 英文通用名
tebufenozide 商品名：，Confir，Mimic
　：虫酰肼是非甾族新型昆虫生长调节剂，是最新研发的昆虫激素类杀虫剂。虫酰肼杀虫活性高，选择性强，对所有鳞翅目幼虫均有效，对抗性害虫棉铃虫、菜青虫、小菜蛾、甜菜夜蛾等有特效。并有极强的杀卵活性，对非靶标生物更安全。虫酰肼对眼睛和皮肤无刺激性，对高等动物无致畸、致癌、致突变作用，对哺乳动物、鸟类、天敌均十分安全
微生物杀虫剂【细菌】
苏云金杆菌Bacillus thuringiensis
苏云金杆菌又称苏云金芽胞杆菌，为了方便都将B.T.写成BT或Bt，故Bt即苏云金杆菌的简称。　当害虫蚕食了伴孢晶体和芽孢之后，在害虫的肠内碱性环境中，伴孢晶体溶解，释放出对鳞翅目幼虫有较强毒杀作用的毒素。这种毒素使幼虫的中肠麻痹，呈现中毒症状，食欲减退，对接触刺激反应失灵，厌食，呕吐，腹泻，行动退缓，身体萎缩或卷曲。一般对作物不再造成危害，经一段发病过程，害虫肠壁破损，毒素进入血液，引起败血症，同时芽孢在消化道内迅速繁殖，加速了害虫的死亡。死亡幼虫身体瘫软，呈黑色。所以，害虫只有把Bt细菌吃到肚子里，再经过一个发病过程，才能死掉，大约48小时方能达到杀灭害虫的目的，不象化学农药作用那么快，但染病后的害虫，上吐下泻，不吃不动，不再危害作物
青虫菌又名蜡螟杆菌二号青虫菌属好气性细菌，其杀虫作用与杀螟杆菌、苏云金杆菌都较相似。但青虫菌的伴孢晶体比杀瞑杆菌小，对不同害虫的毒性也稍有差异。产品为灰白色或淡黄色粉末，杀虫速度较慢，菜青虫取食后，需隔1天才能死亡，残效期7－10天。对人、畜、作物、蜜蜂安全，对天敌无伤害，对家蚕毒性大
核多角体病毒（NPV）：是由蛋白质组成，并包埋了多个病毒粒子。对昆虫的寄生范围较广，可寄生于昆虫的血液、脂肪、器官、表皮等部位细胞的细胞核中，并在细胞核中增殖，而后，侵入健康的细胞中再繁殖，直至昆虫死亡。而且，它还能通过昆虫粪便及死亡再进行传染，以使昆虫群体致死。
颗粒体病毒（GV）：也是蛋白质组成的一种病毒。作用机理和核多角体病毒类似。
质多角体病毒（CPV）：也是由蛋白质组成的病毒杀虫剂。被此病毒侵染的昆虫幼虫的病症与核多角体病毒相仿，但死虫的体壁不易触破
白僵菌白僵菌是一种半知菌类的虫生真菌，具有营养器官--菌丝和繁殖器官--分生孢子，菌丝有横隔有分枝。白僵菌的分布范围很广，从海拔几米至2000多米的高山均发现过白僵菌的存在，白僵菌可以侵入6个目15科200多种昆虫、螨类的虫体内大量繁殖，同时不断产生白僵素（大环脂类毒素）和草酸钙结晶，这些物质可引起昆虫中毒，使体液发现机能发生变化，打乱新陈代谢以致死亡；常见白僵菌共有三种：球孢白僵菌、小球孢白僵菌、卵孢白僵菌。主要通过昆虫表皮接触感染，其次也可经消化道和呼吸道感染。侵染的途径因昆虫的种类、虫态、环境条件等的不同而异
绿僵菌 英文名：Metarhizium
anisopliae其他名称: 黑僵菌 　绿僵菌属、丛梗菌目、丛梗霉科、绿僵菌属，是一种广谱的，在国外应用其防治害虫的面积超过了，防治效果可与白僵菌媲美
微生物菌杀虫剂在20——30度效果好，低于20度不要使用。
以上网友发言只代表其个人观点，不代表新浪网的观点或立场。网站介绍：
中国特种养殖网（）为您提供全国最全面的养殖业加盟,特种养殖项目,养殖业什么最赚钱新闻资讯，中国特种养殖网是全国最大的畜牧交易市场，是全国领先的畜牧电子商务服务营销平台，中国特种养殖网所展示的动物大到骆驼小到蚂蚁等五百多种珍禽特种养殖动物，占地面积三百亩以上；我们为国内养殖户免费提供养殖技术，为投资者提供了创业的条件，为农名工兄弟提供免费的技术指导与投资市场分析；同时我们还为酒店、饭店、农家乐提供动物食材配送等等服务。在这里我们欢迎广大行业内的朋友前来我市场参观，交流，学习。
鳞翅目昆虫有哪些
核心提示：鳞翅目昆包括14万种以上的蛾和蝶，是昆虫纲中的第二个大目。主要特征是口器虹吸式，体、翅密被鳞片和毛，前、后翅一般有中室，下唇须发达&&&&& 鳞翅目昆包括14万种以上的蛾和蝶，是昆虫纲中的第二个大目。主要特征是口器虹吸式，体、翅密被鳞片和毛，前、后翅一般有中室，下唇须发达。全变态。
&&&&& 蛾、蝶类成虫取食花蜜（有的种类不取食），一般不直接为害农作物，且有助于植物的授粉。但有极少数种类，如吸果夜蛾类的喙末端坚实而尖锐，能刺破柑桔、桃、梨等的果皮，吸食果汁，引起落果。生产上有利用成虫需要补充营养的特性，对某些害虫如粘虫、地老虎等以糖醋液诱杀，进行测报或防治。
&&&&& 蝶类多在白天活动。蛾类则多在夜间活动，常有趋光性，在100～200瓦的电灯光或波长3,600～3,650埃的黑光灯下，能诱集大量的蛾类。
&&&&& 蛾、蝶的活动主要是飞翔、觅食、交配和寻找适合的场所产卵。成虫一般有在某些区域或范围内活动的习性，如菜粉蝶喜在十字花科植物上产卵，这是由于该植物含有它所喜爱的芥子油，其活动多在寄主植物分布的区域。但有些害虫种类如粘虫、稻纵卷叶螟，有季节性远距离迁飞的习性。
&&&&& 幼虫期是取食、生长时期，也是鳞翅目昆虫的为害时期，绝大多数种类植食性，为害方式多样：蛀茎的如为害水稻的三化螟、二化螟，为害甘蔗的黄螟、二点螟，为害玉米的玉米螟等；食叶的如为害稻、麦的粘虫，为害蔬菜的菜粉蝶，为害松树的松毛虫等；卷叶或缀叶的如为害水稻的稻纵卷叶螟、稻苞虫（Parnara sp.），为害棉、麻的棉卷叶螟（Sylepta derogata F.）；蛀果的有梨大食心虫、桃小食心虫（Carposina neponensis）、苹小食心虫（Grapholitha inopina-ta）、棉铃虫（Heliothis armigera）；有些幼虫潜叶、蠹木、作虫瘿等方式为害各种植物。还有为害贮粮的如麦蛾、米蛾等；为害毛织品的如谷蛾科的带壳衣蛾（Tinea pellionellaL.）；大蜡蛾（Galleria mellonella）取食蜂巢蜡，是养蜂业的大敌；夜蛾科的白虫（Eublemma amabilus）和遮颜蛾科的黑虫（Holcocera pulverer）捕食紫胶虫，是紫胶生产上的重要害虫。鳞翅目昆虫中有一些有益种类，如家蚕、柞蚕、蓖麻蚕等，幼虫吐丝作茧，用于纺织丝绸，有很大的经济价值。虫草蝙蝠蛾（Hepialus armoricanus）幼虫由于被真菌（Cordyceps sinensis）寄生而形成的冬虫夏草（简称虫草，产于我国云南、四川一带），是名贵的中药。几种鳞翅目昆虫几丁质酶基因的克隆与表达研究--《东北农业大学》2004年博士论文
几种鳞翅目昆虫几丁质酶基因的克隆与表达研究
【摘要】：昆虫几丁质酶cDNA序列可以转化植物或者插入到病原微生物(如Bt或杆状病毒)中并使之表达,增加杀虫效果。对昆虫几丁质酶基因cDNA序列的克隆、表达等一系列分子生物学研究将为生产这类生物杀虫剂奠定重要的理论基础,为害虫的生物防治开辟新的途径。
甜菜夜蛾、粘虫、玉米螟、二化螟四种昆虫均是重要的农业害虫,每年给农业生产都造成一定程度的损失,对这些害虫的生物防治宜采用以苏云金芽孢杆菌为主的多种生物杀虫剂的综合使用的策略。由于昆虫几丁质酶所具有的潜在杀虫活性,可以利用上述昆虫的几丁质酶与苏云金芽孢杆菌的协同杀虫作用来有针对性地增强对甜菜夜蛾、粘虫、玉米螟和二化螟的杀虫效果,并且希望通过此途径有效地避免这些害虫抗性的产生。
本实验从预蛹期甜菜夜蛾、粘虫、玉米螟、二化螟四种昆虫体内各分离克隆了一条几丁质酶基因序列,序列长度分别为、个碱基,分别包括一个、个碱基的的开放读码框,编码557、558、553、552个氨基酸,分子量分别为62.6、62.8、61.8和61.4kDa,等电点分别为5.2,5.05,5.28和5.17。
由四种害虫几丁质酶核苷酸序列推导的氨基酸序列为多结构域序列,包括N-端的活性催化区(Catalytic domain),C-端富含半胱氨酸的几丁质结合区(Chitin-binding domain 2)。序列比对表明,在催化区中含有两个高度保守的区域,一个是KFMVAVGGWAEGS,另一个是YDFDGLDLDWEYP,而第二个高度保守区是酶的催化活性中心区。在催化区和几丁质结合区中间有一个被称为Linker的富含脯氨酸、丝氨酸、苏氨酸和谷氨酸的区域(PEST rich domain)。除了几丁质酶催化区、几丁质结合区和Linker区外,在克隆的昆虫几丁质酶N-端成熟蛋白的前端还都含有一个疏水性、大约在20个氨基酸左右的信号肽。
昆虫几丁质酶是一种糖蛋白,糖基化对酶的活化是至关重要的。Linker区一般要经过O-位的高度糖基化修饰,而在催化区也会有部分N-位糖基化修饰。利用NetOGlyc 2.0软件发现在甜菜夜蛾几丁质酶氨基酸序列中有23个O-位糖基化位点,粘虫几丁质酶氨基酸序列中有21个O-位糖基化位点,而玉米螟和二化螟几丁质酶氨基酸序列中均具有29个O-位糖基化位点。N-位糖基化修饰的位点数目也是不一样的,甜菜夜蛾、粘虫和玉米螟3种昆虫几丁质酶氨基酸序列中存在2个N-位糖基化位点,二化螟几丁质酶氨基酸序列中存在3个N-位糖基化位点。除O-位和N-位糖基化位点以外,昆虫几丁质酶氨基酸序列中还存在多个硫酸化和磷酸化位点,这些位点可以通过Expasy分子生物学服务器上的Prosite软件找到,它们的存在对于蛋白功能的发挥均起到一定的作用。
通过NCBI上的Blast软件比较分析,甜菜夜蛾几丁质酶氨基酸序列与烟草天蛾几丁质酶氨基酸序列同源性达到81%,与棉铃虫几丁质酶氨基酸序列同源性达到87%,与斜纹夜蛾几丁质酶氨基酸序列同源性达到96%,与美国白蛾几丁质酶氨基酸序列同源性达到83%,与其他鳞翅目昆虫几丁质酶氨基酸序列同源性达到也达到75%以上。其他3种昆虫几丁质酶氨基酸序列与已经发表的昆虫几丁质酶氨基酸序列进行比较也得到了类似结果,说
【关键词】：
【学位授予单位】：东北农业大学【学位级别】：博士【学位授予年份】：2004【分类号】：Q78【目录】：
Abstract15-17
1 引言17-31
1．1 昆虫几丁质酶cDNA的克隆方法17-18
1．1．1 利用标记的探针筛选cDNA文库18
1．1．2 通过对文库的随机测序克隆昆虫的几丁质酶基因18
1．1．3 通过cDNA末端快速扩增技术(RACE)克隆昆虫几丁质酶基因18
1．2 目前已克隆的昆虫几丁质酶基因种类18-19
1．3 昆虫几丁质酶基因氨基酸同源性分析19-22
1．4 昆虫几丁质酶氨基酸结构特点22-23
1．5 昆虫几丁质酶的基因结构特点23-24
1．6 昆虫几丁质酶的基因的拷贝数研究24
1．7 昆虫体内几丁质酶基因的时空表达24-26
1．7．1 昆虫几丁质酶基因的不同发育阶段表达25
1．7．2 昆虫几丁质酶基因的组织特异性表达25-26
1．8 昆虫几丁质酶基因的体外表达及活性测定26-27
1．8．1 昆虫几丁质酶基因的表达系统26
1．8．2 昆虫几丁质酶酶活性测定方法26-27
1．8．3 不同pH、不同温度对昆虫几丁质酶活性的影响27
1．9 几丁质酶基因在植物抗虫方面的应用27-29
1．9．1 几丁质酶和Bt基因的协同作用27-28
1．9．2 昆虫杆状病毒表达系统在几丁质酶抗虫研究中的应用28
1．9．3 昆虫几丁质酶在作物抗虫方面存在的问题28-29
1．10 重要农业害虫-甜菜夜蛾、粘虫、二化螟、玉米螟简介29
1．11 本论文研究的目的与意义29-30
1．12 本研究课题的来源及主要研究内容30-31
2 材料与方法31-61
2．1 材料31-33
2．1．1 菌株与质粒31
2．1．2 分子生物学用酶及试剂盒和各种试剂31-33
2．1．3 培养基33
2．1．4 仪器设备33
2．1．5 试虫来源33
2．2 研究方法33-43
2．2．1 几丁质酶mRNA高峰表达时间的确定34-35
2．2．2 昆虫总 RNA提取35-36
2．2．3 利用RT-PCR扩增保守区之间的cDNA序列36-38
2．2．4 RACE引物设计38-39
2．2．5 3′-RACE的实验步骤39-40
2．2．6 5′-RACE的实验步骤40-42
2．2．7 全长cDNA的获取及其序列分析42-43
2．3 玉米螟中肠cDNA文库的构建43-46
2．3．1 提取玉米螟中肠的RNA43
2．3．2 合成cDNA第一链43
2．3．3 cDNA的LD-PCR扩增43-44
2．3．4 cDNA文库的构建44-45
2．3．5 文库的扩增45-46
2．4 cDNA序列分析46-47
2．4．1 利用Blast软件进行序列相似性检索46
2．4．2 分子质量、碱基组成、碱基分布46
2．4．3 全长cDNA可读框架分析46
2．4．4 对ORF进行限制性酶切分析46
2．4．5 基于核酸序列对齐分析的功能预测46-47
2．5 蛋白质基本性质分析47
2．5．1 疏水性分析47
2．5．2 信号肽分析47
2．6 蛋白质功能预测47-48
2．6．1 通过蛋白质序列同源性分析的蛋白质功能预测48
2．6．2 通过motif、结构位点、结构功能域数据库的蛋白质功能预测48
2．7 蛋白质结构预测48-49
2．7．1 蛋白质二级结构预测48
2．7．2 蛋白质三级结构预测48-49
2．8 昆虫几丁质酶基因在大肠杆菌中的表达研究49-53
2．8．1 几丁质酶基因cDNA序列ORF的PCR反应49
2．8．2 PCR产物酶切反应49
2．8．3 E．coli质粒DNA提取和酶切49-50
2．8．4 大肠杆菌表达载体构建50
2．8．5 几丁质酶基因在大肠杆菌中诱导表达50
2．8．6 SDS-PAGE电泳50-53
2．9 昆虫几丁质酶基因在酵母中的表达研究53-56
2．9．1 毕赤酵母Pichia pastoris表达载体的构建53
2．9．2 转化酵母和抗G418重组菌的筛选53-55
2．9．3 转化子的PCR检测55-56
2．9．4 目的基因在毕赤酵母中的诱导表达56
2．10 CM-chitin-RBV为底物的酶活性测定56-57
2．10．1 包涵体的溶解56
2．10．2 包涵体的分离56
2．10．3 包涵体溶解后的透析复性56-57
2．10．4 酶活性测定57
2．10．5 pH值对几丁质酶活性的影响57
2．10．6 温度对酶活性的影响57
2．10．7 Impact和酵母表达系统表达的几丁质酶活性测定57
2．11 杀虫活性测定57-58
2．11．1 以甜菜夜蛾1龄幼虫为试虫进行杀虫活性测定57-58
2．11．2 以小菜蛾2龄幼虫为试虫进行杀虫活性测定58
2．11．3 以粘虫1龄幼虫为试虫进行杀虫活性测定58
2．12 中肠蛋白水解酶提取液对几丁质酶的消化作用58-59
2．12．1 中肠蛋白水解酶的提取58
2．12．2 蛋白水解酶对几丁质酶的消化58-59
2．13 几丁质酶对昆虫中肠围食膜几丁质的分解作用59
2．13．1 昆虫中肠围食膜的提取59
2．13．2 几丁质酶对围食膜胶体几丁质进行分解作用59
2．14 半定量RT-PCR对几丁质酶基因表达水平研究59-61
2．14．1 总RNA的提取59
2．14．2 cDNA第一链的合成59
2．14．3 cDNA样品的标准化59-60
2．14．4 PCR循环数实验60
2．14．5 半定量RT-PCR反应60-61
3 实验结果61-103
3．1 昆虫几丁质酶 RNA提取时间的确定61-62
3．2 昆虫总RNA的提取62-63
3．2．1 RNA完整性的检测62
3．2．2 纯度及产量检测62-63
3．3 几丁质酶的基因特异性片段的获得及序列分析63
3．4 几丁质酶基因cDNA序列的3′-RACE结果63
3．5 几丁质酶基因cDNA序列的5′-RACE结果63-64
3．6 玉米螟中肠cDNA文库的构建64-65
3．6．1 玉米螟中肠总RNA的提取、RNA完整性、纯度及产量检测64
3．6．2 cDNA的合成64
3．6．3 cDNA文库的大小和质量检测结果64-65
3．6．4 扩增文库的滴度测定65
3．7 几丁质酶基因全长cDNA序列的获得65-76
3．7．1 甜菜夜蛾几丁质酶基因全长cDNA序列及推导的氨基酸序列65-68
3．7．2 粘虫几丁质酶基因全长cDNA序列及推导的氨基酸序列68-70
3．7．3 二化螟几丁质酶基因全长cDNA序列及推导的氨基酸序列70-72
3．7．4 玉米螟几丁质酶基因全长cDNA序列及推导的氨基酸序列72-76
3．8 四种昆虫几丁质酶基因的特征比较76-79
3．8．1 不同昆虫几丁质酶碱基序列组成76
3．8．2 不同昆虫几丁质酶氨基酸序列组成分析76-77
3．8．3 不同种类昆虫几丁质酶推导的氨基酸的组成比较77
3．8．4 不同种类昆虫几丁质酶推导的氨基酸序列二级结构预测77-79
3．9 几种昆虫几丁质酶氨基酸结构域预测79-84
3．9．1 甜菜夜蛾几丁质酶氨基酸结构域预测80
3．9．2 玉米螟几丁质酶氨基酸结构域预测80-81
3．9．3 O-位上的糖基化位点和PEST区预测81-83
3．9．4 CDDV2．01软件进行功能区的搜索83-84
3．10 昆虫几丁质酶氨基酸的疏水性分析84-86
3．11 昆虫几丁质酶的同源性比较和系统进化分析86-92
3．11．1 序列同源性比较86-90
3．11．2 昆虫几丁质酶基因的系统进化分析90-92
3．13 昆虫几丁质酶基因在大肠杆菌中的表达92-94
3．13．1 大肠杆菌重组表达载体的构建和鉴定92-93
3．13．2 昆虫几丁质酶基因在大肠杆菌中的融合表达93-94
3．14 昆虫几丁质酶基因在毕赤酵母中的表达94-95
3．14．1 酵母重组表达载体的构建和鉴定94
3．14．2 重组蛋白在毕赤酵母中的表达94-95
3．15 CM-chitin-RBV为底物的酶活性测定95-97
3．15．1 pET29a载体表达的昆虫几丁质酶活性测定结果95-96
3．15．2 pTYB11表达的昆虫几丁质酶活性测定96-97
3．15．3 毕赤酵母表达的甜菜夜蛾几丁质酶活性测定97
3．16 昆虫几丁质酶杀虫活性测定结果97
3．17 昆虫中肠蛋白水解酶对几丁质酶的消化作用97-99
3．18 几丁质酶对昆虫中肠围食膜几丁质的分解作用99
3．19 几丁质酶基因表达水平研究结果99-103
3．19．1 PCR循环数实验结果99-100
3．19．2 目的基因和内参基因浓度定量结果100-103
4 讨论103-108
4．1 RNA的提取103
4．2 RACE反应中需注意的问题103-104
4．3 cDNA基因文库构建技术问题104-105
4．3．1 构建理想的cDNA文库需要考虑的因素104-105
4．3．2 文库筛选可选择的具体方法105
4．13．3 cDNA文库技术的局限性105
4．4 工程菌生产的蛋白的复性与纯化105-106
4．5 表达的昆虫几丁质酶大小探讨106
4．6 关于半定量RT-PCR方法的探讨106-107
4．7 关于表达的昆虫几丁质酶的杀虫活性探讨107-108
5 结论108-121
致谢121-122
欢迎：、、)
支持CAJ、PDF文件格式
【引证文献】
中国期刊全文数据库
鄢杰明;严善春;曹传旺;;[J];北京林业大学学报;2012年01期
李瑶;范晓军;;[J];应用昆虫学报;2011年05期
张福丽;王志英;王占斌;景天忠;;[J];中国森林病虫;2007年04期
中国硕士学位论文全文数据库
崔全敏;[D];山东农业大学;2008年
李瑶;[D];太原理工大学;2012年
【参考文献】
中国期刊全文数据库
吴青君,张文吉,张友军;[J];昆虫知识;2000年05期
鲁国东,王宗华,郑学勤,谢联辉;[J];农业生物技术学报;1998年03期
欧阳石文,刘江良,冯兰香,赵开军;[J];山地农业生物学报;2001年02期
朱顺义,李文鑫;[J];生物化学与生物物理进展;2000年01期
王维荣,刘爱民,钱志康,黄伟达;[J];生物化学与生物物理进展;2000年04期
,马清钧;[J];中国生物工程杂志;2002年05期
隋少飞,陈松林;[J];生物技术通报;2004年03期
刘欣洁,谭振波;[J];生物技术通报;2004年03期
李红,王孟薇,邵勇,尤纬缔;[J];生物技术通讯;2001年04期
【共引文献】
中国期刊全文数据库
吴丛梅,黄天华,吴德生,谢庆东,徐小虎;[J];癌变.畸变.突变;2003年04期
阮烨,王晓云,谢庆东,黄天华;[J];癌变.畸变.突变;2004年03期
欧阳松应,徐寿水,沈文律,周传香,李春艳,欧阳红生;[J];癌变.畸变.突变;2004年04期
陈传德,吴中亮,陈家堃;[J];癌变.畸变.突变;2005年01期
熊小芳,黄天华,谢庆东,王晓梅,陈桂兰;[J];癌变.畸变.突变;2005年03期
王朝霞;[J];安徽教育学院学报;2002年06期
吕慧贞;张建朋;陈新;刘静;张元湖;;[J];山东农业科学;2007年05期
张秀华;王文锋;;[J];山东农业科学;2009年06期
张学民,王金生;[J];安徽大学学报(自然科学版);2000年04期
史冬燕;程在全;;[J];安徽大学学报(自然科学版);2008年03期
中国重要会议论文全文数据库
黄家强;卜夏;李卓娅;龚非力;;[A];生命科学与生物技术：中国科协第三届青年学术年会论文集[C];1998年
郭昱嵩;王中铎;刘楚吾;陈志明;刘筠;;[A];中国海洋学会2007年学术年会论文集（下册）[C];2007年
樊继德;孔庆国;张梅;于喜艳;;[A];中国园艺学会第七届青年学术讨论会论文集[C];2006年
李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
李俊华;吴少庭;翁亚彪;甘燕;刘洪波;刘茂铃;张仁利;高世同;黄达娜;耿艺介;;[A];全国寄生虫学与热带医学学术研讨会论文集[C];2006年
魏巍;贺淹才;刘爱花;;[A];第三届全国工业催化技术及应用年会论文集[C];2006年
唐小江;马争;黄建勋;黄汉林;李来玉;牛侨;;[A];中国环境诱变剂学会抗诱变剂和抗癌剂专业委员会第三次全国学术会议、中国毒理学会生化与分子毒理专业委员会第五届学术交流会、贵州省环境诱变剂学会成立大会暨首届学术交流会论文集[C];2004年
严家彬;李新辉;吴淑勤;杜合军;;[A];可持续水产养殖——资源、环境、质量——2003水产科技论坛论文集[C];2003年
赵晓瑜;柳伟强;李晓霞;;[A];2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2007年
张志云;张虎生;孙毅;梁爱华;;[A];2004年北方七省市植物学年会论文集[C];2004年
中国博士学位论文全文数据库
张婕;[D];山东农业大学;2010年
张曈;[D];中国海洋大学;2010年
陈云松;[D];中国海洋大学;2010年
郑小坚;[D];苏州大学;2010年
许光辉;[D];黑龙江中医药大学;2010年
梁勇;[D];南开大学;2010年
廖芳;[D];南开大学;2010年
于双妮;[D];北京协和医学院;2008年
韩瑞丽;[D];西北农林科技大学;2010年
张立荣;[D];河北农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库
于宾宾;[D];华中农业大学;2010年
朱晓娟;[D];南京医科大学;2009年
钱静;[D];浙江理工大学;2010年
辛宁;[D];郑州大学;2010年
陆玉成;[D];郑州大学;2010年
吕文兵;[D];郑州大学;2010年
李静;[D];郑州大学;2010年
张燕松;[D];郑州大学;2010年
张磊;[D];郑州大学;2010年
冯玖玲;[D];郑州大学;2010年
【同被引文献】
中国期刊全文数据库
方秀富;胡佳贵;;[J];安徽农学通报;2006年06期
公维松;安传信;;[J];安徽农业科学;2007年34期
范晓军;李瑜;李瑶;李兰松;张朝峰;;[J];安徽农业科学;2010年09期
王宗舜;;[J];动物学杂志;1993年02期
胡春祥;[J];东北林业大学学报;2002年04期
迟德富,苗建才,姜丽,祝长龙,王凤斌,李秀花;[J];东北林业大学学报;1997年05期
杨素梅;张骅;成晓松;胡健;;[J];大麦与谷类科学;2008年01期
张志云,张虎生,孙毅,梁爱华;[J];西北植物学报;2004年08期
李照民,赵小凡,王金星,王家宝,王胜利;[J];动物学研究;2003年02期
王胜得,柳爱平,杨春明;[J];广东化工;2004年05期
中国博士学位论文全文数据库
檀建新;[D];中国农业科学院;2000年
兰亦全;[D];福建农林大学;2004年
中国硕士学位论文全文数据库
王光锋;[D];湖南农业大学;2003年
高兴祥;[D];山东农业大学;2004年
覃伟权;[D];华南热带农业大学;2004年
黄琳瑞;[D];中国农业大学;2005年
【二级引证文献】
中国期刊全文数据库
范晓军;宋志芳;仙笑笑;李瑶;赵秋勇;;[J];基因组学与应用生物学;2013年01期
吴楚;蒋义垡;;[J];科技信息(学术研究);2008年25期
王绥冬;宋志芳;张常;李瑶;范晓军;;[J];科技创新与生产力;2012年07期
李硕;;[J];山东林业科技;2012年04期
仙笑笑;范晓军;赵秋勇;;[J];生物技术;2012年05期
国果;吴建伟;吴沁怡;付萍;张勇;;[J];中国人兽共患病学报;2012年06期
罗华东;严加林;余洋;谭万忠;;[J];中国农业科学;2012年18期
冯宏祖;;[J];中国棉花;2013年03期
中国博士学位论文全文数据库
刘小民;[D];河北农业大学;2011年
中国硕士学位论文全文数据库
金艳冬;[D];福建农林大学;2009年
谢宇飞;[D];福建农林大学;2010年
李瑶;[D];太原理工大学;2012年
【二级参考文献】
中国期刊全文数据库
刘伟华,李文雄,胡尚连,徐香玲,李集临,陈正华,胡赞民;[J];西北植物学报;2003年01期
王维荣，黄伟达，王京端，董雪娣，毕可英，阎承璋;[J];复旦学报(自然科学版);1996年06期
黄伟达,王维荣,王京端,尚诚;[J];中国海洋药物;1997年04期
朱新生,张庭芳,朱玉贤;[J];科学通报;1996年20期
曾艳,赵南明,刘进元;[J];生物工程进展;1997年04期
冯道荣,许新萍,范钦,李宝健,雷财林,凌忠专;[J];作物学报;2001年03期
许明辉,唐祚舜,谭亚玲,田颖川,李成云,张树华,陈正华,田文忠;[J];遗传学报;2003年04期
许明辉,李成云,李进斌,谭学林,田颖川,陈正华,唐祚舜,田文忠;[J];中国水稻科学;2003年04期
忻骅;顾其敏;赵志安;李玉民;;[J];植物生理学通讯;1988年03期
【相似文献】
中国期刊全文数据库
马红霞;刘玉堂;伞治豪;;[J];中国兽医科学;2007年12期
丁淑琴;王强;王淑静;王洁;张焱;;[J];宁夏医科大学学报;2011年08期
余泽华,贾放,徐佳;[J];华中师范大学学报(自然科学版);2003年03期
吾鲁木汗·那孜尔别克;彭清忠;何翠;张磊;严芳;恩特马克·布拉提白;;[J];生物技术通讯;2008年01期
马红霞;丛薇;刘玉堂;伞治豪;;[J];中国预防兽医学报;2008年06期
刘淑集;单超;吴成业;王宗华;王茵;刘智禹;;[J];生物技术通报;2011年01期
黄广明,张曼夫;[J];中国预防兽医学报;2002年04期
赵小珍;张政;景巍;李玉英;王转花;;[J];食品科学;2006年10期
罗阿东;唐源;文明;岳筠;程振涛;;[J];山地农业生物学报;2009年02期
朱佳佳;刘宏鹏;张爱君;丁淑琴;;[J];宁夏医科大学学报;2010年03期
中国重要会议论文全文数据库
丁轲;程安春;汪铭书;朱德康;韩新锋;余波;周登春;;[A];第四届第九次全国学术研讨会暨饲料和动物源食品安全战略论坛论文集（下册）[C];2008年
张上隆;;[A];张上隆果树学文选[C];2006年
冯海华;范君文;赵丽红;成军;邓旭明;岳占碰;;[A];中国畜牧兽医学会动物解剖学及组织胚胎学分会第十四次学术研讨会论文集[C];2006年
白义春;康相涛;孙桂荣;陈其新;黄艳群;韩瑞丽;田亚东;樊博;;[A];中国家禽业——机遇与挑战——第十三次全国家禽学术讨论会论文集[C];2007年
钱越华;李文笙;林浩然;;[A];第五届广东、湖南、江西、湖北四省动物学学术研讨会论文摘要汇编[C];2008年
武晓波;董金皋;;[A];中国植物病理学会2008年学术年会论文集[C];2008年
宋铭忻;路义鑫;孙刚;郑宝亮;;[A];全面建设小康社会：中国科技工作者的历史责任——中国科协2003年学术年会论文集（上）[C];2003年
陈由强;何炜;叶冰莹;陈如凯;;[A];中国植物生理学会第十次会员代表大会暨全国学术年会论文摘要汇编[C];2009年
黄欣梅;宋小凯;徐立新;严若峰;李祥瑞;;[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
张丽艳;刘光远;田占成;谢俊仁;龚真莉;刘建刚;;[A];中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第六次代表大会暨第十次学术研讨会论文集[C];2009年
中国重要报纸全文数据库
;[N];厂长经理日报;2001年
;[N];中国经营报;2002年
赵伟;[N];中国质量报;2001年
鲁钟鸣;[N];新华每日电讯;2001年
侯朝晖;[N];厂长经理日报;2001年
马莹;[N];中国贸易报;2001年
姚备;[N];中国证券报;2000年
经济学家温铁军○本报记者杨晓平;[N];中华工商时报;2002年
姚福泰;[N];中国汽车报;2002年
陈晓红;[N];中国艺术报;2000年
中国博士学位论文全文数据库
樊东;[D];东北农业大学;2004年
张焱如;[D];内蒙古农业大学;2005年
李敏;[D];中国农业大学;2005年
张运雄;[D];中国农业科学院;2006年
黄晋玲;[D];中国农业科学院;2006年
黄俊琼;[D];苏州大学;2007年
任鄄胜;[D];四川农业大学;2008年
黄志立;[D];华南理工大学;2001年
王严;[D];大连理工大学;2007年
喻麟;[D];四川大学;2007年
中国硕士学位论文全文数据库
严慧娟;[D];四川农业大学;2009年
孙树民;[D];吉林大学;2006年
刘永斌;[D];内蒙古农业大学;2005年
彭博;[D];华中农业大学;2005年
杨天耀;[D];中国农业大学;2005年
张燕;[D];河北师范大学;2006年
陈思强;[D];华南理工大学;2003年
李婉南;[D];吉林大学;2005年
胡晓航;[D];东北林业大学;2005年
常继涛;[D];内蒙古农业大学;2006年
&快捷付款方式
&订购知网充值卡
400-819-9993
《中国学术期刊（光盘版）》电子杂志社有限公司
地址：北京清华大学 84-48信箱 知识超市公司
出版物经营许可证 新出发京批字第直0595号
同方知网数字出版技术股份有限公司
订购热线：400-819-82499
在线咨询：
传真：010-
京公网安备74号