我用的流动相是水和乙腈，我想知道我每次做完实验柱子要用哪种溶液清洗，具体要怎样操作呢！_百度知道
我用的流动相是水和乙腈，我想知道我每次做完实验柱子要用哪种溶液清洗，具体要怎样操作呢！
脏的话时间可以更长些）2 改比例为100%乙腈，10min以上（视柱容积而定）;min：乙腈（或者甲醇）=9？1 先用水，流速1ml&#47:1、等梯度30min-1h（看你的样品脏不脏你用的是LC还是LC/MS
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用什么流动相就用什么冲柱子。不过用前要超声脱气。不然有气泡
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【求助】10%乙腈冲柱子一晚上，柱压还是高
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这个帖子发布于5年零1天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
问题已解决悬赏丁当:2
前提：柱子Agilent Eclipse Plus C18 3.5um 4.6*100mm流动相： A:枸橼酸三钠缓冲液，B:乙腈分析结束后，因冲柱子设定错误，用纯乙腈冲1min,发现后停止，改用 水：乙腈=90：10，0.5ml/min,柱温40℃冲洗一晚上约9小时后，柱压为282bar。取下柱子，同等条件冲洗流路，柱压为25bar。问题： 柱压高。表现为水：乙腈=90：10，柱温40℃，流速0.5ml/min,柱压为282bar。处理：100%异丙醇，0.2ml/min,冲洗，能否解决柱压过高的问题？或者有更合适的办法？请不吝赐教！
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降恩 前提：柱子Agilent Eclipse Plus C18 3.5um 4.6*100mm流动相： A:枸橼酸三钠缓冲液，B:乙腈分析结束后，因冲柱子设定错误，用纯乙腈冲1min,发现后停止，改用 水：乙腈=90：10，0.5ml/min,柱温40℃冲洗一晚上约9小时后，柱压为282bar。取下柱子，同等条件冲洗流路，柱压为25bar。问题： 柱压高。表现为水：乙腈=90：10，柱温40℃，流速0.5ml/min,柱压为282bar。处理：100%异丙醇，0.2ml/min,冲洗，能否解决柱压过高的问题？或者有更合适的办法？请不吝赐教！简单说一下：首先：你用纯溶剂直接冲洗了，很有可能盐析出来了，这样的情况下，把色谱柱拿下，用有机溶剂的水溶液冲洗就行了，不能用纯异丙醇，因为盐是不溶于异丙醇的，倒是可以用异丙醇水溶液如果冲洗后发现压力还是很高，那么要考虑更换过滤白头了，如果你用是安捷伦液相的话，其他类似当上述原因排除了，再把色谱柱接上，用异丙醇水溶液冲洗色谱柱，由于异丙醇粘度大，流速不宜过大，一般情况下问题都能解决如果还是不能解决，那考虑是不是色谱有问题了，采用再生的办法或许可行
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试试温水，0.5流速冲柱。
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降恩 前提：取下柱子，同等条件冲洗流路，柱压为25bar。没有柱子的时候还这么大反压？开Purge阀压力多少？开purge阀纯水流速5ml/min反压超过5bar请更换冲洗阀过滤芯。
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其实，刚开始的时候，用乙腈冲了一分钟，这时赶快将柱子卸下来，反过来接，用纯水冲洗，会好些，原因刚开始，盐析出在柱头上，还不算太严重，这时反过来将柱头上的盐冲出来，然后再按正常的柱子接法冲洗，这对柱子不会造成太大的影响。现在建议你将柱子反接，用纯水冲（现在的柱子质量都比较好了，用水冲没什么问题的），观察柱子压力多少，和原先的比较下，如果有改善，建议将柱子反接，用纯水冲段时间，可将流速设为0.5，试试。
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把柱子两端的白头拆下来，先用纯水超声，再用异丙醇超声，在上回去，就这么简单
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做实验出现问题很正常了记得有一次，我的一个同事由于没有看清楚某些个东西导致进样系统堵塞，不得已花了不少时间拆开流通阀，里面有一个孔被盐给堵了像楼主的问题，其主要问题有1.做实验要细致2.发现问题要科学的处理，冲洗色谱柱至少要知道相似相容原理吧3.排除问题要简后难4.遇到问题要冷静分析，弄明白问题的所在5.以后尽量少PM吧，有什么问题尽量发帖回帖讨论，本人能力有限哈
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处理措施： 1、取下ODS色谱柱，以90%水相+10%乙腈冲洗系统，一段时间后，柱压降低至正常 2、换了一台只能冲洗色谱柱的旧机子冲洗取下的ODS色谱柱，以90%水相+10%乙腈冲洗，柱压渐渐降低，4h后柱压从186bar将为116bar 3、又将该ODS柱装到1、的系统上，以90%水相+10%乙腈过渡到100%乙腈30min,再继续100%乙腈冲洗30min,柱压降至70bar 教训：一步小的失误，耽误了一天功夫，一定要操作规范、正确。 请批评指正，不胜感激！
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看下是不是泵密封垫脏了，换一个
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排序方式：
中国海洋大学
2，威斯康星-麦迪逊分校的Richard Husung课题组。
3，河南大学的史峰课题组。（做的很不错，去年在北大的化学年会，听过他的报告）
4，香港科技大学的贾国成课题组，主要做金属苯炔（12年在北大的金属有机化学年会上，黄耀曾金属有机化学奖获奖报告）。
推荐几篇优秀的苯炔综述（可以X-MOL文献直达哦）：
1， Pellissier, H.; Santelli, M. Tetrahedron 1.
2，Wenk, H. H.; Winkler, M.; Sander, W. Angew. Chem., Int. Ed.,2.
3，&Bhunia, A.; Yetra, S. R.; Biju, A. T. Chem. Soc. Rev. 2012, 41,3140.
4， Wu, C.-R.; Shi, F. Asian J. Org. Chem. 6.
5，&Dubrovskiy, A. V.; Markina, N. A.; Larock, R. C. Org. Biomol.Chem. 1.
6. Gampe, C. M.; Carreira, E. M. Angew. Chem., Int. Ed. 2012, 51,3766.
7. Tadross, P. M.; Stoltz, B. M. Chem. Rev. , 3550.
8，Chin. J. Org. Chem. &2015 , 35, 770～780 &（史峰老师的中文综述）
这是一个非常棒的问题。苯炔由于活性高、反应多一直备受关注，做这方面的课题组较多。但最主要的有：
1，加州理工学院的B.M.Stoltz（参照X-MOL新生代有机合成大牛介绍），他有一个全面的综述，他组里也有过组会报道，在他的网页上都可以看到。
2，威斯康星-麦迪逊分校的Richard Husung课题组。
3，河...显示全部
Garg，很厉害
还有UCLA的Neil K.&Garg，很厉害
羰基是有机化学中常见的官能团，要是把羰基转化成双键，除了基础有机中的Wittig反应，还有别的反应吗？
中国海洋大学
看来你已经走上了有机的征途啦，好样的，学习就要这样去总结，慢慢地学着自己综述哦。
羰基转化为双键分为两种类型，第一种类型如图1
这种转化很常见，主要包括以下经典的反应及其改进版：
1，Julia反应：苯砜的阿尔法位去质子后和醛酮加成，生成的羟基乙酰化后用钠汞齐脱砜基消除，这种反应主要生成E型烯烃，缺点...显示全部
谢谢回答，学到了很多知识。把双键转化成醛酮等羰基化合物，主要是臭氧化反应，或者双羟化反应后切断。
最近开始看天然产物的全合成，觉得是一个很好的学习知识的途径，可以学到很多反应和试剂，以及合成的设计，我想先看看国内的牛人做的合成，请推荐一些国内天然产物全合成的课题组。
中国海洋大学
2，唐叶峰 研究员，清华大学药学系，师从杨震教授、K.C.Nicolaou，仿生合成做的较多。
3，李闯创 副教授，南方科技大学，师从杨震教授、P.S.Baran.
4,梁广鑫 教授，南开大学化学系，师从Dirk Trauner.
5,谢志翔 教授，兰州大学化学系，师从杨震教授。
6，汤平平 副教授，南开大学化学系，师从俞飚研究员、哈佛大学的Ritter教授，也做降三萜的全合成。参考X-mol《中国有机合成化学家的攀登》
7，樊春安 教授，&兰州大学化学系，师从涂永强院士。
8，高拴虎 教授，华东师范大学化学系，师从涂永强院士、陈绰教授。
9，贾彦兴 教授，北京大学医学部，师从涂永强院士、祝介平教授。
10，刘波 教授，四川大学化学系，师从周维善先生，乌药烷的合成很漂亮。
11，丁寒锋&教授，浙江大学化学系。师从王彦广教授、K.C.Nicolaou。
12，雷晓光 教授，北京大学化学系。
13，张延东 副教授，厦门大学化学系。师从杨震教授、Danishefisky教授。
这些都是发表全合成文章较多的，可以看看他们的文章，当然国内也有很多偶尔发表全合成文章的，没有一一列出，希望对你有所帮助。
恩，你说的对，看全合成的确是个学习知识的好途径。国内、国外现在基本没有纯粹做天然产物全合成的组了，因为经费不好申啊，都是方法学带合成，或者合成带药化。我就给你推荐一些经常发全合成文章，经常在学术会议上讲全合成的课题组吧。
国内的全合成组分为中生代和新生代，按年龄分，50、60年代的算中生代吧，70、80的算新生代吧。...显示全部
以前在医药公司，走的是化药的合成路子，筛选，走库，DMPK，再筛选，动物房，临床。。。
这几年比较看好的生物类药品是什么个意思？有没有更详细的说法？比起普通化药好在哪里？未来会不会都是生物类药品的天下
中国海洋大学
化药您说的很清楚，大家就是这么做的，现在大部分还是做化药吧，我本人也是做化药的。生物类药品指的是从生物体、生物组织、细胞、体液中利用生物和药学等原理和技术（如基因工程、细胞工程、发酵工程等）提取或制造的用于预防、治疗、诊断的制品。如疫苗、血清、一些激素等。包括天然的和人工制得的。
生物药的特点或者优势在于：1）治疗的针对性强，生化机制合理，疗效可靠。如细胞色素C治疗组织缺氧引起的疾病；2）药理活性高，毒副作用小，如ATP的直接功能，蛋白质、核酸、糖类等毒副作用小，营养价值高，多用作保健品；缺点在于生物副作用如过敏反应等、制作工艺复杂、稳定性差、容易腐败变质等。生物药容易被胃肠道的酶分解，所以多采用针剂注射，那对制剂的要求也就更高。
所以个人觉得生物药和化学药是互补的，不能至少短期内不能全部替代化药，目前生物药中疫苗的预防作用倒是非常好的。
呵呵，您的问题我也思考过，今年参加执业药师资格考试，复习的时候看了些，简单回答一下，希望起个抛砖引玉的作用，这些说法出自&执业药师资格考试教材及相关资料。
化药您说的很清楚，大家就是这么做的，现在大部分还是做化药吧，我本人也是做化药的。生物类药品指的是从生物体、生物组织、细胞、体液中利用生物和药学等原理和技...显示全部
我需要进行一个反应，利用双烯烃（比如1，7-辛二烯）与带两个-SH的化合物进行加成环合反应，其中需要加入自由基引发剂，反应中提到需要365nm的UV光照，可以用TLC检测的365nm紫外检测灯管反应吗？
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我们做光反应都是用的光反应器，反应物投在石英光反应管中，光照下发生反应的，一般反应都很快。
如果只是试反应，可以用普通瓶在紫外灯下照射，检测能否反应，反应了倒还好说，不能反应一定得按照标准的光反应去做，毕竟，下一个否定的结论是需要非常谨慎的。
这个反应有没有文献说明仪器条件？除了要考虑前面 普天同庆 提到的反应容器是否吸收紫外的问题以外，通常光照反应所用光源功率比较高，TLC的那个紫外灯功率可能太小了吧……
&&& && & 具体操作步骤希望详细列下来，不胜感激
&小生，想问问哪位大侠会用核磁软件MestRenova对氢谱、碳谱的预测？ChemDraw预测的只是个大致，不准。此外怎么用MestRenova对谱图峰位的归属？怎么把实验谱图与模拟谱图叠放在一起比对它们的峰位、峰强？软件操作指南上面写的太简单了，总感觉这款软件很多强大的功能还未开发出来，希望大神们一起努力，...显示全部
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&&&&&1.&想要使用MestReNova对氢谱、碳谱进行预测，首先得确认一下您目前使用的软件是否有此功能。
您可以使用MestReNova画一个结构式，或者从其他化学画图软件（如chemdraw等）里面直接复制一个化学结构式，粘贴进MestRe...显示全部
在读博士生 Nankai University
文献收索：J.Am.Chem.Soc.90-10893
检测甲醛的荧光探针，作者确实应该把这关键一步解释得更详细一些，因为感兴趣或有需要应用此技术的读者很多都应该是在生物医学或生物物理领域。
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最近用PPA催化苯硫丙酸的PPA催化关环反应，反应成紫色后加水淬灭，但是总有异常粘稠的东西生成，请问怎么进行后处理？
中国海洋大学
您好，这个反应虽然没有亲自做过，但根据查阅的文献作答：
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在C-H活化中。
中国海洋大学
优点就是：1，催化的反应种类多；2，比较高效，催化剂用量少；3，反应温和
缺点个人觉得最大的就是钯比较昂贵，目前正在找镍或者铁等其他大量的廉价的金属代替钯，或者无金属催化的碳氢键活化。
当然要详细了解，请阅读“钯试剂”这本书和于金泉、施章杰编的碳氢键活化这本书。
我是一名研一的有机新生，有机基础比较薄弱，希望学长们给一些学习的建议。
中国海洋大学
化学是一门实验学科，有机化学更是注重实验，我们也是过来人，经历和你分享下，希望对您有所帮助。
1，打好基础，注重理论学习。北大出的基础有机化学，就是大家说的邢大本，先好好看三遍，那个教材是经典中的经典，每个学有机的都从她学起。再就是有机人名反应的学习，大家都知道人名反应对于有机化学的重要性，X-mol之前做过人名反应...显示全部
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反过来，产率低了就要看无水操作是否严格，亲核试剂是否足量。如果都没有问题，那么底物Weinreb酰胺有没有问题。Weinreb酰胺是由酰氯、酸酐、酯或者内酯和N,O-二甲基羟胺反应得到的，可以分离出来核磁鉴定的。
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反过来，产率低了就要看无水操作是否严格，亲核试剂是否足量。如...显示全部
硕士 江西师范大学
多看看相关的文献，不要拘泥于你的眼前。换种碱，换溶剂，换底物，换条思路
这里的“高”，对应英文是“homo”，比所指的官能团多连一个亚甲基，高烯丙基的英文是“homoallyl”，烯丙基（allyl，CH2=CH-CH2-）后面多一个碳原子，即：CH2=CH-CH2-CH2-，实际就是烯丁基。下图是另外一个例子：左边是香草酸（vanillic acid），右边是高香草酸（homovanil...显示全部
中国海洋大学
感谢楼上的回答，非常的好，完全同意。就是多了一个亚甲基！
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博士 上海大学
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中国海洋大学
完全同意楼上的回答，昨天在X-MOL问答中也有回复。
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反应物是一个三级醇，需要把羟基还原。反应物结构里有呋喃环，还有一个酯基，请教合成大神除了Et3SiH/TFA还原体系外，还有什么方法把羟基脱掉？&
中国海洋大学
羟基的旁边还有氢吗，也可以尝试先脱水生成双键再氢化掉双键的方法。
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中国海洋大学
主要是由于中间的过氧键起氧化作用，从结构上看，就像是过氧化氢的两个氢被SO3取代了，核心部分还是过氧键，氧化时，过氧键打断，氧从负一价变成负二价。
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化学的一个重要分支学科，研究有机化合物的组成、结构、性质、制备方法与应用的科学您现在的位置：>>> 正文
Topsil色谱柱说明书
色谱柱使用1.取出色谱柱，仔细查看柱身洗脱液流向箭头标识，用手旋下柱两端的塑料堵头，放好色谱柱，使洗脱液流向和柱身所示流向一致，如图所示：2.用手将&连接管路的不锈钢或者其它材质的接头&旋入色谱柱两端，管路接头要和色谱柱接口连接紧密，确保零死体积连接，在色谱仪正常运行时没有漏液。&色谱柱保存1.短期保存：间隔不超过四天，色谱柱按平时维护程序冲洗至基线平稳，反相色谱柱保存在不带有缓冲盐、离子对试剂的有机相/水溶液中，有机相不低于20%；正相色谱柱正相使用保存在纯正己烷中，反相使用保存在纯有机溶剂中；并将随柱的塑料堵头旋紧密封。2.长期保存：反相色谱柱保存在80%甲醇或80%乙腈水溶液中；正相色谱柱正相使用保存在纯正己烷中，反相使用时需将柱内存储液用异丙醇置换，最后用正己烷保存。最好将色谱柱从仪器上取下，并将随柱的塑料堵头旋紧密封。&使用注意事项液相色谱柱是液相色谱仪的心脏，有严格的生产标准和测试程序，为了充分发挥其性能，最大程度延长其寿命，请仔细阅读此部分。1.色谱柱使用前请先确认色谱柱内的存储液月旭公司色谱柱的存储液，如没有特殊说明均为质检报告中所述流动相，氨基（NH2）、硅胶柱（SiO2）均为正相条件-正己烷/异丙醇体系，反相柱(C8、C18、Phenyl-Hexyl)均为甲醇/水体系，检测前，请用相互溶的试剂将其替换。2.新的色谱柱平衡月旭公司建议新的反相色谱柱用色谱级的纯甲醇以低流速冲洗色谱柱30个柱体积，再更换成能与检测流动相互溶的流动相冲洗30个柱体积，最后用流动相稳定系统至基线平稳；新的正相色谱柱用色谱级的异丙醇以低流速冲洗30个柱体积，再更换成检测流动相稳定系统至基线平稳。3.色谱柱的使用方向确认月旭公司生产的高效液相色谱柱标签上的箭头方向为流动相流向，使用过程按此方向可以避免双向混用，导致两端填料同时污染，不利于色谱柱的再生和维护。4.流动相和样品保持洁净由于悬浮在样品或流动相中的细小颗粒会堵塞色谱柱两端的筛板，月旭公司建议各种试剂选用色谱纯级；如有少量的分析纯试剂，使用前建议用0.45&m孔径以下的滤膜过滤。样品中的杂质是造成色谱柱污染、柱效下降的最主要原因之一，复杂样品可选样品预处理柱（SPE柱）进行样品处理。如果不方便处理，最好使用相匹配的保护柱，样品溶剂与流动相要相匹配。不能出现样品不互溶，极性相差太大等想象，否则会造成色谱峰形变差，鬼峰等现象，使用流动相溶解样品能有效的避免上述情况发生。5.色谱柱允许的pH范围每款色谱柱都有自己特定允许使用的pH范围，在pH范围以外使用，会使硅胶基质溶解或键合相水解，对色谱柱造成不可恢复的损伤。如果在临界pH处使用，分析结束后立即用适合于色谱柱保存并与当前使用的流动相互溶的淋洗液置换掉。TopsilTM 系列色谱柱pH耐受范围：&色谱柱维护1.柱压升高这是每个色谱工作者都很头疼的问题，长时间使用造成柱压的缓慢升高通常是正常现象；短时间甚至是突然的柱压升高通常是异常升高，排除仪器的故障，确定是色谱柱自身原因，一般有以下几点：1) 柱头的过滤筛板污染(固体颗粒物堵塞、强保留物质累积)，解决方法为：a.在柱前端加上在线过滤器或保护柱，用甲醇/水=20/80 1.0ml/min反向冲洗色谱柱180min；b.在柱前端加上在线过滤器或保护柱，反向使用；c.可将柱头打开，将色谱柱头中过滤筛板取出，在稀硝酸溶液内超声清洗20min，纯水超声清洗20min，最后用甲醇超声清洗20min，重新装入色谱柱。2) 柱头填料污染(固体颗粒物堵塞、强保留物质累积)，解决方法为：a.用可以溶解污染物的溶剂较长时间(180min)反向冲洗色谱柱；b.可将柱头打开，小心取出被污染的填料，用相同的填料重新装入修复。3) pH使用不当造成的损伤：pH使用不当造成固定相的缺失或塌陷，很难使色谱柱恢复，只能更换色谱柱。2.使用保护柱和在线过滤器样品和流动相中不能完全过滤掉及泵磨损、密封圈和管路老化产生的固体颗粒物，进入到色谱柱中就会堵塞筛板，导致柱压升高，柱效下降，保护柱和在线过滤器上都有筛板，孔径与分析柱的孔径相同，能阻止颗粒物到达色谱柱，在分析故障中，柱压升高占很大比例，因此建议您在色谱柱前端加上在线过滤器或者保护柱。3.缓冲盐的正确使用缓冲盐通常易溶于水，难溶于有机溶剂，使用不当会析出，加快泵柱塞杆和密封圈，流通阀的磨损，堵塞色谱柱头筛板，填料基质上的微孔和颗粒间的间隙，使填料板结柱压升高，阻碍基质上键合相的碳链自由舒展，使色谱柱保留能力下降，柱效降低，缩短其使用寿命，缓冲盐析出后很难去除，因此正确的使用缓冲盐对延长色谱柱的使用寿命非常重要，具体方法如下：&使用前过渡! 使用后冲洗!&1) 等度条件：分析前后用过渡流动相冲洗柱体积不少于20-30个柱体积，或分析完成后用过渡流动相以0.2ml/min（根据柱规格调整）冲洗過夜；2) 梯度条件：分析前，用与初始流动相组成相同的流动相以分析流速冲洗色谱柱不少于20-30个柱体积，分析后，用该过渡流动相冲洗色谱柱不少于20-30个柱体积，且梯度尽量平缓，避免缓冲盐析出；过渡流动相：有机相和水相的比例和分析流动相中两相比例一致，或者水相比例高于分析流动相，绝对不含缓冲盐。3) 缓冲盐析出：方案1：用甲醇/水＝10/90以分析速度流速35℃条件下反向冲洗色谱柱120min；方案2：用甲醇/水＝10/90以0.2ml/min流速反向冲洗色谱柱過夜。4.避免强保留物质在色谱柱保留强保留物质和大分子化合物在色谱柱中累积，是一个缓慢的过程，一段时间后会对样品成分产生额外的保留行为，引起峰变宽，拖尾，使柱效下降，保留时间变化，到一定程度时会导致柱压升高，对许多样品特别是复杂样品很难判断其是否含有强保留物质，因此要预防这一切的方式，坚持每天分析完成后用纯甲醇或纯乙腈反向冲洗色谱柱20个柱体积以上。清洗方法：1) 未使用缓冲盐，每天分析完成后用纯甲醇或纯乙腈反向冲洗色谱柱20个柱体积以上；2) 使用缓冲盐，用上述方法去除缓冲盐后，用纯甲醇或纯乙腈反向冲洗色谱柱20个柱体积以上；3) 补救方法：水&乙腈&异丙醇（或氯仿）&乙腈&水，每一步需要冲洗不少于30个柱体积。注意：不要轻易打开柱头，一旦打开，很难恢复到新柱的水平。因为柱头打开而造成的检测后果，客户自行负责。&色谱柱再生色谱柱作为液相色谱中昂贵的色谱耗材，会随着使用时间和进样次数的增加，会出现异常的色谱现象，如果一根色谱柱的柱效太低或者柱压太高，通常认为该色谱柱使用寿命已到，为了延长色谱柱的使用寿命，除了完全按照每一款色谱柱的性能使用以外，适当的色谱柱再生是很有效的途径。1.氰基（CN）色谱柱维护和再生CN基柱属于中等极性的固定相，作反相色谱时操作和维护和C18柱完全相同，增加水相比例，可以促进样品的洗脱。但是CN属于短链的键合相，水相比例太高易使CN键水解，尤其在色谱柱pH耐受范围以外，极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快。如果在这个条件下使用，需要按以下程序用15个柱体积溶液冲洗，如下：95%水/5%乙腈&THF四氢呋喃&95%乙腈/5%水并保持95%乙腈/5%水继续冲洗，以低流速0.2-0.5mL/min過夜冲洗。在pH耐受范围条件使用时，也比较伤柱子，要注意冲洗，可以参照上述方法，时间可适当减少。柱子使用一定时间后，柱效下降，需要老化再生，再生时用15个柱体积的下列溶液冲洗：95%水/5%乙腈&THF四氢呋喃&95%乙腈/5%水再走流动相即可。CN柱用于正相时，当柱子使用一定时间后，柱效下降，可清洗一下恢复柱性能，再生时用10个柱体积的下列溶液冲洗：氯仿&异丙醇&二氯甲烷再走流动相即可。CN柱最理想的pH范围在pH 2.0-8.0。CN柱的保存，可用异丙醇或正己烷保存（保存溶剂中不能含水），两端封好，流动相改变时要注意过渡和两相之间的互溶。2.反相柱再生反相色谱柱是使用最普遍的色谱柱之一，除按照以上内容使用以外，必要的再生清洗可以有效的延长色谱柱的使用寿命，用下列每种溶剂20~30个柱体积冲洗：100％甲醇&100％乙腈&75％乙腈/25％异丙醇&100％异丙醇 &100％二氯甲烷&100％正己烷&100％异丙醇&100％甲醇3.正相色谱柱的再生正相氨基柱的键合官能团氨丙基要比C18、C8柱的键合官能团易水解，所以其使用寿命稍短，特别是使用反相条件时，要严格控制pH值范围，pH值越低流动相中水的比例越高越易发生水解。注意：所有试剂都要严格脱水用氨基柱检测酸性物质可能会使略带负电荷的氨基官能团质子化，一定程度上改变对某类的分析物保留性质或表现为柱效下降，再生建议是：用5-10个的柱体积的含0.5-1.0％NH3的50-50乙腈-水溶液冲洗（冲洗后用不含碱的流动相洗去多余的氨），分析酸性分析物时建议在流动相中略微添加少许氨如0.1％。填料被样品中杂质累积污染，色谱柱表现行为柱压增高柱效降低等，依次用：甲醇&异丙醇&氯仿&正己烷&氯仿&异丙醇&甲醇冲柱子（各以0.5ml/min的流速，20个柱体积），再换流动相。NH2柱用于反相条件时，NH2键会水解，尤其是在该柱子pH范围以外，在极端酸性和碱性条件下柱寿命会下降很快，如果在这个条件下使用需要清洗一下，需要用10个柱体积溶液冲洗，也是正相条件下使用色谱柱的再生，建议：95％水/5％乙腈&THF四氢呋喃&95％乙腈/5％水，并保持95％乙腈/5％水继续冲洗，以低流速0.2-0.5mL/min過夜冲洗。反相使用氨基色谱柱的再生（每种淋洗液不少于30个柱体积）：NaOH(pH 9.0)&色谱纯水冲&平衡到流动相或者适合保存的溶液。其它正相柱（硅胶柱，Diol柱）的再生（每种淋洗液不少于20个柱体积）：正己烷&异丙醇。正相柱除水：含2.5% 二甲氧基丙烷(dimethoxypropane)和2.5%冰醋酸的正己烷冲洗30个柱体积。
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