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分离生物大分子液相色谱填料合成和评价.pdf68页
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分离生物大分子液相色谱填料的合成和评价
色谱是分离分析生物大分子类物质的最主要手段，而液相色谱填料是
实现色谱分离的核心材料，因此具有重要的研究意义。本文主要研究以大
孔硅胶为基质的分离生物大分子液相色谱填料，制各了键合型和聚合型两
类色谱固定相，并对填料的色谱性能进行了考察。得到如下结果：
1牙U用硅胶表面的键合反应制备了键合Ⅺ眄60色谱固定相，以三甲
基氯硅烷为钝化试剂对键合填料进行封端处理，通过将融 560结构中的
环氧结构水解为两个亲水性的醇羟基，制备了亲水性良好的二醇键合色谱
填料。填料装柱后，通过蛋白质分离实验证明该固定相对生物大分子适应
性良好，获得了较好的分离效果，柱子渗透性好，适合生物大分子的高效、
快速分离。
2．制备了两种具有双键结构的键合固定相．键合KH570固定相和键合
乙烯基固定相，并在此基础上利用聚合反应，以过氧化苯甲酰 BP0 为
引发剂，对二乙烯基苯 DⅧ 为交联剂，甲基丙烯酸．2．羟基丙酯为聚
合单体进行聚合反应，制备了硅胶基质聚合物的液相色谱固定相，优化了
反应条件。蛋白质类生物大分子的分离实验证明：填料对生物大分子具有
良好的亲和性和生物适应性，渗透性好，能实现快速、高效的分离，此外
填料在碱性条件下表现出很强的耐受性。
关键词：色谱填料，蛋白质分离，大孔硅胶，高效液相色谱，硅胶固定
PREPARATIONAND
CHARACTERISTICS0FHPLCSTATIONARY
PHASEFORB10SEPI气R栅ON
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Bioseparationp“ cess
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高效液相色谱手性填料的合成、评价及简单的化学模拟
【摘要】：
色谱是手性分离的最主要手段,而液相色谱填料是实现色谱分离的核心材料,因此具有重要的研究意义。本文主要研究以硅胶为基质的分离手性化合物液相色谱填料,制备了两种键合型色谱填料,并通过傅里叶红外光谱、元素分析、核磁碳谱对色谱填料进行表征,对填料的色谱性能进行了考察。得到如下结果:
1.利用硅胶表面的键合反应制备了键合双手性色谱固定相,以DL-苯甲酰氯为衍生化试剂,六亚甲基二异氰酸为连接剂,以三甲基氯硅烷对键合填料进行封端处理,制备了双手性键合色谱填料。填料装柱后,对手性化合物分离,获得了较好的分离效果,适合手性化合物的高效、快速分离。
2.纤维素2,3-衍生物应用分子动力学MM+方法,采用Hyperchem软件进行分子模拟,验证了双手性色谱填料合成的可行性。
3.制备了以3,5-二甲基苯基氨基异氰酸酯为衍生化试剂,六亚甲基二异氰酸为连接剂,以三甲基氯硅烷对键合填料进行封端处理。尽管大部分对映体可以在商品化涂覆型色谱填料分离,但这些色谱填料主要的缺点是容易溶解流动相有一定限制,为了克服这个困难,制备了键合型液相色谱填料,优化了反应条件。填料装柱后,对手性化合物分离,获得了较好的分离效果,适合手性化合物的高效、快速分离。
【关键词】：
【学位授予单位】：北京化工大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2009【分类号】：O657.7【目录】：
ABSTRACT7-9
第一章 绪论9-29
1.1 前言9-11
1.2 外消旋体拆分方法11-15
1.3 高效液相色谱手性固定相的类型15-21
1.4 高效液相色谱介质21-22
1.5 多糖衍生物固定相研究现状及影响手性拆分的因素22-26
1.6 计算化学分子模拟26-27
1.7 本论文研究内容27-29
第二章 DL-苯丙酰氯键合硅胶色谱填料(双手性)的制备、评价29-44
2.1 试剂及仪器29-30
2.2 双手性键合固定相的制备30-33
2.3 分析表征33-36
2.4 色谱柱的装填36-38
2.5 双手性键合固定相色谱性能评价38-44
第三章 区域选择性微晶纤维素衍生物分子模拟44-47
3.1 模拟软件44
3.2 分子模拟44-46
3.3 小结46-47
第四章 3，5-二甲基苯基氨基异氰酸酯键合色谱填料制备、评价47-56
4.1 试剂和仪器47
4.2 3，5-二甲基苯基氨基异氰酸酯键合固定相的制备47-51
4.3 分析表征51-53
4.4 色谱柱填装53
4.5 3，5-二甲基苯基氨基异氰酸酯键合固定相色谱性能评价53-55
4.6 小结55-56
第五章 结论与展望56-58
5.1 论文结论56
5.2 论文创新点56
5.3 对今后工作的建议与展望56-58
参考文献58-61
研究成果及发表的学术论文62-63
作者及导师简介63-64
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