MYElb培养基基是什么

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MS培养基是什么?
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拼音xuan ze pei yang ji
英文selective medium
释义是根据某一种或某一类的特殊营养要求或对一些物理化学抗性而设计的培养基利用这种培养基可以将所需要的微生物从混杂的微生物中分离出来
新手上路我有疑问投诉建议参考资料 查看无血清培养基_百度百科
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无血清培养基和被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊椎动物细胞以制备病毒抗原和重组蛋白等大多数的无血清含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素以及一些蛋白质和清蛋白纤维蛋白胎球蛋白等这些蛋白在细胞培养中发挥各种不同的功能如提供细胞贴壁所需的基质抗生物反应器剪切力作为脂质和其他生长分化因子的载体等[1]添加组分促贴壁物质、促生长因子及激素等缺&&&&点成本较高
定义无血清培养基是不需要添加血清就可以维持细胞在体外较长时间生长繁殖的合成培养基
无血清培养基的基本配方:基本成分为基础培养基及添加组分两大部分 用于生物制药和疫苗生产的细胞在体外培养时多数呈贴壁生长或兼性贴壁生长而当其在无血清无蛋白培养基中生长时由于缺乏血清中的各种粘附贴壁因子如纤粘连蛋白层粘连蛋白胶原玻表粘连蛋白细胞往往以悬浮形式生长1.促贴壁物质许多细胞必须贴壁才能生长这种情况下无血清培养基中一定要添加促贴壁和扩展因子一般为细胞外基质如纤连蛋白层粘连蛋白等它们还是重要的分裂素以及维持正常细胞功能的分化因子对许多细胞的繁殖和分化起着重要作用纤连蛋白主要促进来自中胚层细胞的贴壁与分化这些细胞包括成纤维细胞肉瘤细胞粒细胞肾上皮细胞肾上腺皮质细胞CHO细胞成肌细胞等[2]
2.促生长因子及激素针对不同细胞添加不同的生长因子激素也是刺激细胞生长维持细胞功能的重要物质有些激素是许多细胞必不可少的如胰岛素
3.酶抑制剂培养贴壁生长的细胞需要用胰酶消化传代在无血清培养基中必不可少须含酶抑制剂以终止酶的消化作用达到保护细胞的目的最常用的是大豆胰酶抑制剂
4.结合蛋白和转运蛋白常见如转铁蛋白和牛血清白蛋白牛血清白蛋白的添加比较大可增加培养基的粘度保护细胞免受机械损伤许多旋转式培养的无血清培养基都含有牛血清白蛋白
5.微量元素硒是最常见的目前血清仍是动物细胞培养中最基本的的添加物尤其是在原代培养或者细胞生长状况不良时常常会先使用有血清的培养液进行培养待细胞生长旺盛以后再换成无血清培养液细胞转入无血清培养基培养要有一个适应过程一般要逐步降低血清浓度从10%减少到5%3%1%直至无血清培养在降低过程中要注意观察细胞形态是否发生变化是否有部分细胞死亡存活细胞是否还保持原有的功能和生物学特性等在实验后这些细胞一般不再继续保留很少有细胞能够长期培养于无血清培养基而不发生改变的细胞转入无血清培养之前要留有种子细胞种子细胞按常规培养于含血清的培养基中以保证细胞的特性不发生变化
为了使细胞适应无血清培养关键的是使所培养细胞
1.处于对数生长中期
2.&90% 活细胞率
3.适应时以较高的起始细胞接种
细胞适应无血清培养基的方法
1.直接适应细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基SFM中
一些类型细胞可直接从包含血清的培养基适应无血清培养基对于直接适应接种细胞密度应该:2.5×10~3.5×10细胞/ml当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml时传代培养细胞当细胞密度在培养4到7天后达到2×10~4×10细胞/ml时细胞完全适应了无血清培养基每隔3~5天当细胞密度达到1×10~3×10细胞/ml细胞活率在90%时贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养
2.连续适应分好几步把细胞从添加血清的培养基转换到无血清培养基SFM中与直接适应相比较连续适应趋向对于细胞更加温和一些
1以2倍正常接种密度接种生长活跃的细胞培养物到75%有血清培养基25%SFM 混合培养基中传代培养
2当细胞密度&5×10细胞/ml时以2×10到3×10细胞/ml细胞密度在有血清培养基SFM为50∶50的混合培养基中传代培养
3以2×10到3×10细胞/ml细胞密度25%有血清培养基和75% SFM中传代培养
4当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml接种后4到6天在100%SFM培养基中传代培养
5每隔3到5天当细胞密度达到1×10到3×10细胞/ml细胞活率在90%时贮备的适应了无血清培养基的细胞培养物应该再次传代培养
建议备份前一次混合培养的培养物直到每一次细胞适应了新的混合培养基每一次减少血清前可能需要在SFM/有血清混合培养基中进行几次传代
在适应过程中最好不要让细胞生长过度这将增加选择亚群的可能性需要注意与有血清培养基相比大部分SFM包含非常少的蛋白质因而更易于受外界因素的影响
细胞培养适应替代血清许多细胞利用连续适应方法能很好的适应用包含FBS的的培养基和包含有替代血清的培养基1∶1v∶v的混合培养基培养细胞通过下列的混合培养基的方式连续几代减少当前培养基的量1∶21∶41∶16和100%替代培养基每次适应改变血清比例时传代细胞2到3次
培养可以直接从FBS转换到替代血清一开始就使用相同于FBS的浓度的替代物或血清生长的延迟可能会发生4允许进行2到3次的传代使生长率恢复到以前的水平
特别需要强调的是配制无血清培养液必须使用高质量的水如石英玻璃蒸馏器经三次蒸馏或超纯水净化装置制备的水因为无血清培养基缺乏了血清中天然成分中和毒素保护细胞的大分子既便水中的有毒物质含量甚微也可能对细胞产生致死性损害这是无血清培养能否成功的关键因素之一1.可避免血清批次间的质量变动提高细胞培养和实验结果的重复性
2.避免血清对细胞的毒性作用和血清源性污染
3.避免血清组分对实验研究的影响
4.有利于体外培养细胞的分化
5.可提高产品的表达水平并使细胞产品易于纯化
1.细胞在无血清培养基中易受某些机械因素和化学因素的影响培养基的保存和应用不如传统的合成培养基方便
2.成本较高
3.针对性很强一种无血清培养基仅适合某一类细胞的培养1.神经细胞干细胞PC12细胞
成份 终浓度
葡萄糖--0.6%
谷氨酰胺-2mM
NaHCO3--3mM
Hepes --5mM
胰岛素--2.5μg/ml
转铁蛋白 -100ng/ml
孕 酮 --20nM
丁二胺--60μM
硒酸钠--30nM
青霉素--50mg/ml
链霉素--50mg/ml
最后用DF12添加到100ml即可
2.各类小鼠胚胎癌细胞系培养基
DMEM/F12 1:1混合成1000ml
NaHCO32.4g
HEPES(1.5M) 10.0ul
硒酸5*10-6M) 10.0ug
纤粘连蛋白 1ug/cm(37度作用15-30分钟
胰岛素 1000.0ug
转铁蛋白 5000.0ug
3.NIH3T3小鼠成纤维细胞培养基
DMEM/F12 1:1混合成1000ml
HEPES 15mM
大豆胰酶抑制剂 0.1%
胰岛素 10.0ug/ml
转铁蛋白 25.0ug/ml
纤粘连蛋白 5.0ug/ml
4.杂交瘤细胞培养基
DMEM/F12 1:1混合成1000ml
NaHCO31.2g/L
HEPES 15mM
胰岛素 5.0ug/ml
氨基乙醇 20.0uM
硒酸 2.5mM
转铁蛋白 35.5ug/ml
应用无血清培养基和试剂被广泛的应用于培养哺乳动物和无脊动物细胞以制备病毒抗原和等大多数的无血清产品含有向细胞内转运离子的转铁蛋白和调节葡萄糖摄取量的胰岛素以及一些蛋白质如清蛋白等这些蛋白在中发挥各种不同功能如吸附毒性化合物抗生物反应器剪切力提供细胞贴壁所需的基质作为和其他生长因子的载体等12-725F UltraCULTURE MEDIUM(Serum-free general purpose medium) 500ml
产品简介一种通用的无血清培养剂
适用范围培养贴壁和悬浮哺乳动物细胞疫苗生产中病毒颗粒的制备产品
77232 PC-1Complete Serum-free Medium 500ml
77230 PC-1 Complete Serum-free Medium(powder plus supplement) 10L
344022 PC-1 Supplement (50) 10ml
产品简介是一种低蛋白无血清培养基PC-1培养基旨在应用于各种研究和工业用途使用限定成份配制的培养基确保在维持最低蛋白成分同时使细胞获得最佳的生长状态
适用范围培养和产品
12-743F UltraMEM Reduced Serum Medium
(Low-protein medium containing L-glutamine &ITES) 500ml
12-745F UltraMEM Reduced Serum Medium
(Protein-free basal medium without L-glutamine) 500ml
产品简介用于支持多种贴壁细胞在低血清浓度下的正常生长的限定培养基
适用范围培养贴壁信赖性细胞产品
12-724Q UltraCHO Meidum(1*liquid with L-glutamine) 1L
12-715F UltraCHO Meidum(1*liquid without nucleosides) 500mL
17-811A UltraCHO Supplement(Non-sterile) 100ml
产品简介培养基最适于培养转染和未转染的CHO细胞表达重组蛋白质
适用范围培养CHO细胞; 的合成产品12-749Q UltraMDCK Meida 1L
产品简介是一种无血清限定培养剂适于高/低平板密度培养MADIN-DABBY犬MDCK
适用范围培养供体外诊断IVD用的MDCK细胞产品
12-764Q PRO 293A-CDM 1L
12-765Q PRO 293S-CDM 1L
产品简介用于293细胞转化的人胚肾细胞培养Pro293限定培养基系统是专为促进293细胞重组蛋白的合成和下游反应而开发的这些配方不需要任何动物来源的成分即可支持高密度的培养
适用范围293细胞重组蛋白和合成产品12-730Q Insect-XPRESS Medium 1L
产品简介采用一种无蛋白配方适合培养来源于Spodoptera frugiperda(Sf9和Sf21)的昆虫细胞系
适用范围杆状病毒的增殖重组蛋白的表达产品77203 HL-1 Complete Serum-free Medium(powder) 10L
产品简介HL-1TM完全无血清培养基是一种限定培养基蛋白含量低于30ug/ml. HL-1TM完全无血清培养基不含和其它不明蛋白混合物
适用范围杂交瘤细胞和淋巴细胞来源的分化细胞的无血清培养产品12-723 BUltraDOMA Medium 500ml
产品简介适用于中空纤维反应器中进行中鼠和嵌合杂交瘤细胞的培养及上述细胞的批量培养
适用范围杂交瘤细胞的培养单克隆抗体的制备产品12-727F FUltraDOMA-P.F.Protein-free Medium 500ml
08-024B Ultra DOMA-P.F.Protein-free Medium 10L
产品简介一种不含蛋白的培养基适于鼠人和嵌合细胞来源的杂交瘤细胞系的培养
适用范围杂交瘤细胞和骨髓瘤细胞的培养单克隆抗体的制备产品
04-380Q X-VIVO 10 with Gentamicin and Phenol Red, 1 L
04-743Q X-VIVO 10 w/o Gentamicin and Phenol Red, 1 L
产品简介为了有助于在无血清环境中制备淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK)而设计的产品
04-418Q X-VIVO 15 with Gentamicin and Phenol Red, 1 L
04-744Q X-VIVO 15 w/o Gentamicin or Phenol Red, 1 L
产品简介在组成上和X-VIVO 10相似并且经过调整优化使之适合于无血清条件下肿瘤浸润淋巴细胞TIL的增殖其配方有助于外周学及人类肿瘤中的CD3+细胞的增殖同时还用于维持人类单核细胞巨噬细胞及细胞系粒细胞和自然杀伤细胞NK的生长产品04-448Q X-VIVO 20 with Gentamicin and Phenol Red, 1 L
产品简介经过改进和优化有助于单核细胞耗竭的高密度的外周淋巴细胞制备LAK细胞
存储条件2℃-8℃
三种培养的部分细胞类型应用如下
人和鼠淋巴因子激活杀伤细胞LAK外周血淋巴细胞PBL人和鼠肿瘤浸润淋巴细胞TIL人T细胞人和鼠巨噬细胞人和鼠造血干细胞克隆形成和增殖人体组织的冰冻保存
X-VIVO 产品的其他应用包括
PBL的增殖TIL的增殖器官的冰冻保存和移植人单核细胞和巨噬细胞的培养干细胞的培养树突状细胞的培养
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出门在外也不愁MyEclipse后面的Blue是什么意思啊!_百度知道
MyEclipse后面的Blue是什么意思啊!
还有就是后面是GA,M1又是什么意思啊!下哪个版本好些啊!
GA,M1又是什么意思啊!
提问者采纳
blue是专为IBM开发的.其他的无所谓吧.反正我用着都一样.
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