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【求助】含有葡萄糖的液体可以高压灭菌吗？
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我是从文献获得的BUFFER配方，里面含有葡萄糖，因为以前配过SOC培养基，那里面的葡萄糖是单独过滤后再加到高压后的培养基里的，因此我在考虑是不是只要是含有葡萄糖就都得单独加，而不能一起配好后高压灭菌。是不是因为高温高压情况下葡萄糖会发生化学反应呢？可是提质粒的Solution I里也是含有葡萄糖的，是可以一起高压的。到底怎么回事呢？请高手指点！查看完整版本请点击这里：
2541 ( 11:17:03)
我想问:提质粒的Solution I里含有葡萄糖,这个溶液的高压条件是?
mamamiya ( 11:17:38)
提质粒的Solution I中含有葡萄糖，我以前一开始用的高温灭菌条件是0.1MP，20min，灭菌后发现Solution I变成了浅黄色，后来我用的是0.05mp，30min，灭菌的效果就很不错，建议楼主用0.05mp，灭菌30min便可以！
gemei0115 ( 11:18:08)
昨天我已经试过高压灭菌了，出现了很奇怪的现象，有两瓶BUFFER和wxf1206_0站友描述的情况一样，液体变成了浅黄色，但另外两瓶同样含有葡萄糖的BUFFER没有变色。这是怎么回事呢？是不是版主所说的跟葡萄糖的浓度有关？那多少才是浓度低，多少才算高呢？我算了一下，我的BUFFER里变色的两瓶一个是0.2％，另一个是0.6％，而没变色的一个是2％，另一个是0.09％，而提质粒的Solution I中葡萄糖含量为0.88％，似乎找不到甚么规律：（
我的BUFFER是用来洗涤细胞的，也不知道糠醛会不会对细胞有影响？
另外我们实验室的高压灭菌锅没有温度显示，只有压力显示。不知道楼上站友提到的mp是甚么单位，一般对压力的描述好像多用“磅”吧
ritou1985 ( 11:19:47)
提质粒的Solution I只要0.1mPa，15min就行了，分子克隆这么写的。
多少葡萄糖才是浓度低，多少才算高？这个我也不太清楚，我一般5%以下就不分开消了，因为培养的菌好像不受影响。
one ( 11:20:05)
这个我也有做过,当时是115度20分钟做的,溶液也有点变色.
但是据我的了解,溶液1影响不大的,它主要的功能就是把菌体混合均匀,关键的是溶液2和3,NAOH的溶度一定不能错,而且溶液2要新鲜配制.
XYZQ ( 11:20:34)
105度15min
mimili_901 ( 11:20:52)
我好像不用灭菌也用得好好...
ero11 ( 11:21:10)
如果有条件可以用0.22微米的膜过滤.
duoduo ( 11:21:35)
115没有问题，120度就会变色，不过如果提质粒是不影响使用的
bring ( 11:21:53)
主要是控制压力，一般控制在8-10磅
3648755 ( 11:22:13)
115度15分钟,严格控制压力,过了就会变黄.
987789 ( 11:22:29)
115度15分钟
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高压灭菌锅可以对空瓶进行灭菌吗？
在线时间71 小时
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签到天数: 5 天[LV.2]偶尔看看I
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中级会员, 积分 270, 距离下一级还需 330 积分
我们检测自来水的微生物时，用的是高压灭菌锅灭菌过的空血清瓶，取来水样检测微生物菌落总是竟然很高，第二次用的是装满蒸馏水灭菌过的瓶子，用时将里面原来灭菌过的水倒掉，去自来水样，结果是合格的，不知道第一次是瓶子的原因？还是其它的原因？
在线时间5980 小时
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签到天数: 2 天[LV.1]初来乍到
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空瓶当然可以高压蒸汽灭菌啊
不过最好是干热灭菌，只是不知你那瓶子耐不耐高温
估计你的问题不是瓶子的问题
[fly]天使就是整个世界离你而去的时候，静静向你走来的人[/fly]
在线时间15299 小时
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签到天数: 704 天[LV.9]以坛为家II
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空瓶灭菌的时间要长些&&121度 30分钟
忠孝仁义做人。求真如实做事——王梦恕
在线时间2162 小时
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签到天数: 1 天[LV.1]初来乍到
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可以将空瓶放入高压锅中灭菌！
时间仓促的情况下，我们也用湿热灭菌的！
机会凭自己争取！
命运靠自己把握！
生命是自己的画板！
为什么要依赖别人着色？
(敬天爱人)
在线时间959 小时
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签到天数: 189 天[LV.7]常住居民III
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很可能第一次没有达灭菌要求
是有菌空瓶
空瓶里加满水
可增大灭菌过程传热速度
增强灭菌效果
在线时间21 小时
阅读权限20
该用户从未签到
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我这几天做的也是，地下水竟然检出大肠菌群，也不知道是灭菌不彻底，还是采样的问题。我是将瓶子用报纸包好瓶盖，瓶颈，缠上，121-122°灭菌22分钟，
是不是时间短？应该30分钟？
在线时间7713 小时
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签到天数: 7 天[LV.3]偶尔看看II
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回复 6# 的帖子
&121-122°灭菌22分钟&对付“大肠菌群”应该没有问题。许老师说的30分钟可能是针对潜在的耐高温菌。
欢迎参与技术讨论
(敬天爱人)
在线时间959 小时
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签到天数: 189 天[LV.7]常住居民III
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原帖由 紫云裳 于
22:05 发表
我这几天做的也是，地下水竟然检出大肠菌群，也不知道是灭菌不彻底，还是采样的问题。我是将瓶子用报纸包好瓶盖，瓶颈，缠上，121-122°灭菌22分钟，
是不是时间短？应该30分钟？
其实22分钟或是30分钟目的都是杀死瓶内微生物
在不清楚条件的情况下，可以延时以达到目的
如果此步不能完全杀死微生物
检测结果不超标了证明合格，如果超标则不能判断合格与否
欢迎参与技术讨论
(青木堂大师兄)
在线时间313 小时
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该用户从未签到
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不过 要是检测时用到的器皿，最好用高压干热灭菌~
当风停了，你带走的只是我的心。
在线时间2332 小时
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签到天数: 4 天[LV.2]偶尔看看I
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如果使用血清瓶子，
最大的问题就是可能因为瓶子内部存留了没有充分清洗干净的血清，
这类物质具有细菌的保护能力、中和消毒剂能力，
可能能够更准确体现水中的微生物数量。
我不确定你们采样之后一直到检验结束的时间。
因为如果时间较长，
可能导致样品中间的细菌在含有血清的瓶子里面繁殖的可能。
感谢您对论坛的支持
在线时间15299 小时
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签到天数: 704 天[LV.9]以坛为家II
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谢谢野兽老师，怎么变酒鬼了
忠孝仁义做人。求真如实做事——王梦恕
在线时间15299 小时
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是不是因为血清瓶内的空气不容易灭菌呢？？
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Powered by溴酚蓝能高压灭菌吗?
我抄鸟ATA0117
如果是1%的溴酚蓝或0.05%的溴酚蓝 的话应该是可以,可以参照培养基灭菌,
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【求助】用于制备感受态细胞的氯化钙可以高压灭菌吗?
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这个帖子发布于9年零284天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
用于制备感受态细胞的氯化钙可以高压灭菌吗?
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就是应该高压灭菌后使用的
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最好是过滤灭菌的,保持浓度不便但是有时候偷懒,直接高温灭菌,也没明显影响可以高温灭菌
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我看的参考基本上都是过滤除菌的,但是我感觉过滤操作较麻烦且容易污染,我用高压灭菌不知道对氯化钙有什么影响?
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我觉得过滤挺好的也不是太麻烦过滤的时候还能分装
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最好不要高压灭菌
cacl2的浓度直接影响着感受态的转化效率cacl2浓度要控制在0.1mol/L 所以你可以先过滤Imol/L母液用0.22um滤器过滤除菌 4度保存 使用时在超菌台 再用双蒸水稀释10倍使用.
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我的导师(英国回来的)觉得过滤不能很好除菌,要求我们高压灭菌,转化的效果还挺好的
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可以灭，但是灭时不要超过121就可以了。
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过滤应该可以吧. 我们就是过滤后再稀释使用的.
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过滤使用很方便的阿，高压后浓度有变吧
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我们几年来一直用高温高压灭菌消毒。用双蒸水配成0.1Mol/L，通常配100ML，消毒后放4度冰箱备用。1年后拿出来用也很好！
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高压没问题，一点浓度变化不会有任何的影响
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120度20分钟，没问题，效果好
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必须要高压灭菌
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必须高压 但是提醒你高压时旋松些瓶盖，防止爆裂。当压好后，立即旋紧 4度保存，使用时按无菌原则。（120度，20分钟）我们实验室一直都是这样的，制备的效率很高的。
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我每次称cacl2的时候，都是随便称一下，就稀释，高压灭菌了，这个浓度应该不是要求非常准确吧，我觉得最主要的是它的纯度，因为ca细胞一般是要用ca去诱导就可以的，我个人看法．
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经试验鉴定 过滤和高压灭菌都可以
没有感觉到差别
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我同样lihuanzheng战友的说法，我觉得浓度影响不是很大，关键是纯度．
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我一直都是过滤除菌，结果有一次突发奇想用了高压灭菌，结果发现产生不少沉淀，不是放在玻璃瓶里面灭的，放在50ml离心管。
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氯化钙的质量(纯度)太重要了!最好买进口货,我们一向都高压灭菌的,毫无影响;但如果使用国产的,做出来的感受态效率十分不稳定!
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我们实验室是用过滤除菌的,注意无菌操作,我同意freshsand0225 战友的说法.我们也是过滤Imol/L母液用0.22um滤器过滤除菌 4度保存,用时稀释
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关键是纯度,两种方法都可以
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灭菌是一定的，我一直用121度15分钟，效果很好，氯化钙的质量很重要。
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我们实验室用的cacl2都是121°高压灭菌的，感受态效果还不错了
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我们高压灭菌，感觉转化效率也蛮高的。。。。
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需要灭菌啊，不一定高压，也可以过膜。
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个人觉得虽然高压灭菌也可，但过滤除菌较好，这不是担心高压灭菌会造成浓度改变，而主要是防止灭活细菌的遗传物质被转化到感受态细胞内。
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灭过一次,产生了不少沉淀,想想应该是高温下破坏了氯化钙水解平衡变成了氢氧化钙了,所以一直用过滤除菌...
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