实验二、细菌革兰氏染色法_百度文库
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实验二、细菌革兰氏染色法|
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氢氧化钾实验法对革兰氏染色法的辅助鉴别
【摘要】：氢氧化钾实验法对革兰氏染色法的辅助鉴别肖荣华（黑龙江农垦工业学校萝北１５４２１１）程光（黑龙江省佳木斯肉类联合加工厂）范永久（黑龙江省友谊农场革兰氏染色法是细菌学中最常见的一种鉴别染色法。此法可将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。其方法是将结...
【作者单位】：
【关键词】：
【分类号】：O656【正文快照】：
氢氧化钾实验法对革兰氏染色法的辅助鉴别肖荣华（黑龙江农垦工业学校萝北１５４２１１）程光（黑龙江省佳木斯肉类联合加工厂）范永久（黑龙江省友谊农场革兰氏染色法是细菌学中最常见的一种鉴别染色法。此法可将细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌两大类。其方法是将结晶
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京公网安备74号革兰氏染色的改良快速染色法--《贵阳医学院学报》1958年01期
革兰氏染色的改良快速染色法
【摘要】：正 革兰氏染色在细菌学检验工作中是最常用的一种染色法,它可以初步地来鉴别细菌。帮助诊断,在我们的实际工作中,为了节省时间,我们曾对革兰氏染色法加以改良。长期地应用这种革兰氏改良染色法以来,证明其染色结果较之各类书刊中所介绍者有过之无不及。现将这种改良快
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革兰氏染色在栩菌学检脸工作中是最常用的一种染色法:它可以初步地来鉴别栩菌。二一帮助熟断。在我啊的实际工作中。为了节省时简:我俩曹对革兰氏染色法加以改良。长期地应用这种革兰氏改良染色法以来,靓明其染色拮果较之各类书刊中所介招者有过之无不及。砚将这种改良快速法
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京公网安备74号在细菌学实验室里，革兰氏染色法是最重要的染色方法。下列染色过程中，不正确的是()。A．制作细菌热固定涂片B．用结晶紫染色后冲洗C．用含I2的乙醇溶液再染色后，然后用乙醇脱色D．用蕃红（藏红）复染C20..域名：学优高考网，每年帮助百万名学子考取名校！名师解析高考押题名校密卷高考冲刺高三提分作业答案学习方法问题人评价，难度：0%在细菌学实验室里，革兰氏染色法是最重要的染色方法。下列染色过程中，不正确的是(? )。A．制作细菌热固定涂片 B．用结晶紫染色后冲洗C．用含I2的乙醇溶液再染色后，然后用乙醇脱色? D．用蕃红（藏红）复染马上分享给朋友：答案C点击查看答案解释本题暂无同学作出解析，期待您来作答点击查看解释相关试题革兰氏染色法步骤及原理
革兰氏染色法步骤及原理
G﹢菌：细胞壁厚，肽聚糖网状分子形成一种透性障，当乙醇脱色时，肽聚糖脱水而孔障缩小，故保留结晶紫-碘复合物在细胞膜上。呈紫色。
Gˉ菌：肽聚糖层薄，交联松散，乙醇脱色不能使其结构收缩，其脂含量高,乙醇将脂溶解，缝隙加大，结晶紫-碘复合物溶出细胞壁，沙黄复染后呈红色。
革兰氏染色法一般包括初染、媒染、脱色、复染等四个步骤，具体操作方法是：
革兰氏染色反应是细菌分类和鉴定的重要性状。它是1884
年由丹麦医师Gr 二创立的。革兰氏染色法（Gram stain
）不仅能观察到细菌的形态而且还可将所有细菌区分为两大类：染色反应呈蓝紫色的称为革兰氏阳性细菌，用G＋表示：染色反应呈红色（复染颜色）的称为革兰氏阴性细菌，用G
一表示。细菌对于革兰氏染色的不同反应，是由于它们细胞壁的成分和结构不同而造成的。革兰氏阳性细菌的细胞壁主要是由肤聚糖形成的网状结构组成的，在染色过程中，当用乙醇处理时，由于脱水而引起网状结构中的孔径变小，通透性降低，使结晶紫一碘复合物被保留在细胞内而不易脱色，因此，呈现蓝紫色；革兰氏阴性细菌的细胞壁中肤聚糖含量低，而脂类物质含量高，当用乙醇处理时，脂类物质溶解，细胞壁的通透性增加，使结晶紫一碘复合物易被乙醇抽出而脱色，然后又被染上了复染液（番红）的颜色，因此呈现红色。
革兰氏染色需用四种不同的溶液：碱性染料（basic dye
）初染液；媒染剂（mordant ) ；脱色剂( decolorising agent ）和复染液（counter stain
）。碱性染料初染液的作用象在细菌的单染色法基本原理中所述的那样，而用于革兰氏染色的初染液一般是结晶紫（crystal violet
）。媒染剂的作用是增加染料和细胞之间的亲和性或附着力，即以某种方式帮助染料固定在细胞上，使不易脱落，碘（iodine )
是常用的媒染剂。脱色剂是将被染色的细胞进行脱色，不同类型的细胞脱色反应不同，有的能被脱色，有的则不能，脱色剂常用95
％的酒精（ethanol
）。复染液也是一种碱性染料，其颜色不同于初染液，复染的目的是使被脱色的细胞染上不同于初染液的颜色，而未被脱色的细胞仍然保持初染的颜色，从而将细胞区分成G
＋和G 一两大类群，常用的复染液是番红。
将培养的不同菌分别作涂片（注意涂片切不可过于浓厚），干燥、固定。固定时通过火焰l 一2
次即可，不可过热，以载玻片不烫手为宜。
）初染加草酸铰结晶紫一滴，约一分钟，水洗。
）媒染滴加碘液冲去残水，并覆盖约一分钟，水洗。
( 3 ）脱色将载玻片上面的水甩净，并衬以白背景，用95
％酒精滴洗至流出酒精刚刚不出现紫色时为止，约20 一30 秒钟，立即用水冲净酒精。
( 4 ）复染用番红液染1 一2
分钟，水洗。
）镜检干燥后，置油镜观察．革兰氏阴性菌呈红色，革兰氏阳性菌呈紫色。以分散开的细菌的革兰氏染色反应为准，过于密集的细菌，常常呈假阳性。
同法在一载玻片上以大肠杆菌与枯草芽孢杆菌混合制片，作革兰氏染色对比。
革兰氏染色的关键在于严格掌握酒精脱色程度，如脱色过度，则阳性菌可被误染为阴性菌：而脱色
不够时，阴性菌可被误染为阳性菌。此外，菌龄也影响染色结果，如阳性菌培养时间过长，或已死亡及
部分菌自行溶解了，都常呈阴性反应。
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