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黄斑蓝子鱼血清寄生虫及细菌活性物质的研究.pdf133页
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黄斑蓝子鱼血清寄生虫及细菌活性物质的研究
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中山大学博士学位论文 黄斑蓝子鱼血清抗寄生虫及细菌活性物质的研究 专 业:水生生物学 博士生:王方华 指导老师:谢明权教授
摘要 本论文在8种主要海水养殖鱼类对刺激隐核虫感染的敏感性试验中,发现黄斑蓝子
鱼对刺激隐核虫感染的敏感性较低,表现出较强的抵抗力,平均感染强度仅为
刺激隐核虫的幼虫及滋养体均具有较强的杀灭作用,其中对幼虫的阻动效价高达
44.51士22.982。利用光学显微镜,扫描电子显微镜及荧光显微镜对体外阻动过程观察的
结果表明该血清能够导致刺激隐核虫幼虫纤毛的脱落、大核的肿胀破裂,继而导致外膜
的破裂,内容物的释放。另外,光学显微镜下观察也发现黄斑蓝子鱼的血清同样能导致
刺激隐核虫滋养体细胞的破裂及内容物的释放。 在此研究的基础上,我们还首次测定了黄斑蓝子鱼的血清对其它两种寄生虫 淡水小
瓜虫及布氏锥虫 及各种细菌的体外作用效果。结果表明在体外该血清对两种寄生虫均
具有较强的杀灭作用。其中对于淡水小瓜虫的阻动效价为21.33士9.238,且作用机制与
对刺激隐核虫的相似,均导致细胞核膜和外膜的破裂。黄斑蓝子鱼血清对于布氏锥虫的
最小杀虫浓度为1.5%,并且在该浓度下lh内就能使虫体全部崩解。激光共聚焦显微镜
观察发现该血清能导致虫体形态发生明显改变,细胞破裂,内容物释放。血清的抑菌谱
测定试验中也发现黄斑蓝子鱼的血清对所测定的3种革兰氏阳性菌和6种革兰氏阴性菌
均有抑菌效果,但对于黑曲霉和小麦赤霉菌两种真菌则无抑菌作用。扫描电镜观察结果
表明该血清能导致大肠杆菌的菌体表面出现明显的孔洞,但对于金黄色葡萄球菌则只造
成菌体表面产生褶皱
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细菌介绍及研究历史
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细菌(英文:germs;学名:bacteria)广义的细菌即为原核生物是指一大类细胞核无核膜包裹,只存在称作拟核区(nuclear region)(或拟核)的裸露DNA的原始单细胞生物,包括真细菌(eubacteria)和古生菌(archaea)两大类群。人们通常所说的即为狭义的细菌,狭义的细菌为原核微生物的一类,是一类形状细短,结构简单,多以二分裂方式进行繁殖的原核生物,是在自然界分布最广、个体数量最多的有机体,是大自然物质循环的主要参与者。 细菌主要由细胞膜、细胞质、核质体等部分构成,有的细菌还有荚膜、鞭毛、菌毛等特殊结构。绝大多数细菌的直径大小在0.5~5μm之间。并可根据形状分为三类,即:球菌、杆菌和螺形菌(包
细菌括弧菌、螺菌、螺杆菌)。 按细菌的生活方式来分类,分为两大类:自养菌和异养菌,其中异养菌包括腐生菌和寄生菌。按细菌对氧气的需求来分类,可分为需氧(完全需氧和微需氧)和厌氧(不完全厌氧、有氧耐受和完全厌氧)细菌。按细菌生存温度分类,可分为喜冷、常温和喜高温三类。细菌的发现者:荷兰商人安东·列文虎克。 细菌是生物的主要类群之一,属于细菌域。细菌是所有生物中数量最多的一类,据估计,其总数约有 5×10的三十次方个。细菌的个体非常小,目前已知最小的细菌只有0.2微米长,因此大多只能在显微镜下看到它们。细菌一般是单细胞,细胞结构简单,缺乏细胞核、细胞骨架以及膜状胞器,例如线粒体和叶绿体。基于这些特征,细菌属于原核生物(Prokaryota)。原核生物中还有另一类生物称做古细菌(Archaea),是科学家依据演化关系而另辟的类别。为了区别,本类生物也被称做真细菌(Eubacteria)。 细菌广泛分布于土壤和水中,或者与其他生物共生。人体身上也带有相当多的细菌。据估计,人体内及表皮上的细菌细胞总数约是人体细胞总数的十倍。此外,也有部分种类分布在极端的环境中,例如温泉,甚至是放射性废弃物中,它们被归类为嗜极生物,其中最著名的种类之一是海栖热袍菌(Thermotoga maritima),科学家是在意大利的一座海底火山中发现这种细菌的。然而,细菌的种类是如此之多,科学家研究过并命名的种类只占其中的小部份。细菌域下所有门中,只有约一半包含能在实验室培养的种类。 细菌的营养方式有自养及异养,其中异营的腐生细菌是生态系中重要的分解者,使碳循环能顺利进行。部分细菌会进行固氮作用,使氮元素得以转换为生物能利用的形式。 研究历史 细菌最早是被路易·巴斯德(Louis Pasteur, )发现的,他用鹅颈瓶实验指出,细菌是由空气中已有细菌产生的,而不是自行产生,并研制出“巴氏消毒液”。 微生物学家巴斯德细菌这个名词最初由德国科学家埃伦伯格(Christian
细菌Gottfried Ehrenberg, )在1828年提出,用来指代某种细菌。这个词来源于希腊语βακτηριον,意为“小棍子”。 1866年,德国动物学家海克尔(Ernst Haeckel, )建议使用“原生生物”,包括所有单细胞生物(细菌、藻类、真菌和原生动物)。 1878年,法国外科医生塞迪悦(Charles Emmanuel Sedillot, )提出“微生物”来描述细菌细胞或者更普遍的用来指微小生物体。 因为细菌是单细胞微生物,用肉眼无法看见,需要用显微镜来观察。1683年,安东·列文虎克(Antony van Leeuwenhoek, )最先使用自己设计的单透镜显微镜观察到了细菌,大概放大200倍。路易·巴斯德(Louis Pasteur, )和罗伯特·科赫(Robert Koch, )指出细菌可导致疾病。 种类 细菌可以按照不同的方式分类。细菌具有不同的形状。大部分细菌是如下三类:杆菌是棒状;球菌是球形(例如链球菌或葡萄球菌);螺旋菌是螺旋形。另一
细菌类,弧菌,是逗号形。 细菌的结构十分简单,原核生物,没有膜结构的细胞器例如线粒体和叶绿体,但是有细胞壁。根据细胞壁的组成成分,细菌分为革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌。“革兰氏”来源于丹麦细菌学家革兰(Hans Christian Gram),他发明了革兰氏染色。 有些细菌细胞壁外有多糖形成的荚膜,形成了一层遮盖物或包膜。荚膜可以帮助细菌在干旱季节处于休眠状态,并能储存食物和处理废物。 细菌的分类的变化根本上反应了发展史思想的变化,许多种类甚至经常改变或改名。最近随着基因测序,基因组学,生物信息学和计算生物学的发展,细菌学被放到了一个合适的位置。
细菌最初除了蓝细菌外(它完全没有被归为细菌,而是归为蓝绿藻),其他细菌被认为是一类真菌。随着它们的特殊的原核细胞结构被发现,这明显不同于其他生物(它们都是真核生物),导致细菌归为一个单独的种类,在不同时期被称为原核生物,细菌,原核生物界。一般认为真核生物来源于原核生物。 通过研究rRNA序列,美国微生物学家伍兹(Carl Woese)于1976年提出,原核生物包含两个大的类群。他将其称为真细菌(Eubacteria)和古细菌(Archaebacteria),后来被改名为细菌(Bacteria)和古菌(Archaea)。伍兹指出,这两类细菌与真核细胞是由一个原始的生物分别起源的不同的种类。研究者已经抛弃了这个模型,但是三域系统获得了普遍的认同。这样,细菌就可以被分为几个界,而在其他体系中被认为是一个界。它们通常被认为是一个单源的群体,但是这种方法仍有争议。 古细菌 古细菌(archaeobacteria) (又可叫做古生菌或者古菌)是一类很特殊的细菌,多生活在极端的生态环境中。具有原核生物的某些特征,如无核膜及内膜系统;也有真核生物的特征,如以甲硫氨酸起始蛋白质的合成、核糖体对氯霉素不敏感、RNA聚合酶和真核细胞的相似、DNA具有内含子并结合组蛋白;此外还具有既不同于原核细胞也不同于真核细胞的特征,如:细胞膜中的脂类是不可皂化的;细胞壁不含肽聚糖,有的以蛋白质为主,有的含杂多糖,有的类似于肽聚糖,但都不含胞壁酸、D型氨基酸和二氨基庚二酸。
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