稀释平板计数法涂布平板法计数为什么结果偏小

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2015-02-20 08:46 标签： 稀释涂布平板法计数
稀释涂布平板法到底是计数方法还是接种方法?
是接种方法,可以用于记数,所以大多都才有这种方法接种.
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关于稀释平板计数法的疑问
1.我用的浇注法，应该24h计数还是48h计数？
2.长了24h后培养基表面的菌落很明显，但是培养基内部的菌就是一个小点点，很难看到，稀释倍数低的平板像是10倍100倍1000倍几乎全部都是一个点一个点大片大片的挺均匀根本看不清。这时该怎么计数呢？稀释度高的培养基内部也有一些点点，是表面和内部的都记上去吗？
3.我一共做了7个梯度的十倍稀释。原菌液倒平板之前的OD是1.13了，稀释十倍之后变成0.13，稀释100倍是0.01，1000居然变成0了，后面的稀释度也是0左右。那这么看来菌液里的菌很少很少很少了，可是为什么平板计数后后面OD值是0的菌长出来的菌落还挺多啊，不数那些点点就差不多在30-300之间，数了差不多1000以上了。。。。
不懂怎么计数。我是想做一个CFU与OD之间关系的曲线来着。
是不是该等平板培养一段时间的同时要将相应稀释倍数的菌同等条件培养呢？是不是菌在平板里扩大培养了所以之前测的OD值是不对的？
2.倒推的意思是，假如说我的第五个十倍稀释是50个菌落，那倒退回第四个十倍稀释就是500个？
3.你的意思是说培养基内部的小点点是杂菌？不会吧，因为高浓度菌液长出来的是很密密麻麻的小点点，我是倾注平板不是涂布平板所以培养基内部也会有菌的吧？
可是我纠结的是我每次做实验之前都要确保CFU在10的6次方，要是每次都这么数一次，那就是把前一天铺平板的菌液倒平板之后保存在4度吗？然后等第二天长出来再计数选择哪个稀释度的菌液吗？
我觉得是的，但是不知道该不该计算进去
2.我稀释第7个10倍数出来的是100个菌落，每个平板接种的是0.2ml那计算公式应该是100*5*10（7次方）=5*10（9次方），那就是原菌液是这个浓度的是吧，那我需要1*10（6次方），这个是不是把我的原菌液稀释5000倍，是这个意思吗？
3.我的第7个10倍稀释出来的输出来的菌落都那么多，OD还是0这没法儿在稀释了吧？
我使用培养基稀释的，多多交流哈
有道理，不过个人认为用没用过的培养基做对照还是不够准确，要用培养过去除菌体的培养基就更好了。
2 是的，但不是把原菌液稀释5000倍，而是梯度稀释，或者说取你第3个稀释梯度再做调整。
3、你的第7个10倍稀释取0.2ml有100个菌落，那说明你该梯度的菌液每ml菌数目大概是500个，这个数目是非常少的啊，溶液透明，od是0很正常。。。，
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