慢病毒包装原理一般多少钱?

Lenti-Pac&慢病毒包装试剂盒
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Lenti-Pac&慢病毒颗粒包装试剂盒
高转导效率,高病毒滴度,高蛋白表达水平
美国GeneCopoeia(复能基因)的Lenti-Pac& HIV 和 FIV包装系统包含最佳的包装质粒混合物,eGFP对照克隆和新研发的慢病毒系统专用的转染试剂。与GeneCopoeia OmicsLink& ORF慢病毒表达克隆配套使用,可获得高病毒滴度与高表达水平。
Lenti-Pac HIV表达包装试剂盒
基于HIV骨架的慢病毒包装质粒 ; 附赠eGFP对照克隆;
EndoFectin& Lenti 转染试剂
提供产率优化的重组慢病毒
(基于HIV的慢病毒载体)
Lenti-Pac FIV 表达包装试剂盒
基于FIV骨架的慢病毒包装质粒; 附赠eGFP对照克隆;
EndoFectin& Lenti 转染试剂
提供产率优化的重组慢病毒
(基于FIV的慢病毒载体)
GeneCopoeia293Ta慢病毒包装细胞系
1.5 x 106cells 细胞
低传代的认证细胞株
Lenti-Pac 慢病毒浓缩试剂盒
回收率可达90%,适用于几乎所有的慢病毒颗粒,无需额外离心,整个过程只需3小时。
快速简便的纯化慢病毒颗粒。
慢病毒颗粒滴度检测试剂盒
主要组分包括RNA提取试剂, qRT-PCR反应试剂以及内参对照
可快速、简便地测定病毒拷贝数,并确定病毒包装是否成功
GeneCopoeia GCI-L3 大肠杆菌化学转化感受态细胞
适合转化OmicsLink 慢病毒载体介导的ORF 表达克隆的理想细胞株
转化效率高;重组率低
Endofectin Lenti 转染试剂
专为 GeneCopoeia HIV/ FIV慢病毒表达系统优化
转染效率高、毒性低,结果可靠可重复
OmicsLink 慢病毒载体介导的ORF表达克隆
由CMV 启动子驱动的25,000 个人类 /15,000个 小鼠源慢病毒表达克隆
可直接用于转染,包装出病毒颗粒的慢病毒表达克隆
OmicsLink 慢病毒载体介导的shRNA表达克隆
覆盖人、小鼠、大鼠全基因组,HIV/FIV慢病毒骨架载体,带有eGFP或mCherry报告基因,
含eGFP或mCherry报告基因;
全基因组覆盖人、小鼠和大鼠基因
高效抑制靶基因; 最低限度的脱靶效应
miExpress 前体microRNA表达克隆
750 个人 /450个 小鼠/270 个大鼠的miExpress 前体microRNA表达克隆,
FIV慢病毒载体骨架,含eGFP报告基因
研究miRNA对相应基因和蛋白质的调控与功能
miArrest&慢病毒载体miRNA inhibitor表达克隆
1126个人 /672个 小鼠/408 个大鼠的miRNA,慢病毒载体骨架,含eGFP或mCherry报告基因。
特异、高效地抑制生物体内源性miRNA的活性,是研究miRNA功能的必要工具
HIV与FIV包装系统均可确保重组转录本在哺乳动物细胞中的高效表达,这些可适用范围广并经优化的系统包括高质量的慢病毒表达克隆,慢病毒包装质粒和最新研制的能高效转染包装细胞的试剂:
全长测序、即买即用、并经过严格验证的表达克隆(包括慢病毒骨架的ORF表达克隆,miRNA克隆和shRNA克隆),其载体经过改造优化,无论对分化还是未分化细胞,都能确保高转导效率和高蛋白表达水平。
包装质粒可协同高效的表达慢病毒包装必须的所有原件,确保将重组转录子包装成有感染性的病毒颗粒,同时病毒基因组不能进行自我复制。
EndoFectin& Lenti,慢病毒系统专用转染试剂,通过多种慢病毒对照克隆(包括eGFP和mCherry对照克隆)与慢病毒表达克隆、包装质粒共转染包装细胞测试,证实可获得高的病毒滴度(图1)。
与GeneCopoeia优化的包装系统共同使用,GeneCopoeia慢病毒克隆产生的有感染性的上清液,无需浓缩即可高效转导靶细胞(图2)。
GeneCopoeia慢病毒表达克隆通过专利技术构建,可将含目的基因的重组转录子高效的传递至任何类型的细胞,并可进行高效表达。为您保证全长序列结构中的重要区域的完整性,并在合理的价格基础上获得更精确可靠的结果。
原代细胞、干细胞或为分化细胞转染完全攻略
不确定那种产品组合或载体更加适合您的研究项目吗?请,我们将给您一些建议和参考。
转染试剂对比
图1. 分别用EndoFectin Lenti转染试剂(左列)和 一种常用的脂质体转染试剂(右列)将GeneCopoeia 慢病毒表达克隆Ex-mCHER-Lv105(表达红色荧光蛋白)及Lenti-Pac HIV packaging Mix 转染HEK293T包装细胞,转染后48h通过荧光显微镜(上排)和相差显微镜(下排)检测细胞状态。使用EndoFectin Lenti转染试剂的细胞产生的病毒滴度比使用常用的脂质体转染试剂的细胞高20倍
Packaging Mixes对比
图2. 表达eGFP的慢病毒阳性对照克隆(GeneCopoeia EX-EGFP-Lv105)与不同packaging mixes共转293Ta包装细胞(GeneCopoeia CLv-PK-01)。产生的病毒(未经浓缩)直接转导24孔板中的H1299 细胞。转导后72h荧光显微镜观察: A) GeneCopoeia Lenti-Pac HIV Expression Packaging M B) LX Packaging M and C) UM Packaging Mix.
Lenti-Pac& 293Ta慢病毒包装细胞系
美国GeneCopoeia(复能基因)同时提供293Ta包装细胞系,与优化的ORF、miRNA、shRNA慢病毒载体表达克隆共同包装产生高滴度慢病毒颗粒。
Lenti-Pac& 慢病毒颗粒浓缩试剂盒
Lenti-Pac& 慢病毒纯化试剂盒操作简便,研究者只需将慢病毒上清与试剂按比例混合孵育后离心,即可得到纯化的慢病毒颗粒。
慢病毒颗粒回收率最高可达90%
适合于几乎所有类型的慢病毒颗粒
只需2步离心,整个纯化过程最少只需3小时
Lenti-Pac& 慢病毒颗粒滴度检测试剂盒
GeneCopoeia设计的Lenti-Pac& HIV 和 FIV qRT-PCR慢病毒颗粒滴度检测试剂盒可快速、简便地测定病毒拷贝数,并确定病毒包装是否成功。该试剂盒主要组分包括RNA提取试剂, qRT-PCR反应试剂以及内参对照。慢病毒的RNA基因组被反转录后用qRT-PCR和SYBR& green技术进行定量。
Lenti-Pac FIV Expression Packaging Kit
(20次反应)
基于FIV骨架的慢病毒颗粒包装试剂
FPK-LvTR-20
¥3,912.00
Lenti-Pac FIV Expression Packaging Kit
(40次反应)
基于FIV骨架的慢病毒颗粒包装试剂
FPK-LvTR-40
¥7,112.00
Lenti-Pac HIV Expression Packaging Kit
(20次反应)
基于HIV骨架的慢病毒颗粒包装试剂
HPK-LvTR-20
¥4,736.00
Lenti-Pac HIV Expression Packaging Kit
(40次反应)
基于HIV骨架的慢病毒颗粒包装试剂
HPK-LvTR-40
¥7,912.00
Lenti-Pac& 293Ta慢病毒包装细胞系
(1.5 x 106 cells)
与优化的ORF、miRNA、shRNA慢病毒载体表达克隆共同包装产生高滴度慢病毒颗粒
¥1,500.00
Lenti-Pac& Lentivirus Concentration Solution (50 ml)
快速简便的浓缩慢病毒颗粒
LPR-LCS-01
¥1,500.00
Lenti-Pac HIV qRT-PCR Titration Kit
(20次RT反应 +50次PCR反应 )
基于qRT-PCR技术的HIV骨架慢病毒颗粒
滴度检测试剂
HPR-LTK-050
¥2,850.00
Lenti-Pac HIV qRT-PCR Titration Kit
(40次RT反应 +100次PCR反应 )
基于qRT-PCR技术的HIV骨架慢病毒颗粒
滴度检测试剂
HPR-LTK-100
¥4,300.00
Lenti-Pac FIV qRT-PCR Titration Kit
(20次RT反应 +50次PCR反应 )
基于qRT-PCR技术的FIV骨架慢病毒颗粒
滴度检测试剂
FPR-LTK-50
¥2,850.00
Lenti-Pac FIV qRT-PCR Titration Kit
(40次RT反应 +100次PCR反应 )
基于qRT-PCR技术的FIV骨架慢病毒颗粒
滴度检测试剂
FPR-LTK-100
¥4,300.00
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慢病毒包装服务的详细描述:
&&&&慢病毒包装一、慢病毒服务简介慢病毒(Lentivirus)载体是以人类免疫缺陷I型病毒(HIV-1)为基础发展起来的基因载体。它是一种逆转录病毒,能使外源基因整合入宿主的基因组稳定、长期表达,但却比一般的逆转录病毒具有更高的滴度和更广的宿主范围。携带外源基因的慢病毒载体与包装载体(表达病毒包装所需辅助蛋白)一同转染包装细胞,即可进行病毒的包装;经收集和浓缩的慢病毒液可以直接用于感染宿主细胞或活体动物模型。辉骏生物使用的慢病毒包装系统是4质粒包装系统,包括1个慢病毒表达载体和3个慢病毒包装载体(分别表达病毒包装必需的蛋白Gag/Pol、Rev和VSV-G),包装细胞为293T细胞。辉骏生物提供包含多种荧光基因(如GFP或RFP等)、多种抗性筛选标签和多种启动子的慢病毒载体,可充分满足客户不同实验设计的要求。&二、慢病毒表达系统的特点1> 能将外源基因有效地整合入宿主染色体上,介导目的基因稳定、长期的表达;2>慢病毒有更广泛的宿主范围,能够有效地感染分裂细胞、非分裂细胞,特别适合于一些难转染的细胞(如原代细胞、干细胞、不分化的细胞)和对腺病毒感染具有较强免疫反应的细胞(如树突状细胞、单核细胞和间充质干细胞)等;3> 适用范围更广,不仅能用于体外实验,还能用于活体动物模型。4>不需要转染试剂,转导效率高,目的基因整合到宿主细胞基因组的概率大大增加;5>可用于研究基因的过表达、microRNA过表达和RNAi等。6>利用慢病毒建立稳转细胞株的时间较常规真核表达载体更短,能大大缩短实验周期、提高实验效率。&三、慢病毒技术整体流程A.慢病毒载体的构建:根据客户的不同需要,将目的基因片段连接至慢病毒载体;B.慢病毒包装:重组病毒质粒与包装质粒一起转染293T细胞进行包装;收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液,浓缩后进行滴度测试,得到滴度≥1×108TU/mL的慢病毒液;C.稳转细胞株的建立:分别使用实验组和对照组慢病毒感染细胞,利用抗生素初步筛选稳转细胞株,细胞分选得到单克隆细胞株,建立实验组和对照组的稳转细胞株。&&&在慢病毒的包装系统中,慢病毒表达载体携带病毒包装和复制所需的顺式作用元件和外源基因表达盒,3个包装质粒反式提供病毒包装必需的蛋白。辉骏生物提供多种慢病毒表达载体,具体元件如下图所示,除此之外,客户还可以根据需要更换启动子、荧光基因或抗性基因。&五、慢病毒技术服务项目&表1慢病毒服务项目及内容分类服务编号项目名称客户提供服务描述RNAi慢病毒服务FG101RNAi慢病毒载体构建目标基因登录号或序列(1)设计并合成1条干扰序列(2)构建载体FG102ARNAi慢病毒包装套餐A目标基因登录号或序列(1)设计并合成3条干扰序列(保证至少有1个靶序列的干扰效率大于70%)(2)分别构建3条载体(3)分别进行3次慢病毒包装FG102BRNAi慢病毒包装套餐B设计好的有效靶点序列(1)构建载体(2)慢病毒包装注:可提供多条干扰序列FG103ARNAi稳转细胞株构建套餐A目标基因的序列(1)设计并合成3条干扰序列(2)分别构建3条载体(3)分别进行3次慢病毒包装(4)建立稳转细胞株(得到至少1个有效干扰的细胞株)FG103BRNAi稳转细胞株构建套餐B设计好的有效靶点序列(1)构建载体(2)慢病毒包装(3)建立稳转细胞株基因过表达慢病毒服务FG111基因过表达慢病毒载体构建目标基因的模板构建载体FG112基因过表达慢病毒包装套餐目标基因的模板(1)构建载体(2)慢病毒包装FG113过表达稳转细胞株构建套餐目标基因的模板(1)构建载体(2)慢病毒包装(3)建立稳转细胞株microRNA慢病毒服务FG121microRNA过表达载体构建microRNA前体或初始产物模板构建载体FG122microRNA过表达慢病毒包装套餐microRNA前体或初始产物模板(1)构建载体(2)慢病毒包装FG123microRNA过表达稳转细胞株构建microRNA前体或初始产物模板(1)构建载体(2)慢病毒包装(3)建立稳转细胞株特别提醒:(1)基因过表达慢病毒服务适用于目标基因长度为2000bp以下的片段,2000bp以上的请具体咨询;(2)我公司亦可进行基因钓取和WB检测服务,但费用不包含在总套餐之内,需根据实际情况收费;(3)客户如对所需病毒量(TU)及病毒液滴度范围有特殊要求需提前告知,我公司一般提供的病毒滴度在1×108~1×109TU/mL之间,规格为1mL;(4)若实验材料为原代细胞和需要特殊培养的细胞,请具体咨询;(5)客户亦可根据特殊要求进行慢病毒产品定制服务。六、实验结果提交实验结束后,我公司会提交完整的实验结果,包括:1. 客户定制的相应载体、病毒液或稳转细胞株;2. 慢病毒液滴度测定报告单;3. 慢病毒载体的测序结果和峰图、引物序列、载体图谱;4. 全部实验图片;5. 详细实验报告。&&
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联系方式:是处理侵权投诉的专用邮箱,在您的合法权益收到侵害时,欢迎您向该邮箱发送邮件,我们会在3个工作日内给您答复,感谢您对世界工厂网的关注与支持!三个步骤 三十分钟 慢病毒包装就这么简单
春节前购买慢病毒包装系统立送百元话费。
将携带目的基因/shRNA的慢病毒载体和包装质粒共转染病毒包装细胞,在该细胞中进行包装,包装好的假病毒颗粒分泌到细胞外的培养基中,离心取得上清液后,浓缩可获得高滴度病毒。
慢病毒感染宿主细胞能力强,可作为基因过表达和基因干扰首选。
(1)293FT包装细胞(低代数,高效率)。
(2)慢病毒表达载体(表达基因、shRNA、miRNA等多种载体)。
(3)包装质粒混合物(优化配比,高效出毒)。
(4)高效转染试剂(来自Invitrogen的Lip2000原装转染试剂)。
(5)慢病毒浓缩液(最实用、性价比最高的慢病毒浓缩方式)。
HEK293细胞感染LV-HIF1a-sh40慢病毒72h
RGC-5细胞感染LV-RIPK3-1708慢病毒72h
操作安全简单,对设备要求低。
产毒效率高,快速收获高滴度病毒。
应用广泛,可针对细胞学实验和整体动物实验。
多种选择,基因,shRNA慢病毒包装应有尽有。
YRGene拳头产品:慢病毒包装系统 Step 1-2-3
Step 1:准备慢病毒包装专用细胞系293FT
价格(元)
Step 2:选择合适的慢病毒表达载体,构建您的目的基因
1)基因表达载体
真核筛选标记
价格(元)
pLVX-IRES-ZsGreen1
pLVX-IRES-tdTomato
pLVX-IRES-neo
pLVX-IRES-puro
pLVX-AcGFP1-N1
pLVX-DsRed-Monomer-N1
DsRed-Monome
2)shRNA表达载体
真核筛选标记
价格(元)
pLVX-shRNA1
pLVX-shRNA2
3)miRNA表达载体
真核筛选标记
价格(元)
pLVX-EGFP-IRES-neo
Step 3.慢病毒包装---慢病毒包装试剂盒
价格(元)
慢病毒包装试剂盒(包装质粒混合物、转染试剂、慢病毒浓缩液)
&5个10cm皿
10个10cm皿
20个10cm皿
您也可以选择以下精简版Kit(无转染试剂):
价格(元)
慢病毒包装试剂盒精简版(包装质粒混合物、慢病毒浓缩液)
&5个10cm皿
10个10cm皿
20个10cm皿
您也可以单独购买慢病毒包装试剂盒中的某个组分,包括慢病毒包装质粒、慢病毒浓缩液、转染试剂等。
附录一:慢病毒包装质粒
价格(元)
附录二:慢病毒浓缩液
价格(元)
慢病毒浓缩液
附录三:慢病毒对照
慢病毒对照
LV-ZsGreen1 (表达基因用对照) (绿色荧光)
&&&&&&&&&&更高滴度
LV-tdTomato (表达基因用对照) (红色荧光)
&&&&&&&&&&更高滴度
LV-shRNA-NC (表达shRNA用对照) (绿色荧光)
&&&&&&&&& 更高滴度慢病毒包装-技术培训和服务-viewsolid,viewsolid biotech co.ltd,北京唯尚立德生物科技有限公司
&人类全基因组siRNA文库
&人源cDNA克隆
&公司动态及促销
售前咨询:
技术咨询:
技术支持:Support@
慢病毒包装
日 12:05&&&&&&字体:【&&】
慢病毒背景介绍
慢病毒(Lentivirus)载体是以HIV-1(人类免疫缺陷I型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达。在感染能力方面可有效地感染神经元细胞、肝细胞、心肌细胞、肿瘤细胞、内皮细胞、干细胞等多种类型的细胞,从而达到良好的基因治疗效果。由于有些类型细胞脂质体转染效果差,转移到细胞内的siRNA半衰期短,体外合成siRNA对基因表达的抑制作用通常是短暂的,因而使其应用受到较大的限制。采用事先在体外构建能够表达siRNA的载体, 然后转移到细胞内转录siRNA的策略,不但使脂质体有效转染的细胞种类增加,而且对基因表达抑制效果也不逊色于体外合成siRNA,在长期稳定表达载体的细胞中,甚至可以发挥长期阻断基因表达的作用。因此,人们常用慢病毒载体将目的基因(或shRNA)导入动物、人原代细胞或细胞系
慢病毒的技术特点
1、侵染效率高:分裂期和分裂间期的细胞,包括造血干细胞,神经干细胞,处于分化终末的神经元,肝实质细胞等
2、多启动子:包括细胞特异性启动子和管家基因的启动子
3、整合效率高:目的基因整合到宿主细胞基因组的几率大大增加
4、容量大:能够插入大的片段( 8kb)
6、快速获得高水平的表达
7、将免疫反应降到最低
京、津、辽、吉、黑
服务热线:
地址:北京市海淀区上地开拓路5号中关村生物医药园B302&& 电话:010--& &邮箱:Order@&&慢病毒包装_百度知道
慢病毒包装
我想请问制备慢病毒时 Cacl2 ,special water,2*HBS 的作用分别是什么
提问者采纳
Cacl2 和2*HBS加到一起会生成磷酸钙沉淀,达到转染效果,质粒和沉淀包到一起,被细胞吞入2*HBS是磷酸盐缓冲液,special water是用来稀释用的
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