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-骨髓造血干细胞微环境
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OP9-DL1 细胞共培养系统在T 细胞体外定向诱导分化中的应用
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OP9-DL1 细胞共培养系统在T 细胞体外定向诱导分化中的
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＞＞＞根据所学知识判断下列几种叙述中正确的是①胸腺在免疫中的作用是先..
根据所学知识判断下列几种叙述中正确的是①胸腺在免疫中的作用是先分化出造血干细胞，进而分化出T细胞 ②过敏反应是指已免疫的机体在再次接受相同抗原的刺激时所发生的反应 ③浆细胞产生的抗体能对任何病毒起免疫作用 ④吞噬细胞、T细胞、B细胞、记忆细胞、浆细胞均能识别抗原 ⑤一种抗原只能与相应的抗体发生特异性结合 ⑥自身免疫病和艾滋病都是机体免疫功能不强或缺陷造成的
A．②⑥B．②⑤C．③⑤D．①④
题型：单选题难度：中档来源：0108
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据魔方格专家权威分析，试题“根据所学知识判断下列几种叙述中正确的是①胸腺在免疫中的作用是先..”主要考查你对&&免疫系统的组成和功能&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
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因为篇幅有限，只列出部分考点，详细请访问。
免疫系统的组成和功能
免疫系统的组成和功能：一、免疫系统的组成：二、免疫系统的功能：1、非特异性免疫（1）组成：①第一道防线：皮肤、黏膜。②第二道防线：体液中的杀菌物质（如溶菌酶）和吞噬细胞。(2)特点：人人生来就有，不针对某一特定病原体。 2、特异性免疫（第三道防线） (1)组成：主要由免疫器官和免疫细胞借助血液循环和淋巴循环而组成。(2)作用：抵抗外来病原体和抑制肿瘤等。 (3)方式：体液免疫和细胞免疫。(4)过程 ①体液免疫： ②细胞免疫3．监控和清除功能：监控并清除体内已经衰老或因其他因素而被破坏的细胞，以及癌变的细胞。 知识点拨：识别抗原和特异性识别抗原的细胞1、识别抗原的细胞：吞噬细胞.B细胞、T细胞、记忆细胞、效应T细胞。 2、特异性识别抗原的细胞：吞噬细胞只能识别自己与非己成分，因而没有特异性的识别能力，除吞噬细胞以外①中其余的细胞都有特异性的识别能力。 3、抗体与抗原结合后的反应 ①抑制病原体的繁殖，或揶制病原体对人体细胞的黏附。②多数情况下，抗原、抗体形成沉淀或细胞集团进而被吞噬细胞吞噬消化。4、体液免疫和细胞免疫的关系
知识拓展：1、免疫细胞的来源和功能
2、免疫活性物质并非都由免疫细胞产生，如唾液腺、泪腺细胞都可产生溶菌酶。 3、抗原和抗体 ①成分：抗原并非都是蛋白质，但抗体都是蛋白质。②来源：抗原并非都是外来物质（异物性），体内衰老、癌变的细胞也是抗原；抗体是人体受抗原刺激后产生的，但也可通过免疫治疗输入。③分布&&&&&&&&&&&&&& 抗原：主要存在于细胞外的抗原引起体液免疫，存在于细胞内的抗原由细胞免疫清除。抗体：主要分布于血清，也分布于组织液和外分泌液（如乳汁）中。
发现相似题
与“根据所学知识判断下列几种叙述中正确的是①胸腺在免疫中的作用是先..”考查相似的试题有：
870238719987239730019705879588人类胚胎干细胞向造血干细胞定向诱导分化的研究现状及进展
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|个人分类:|系统分类:|关键词:干细胞
世界十大 生物学 胚胎干细胞 造血干细胞 诱导分化 自我更新 信号通路
& & &近年来，随着基因工程和分子生物学的跨越式发展，包括胚胎干细胞和成体干细胞在内的干细胞领域研究迅速兴起为21世纪的研究热点，并两次入选世界十大科技新闻。人造血干细胞作为成体干细胞的重要组成，尤其在胚胎干细胞定向诱导分化为造血干细胞的机理、CD34和CD45等表面标志分子成功筛选、培养条件的优化探索中取得了突破性进展，这为治疗恶性血液疾病、根本缓解血细胞来源紧张等临床应用提供了可能。本文就人类胚胎干细胞向造血干细胞方向分化的最新研究进展作如下综述，以期为致力于该研究领域工作的科研人员提供一些有益的参考。1&胚胎干细胞的生物学特性& 胚胎干细胞（s，ES&cells）是指从哺乳动物的囊胚内细胞团（inner&cell&mass，ICM）或早期胚胎的原始生殖细胞（primordial&germ&cells，PGCs）中分离得到的细胞，如3.5d小鼠囊胚内细胞团的全能干细胞。它是一类未分化的二倍体细胞，属于成体干细胞&(adult&stem&cells,&ASCs)的范畴。广泛应用于组织工程、转基因动物、发育生物学研究以及基因表达与调控研究等领域。ESC最大的特征是具有自我更新、高度增殖和多向分化的潜能，小鼠ES细胞系由英国剑桥大学的Evans和Kaufman于1981年首次从延缓着床的小鼠囊胚内细胞团中发现并分离，而人类胚胎干细胞最早由Thomson和Shamblott研究小组于1998年培养成功。ES细胞分化是内在机制和微环境因素共同作用的结果，通过细胞单层培养和聚集培养方式可以实现ES细胞的体外分化。具体而言，分化可以通过基因等内源性因素和细胞因子、转录因子（如Oct-4）、中草药[1]和微环境等外源性因素的共同调节实现；加入DIA或LIF等细胞因子可以有效抑制其分化，这也表明ES细胞具有良好的可塑性。最新的研究表明，等[2]利用不添加血清和基质细胞的低氧胚胎干细胞也在小鼠体内成功分化为造血干细胞。& 胚胎干细胞具有与早期胚胎细胞相似的生物学特征。具体而言，包括以下几点：（1）胞体体积小，核大，有一个或多个核仁，细胞器少，核型正常；（2）端粒酶高表达；（3）增殖快，大多数时间处于S期；（4）细胞表面抗原OCT-4，可用于鉴定ES细胞是否处于未分化状态；（5）具有高分化潜能，可形成三胚层衍生物的畸胎瘤、嵌合体和类胚体等；（6）可体外增殖，通过滋养层细胞、条件培养基、抑制分化的细胞因子以维持未分化状态；（7）具有发育的全能性，在特定的体外培养条件下，能分化形成各种细胞系。2&造血干细胞的生物学特性& 造血干细胞(&hematopoietic&stem&cell，HSC)&具有高度的自我更新和多向分化潜能，是组织特异性干细胞研究中最为活跃和成熟的研究方向[3]，也是组织特异性干细胞转分化研究的发源地和核心，已经成为目前研究最为深入的成体干细胞，在世界范围内得到了广泛应用。& & & HSC起源于胚胎的主动脉旁-胚脏壁和主动脉-性腺-中肾区，随后进入卵黄囊、肝脏、胸腺及脾脏，可通过阳性富集和阴性富集方法从骨髓、外周血、脐血、胎肝等分离纯化制备。目前随着理论研究的深入和技术更新，HSC分离纯化的手段已日趋多样化，包括密度分离、MiniMACS分离、流式分选、Dyna&beads分离以及不同比密Ficoll-泛影葡胺分离等均有文献报道。HSC通过促进生长的正调控信号和负调控信号之间的平衡来实现自我更新的调控，这主要受到转录因子、细胞周期调控因子[4]、生长因子和粘附分子在内的复杂内外信号的严格调控。其中，文献已报道参与&HSC的自我更新正调控信有Notch、sonic&hedgehog(&Shh)、Bmi&1、Wnt和HOX等[5]；参与HSC增殖和分化的造血生长因子有IL-3/6/11、G-CSF、EPO、[6]、SCF和LIF等，诱导分化因子有维甲酸RA、DMSO、BMP-4[7]、β-磷酸甘油、VC、VK、地塞米松及2，5-羟基VD3&等，最近关于Actin&A在人脐带血造血干细胞的原始培养中的作用也有相关报道[8]。目前，较为常用的诱导方法有化学试剂诱导法、细胞因子诱导法、共培养诱导法和转基因诱导法四类。& 总体而言，造血干细胞具有高度的自我更新和分化潜能。具体而言，具有如下生物学特点：（1）多数造血干细胞处于G0期，大约5%处于S/G2/M期，但在造血生长因子联合作用下，可进入细胞周期；（2）部分可表达CD34、CD133、ABCG2、Thy-1分化抗原等表面标志分子，进一步分化为CD34+CD38+和CD34+CD38-两个异质性细胞亚群；（3）可进行不对称分裂，产生一个维持自我更新的HSC和一个立即分化为造血祖细胞的HSC，进而维持干细胞池的稳定和造血系统的平衡；（4）高表达人类白血病分化抗原CD45RA，而低表达HLA-DR抗原。3&造血干细胞定向诱导分化的体外研究& &目前，在ES细胞向造血细胞定向诱导分化的研究中，EBs形成法\可溶性细胞因子诱导法或与造血基质细胞（如OP9、S17、MS5基质细胞）共培养法是常用的研究手段。在该领域研究中，Doetschman、Kennedy等人先后利用BMP4、activin&A、bFGF和VEGF的甲基纤维素培养基培养出BL-CFCs，进而在小鼠ES向造血干细胞分化的研究中取得进展。Thomson实验室通过添加含SCF、BMP4、VEGF、TPO的培养基，率先诱导出表达TAL-1、LMO-2、GATA-2等转录因子的造血前体细胞细胞群；随后，Ledran等、Qiu等和Kennedy&等通过人造血微环境基质细胞与人ES&细胞共培养，先后优化了人ES&细胞具有向造血各系细胞分化的条件，得到的CD34+细胞比例达20%。& &近些年来，HSC扩增手段打破了造血干细胞只能自我更新而不能自我扩增的状况，实现了HSC数量扩增和向造血细胞的分化。研究表明，通过细胞因子的不同组合，可诱导HSC和更早的间充质干细胞在体外大量定向诱导为中性粒-巨噬细胞系祖细胞（CFU-GM）、红系造血祖细胞（CFU-E）、巨核系造血祖细胞（CFU-Meg）、嗜酸粒系造血祖细胞（CFU-Eo）等祖细胞以及血小板、淋巴细胞[9]、树突状细胞和内皮细胞[10]等功能细胞。这为充分挖掘HSC的多向分化潜能、满足基础和临床应用需要提供了条件。& 科研人员通过原始细胞成集落细胞实验（Blast&Colony&Forming&Cell，BL-CFC），对于发育学上最原始造血干细胞进行了有效检测。Choi等通过BL-CFC证实，在早期胚体内存在一种造血细胞和内皮细胞的共同前体细胞，这可能代表了最原始的造血干细胞。Kennendy等也通过合用VEGF、KL、D4T-CM、EPO四因子进行了3.25d胚体细胞产生BL-CFC的验证工作，并首次证实BL-CFC能生成初始造血细胞、有型造血细胞核内皮细胞的可能性。3.1&信号通路& 造血干细胞的自我更新和定向分化是由自身基因和外在微环境信号共同调控的结果，由一系列内源性和外源性信号机制进行精密地动态调控。长期以来，Wnt信号通路、Notch信号通路是HSC发育调控研究中两条经典的通路。Duncan&AW等[11]证实，在造血干细胞龛里的大多数细胞Notch和Wnt信号均为活化的，且多数同时利用这两条信号通路。最新的研究表明，裂原激活的蛋白激酶通路(mitogen&activated&protein&kinase&pathway,&MAPK&)是启动HSC细胞增殖最主要的机制[5]。3.1.1&Wnt信号通路& 据文献报道，Wnt和BMP为ES细胞向造血细胞分化所必需[12]，经典的Wnt信号通路在整个生物进化过程中高度保守。Wnt基因是编码一类分泌型糖蛋白的基因，最早发现于小鼠乳腺癌，目前在虫类、鱼类、人类中已被成功分离得到。Wnt配体与Frizzled家族、LRP5/6等相结合，Wnt&3a信号蛋白激活经典的Wnt&/β-catenin信号通路，引起β-catenin在胞浆内的积累，导致APC/Axin/GSK-3β关键复合体的磷酸化、泛素化降解，进而调控HSC的自我更新能力。近年来，体外人类造血前体细胞与Wnt蛋白共培养实验发现未成熟克隆形成增加，而纯化的Wnt蛋白和活性β-catenin增强了造血干细胞在小鼠体内的造血重建能力，这也进一步验证了Wnt信号通路的诱导调控作用。3.1.2&Notch信号通路& Notch信号通路高度保守，在胚胎发育中的细胞命运决定[13]和维持组织内稳态过程中发挥着重要的作用。该基因编码300ku的单链跨膜蛋白，在进化过程中高度保守，可作为膜表面受体和基因转录的调节因子。自从果蝇中被发现、克隆以来，该信号已经成为维持造血于细胞未分化状态的关键，在自我更新与成熟间发挥了“守门员”的作用。Rattis&FM等证实，Notch信号被阻断后，促进了造血干细胞分化率的提高，增强了造血系统的重建能力，这充分说明了Notch信号是维持造血干细胞未分化状态所必需的。最近的研究表明[14]，Notch信号通路和Wnt信号通路可选择性的调控造血作用。3.2&调控因子& 研究表明，在胚胎干细胞定向诱导分化为造血干细胞的进程中，要受到多种正性调控因子和负性调控因子的直接或间接调控作用。其中，HOX家族成员（如HOXA5、HOXA7、HOXA10、HOXB4等）、GATA家族成员（如GATA-1、GATA-2、GATA-3、GATA-4）、IL家族成员（如IL-1、IL-6）、C/EBP家族成员（如C/EBPα、C&/EBPβ、C/EBP、C/EBP等）、Ets家族成员（如PU.1、Spib、Flil、MEF等）以及最近几年兴起的microRNA成员和SOX17等[15]，均在此过程中发挥着一定的作用。下面就HOXB4转录因子和microRNA进行简要概述。3.2.1&HOXB4转录因子& HOXB4（Homeobox&gene&B4，HOXB4）基因属于同源盒基因家族成员，其编码的HOXB4转录因子可以通过种系特异性和阶段特异性的方式实现HSC的调控，以及参与造血调控、个体发育、形态发生和器官塑形等生命过程。该基因最早由Sauvageau等采用聚合酶链式反应从未成熟的造血干细胞中扩增出来。虽然通过基因芯片分析、深度测序和基因表达分析等取得了一定的进展，但目前对于HOXB4动态调控网络仍知之甚少[16]。研究表明，该基因不但对于增强HSC的自我更新功能和造血功能有极大的影响[17]，而且可以有效地大量扩增HSC/HPC（hematopoietic&stem&cell&/&hematopoietic&progenitor&cell,&HSC&/HPC）和加快HSC的体外分化进程[18]，同时无需加入其他的细胞因子[7]，甚至无需加入血清[19]。这主要是通过激活包括MAPK信号转导途径在内的不同的信号通路来实现的，同时又不影响机体维持正常稳态造血的调控机制。& 据最新文献报道，在不同类型的细胞中，不同浓度的HOXB4在维持HSC自我更新和诱导分化过程中的作用也有所差别[20]，而且对于耐药基因的选择体系构建也有一定的改善作用。此外，鉴于HOXB4在CD34+细胞中的高表达，同时参与Wnt和Notch等信号通路构成的HSC诱导分化和自我更新调控网络，因此也被认为是原始造血细胞中的重要调节因子。同时，HOXB4被证明为第一个能够在体内外参与促进HSC扩增而不影响其正常分化为成熟淋巴系和髓系细胞的转录因子，也收到上游刺激因子USF-1/2、NF-Y以及TPO和Wnt&3a等的调控作用。在小鼠的连续骨髓移植实验中，通过逆转录病毒转染实现HOXB4过表达，发现实验组的初级和次级受体小鼠产生再殖能力的HSC数量比对照组高出近50倍。可以预见，HOXB4及其调控的靶基因的表达上调，将会在干细胞移植和基金治疗等方面具有广阔的应用前景。3.2.2&SOX17& & &最新的文献报道[15]，作为SOX家族成员的SOX17在hESCs/iPSCs向造血干细胞的定向诱导分化过程中具有关键作用。通过SOX17过表达并检测一些已知的造血调节基因发现，在生血内皮中获得了由hESCs/iPSCs诱导产生的CD34+CD43-高表达的内皮细胞。而SOX17被抑制或失活后，该细胞群则大大提高了其向造血祖细胞分化造血的重建能力。这表明SOX17在引发内皮细胞造血潜能中发挥着关键作用，进而调节hESCs/iPSCs向造血方向分化。3.2.3&microRNA& MicroRNA&(miRNA)&是一类崭新的调控性非编码小分子RNA，大小为19~&25&nt，具有调控功能的非编码RNA，主要参与基因转录后水平的调控，在监控生物体个体发育和细胞增殖、分化进程中起着重要作用。miRNA特性大致包括细胞特异性、表达时空特异性、保守性和作用靶点的时序性。随着干细胞研究的深入，发现miRNA&参与包括胚胎干细胞和多种成体干细胞的发育进程，人类造血干细胞及其发育过程中也存在特征性miRNA&表达谱。这表明，miRNA参与调控造血干细胞发育进程，作为潜在的分子靶点，对于造血功能低下等疾病防治具有广阔的应用前景。& 最新研究表明[21]，在体外可以获得hESCs来源的CD34+造血干细胞，随后将其先后与OP9饲养层细胞共培养、与添加细胞因子的间充质干细胞共培养，可分化为不同的红系细胞。& &miRNA在调控造血干细胞定向分化的研究，最早由Chen等[22]在小鼠骨髓造血干细胞克隆研究中报道，并确立了miR-142、miR-181等在造血组织中优先表达的miRNA。其中，通过分析CD34+细胞，Georgantas等[23]在B细胞中过表达miR-181，可以显著促进造血干细胞向B细胞谱系分化的进程这表明miR-181在此过程中充当正调节因子的功效。此外，据文献报道，miRNA在造血干细胞向血小板发育进程（Garzon&R等，2006年）、脐血CD34+&造血祖细胞向红系发育过程（Felli等，2005年）、造血干细胞自我更新进程（Georgantas&R，2007年）均发挥着一定的诱导调控作用。4&人胚胎干细胞向造血干细胞方向分化的应用前景4.1&临床治疗应用& 自1998年从人的胚泡分离以来，人类胚胎干细胞研究日益成为生物医学领域的热点和国内外生命科学及生物技术领域的研究前沿。这为生殖医学、胚胎发育学、遗传学和临床医学开辟了崭新的天地，尤其是人ES&细胞体外可定向诱导分化为造血细胞的研究应用及其广泛。经过几十年的研究，目前在胚胎干细胞领域已经获得了丰硕的成果，并成为研究干细胞多能性和再生机理的基础理论的主要研究对象。近年来，尽管诱导多潜能干细胞iPSC异军突起，但随着研究的深入发现其在分化过程中面临着致瘤性等难题。因此，科学界越来越认同胚胎干细胞作为目前具有最佳增值能力和向不同方向分化能力的干细胞这一观念，人ES细胞在临床应用上仍然前景广阔。& 鉴于人胚胎干细胞向造血干细胞方向分化研究的不断深入、相关诱导分化机理的逐步揭示，其为血液系统疾病、实体瘤、免疫缺陷性疾病等的临床治疗提供了一种可靠的临床治疗选择。如通过该研究，可以提高脐血造血干细胞移植的成功率，有效地改善肿瘤放疗与化疗所致的中性粒细胞和血小板的减少、造血干细胞移植相关的血小板减少症，促进免疫治疗时NK细胞及淋巴细胞的体外扩增与激活以及DC&的生成、扩增与激活。此外，该研究对于肿瘤特异性生物免疫治疗，甚至利用基因改造攻克单基因遗传性疾病均具有良好的前景。& 与此同时，可以通过信号通路的改善和抑制来开展临床治疗。如Wnt、Notch两条通路在维持造血干细胞分化状态和诱导分化中互相联系并起着关键作用，这暗示了通过对相关信号通路进行调控以完成干细胞的体外维持和扩增的可能性，为骨髓移植、心肌梗死、心肌坏死、白血病等心血管疾病乃至帕金森氏症、糖尿病或其他严重的组织缺损性疾病等的彻底治愈带来了曙光。4.2&亟待解决的瓶颈：& 进入21世纪，人类胚胎干细胞的研究虽取得了长足的进步，但并未彻底解决ES细胞多能性及自我更新的机制[24]。一方面，胚胎干细胞的研究还受到包括生物学层面、心理学层面和社会学层面在内的伦理学制约，无法大规模地开展人类疾病治疗的研究。另一方面，胚胎干细胞定向诱导为造血细胞虽已在表型和功能上实现，但转化效率低下，使得经过基因改良的HSC的数量和比例均不能满足治疗的需求。针对这一应用局限[25]，尚需摸索二维静态培养、三维静态培养以及Luni&等[26]和Eibes等[27]开发的浮力驱动搅拌式培养等方法来改进。& 与此同时，ES细胞多能性和自我更新的机制及其定向诱导分化为造血干细胞等问题尚需深入研究。近年研究已发现Wnt、Notch通路均与转录因子密切联系，采用何种诱导因子、如何在转录水平上来干预调控这两条信号通路，以及某些细胞刺激因子的作用机制等，均还缺乏全面了解。& 造血干细胞发育分化是一个非常复杂的过程，尚存在许多亟待解决的困惑。例如，造血干细胞特异性分子标志筛选、长期增殖的关键因子、受损相关疾病发生机制等，均是当前造血干细胞研究的热点。此外，近些年来兴起的端粒酶、miRNAs等，在造血干细胞发育中又发挥何种作用机理，以及相关体内实验技术方法的建立，将是今后面临解决的新课题。参考文献：[1]&项盈,&王金福.中药对造血干/祖细胞扩增和分化的影响[&J]&.中国中西医结合杂志,&2008,&24&(&7):&666-&667[2]&et&al.[J][3]&徐建萍，卓光生.造血干细胞定向诱导分化的研究[J].引进与咨询，2009年第9期:10-13[4]&Miyake&N,Brun&AC,etal.HOXB4&induced&self&renew&al&of&hematopoietic&stem&cells&is&significantly&enhanced&by&p21deficiency.&Stem&Cells,&3-&661[5]&Wilson&A,&Trum&pp&A.&Bone&marrow&haematopoietic&stem&cell&niches.&N&at&Rev&Immunol.&-&106[6]&et&al.[J]：[7]&Zambidis&E&T,&Park&T&S,&Yu&W,&et&al.&Expression&of&angiotensin-converting&enzyme&(CD143)&identifies&and&regulates&primitive&hemangioblasts&derived&from&human&pluripotent&stem&cells.&Blood.&&(9):&[8]&et&al.[J][9]&Rosenzwajg&M,&Mark&DF,&Zhu&H,&et&al.&In&vitro&T&lymphopoiesis&of&human&and&rhesus&CD34+&progenit&or&cells.&Blood,&40-&4048[10]&Soligo&D,&Q&nirici&N,&Caneva&H&,&et&al.&High&purified&endothelial&cells&can&be&generated&from&human&AC133+&bone&marrow&precursors.&Blood,&2000,&96(&supple)&:&278a[11]&Duncan&AW,&Rattis&FM,&Dimascio&LN,et&al.&Integration&of&Notch&and&Wnt&signaling&in&hematopoietic&stem&cell&maintenance[J].Nat&Immunol,&):314-322[12]&.[J]&[13]&[J][14]&et&al.[J][15]&&,&et&al.[J]&Blood,&2012,Nov&20[16]&et&al.[J]&[17]&郑翠玲,&周斌,&陆敏.HOXB4基因在造血干细胞自我更新中的调控作用[J].中国实验血液学杂志，):&647&-&651[18]&Chan&K&M,&Bonde&S,&Klump&H,&et&al.&Hematopoiesis&and&immunity&of&HOXB4-&transduced&embryonic&stem&cell-derived&hematopoietic&progenitor&cells.&Blood.&&(6):&[19]&[J][20]&Klump&H,&Schied&mleier&B,&Baum&C.Control&of&Self&Renewal&and&Differentiation&of&Hematopoietic&Stem&Cells:&HOX&B4&on&the&Threshold.&Ann&NY&A&cad&Sci,&:&6-15[21]&et&al.[J],&&[22]&Chen&C&Z,&Li&L,&Lodish&HF,&et&al.&MicroRNAs&modulate&hematopoietic&lineage&differentiation&[&J]&.&Science,&(&5654)&:83-86[23]&Georgantas&RW&3rd,&Hildreth&R,&Morisot&S,&et&al.&CD34+&hematopoietic&stem-progenitor&cell&microRNA&expression&and&function:&a&circuit&diagram&of&di[24]&Fenno&LE,&Ptaszek&LM,&Cowan&CA.&Human&embryonic&stem&cells:&emerging&technologies&and&practical&applications.&Current&Opinion&in&Genetics&&Development,&-329fferentiation&control[J].&Proc&Natl&Acad&Sci&USA.&):&.[25]&Kresnowati&MT,&Forde&GM,&chen&XD.&Model-based&analysis&and&optimization&of&bioreactor&for&hematopoietic&stem&cell&cultivation[J].&Bioprocess&Biosyst&Eng,&):1-13[26]&Luni&C,&Feldman&HC,&et&al.&Microliter-bioreactor&array&with&buoyancy-driven&stirring&for&human&hematopoietic&stem&cell&culture&[J].&Biomicrofluidics,&):&1-13[27]&Eibes&G,&Dos&Santos&F,&Andrade&PZ,&et&al.&Maximizing&the&ex&vivo&expansion&of&human&mesenchymal&stem&cells&using&a&microcarrier-based&stirred&culture&system&[J].J&Biotechnol,&&(4):194-197
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