用分光光度法测血清蛋白含量实验报告讨论个人简历怎么写写

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蛋白含量测定
多酚氧化酶的测定:多酚氧化酶是一种含铜的氧化酶,在有氧的条件下能使一元酚和二元酚氧化产生琨,用分光光度法在525nm波长下测其吸光度,即可计算..
还原型谷胱甘肽(glutathione, GSH)是一种低分子自由基清除剂,它可清除O2˙ 、H2O2、LOOH。GSH是蛋氨酸、甘氨酸和半胱氨酸组成的一种小分子肽,是..
GSH、AsA含量测定/抗坏血酸过氧化物酶(APX)活性测定:主要介绍了抗坏血酸(AsA)和谷胱甘肽(GSH)含量的测定方法以及抗坏血酸过氧化物酶(APX)..
甲基化是在甲基转移酶的催化下,DNA的CG两个核苷酸的胞嘧啶被选择性地添加甲基基团的化学修饰现象。通常发生在5胞嘧啶位置上,具有调节基因表达和保..
比较4 种常用蛋白浓度测定方法的准确性及各自的影响因素。方法采用Lowry 法、BCA 法、磺基水杨酸沉淀法、Bradford 法等4 种常用蛋白浓度测定方法对..
蛋白质含量测定的方法有很多种,本文档中主要介绍Bradford法测量蛋白质浓度的实验原理、需要的实验试剂和器材、实验步骤、测量结果的统计和处理及结..
Thermo Scientific Pierce BSA 是高治疗的蛋白测定标准品,可用于蛋白标准曲线的制作和校准品。BSA是被普遍认可的参考蛋白,Thermo的牛血清白蛋白标..
了解目前常用的几种蛋白质含量测定方法的基本原理及各自的特点。掌握Lowry法测定蛋白质的操作方法,722s型分光光度计的工作原理及使用方法。
常用的蛋白含量测定的方法主要有5种,即凯氏定氮法、双缩脲法、紫外吸收法、Folin-酚试剂法和考马斯亮蓝法。这几种方法各有各自的优缺点,对于不同..
蛋白分子量标准主要分为两种,一种是未染蛋白分子量标准,一种是预染蛋白分子量标准。选择正确的蛋白分子量标准是实验成功的必要条件之一。本文档主..
实验简便指导:叶绿素、SOD、MDA、POD、硝酸还原酶、抗坏血酸等测定方法。
测定蛋白质一级结构并作出肽谱的重要性在于:①可用于分子克隆中寡核苷酸探针的制备;②为cDNA推导的氨基酸序列提供证据;③为重组DNA产生的蛋白质..
DNA或蛋白质的化学修饰与基因表达
重组细胞因子分类及应用概述
大规模蛋白质相互作用研究方法进展
紫外吸收法测蛋白质含量
影响紫外吸收法测定蛋白质DNA浓度的因素
血清总蛋白质的测定方法
牛奶中酪蛋白和乳糖的分离及纯度测定
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【求助/交流】分光光度法测DNA含量
请问大家分光光度法测DNA含量的检测限是多少?
用的微量核酸蛋白质检测仪,可以达到小数点后两位。微克每微升 核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值(OD260/OD280),估计核酸的纯度。纯净DNA的比值为1.8, RNA为2.0。若比值高于1.8说明DNA样品中的RNA尚未除尽,若样品中含有酚和蛋白质将导致比值降低。270nm存在高吸收表明有酚的干扰。 紫外分光光度法只能用于测定浓度大于0.25μg/ml的核酸溶液,对浓度更小的样品,可采用荧光分光光度法 Originally posted by leonn at
核酸的最大吸收波长为260nm,蛋白质为280nm,在波长260nm时,1OD值相当于双链DNA浓度为50μg/ml,单链寡核苷酸的含量为30μg/ml,可以据此来计算核酸样品的浓度,还可通过测定在260nm和280nm的OD值的比值(OD260/O ... 非常感谢~~~~&&:) 分光光度计的设计原理和工作原理,允许吸光值在一定范围内变化,即仪器有一定的准确度和精确度。如Eppendorf Biophotometer的准确度≤1.0%(1A)。这样多次测试的结果在均值1.0%左右之间变动,都是正常的。另外,还需考虑核酸本身物化性质和溶解核酸的缓冲液的pH值,离子浓度等:在测试时,离子浓度太高,也会导致读数漂移,因此建议使用pH值一定、离子浓度较低的缓冲液,如TE,可大大稳定读数。样品的稀释浓度同样是不可忽视的因素:由于样品中不可避免存在一些细小的颗粒,尤其是核酸样品。这些小颗粒的存在干扰测试效果。为了最大程度减少颗粒对测试结果的影响,要求核酸吸光值至少大于0.1A,吸光值最好在0.1-1.5A(5ug/ul-75ug/ul)。在此范围内,颗粒的干扰相对较小,结果稳定。从而意味着样品的浓度不能过低,或者过高(超过光度计的测试范围)。 实际样品的话,检测限估计也就5ng/uL左右,再小就不准了,而且这个方法极易受到其他大分子物质的干扰,如果样品中杂质较多,结果完全不可信。该帖子已被 初学者&九点虎设置为精华,下面是奖励积分记录:云中漫步(20分)
实验原理本实验采用紫外分光光度法测定蛋白质含量。蛋白质中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键,因此,蛋白质具有吸收紫外光的性质,其最大吸收峰位于280 nm附近(不同的蛋白质吸收波长略有差别)。在最大吸收波长处,吸光度与蛋白质溶液的浓度的关系服从朗伯-比耳定律。仪器与试剂紫外-可见分光光度计,比色管,吸量管标准蛋白质溶液:5.00 mg.mL-1溶液,0.9% NaCl溶液,待测蛋白质溶液实验步骤1. 标准曲线的制作 :& & & & 用吸量管分别吸取1.0 、1.5、 2.0 、2.5 、3.0 mL 5.00 mg.mL-1标准蛋白质溶液于5只10 mL 比色管中,用0.9% NaCl溶液稀释至刻度,摇匀。用1 cm石英比色皿,以0.9%NaCl溶液为参比,在280 nm处分别测定各标准溶液的吸光度A280,记录所得读数。2. 样品测定:& & & & 取待测蛋白质溶液3 mL,按上述方法测定280 nm处的吸光度。平行测定三份。数据处理1. 以蛋白质浓度为横坐标,吸光度为纵坐标绘制标准曲线。2. 根据样品溶液的吸光度,从标准曲线上查出待测蛋白质的浓度。注意事项和问题1. 紫外吸收法与Folin-酚比色法测定蛋白质含量相比,有何缺点及优点?2. 若样品中含有核酸类杂质,应如何校正?
仪器采购指南:&&&&
&&回复于: 17:44:43
没做过蛋白质酪氨酸275nm和色氨酸280nm,那么本实验测定的蛋白质应该是两者之和吗?
&&回复于: 22:17:39
蛋白质是一个大类,里面还有很多细分,楼住所说的蛋白质标准溶液指什么?
&&回复于: 22:22:41
建议看一下考玛斯亮蓝法的教科书
&&回复于: 22:27:23
原文由 bszcb 发表:建议看一下考玛斯亮蓝法的教科书我们一般都用开始定单法测定粗蛋白,这种方法还真没有用过
&&回复于: 22:44:38
标准曲线法??
&&回复于: 23:09:07
本法是测蛋白质的粗略方法,核酸是在260nm测定.
&&回复于: 8:30:08
没见过该方法介绍。&IMG border=0 SRC=.cn/bbs/images/brow/em0803.gif&
&&回复于: 17:41:30
感谢分享~!!!
&&回复于: 19:08:38
楼主是做食品的?
&&回复于: 20:02:30
这个方法容易被核酸干扰,而且测定混合有机成分时,极不准确。 上传我的文档
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血清中总巯基和非蛋白巯基的DTNB分光光度法
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临床生化检验实验紫外分光光度法测定血清蛋白质
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