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一种用普通扫描仪替代薄层色谱扫描仪的方法
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摘要：本文运用VC++语言开发了一个办公用扫描仪应用于定量分析的软件。该软件能将一次扫描成像的一列（或一排）多个斑点分别转换为以斑点的彩色积分值为纵坐标的峰形图，并给出彩色积分值和斑点的Rf值。研究了该软件对硅胶薄层板、滤纸、打印纸上所点碱性品红、萘酚绿B、果绿、普鲁氏蓝、K2CuFe(CN)6棕红、柠檬黄六种色斑进行定量分析的可行性。结果表明除K2CuFe(CN)6棕红外各色斑的灰度积分值与点样体积、浓度、样品绝对量成正比，精密度也较好。不同点样介质上色斑的精密度和灵敏度不同。关键词：办公用扫描仪，软件，定量分析
作者在前文中报道了应用VC++语言开发的两个能将办公用扫描仪应用于薄层色谱定量分析中的软件[1，2]。第二个软件[2]能将一次扫描成像的一列（或一排）的多个色斑转换成以斑点的灰度积分值为纵坐标斑点的位置为横坐标的灰度积分值图，并给出灰度积分值和Rf值。研究表明斑点的灰度积分值与点样量（浓度、体积、绝对量）成正比。
但实际样品多为彩色斑点。将其转换为灰度进行定性定量分析，不仅多一个步骤，还会损失彩色本身可利用的一些信息，有些色彩如黄色就没有灰度[1]。因此本文对软件[2]继续做了改进，使它能对色斑进行彩色值积分，利用彩色积分值进行定性定量分析。1．
材料与方法1.1仪器和材料
硅胶H薄层预制板（50*100mm，厚度0.20-0.25mm），青岛海洋化工厂分厂；AGFA
SNAPSCAN1212 扫描仪；微量进样器（10μL），上海安亭微量进样器厂；定量滤纸（直径9cm），杭州新华纸业有限公司；1.2试剂 无水乙醇、亚铁氰化钾（天津化学试剂厂）、碱性品红、萘酚绿B（中国医药公司北京采购供应站）、十二水合硫酸铵铁（西安化学试剂厂）、五水合硫酸铜（成都化学试剂厂）均为分析纯；复合食用色素果绿（上海市染料研究所）、柠檬黄（上海市染料研究所）为市售商品，纯度均为60℅。按照文献[1]的方法配置碱性品红、萘酚绿B、果绿、柠檬黄溶液，及普鲁氏蓝、K2CuFe(CN)6悬浊液。1.3程序操作流程图
硅胶板上普鲁氏蓝色斑的彩色图（256色）
滤波前的彩色图
滤波后的彩色图图1. 程序操作流程图Fig1. Scheme of the program1.4 试验方法在分别变化浓度、点样体积、斑点大小等条件下用微量进样器把六种有色溶液点在硅胶板、滤纸、打印纸上。晾干后用SNAPSCAN1212扫描仪扫描成24色彩色图（选取分辨率150dpi）。使用画图板将24色的彩色图转化为256色的彩色图，用我们所研制的程序作滤波后的彩色——位置图，键入峰的序号，计算机显示峰面积和Rf值。然后分别对上述变量作图、表。2.结果与讨论2.1中值滤波按照前文[2]的方法对彩色积分值——位置图进行中值滤波。如图1所示，经过两次中值滤波后图像变得较为平滑。2.2不同点样介质空白的对比 图2.点样介质空白彩色积分图Fig2. Integral color value of three blank material对硅胶薄板、滤纸、打印纸三种材料自身的彩色空白值及均匀性进行了研究。如图2所示，硅胶薄板的空白值及不均匀性明显大于滤值和打印纸。另一方面，与前文[2]相比三种材料的彩色背景空白均比同种材料的灰度空白小的多。图2也可见硅胶的彩色空白背景已大大降低。因为材料本身的空白背景属于黑白背景，彩色值很低或为零。这对于彩色图的检测下限的降低会产生作用。2.4峰面积的计算软件按前文[2]的方法计算扣除彩色背景空白值后的峰面积并显示。2.4 系统的实际分辨率2.5浓度对彩色值的影响固定有色溶液点样体积（3μl），变化其浓度，然后用彩色积分值对浓度作图。碱性品红、果绿、萘酚绿B、普鲁氏蓝的结果分别如图3~7。K2CuFe(CN)6棕红在三种点样介质中都无法检测，但可采用灰度法检测。
在5~100mg/L*范围内碱性品红的彩色值回归方程为滤纸：y=461x+247，r=0.994。与灰度法相比，斜滤/截距之比上升。不直接比较彩色法与灰度法的斜率，因为彩色图和灰度图不是同一次扫描的结果，无可比性。硅胶和打印纸无法检测，原因不详。以100mg/L溶液3μl平行点样五次所得的彩色值的RSD为滤纸1.27%。在 800~2000mg/L*内果绿的彩色值回归方程为硅胶：y=82.8x+7657，r=0.984；打印纸：y=80.5x+12389，r=0.971。滤纸所点的斑点软件无法分辨。以2000mg/L溶液3μl平行点样五次，彩色值的RSD为硅胶：2.35℅，打印纸：1.64%。在800~2000mg/L*内萘酚绿B彩色值与浓度成线性，彩色值回归方程为硅胶：y=49.7x+4737，r=0.990；滤纸：y=128x-27797，r=0.993；打印纸：y=72.3x-13308，r=0.975。以2000mg/L溶液3μl平行点样五次，彩色值的RSD分别为硅胶4.05℅、滤纸2.97%、打印纸2.56℅。在Fe3+浓度为200~1000mg/L*内普鲁氏蓝的彩色值与浓度呈线性，其回归方程为硅胶：y=90.1x-1732，r=0.999；滤纸：y=289x-30609，r=0.994；打印纸：y=18.3x+5870，r=0.955。以1000mg/L的溶液3μl平行点样五次，彩色值的RSD分别为硅胶4.15℅、滤纸4.78%、打印纸4.56%。
在浓度为200~1000mg/L*内柠檬黄的彩色值与浓度呈线性，其回归方程为滤纸：y=6.38x+584.5,r=0.992；打印纸：y=6.37x-681.9,r=0.998。硅胶未检出。以500mg/L的溶液3μl平行点样五次，彩色值的RSD分别为滤纸：5.85%、打印纸7.55%。2.8体积对彩色值的影响在固定有色溶液浓度的条件下，变化点样体积（1~5μl），然后用彩色积分值对体积作图。上述四种有色溶液的结果如图8~12。
碱性品红的彩色值回归方程为滤纸：y=1，r=0.9664。果绿的彩色值回归方程为硅胶：y=3， r=0.997；打印纸：y=3，r=0.998。使用打印纸点样时萘酚绿B的彩色值的灵敏度较高，其回归方程为硅胶：y=2，r=0.999；滤纸：y=48，r=0.999；打印纸：y=7，r=0.997。使用滤纸点样时普 鲁氏蓝的彩色值灵敏度最高，其回归方程分别为硅胶：y=1，r=0.987；滤纸：y=7，r=0.999；打印纸：y=，r=0.990。由上可见，各回归方程的系数都较大。也就是说，如果体积稍微有误差将使结果引入很大的误差。也说明严格控制点样体积的误差是提高准确度和精密度的关键。2.9斑点大小对彩色值的影响在同时改变有色溶液的浓度和体积，但保持其总量不变的条件下，研究斑点大小对彩色积分值的影响。上述五种有色溶液的彩色积分值结果如下表1~4。由下表可知，所试验物质斑点总量相同时其彩色值基本相同，说明物质的彩色值只与物质的总量有关。表1.斑点大小对碱性品红彩色值的影响
表2.斑点大小对果绿彩色值的影响Table1. Effect of spot’s area on basic fuchsin’s color value
Table2.Effect of spot’s area on fruit green’s color value浓度（mg/L）体积（μL）
RSD(%)灰度值
浓度（mg/L）体积（μL）
RSD(%)灰度值
.1表3.斑点大小对萘酚绿B彩色值的影响
表4.斑点大小对普鲁氏蓝彩色值的影响Table3. Effect of spot’s area on naphthol green B’s color
Table4. Effect of spot’s area on KFe[Fe(CN)6]’s color
value浓度（mg/L）体积（μL）
RSD(%)灰度值
12.1浓度（mg/L）体积（μL）
RSD(%)灰度值
8.06表5.斑点大小对柠檬黄彩色值的影响Table5. Effect of spot’s area on tartazine’s color value浓度（mg/L）体积（μL）
RSD(%)灰度值
9.90表6.使用不同点样介质时灰度法与彩色法能检出的物质的比较（空格表示不能检出）
K2CuFe(CN)6
柠檬黄灰度法
能检出2.10结论本研究表明，采用本文开发的办公用扫描仪薄层色谱定量分析软件能将一次扫描成像的一排多个斑点转换为与斑点的彩色积分值成正比的峰形，进行峰面积计算及显示，并可实现自动取峰，大大简化了操作过程。既可应用于薄层扫描色谱定量分析，也可应用于有色样品直接点样后扫描分析。该方法所需设备简单、操作快捷，有很大的应用前景。本文还对比了利用不同介质进行点样时对定量分析灵敏度和精密度的影响，结果表明不同的点样介质对定量分析的灵敏度有很大的影响，我们可以通过改变点样介质来提高灵敏度。
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TLC薄层放射性扫描仪BIOSCAN
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已通过企业实名备案
联&系&人：华瑞森 经理
企业经济性质：私营有限责任公司
所&在&地&址：北京北京
详&细&地&址：北京通州区通州工业开发区光华路16号方和正圆大厦A座2楼
上次登录时间：日
产品详细说明
产品规格：
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北京华瑞森科技发展有限公司 中国区域销售：美国BIOSCAN公司&& Mini-Scan& TLC& Scanner薄层放射性扫描仪
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1、用于&、&和&射线标记放射 药物的TLC分析
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1、The& Mini-Scan TLC薄层放射性扫描仪模拟和数字脉冲输出使得Mini-scan很容易地与所有的条状图、积分仪以及色谱数据系统相连接。数据可以通过数据系统获得并进行分析
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北京华瑞森科技发展有限公司 是一家集技术推广、销售和技术服务于一体的高科技企业，公司设有高效的业务职能机构、完善的服务体系，迅速为您提供优质的产品和热情周到的服务。 北京华瑞森科技发展有限公司自成立以来，形成了全国性的咨询、销售和服务网络。我们已经建立了质量跟踪、质量监控的销售网络和售后服务体系，企业的发展依靠的就是质量和诚心的售后服务理念。本公司拥有一支富于进取，勇于创新的年轻化、知识化、专业化的管理与技术人才的队伍。 北京华瑞森科技发展有限公司致力于核应急监测、环境辐射监测、实验室分析、保健物理仪器、放废测量系统、洗消隔离装置，辐射防护用品、辐射监测系统工程、射线防护材料、远红外线发射率检测仪器、 核医学仪器及 X 射线机 CT 机 QA/QC 系统（ CT 机性能测试模体 ,X 线机性能检测仪 ,CT 机综合性能测试仪，伸缩杆型低高能散漏射线剂量 / 剂量率测量仪，仿真人 CT 全身模体，全身 X 线模体，仿真人全身 X 线教学培训模体，仿真人全身定位模体 , 临床乳腺机 IQ QA/QC 测试模体 , 锥形束 CT/3D QA/QC 测试模体等）、医疗器械、实验仪器、环保核辐射仪器设备等研发销售 ，我们以科学严谨的工作态度，服务于科研、医疗教育、环保、检验检疫、疾控中心、军警、安防等诸多行业，服务于社会。 我们以 & 提供高性能辐射安全监测及创造安全舒适的防护空间 & 为宗旨，以推进高科技应用于服务为先导，立足于客户建立长期的合作友好、共同发展、互惠互利的关系。企业技术力量雄厚，设备及检测仪器先进，产品性能优越，工艺精致，质量可靠。 北京华瑞森科技发展有限公司 专业维修德国 R280 型手持式&&& X 多功能放射性检测仪， GAMMA-SCOUT 多功能数字核辐射仪，维修 900 型数字核辐射仪， 维修美国 Alert 型 &&& 和 X 辐射检测仪，专业维修 Inspector Radalert 100 、 Inspector Alert 、 Inspector EXP 、 Monitor 4 辐射检测仪 北京华瑞森科技发展有限公司 现货供应：临床乳腺机 IQ QA/QC 性能测试模体 , 锥形束 CT/3D QA/QC 性能测试模体 , 仿真人 CT 全身模体，全身 X 线模体，仿真人全身 X 线教学培训模体，仿真人全身定位模体， X 射线诊断计量仪，剂量 / 剂量率 /kv/ 脉冲 / 曝光时间测量仪， QUART noniu X 射线光野照射野一致性测量仪， QUART 实时焦点检测仪（针孔相机）， QUART 数字减影 DSA QA 性能测试模体， X 射线机性能测试模体 ,CT 机性能测试
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您好，这边是TCL手机平台哦。
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应该是该文件已损坏，试图杀毒电脑，重新安装下
TCL的分析失败意味着薄层扫描分析失败
原因1，计算机部件可能会被破坏。电脑出了问题被销毁
解决方案的一个组成部分：您可以先检查地下城与勇士的配置是否符合要求，如果没有，请安装内存，扩展卡，如购买。
有两个原因：系统资源不足，贫困群体薄层扫描仪故障
解决方法：修复薄层扫描仪就可以了，检查电脑是否已接触的位置。
三方面的原因：没有足够的系统将打开地下城与勇士权
解决方法：多次尝试打开DNF，就不会出现，直到分析失败TCL的对话框后，请重新启动计算机和防病毒，你可以。首先是C盘右键单击菜单中的工具属性：
四方面的原因：有一个问题在计算机内部
解决方法：运行CHKDSK工具甚至可以在位置
Chkdsk工具CHNK...
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出门在外也不愁薄层色谱扫描仪的工作原理
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薄层色谱扫描仪的工作原理
时间： 17:09
薄层色谱扫描仪的工作原理 用于定量的薄层色谱仪称为薄层色谱扫描仪（TLC&Scanner），或薄层色谱光（TLC&Densitometer），用这种仪器对薄层上被分离的物质进行直接定量的方法称薄层色谱扫描法。目前各国生产的薄层色谱仪规格不同，性能各异，但其基本测定原理是一样的，即用一束长宽可以调节的一定波长、一定强度的光照射到薄层斑点上进行整个斑点的扫描，用仪器测量通过斑点或被斑点反射的光束强度的变化从而达到定量的目的。&
　　但是薄层是由许多细小颗粒组成的半透明物体，光照射到薄层表面，除透射光、反射光外，还有相当多的散射光，因此与光照透明溶液不同，样品量与测得值之间呈非线性关系，特别在高浓度区，这样就给定量工作带来困难，为此有以下三种途径来解决薄层上的定量间题。 　　a&．选取曲线中的直线部分用于定量分析在低浓度范围内，样品量与测得值间可存在线性关系，此法最简便，也是在没有线性化功能的薄层色谱仪上最常用的方法，但由于线性浓度范围有限，故应用上有一定限制| | | | | | | | |。 　　b&.&Kubelka-Munk&方程 　　光照到散射物质表面，光的行为比较复杂，Kubelka&及Munk&从理论上推导出简化的方程式，现应用于薄层扫描。从实用角度解释光照到薄层上的变化情况。 　　根据他们的理论，推导出两个微分方程式：Kubelka-Munk&方程式：
从以上两个方程式再推导出在薄层上斑点的透光度T&和反射度R&是
空白薄层的透光度T0和反射度R0分别为
　　上列各式中，X&为薄层厚度；S&为薄层单位厚度的散射程度，即散射系数；SX&为散射参数，它与薄层的吸附剂性质（颗粒大小、分布范围、表面孔径、性状、制备工艺等）、薄层的涂布以及厚度有关；K&为薄层单位厚度的吸光程度，即吸收系数；KX&为吸收参数，当厚度X&一定时，它只与物质的含量有关，不同吸附剂或不同厂家生产的同一吸附剂，其SX&值均不同，需要预先测定。如Merck&厂生产的硅胶板SX=3&，氧化铝板SX&=7&等。 　　用-lgT&/&T0或-lgR&/&R0&对KX&作图，不同的SX值的吸附剂得出不同弯曲度的曲线，如下图所示。
　　用-lgT&/&T0作图时，曲线比较直，这就表示透射法比反射法的线性好些。||||||||||
　　CS&系列薄层色谱扫描仪具有线性化器，其工作原量即根据Kubelka-Mimk&方程式用电路系统将弯曲的曲线校正为直线，用校正后的直线进行定量，见下图。
　　c&．利用非线性方程定量 　　利用计算机先求出非线性方程，然后在测定样品时将测定值输入计算机，由此方程求出样品浓度。瑞士Camag&公司的薄层扫描仪l&型即根据此原理进行测定，并认为这种方法更为合理，测定值更准确可靠。 　　目前文献报道的非线性方程有lgY=AlgX+B，lnY=AlnX+B，1/Y=A+B&1/X，Y=A+BX+CX，lnY=A+B（lnX）+C（lnX）等，式中Y为测定的色谱峰面积或高度；X&为样品量；A&,&B&,&C&为常数。经实验，认为最后一个非线性方程更适用，计算结果误差较小。信息来源：
信息来源：/arnews.asp?id=1053
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