你好请问是鹿晗吗rna的提取有什么方法，各自优缺点是什么

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-04-16 08:39 标签： 你好请问清炖甲鱼
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【求助】关于提取RNA做PCR的问题
楼层直达：
这个帖子发布于2年零39天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
本人菜鸟一个，请问我想从血白细胞中提取RNA，然后做PCR，采血的管是什么样的啊，不要笑话我啊。
不知道邀请谁？试试他们
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ssskjk 本人菜鸟一个，请问我想从血白细胞中提取RNA，然后做PCR，采血的管是什么样的啊，不要笑话我啊。就常规的采血管就行
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是EDTA抗凝管吗
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用??肝素钠的
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你好大姨妈 用??肝素钠的 EDTA不行吗
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EDTA或者枸橼酸钠，肝素的千万不能用，会抑制
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萌夏 EDTA或者枸橼酸钠，肝素的千万不能用，会抑制 可以直接提miRNA吗
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关于丁香园RNA的提取方法除了希碱法和浓盐法外还有哪些？各自的优缺点是？_百度知道
RNA的提取方法除了希碱法和浓盐法外还有哪些？各自的优缺点是？
酵母RNA 的提取。。。实验
我有更好的答案
用TRIzol提,商业化的东西,很好用,很方便
1、苯酚法；2、去污剂法、3、盐酸胍法。
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3秒自动关闭窗口想不通找不到原因，到底怎么回事，心烦，rna提取问题 - 实验交流 - 生物秀
标题: 想不通找不到原因，到底怎么回事，心烦，rna提取问题
摘要: [想不通找不到原因，到底怎么回事，心烦，rna提取问题] 做实验做的好心烦啊，一直在做荧光定量，一直遇到问题，前段时间认为提RNA还算不难，提的效果也不错，不过近来怎么都提不好各种问题，脑子都快气炸了！一套方法一批试剂，前几天提了质量差，觉得是试剂的问题，全部重新配的，今天再做结果是有的好260 280能达到1 9，但是有的很差乱七八糟的，260 280只 关键词:[试剂 抽提 果实 氯仿 研磨 试剂盒 上清]……
做实验做的好心烦啊，一直在做荧光定量，一直遇到问题，前段时间认为提RNA还算不难，提的效果也不错，不过近来怎么都提不好各种问题，脑子都快气炸了！一套方法一批，前几天提了质量差，觉得是的问题，全部重新配的，今天再做结果是有的好260/280能达到1.9，但是有的很差乱七八糟的，260/280只有1.2左右，260/230比值都有5甚至6的，质量好的是一批材料，不好的是其他批次，怀疑是材料的问题，不过也不应该啊之前这些质量不好的材料还是一样提的出来的质量也不错。
把方法附上吧希望朋友们一起帮我找找原因：
CTAB-LiCl沉淀法稍做改良
1）吸取4mLRNA提取液（2% CTAB(W/v)，2% PP(W/v)，25 mM EDTA，100 mM Tris-Cl pH 8.0，2.0 M NaCl）置于65℃水浴中预热。
2）称取2g样品迅速放入盛有液氮的研钵中研磨成粉末，并转移至含有提取液的中，涡旋混匀器上振荡混匀，使粉末与液体充分接触。
3）加入320?L的β-巯基乙醇及少量亚精胺，混匀，65℃保温5min。冷却至室温加入等体积的氯仿/异戊醇（24：1 V/V），混匀，于4℃下12000rpm离心20min。吸取上清并重复抽提一次。
4）取上清加入1/4体积10mol/L LiCl于4℃下放置8-16h。
5） 4℃下12000rmp离心30min后加入500?L 无水乙醇洗涤沉淀，4℃12000rmp离心10min，除去上清液。
6）加入500?LSSTE溶解（SSTE buffer：1.0 M NaCl，0.5%SDS，10 mMTris-Cl pH 8.0，1 mM EDTA）沉淀，并加入同体积的氯仿/异戊醇（24：1 V/V）抽提，4℃12000rmp离心20min，吸取上清液。
7）上清液中加入两倍体积的无水乙醇沉淀RNA（-70℃≥30 min）。
8）4℃下12000rmp离心20min，弃上清并用70％乙醇洗2～3次后干燥。
9）用50?L DEPC处理水溶液沉淀，密封保存于-70℃备用。
以上是提取方法，我的材料是果树果实不同发育时期的，以上所有操作均是我一人操作应该排除操作问题，提取质量好坏的样品分歧就出在第5步，质量好的批次此处去完上清后是白色的沉淀，而不好的都带有绿色，紧接着结果导致的是在第8步rna提取出来时，质量好的都是透明的，而有问题的都是略微带些红色或者黄色的，也不透明，我不明白这个红色是什么物质，我用的果实也是绿色的，还有第5及最后出现问题了，我要怎么去处理呢？？？！方法也是用别人的，所以现在出来问题怎么解决自己也理不出头绪，想不到对策，求帮助啊！！！回复自己没有提过植物的RNA，但是应该有相应试剂盒，质量应该好一些。回复个人觉得是你的心情影响你的实验。建议减少批次的平行实验，一次实验以不超过两小时为佳。最好在开始前好好地休息一下，再开始工作。Enjoy the lab life!回复你好~我也是果树的，不过我提的是根RNA。用的是invitrgen公司的Trizol试剂，提的浓度跟质量都还可以，就是260/230小了点，最终是透明沉淀。我觉得你那个质量不好的是不是果实中的多糖或酚类？回复应该是这样，挺烦燥的还好有大家帮忙！回复心情好了没有？休息了没有？
而有问题的都是略微带些红色或者黄色的，也不透明，我不明白这个红色是什么物质，我用的果实也是绿色的，（因为你的材料是植物材料，这些材料应该是块成熟时高含量的多酚氧化酶产物，其产生的酚类物质，其中多酚类是可于乙醇沉淀的）。
具体是不是，你可以自己再确定下。回复
心情好了没有？休息了没有？
而有问题的都是略微带些红色或者黄色的，也不透明，我不明白这个红色是什么物质，我用的果实也是绿色的，（因为你的材料是植物材料，这些材料应该是块成熟时高含量的多酚氧化酶产物，其 ... 呵呵休息好了，也有人这么讲是酚类物质氧化了，我就多加了些β巯基乙醇结果还是一样，昨天用试剂盒提取，测质量感觉蛮好，一跑胶一片模糊！还想请问你做的是什么材料呢？回复建议楼至采用trizol或者是试剂盒来提取，还有就是注意枪头的处理，提取的时候勤换手套，并且因为植物材料中多糖和酚类物质的含量会比较多，次生代谢的成份会比较多，所以测出来的260/280，260/230有时会比较低的，多提几次就会好点。祝实验顺利。回复改良CTAB发应该是没多大问题的，建议研磨时加入少许PVP在一起研磨，SSTE溶解后氯仿异戊醇可以抽提两次，可以尽量多的抽提掉杂质，RNA的降解一般多出现在研磨和洗沉淀这两步，稍微注意一点应该都没多大问题的，希望你试验顺利回复我和你有一样的问题 但我用的trizol我也很烦躁最近总是一遍一遍的提啊 提啊有的时候是好的 可是有的时候就又不好了
我老师分析说可能是植物多酚发生褐变 与rna结合影响了结果建议我加pvp可是我奇怪你加了pvp怎么还是这个结果 我现在犹豫 我要不要往下做了 加油好在我们还有时间好运回复样品跟试剂的量要把握好，样品太多，trizol的缓冲能力有限，RNA质量就会很差回复其实我觉得在我提rna时刚开始的确有很多问题，都是细节上的，例如，你在第一步时可以先把植物组织研碎后，还是你粉末装就加入，迅速放进液氮里，准备好试剂和枪头后加入你配的试剂要比把植物加入有试剂的好点。回复我第一次用qigen试剂盒提的，纯化后浓度还有600多，就是跑胶什么都没有。后来提的纯度挺好，就是浓度太低。还请各位给一些建议:hand:回复像260/280、263/230比值不行都都是因为杂质没有去干净，多用酚氯仿抽提两次就OK了。我一般都是用酚氯仿抽提两次，然后用醋酸钠+无水乙醇沉淀，一般都很安静。提的好不好主要还是要看电泳的完整度，而不是这个比值，比值只能反应提取RNA中杂质少，不能反应有没有讲解~~~
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