dna复制过程中,不连续合成的图a中的三个dna片段段又称为什么

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2016-04-24 19:01 标签： 小片段dna回收
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24.随从链复制过程中出现的不连续片段称为________,由______连接成单链DNA.
窝窝三炮0139
随从链复制过程中出现的不连续片段称为___冈崎片段_____,由___连接酶___连接成单链DNA.
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多聚酶链式反应扩增DNA片段
作者：佚名 教案来源：网络 点击数： &&&
多聚酶链式反应扩增DNA片段
文章来源 莲山课件 w w w.5 Y Kj.Co M 多聚酶链式反应扩增DNA片段目标：（一）知识与技能1、了解PCR技术的基本操作2、理解PCR的原理3、讨论PCR的应用（二）过程与方法在多聚酶链式反应扩增DNA片段的实验过程中，应避免外源DNA污染，严格控制温度等反应条件（三）情感、态度与价值观通过对PCR实验的操作及结果分析，培养学生严谨的科学态度和实事求是的科研精神重点：PCR的原理和PCR的基本操作教学难点：PCR的原理教学过程：（一）引入新课在现代生物技术中，DNA技术可谓是尖端技术。人类基因组计划、基因工程、基因诊断、基因检测、古生物鉴定等都离不开对DNA分子碱基序列的分析。而分析DNA碱基序列，就需要一定量的DNA片段。怎样迅速获得足够量的DNA片段呢？今天我们来研究学习DNA分子的扩增技术DDPCR技术。（二）进行新课1．基础知识PCR技术扩增DNA的过程，与细胞内DNA复制过程类似：1．1细胞内DNA复制条件分析：条件&组分&作用模板&DNA的两条单链&提供复制的模板原料&四种脱氧核苷酸&合成DNA子链的原料酶&解旋酶DNA聚合酶&打开DNA双螺旋催化合成DNA子链能量&ATP&为解螺旋和合成子链供能引物&RNA&为DNA聚合酶提供合成的3’端起点1．2细胞内DNA复制过程（1）DNA的反向平行结构：（结合投影图）核苷酸分子的结构与方向性：（分子结构模式图）由核苷酸通过3,5-磷酸二酯键连接形成核苷酸长链：（模式图，体现方向性）。DNA双螺旋结构的反向平行结构：（2）DNA的复制过程:解&&& 旋：解旋酶、ATP，DNA两条链打开，，形成两条DNA单链。引物结合：在DNA单链3’端与DNA反向配对结合，确保引物3’端与DNA单链准确配对。DNA聚合酶结合：子链合成：DNA聚合酶从引物3’端开始，将配对的脱氧核苷酸连接起来。后续加工：DNA聚合酶I将引物切去，并合成空缺处的DNA单链，再由DNA连接酶将不连续的DNA子链连接起来（半不连续合成。先导链，滞后链）子链合成特点：不能从头合成；合成方向为“5’→3’合成”。感悟生命的神秘：DNA聚合酶不但能够催化磷酸二酯键的形成，还具有校对功能。它在每引入一个核苷酸后都要复查一次，只有碱基配对无误后才能继续往下聚合，它不能从头合成。RNA聚合酶没有校对功能，因此RNA的合成不需要引物，而是从头合成的，它的错配可能性较大，在RNA引物完成功能后即被DNA聚合酶I删去，代之以高保真的DNA链。［思考］DNA分子能准确复制的原因有哪些？DNA双螺旋结构提供模板；碱基互补配对；DNA聚合酶的复查功能。［思考］细胞内哪些物质是从头合成的？RNA合成、蛋白质合成。1．3DNA分子复制的人工控制解开螺旋：在80～100℃时，DNA双螺旋打开，形成两条DNA单链，称为变性。恢复螺旋：在50℃左右时，两条DNA单链重新形成双螺旋结构，称为复性。复制条件：缓冲液,DNA模板,四种脱氧核苷酸,热稳定DNA聚合酶,两种引物。反应场所：PCR仪（自动温度周期性调节）。［思考］缓冲液相当细胞内的什么成分？（核基质）1．4PCR的反应过程
变性：在95℃时DNA解旋复性：在50℃时引物与DNA单链结合延伸：在72℃时合成DNA子链（两个引物间的序列）2．实验操作2．1 PCR反应体系：缓冲液、DNA模板，四种脱氧核苷酸原料、热稳定DNA聚合酶、两种RNA引物，水2．2 实验操作步骤2．3 按照PCR反应体系配方配制反应液；（2）将PCR反应体系50μL用微量移液器转移到微量离心管（0.5mL）中；（3）将微量离心管放到PCR仪中；（4）设置PCR仪的工作参数。（5）DNA在PCR仪中大量扩增。2．4 水浴法：将微型离心管依次在95℃、55℃、72℃的恒温水浴锅中循环处理相应时间。3．实验注意事项3．1避免外源DNA污染：所用仪器、缓冲液、蒸馏水等使用前高压灭菌。3．2缓冲液和酶分装成小份，－20℃低温保存。3．3每添加一种反应成分，更换一个移液器的枪头。3．4混匀后离心处理，使反应液集中在离心管底部。4．结果分析与评价4．1反应液稀释：取2&LPCR反应液，添加98&L蒸馏水；2．分光光度计调零：将100&L蒸馏水添加到比色杯中，在260nm处将分光光度计调整读数为零。4．2将100&L反应稀释液倒入比色杯中，测定在260nm处的光吸收值。4．3计算：DNA含量＝50×光吸收值×稀释倍数（三）课堂总结、点评
（四）实例探究例1 在（&&& ）的温度范围内，DNA的双螺旋结构解开A. 10－20℃&&&&&& B. 80－100℃&&&&&&&& C. 20－30℃&&&&&&& D. 40－60℃解析：蛋白质大多不能忍受60－80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性。答案：B例2 关于DNA的复制，下列叙述正确的是（&&& ）A.DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从5’端延伸DNA链B.DNA复制不需要引物C.引物与DNA母链通过碱基互补配对进行结合D.DNA的合成方向总是从子链的3’端向5’端延伸解析：由于DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，只能从引物的3’端即复制方向由3’端向5’端延伸；由于DNA分子是反向平行的，子链是依据碱基互补配对原则，在DNA聚合酶作用下合成的，其合成方向是从子链5’端向3’端延伸。答案：C综合应用例3 下列有关PCR描述，不正确的是（&&& ）A.是一种酶促反应B.引物决定了扩增的特异性C.扩增产量按y＝（1＋X）nD.扩增对象是氨基酸序列E.扩增对象是DNA序列解析：PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，它以极少量的DNA为模板，以四种脱氧核苷酸为原理，在引物的作用下使DNA聚合酶从引物的3’端连接脱氧核苷酸，短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝，其扩增产量为y＝（1＋X）n，y代表DNA片段扩增后的拷贝数，x表示平均每次的扩增效率，n代表循环次数，因此答案选D。答案：D课后探究1、PCR与生物体DNA复制有何区别？2、如果在案件侦破过程中，只收集到一根毛发，但它所含的遗传信息太少，该怎么办呢？
★教后小记教师在教学过程中，可以先引导学生回忆必修2的有关DNA复制的知识，在此基础上，学生可加深对于PCR原理的认识。对于PCR反应过程的教学，应以读图识图为主。教材中反应过程图解详细的描绘了参与PCR的各种组成成分；每一轮反应的三个基本步骤―变性、复性、延伸；每一步骤的作用。教师在教学中可以请学生在读图的同时，结合教科书中的文字说明来加深理解。当学生遇到难以理解的地方时，教师要及时给予解答。
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填空题DNA复制时，复制叉进行的半保留复制实际上是半不连续复制，（）链上是连续复制，（）链上是不连续合成的，即先合成出小的DNA片段，称为冈畸片段，然后再在酶的催化下将这些小的片段连接成长链。连接反应需要能量，细菌内以（）为能量来源，动物细胞和某些噬菌体以（）为能量来源。
前导；后随；NAD+；ATP
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1.填空题 快；真核生物；不需要；切断；修复合成；切除；连接2.填空题 稳定单链区；催化合成RNA引物；催化DNA的合成；除去引物，修复合成，并填补缺口；催化冈畸片段的连接3.填空题 放线菌素D；利福平4.填空题 α2ββ’σ；α2ββ’；起始作用；终止因子5.填空题 PRPP；IMP正确教育旗下网站
题号：8130768试题类型：读图填空题 知识点：&&更新日期：
下图示DNA分子复制的片段,图中a、b、c、d表示各条脱氧核苷酸链。请据图回答问题:1.图中母链a和d称为复制过程中的。2.DNA复制的时期是和。3.分析得知,新合成的DNA分子中,A=T,G=C这个事实说明DNA的合成遵循。为DNA 复制直接供能物质的主要来源的生理过程是。4.15N标记的DNA分子,放在没有标记的培养基上培养,复制三次后标记的DNA分子占DNA分子总数的。5.DNA分子复制完毕后,新形成的DNA分子子链是( )A.是DNA母链的片段B.和DNA母链之一完全相同C.和DNA母链相同,但T被U所取代D.和DNA母链稍有不同6.由第5题可见,DNA分子复制又称为复制。
难易度：中等
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