DMEM/F12与DMEM的不同(肿瘤细胞,培养液) - 细胞实验 - 生物秀
标题: DMEM/F12与DMEM的不同(肿瘤细胞,培养液)
摘要: [DMEM F12与DMEM的不同(肿瘤细胞,培养液)] 相关疾病：肿瘤请教各位战友，我买的肿瘤细胞刚到手，是用DMEM F12培养液养的，而我买的是DMEM，可以替换么？就是说换液的时候能直接换成DMEM么？帮帮忙，谢谢 关键词:[肿瘤细胞 培养液]……
请教各位朋友，我买的肿瘤细胞刚到手，是用DMEM/F12培养液养的，而我买的是DMEM，可以替换么？就是说换液的时候能直接换成DMEM么？帮帮忙，谢谢
回复区别肯定是有的！你对比一下两者的成分就明白了
好像DMEM/F12添加了谷氨酰胺 这种成分！你可以弄一点儿加DMEM培养基试着养一下 能活的话就可以！回复前者是后者与F12培养基1：1混合的。其营养成分较后者更为丰富回复谢谢楼上同胞的指点，我查了下二者的成份差别。。但是不知道倒出培养瓶中的DMEM/F12可以直接换成DMEM么？有这样做过的同胞么？细胞长势如何呀。。。回复请教各位朋友，我买的肿瘤细胞刚到手，是用DMEM/F12培养液养的，而我买的是DMEM，可以替换么？就是说换液的时候能直接换成DMEM么？帮帮忙，谢谢DMEM/F12是无血清培养基，与DMEM还是差别明显的首先您得确定DNEM是否适合您的细胞生长。您可以购买F12，与DMEM 1:1配成DMEM/F12。细胞培养过程中，最好不要更换培养基，若必须更换，可尝试半换，让细胞逐渐适应新的培养基.回复 个人感觉单纯养细胞没有区别。DMEM/F12也不是无血清培养基。DMEM/F12 会促进细胞贴壁和生长，所以细胞会长的快，但同时分化和老的也快。DMEM是常规培养液，可以多用途。你的是肿瘤细胞，个人觉得dmem足够了。回复
昨天刚刚在里看到的，借用来DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物(mammalian)细胞培养,更适合高密度悬浮细胞培养。适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物(mammalian)细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无血清配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于血清含量较低条件下哺乳动物(mammalian)细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mMHEPES缓冲液。回复学习，标记下回复大家说的还是有差别的啊DMEM/F12有没有血清啊？回复我也标记下回复
我自己试了试，肿瘤细胞两种细胞都能长出来的回复长见识回复学习了回复多谢！回复请问我养准备小脑颗粒细胞和小胶质细胞，小脑颗粒细胞用高糖的DMEM/F12还是低糖，小胶质细胞是用高糖的还是低糖的回复DMEM就是常规养肿瘤的培养基。DMEM/F12是1：1的，DMEM用的是碳酸氢钠的缓冲系统，F12用的是HEPE的缓冲系统。碳酸氢钠缓冲系统是和CO2形成一种平衡来维持PH，HEPE不需要CO2。所以DMEM的PH比DMEM/F12要碱。细胞从一个环境到另外的需要适应过程，细胞刚过来最好使用与原来培养基一致的，不然细胞不一定能长好，活了形态也有可能发生改变。你可以直接买DMEM/F12，也可以买一瓶F12，用的时候和你的DMEM1：1的配。楼上说的谷氨酰胺对细胞生长作用很大的，有的货号里添加了，有的没有。原因是谷氨酰胺在液体中不稳定，所以有人宁愿买不添加的，在养细胞的时候再添加谷氨酰胺补充液。肿瘤细胞对谷氨酰胺不是很明显，个别细胞还是要注意的。回复
bjzhangzhanzlz wrote:昨天刚刚在里看到的，借用来DMEM-高糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物(mammalian),更适合高密度悬浮。适用于附着性较差，但又不希望它脱离原来生长点的克隆培养，也可用于杂交瘤中骨髓瘤细胞和DNA转染的转化细胞的培养。DMEM-低糖（标准型）是一种应用十分广泛的培养基，可用于许多哺乳动物(mammalian)细胞培养。低糖适于依赖性贴壁细胞培养，特别适用于生长速度快、附着性较差的肿瘤细胞培养。DMEM/F12DMEM/F12培养基适于克隆密度的培养。F12培养基成分复杂，含有多种微量元素，和DMEM以1：1结合，称为DMEM/F12培养基（DME/F12medium），作为开发无配方的基础，以利用F12含有较丰富的成分和DMEM含有较高浓度的营养成分为优点。该培养基适用于含量较低条件下哺乳动物(mammalian)细胞培养。为了增强该培养基的缓冲能力，改良之一是在DMEM/F12（1：1）中加入15mM。非常感谢！回复感谢阿回复非常感谢，收藏了回复好贴，谢谢楼主和大虾们回复已经用DMEM/F12培养基养了兔骨髓间充质，而且加了15%FBS，可大部分外文文献都是说用L-DMEM，血清一般加10%，不知道会不会有影响？？？回复我们养肿瘤细胞时细胞刚买来或者状态不好的时候一般会加15%FBS胎牛血清，就是给细胞补充营养的意思，平时状态稳定时就是10%FBS。回复楼上各位细胞能手，能不能帮帮我啊~一直用1640养MKN45细胞，状态满好的，最近不小心看错了培养基，用F12养了两天后才发现，赶紧改回1640养，可是细胞状态已经变的差了，不怎么透明了，形态也不像梭形了，有点偏圆，不知道还能不能挽救。这样的话，我的细胞还能继续用来做实验吗？哎。回复对与成骨细胞，有文献用了DMEM，有文献用DMEM/F12，有没有养过的同学，交流一下啊！回复乳腺癌细胞MCF-7用哪个培养基更好？DMEM还是RPMI1640?回复已经用DMEM/F12培养基养了兔骨髓间充质，而且加了15%FBS，可大部分外文文献都是说用L-DMEM，血清一般加10%，不知道会不会有影响？？？ 半年过去了，不知道前辈的MSC养的怎么样？实验是不是已经结束了，细胞传了多少代？回复请教下之前听说DMEM-F12加入10%的胎牛血清后如果放置的时间超出2周要重新加谷氨酰胺，这是真的么？如果养肿瘤细胞需不需要放置后再添加呢？谢谢！回复是真的，不过不是定率，效期较新还是先培养细胞看下状态，啥都不影响就不必加，这个要摸索回复学习了，谢谢回复学习了，谢谢，正要养神经细胞呢回复楼上各位细胞能手，能不能帮帮我啊~一直用1640养MKN45细胞，状态满好的，最近不小心看错了培养基，用F12养了两天后才发现，赶紧改回1640养，可是细胞状态已经变的差了，不怎么透明了，形态也不像梭形了，有点偏圆，不知道还能不能挽救。这样的话，我的细胞还能继续用来做实验吗？哎。 哥 你真强 这都能看错。。。。。。。。。回复乳腺癌细胞MCF-7用哪个培养基更好？DMEM还是RPMI1640? 貌似都差不多吧，我们实验室都有用，没看出有太大差别。回复谢谢LZ回复其他细胞可能还需要细致考虑下，肿瘤细胞一般没有问题，没有特殊营养和培养条件要求的肿瘤细胞DMEM一般都没问题，出了问题也是人为操作引起的。回复请问养星形胶质细胞，用哪个培养基更好呢？文献既有DMEM的，也有DMEM/F12的。还请各位大虾指教！
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饥饿诱导环境下人牙周膜成纤维细胞的自噬作用研究
目的：探讨饥饿环境中自噬作用在人牙周膜细胞中的发生情况。方法：原代培养人牙周膜成纤维细胞，将其随机分为正常对照组与实验组。正常对照组细胞用含10％胎牛血清的DMEM 培养基培养；实验组细胞用饥饿诱导方法，分别用厄尔氏平衡盐溶液（EBSS）培养1h、2h、3h、4h、6h ；应用透射电子显微镜观察组间人牙周膜细胞中自噬体数量的变化，采用细胞免疫荧光染色和免疫印迹方法检测人牙周膜细胞中自噬相关蛋白LC3的表达。结果：透射电子显微镜结果显示经EBSS饥饿诱导的实验组细胞均出现自噬体，数量明显多于对照组，且在EBSS诱导2h组、3h组、4h组较多。细胞免疫荧光结果表明，经EBSS 饥饿诱导的细胞LC3表达量高于对照组，且在EBSS诱导2h、3h、4h组相对较高。免疫印迹检测结果显示，经 EBSS 饥饿诱导的细胞 LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比值明显高于对照组（P＜0．05）。结论：饥饿诱导环境可诱导人牙周膜成纤维细胞出现自噬作用增多表现。
Abstract：
Objective :To investigate the autophagy in periodontal ligament cells induced by starvation . Methods :Periodontal ligament cells were cultured and divided into control group and experimental group .The cells in control group were cultured in DMEM medium with 10% FBS .The cells in the experimental group were treated with EBSS for 1h ,2h ,3h ,4h and 6h ,respectively .The autophagosomes in periodontal ligament cells were observed under transmission electron microscope .The expression of autophagy related prote LC3 was detected through west-ern blot and immunofluorescence staining .Results :The autophagosomes and the expression of LC3 in the cells trea-ted with EBSS were more than those in the control cells ,especially in the 2h ,3h and 4h EBSS treated group .The ra-tio of LC3-II/LC3-I in the cells treated with EBSS was significantly higher than that in the control group cells (P&0 . 05) .Conclusion:The starvation condition can induce autophagy of periodontal ligament cells .
作者单位：
第四军医大学口腔医院 西安710032
解放军第461医院
吉林大学第四医院骨质疏松诊疗中心
年，卷(期)：
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【求助】用雷帕霉素和3-MA诱导和抑制细胞自噬
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买了雷帕霉素和3-MA的粉末，用于细胞培养，可是怎么溶解和使用浓度都不知道，这玩意好贵也不敢乱试，求高手~~~
不知道邀请谁？试试他们
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wenjiexiaohuli 买了雷帕霉素和3-MA的粉末，用于细胞培养，可是怎么溶解和使用浓度都不知道，这玩意好贵也不敢乱试，求高手~~~请问楼主，现在知道了没？
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楼主能向您请教这两个药物处理细胞的方法吗？
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可以用水配，我是配成0.2M的储存浓度，工作浓度是5mM
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你好，请问你买的雷帕霉素和3-MA 是那个厂家的？我也是做细胞培养自噬的，求赐教~谢谢~~
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我也是自噬，也在找雷帕霉素用药浓度
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各位楼主你们好，请问你们上边问的问题解决了么？可以告诉下我么？我在做这方面的实验，求赐教，急啊
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cheff0412 edited on
哪位老师能推荐雷帕霉素对细胞的作用浓度常用范围啊？
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dol1314 我也是自噬，也在找雷帕霉素用药浓度 请问您怎么找雷帕霉素用药浓度？
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雷帕霉素有很多浓度，100nM到uM级别，但我发现5uM24小时能较好增加自噬，3-MA浓度可能要更高，至少10mM，
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2002sunjian 雷帕霉素有很多浓度，100nM到uM级别，但我发现5uM24小时能较好增加自噬，3-MA浓度可能要更高，至少10mM，
您好，最近刚刚再用雷帕霉素，溶解遇到了问题，我买的是粉剂，用DMSO溶解的，25mg/ml.可是用细胞培养液(不加FBS的1640)稀释成工作液，DMSO比例还在0.38%，雷帕霉素就又析出来了。。。因知DMSO浓度最好不要超过总体系的0.1%.这样实验就没法进行了。。。**只能依此尝试，找个最低的可以溶解雷帕霉素的DMSO的百分比吗
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您好，最近刚刚再用雷帕霉素，溶解遇到了问题，我买的是粉剂，用DMSO溶解的，25mg/ml.可是用细胞培养液(不加FBS的1640)稀释成工作液，DMSO比例还在0.38%，雷帕霉素就又析出来了。。。因知DMSO浓度最好不要超过总体系的0.1%.这样实验就没法进行了。。。**只能依此尝试，找个最低的可以溶解雷帕霉素的DMSO的百分比吗 你的rapamycin实验浓度这么高吗，我是用5mM浓度保存的，也是DMSO溶解，工作浓度是5um，DMSO对低温敏感，把1640加热到37度可以增加溶解，
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2002sunjian
您好，最近刚刚再用雷帕霉素，溶解遇到了问题，我买的是粉剂，用DMSO溶解的，25mg/ml.可是用细胞培养液(不加FBS的1640)稀释成工作液，DMSO比例还在0.38%，雷帕霉素就又析出来了。。。因知DMSO浓度最好不要超过总体系的0.1%.这样实验就没法进行了。。。**只能依此尝试，找个最低的可以溶解雷帕霉素的DMSO的百分比吗
你的rapamycin实验浓度这么高吗，我是用5mM浓度保存的，也是DMSO溶解，工作浓度是5um，DMSO对低温敏感，把1640加热到37度可以增加溶解， 5um是多少单位，雷帕霉素加入之前细胞还必须用DMEM培养基才可以吗。普通培养基不可以吗
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雷帕霉素，3MA用于活体小鼠研究自噬，给药的剂量和作用时间是多少?哪位大神知道？
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【实验求助】饥饿诱导自噬
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请教园里的各位前辈，小妹想做饥饿诱导自噬的模型，查文献有用HBSS或EBSS的，请问有无钙镁糖的HBSS或EBSS卖吗？还是需要自己配呀？
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透射电镜观察细胞自噬，技术交流 ××××
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dachong99 edited on
同问此问题，希望大神回复
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都有卖的。饥饿的时间需要自己摸索
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请问饥饿的话，可不可以用无血清培养基？
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missorchi 请问饥饿的话可不可以用无血清培养基？要看你的培养基成分，如果你的培养基是DMEM高糖，本身有很多氨基酸和营养物质，则可能诱导的现象不明显，时间要较长。文献很多人用的培养基，只需要饥饿4-6小时即可诱导自噬。随着时间增长，自噬又会消失。所以主要的时间点还要靠自己摸索，最好是GFP-LC3监测，这样可以比较省力不用收不同时间点的蛋白去验证。
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dachong99 edited on
谢谢版主赏分
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dachong99 edited on
我是低氧有道时间12小时不错
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