生物碱的提取方法
生物碱的提取方法
09-02-23 &匿名提问
从植物中提取生物碱，一般有下面三种方法:（1）加酸－碱提取法。首先将含有较丰富生物碱的植物用水清洗干净，沥干研碎，再用适量的稀盐酸或稀硫酸处理，使生物碱成为无机酸盐而溶于水中，然后往此溶液中加入适量的氢氧化钠使生物碱游离出来,最后用有机溶剂萃取游离的生物碱,蒸去有机溶剂便可得到较纯的生物碱。（2）加碱提取法。在某些情况下,可把研碎的植物直接用氢氧化钠处理,使原来与生物碱结合的有机酸与加入的氢氧化钠作用,生物碱就会游离出来,最后用溶剂萃取。（3）蒸馏法。有些生物碱(如烟碱)可随水蒸气挥发,则可用水蒸气蒸馏法提取。
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　物碱的提取与分离方法有多种，选用何种方法要根据植物中生物碱的性质和存在状态，以及目的而定。　　　　总生物碱的提取，主要介绍溶剂提取法　　1. 水或酸水提取法　　原理：①利用生物碱盐易溶于水，难溶或不溶于亲脂性有机溶剂的溶解性能，用水进行提取。　　②用酸水提取可使生物碱都以盐的形式被提出，提高提取率。　　常用的酸：0.5％～1％的乙酸、硫酸、盐酸或酒石酸等。　　提取方法：浸渍法、渗漉法、煎煮法。［医学教　育网 搜集整理］　　此方法的缺点是提取液体积大，浓缩困难，水溶性杂质多。　　2. 醇类溶剂提取法　　原理：游离生物碱及其盐一般都能溶于乙醇和甲醇。　　提取方法：浸渍法、渗漉法、加热回流（连续回流）提取法。　　此方法的缺点是含有大量脂溶性杂质。　　3. 亲脂性有机溶剂提取法　　原理：利用游离生物碱易溶于低极性有机溶剂，进行提取。　　提取方法：冷浸法、加热回流（连续回流）提取法。　　此方法的特点是 ① 提取前需用碱碱化。　　② 只能提取亲脂性生物碱，亲水性生物碱不被提出。　　③ 杂质少，易于进一步纯化。　　④ 毒性大，易燃易爆。
请登录后再发表评论!2.4生物碱的提取及纯化方法；2.4.1传统提取方法；绝大多数生物碱是利用溶剂提取法进行提取；2.4.1.1浸渍法；浸渍法是将处理过的药材用适当的溶剂在常温或温热的；2.4.1.2渗流法；渗滚法是往药材粗粉中不断添加溶剂使其渗过粗粉，从；2.4.1.3煎煮法；煎煮法是将中药粗粉加水加热煮沸，将中药成份提取出；2.4.1.4热回流法；热回流法最大的特点在于通过
2.4生物碱的提取及纯化方法
2.4.1传统提取方法
绝大多数生物碱是利用溶剂提取法进行提取。生物碱在溶剂中的溶解符合“相似相溶”的规律。极性强的生物碱亲水性较强，易溶于极性溶剂;弱极性生物碱亲脂性较强，易溶于弱极性溶剂。游离的生物碱大多亲脂性较强，而生物碱盐一般亲水性较强。按极性强弱可将生物碱提取溶剂分为极性溶剂、半极性溶剂和非极性溶剂。溶剂提取法按具体操作可分为浸渍法、渗流法、煎煮法、热回流法和连续回流法(索氏提取法)。
2.4.1.1浸渍法
浸渍法是将处理过的药材用适当的溶剂在常温或温热的情况下浸渍以溶出其中成分。该法一般是在常温下进行，对热敏性的物质的提取很有利，但所需时间长，效率低，尤其是水作溶剂时易发霉变质。
2.4.1.2渗流法
渗滚法是往药材粗粉中不断添加溶剂使其渗过粗粉，从渗涟筒下端流出浸提液的方法。此方法浸出效果优于浸渍法，适用于有效成分含量低或贵重药材的提取。但是费时较长，所用溶剂量比较大。操作麻烦。
2.4.1.3煎煮法
煎煮法是将中药粗粉加水加热煮沸，将中药成份提取出来的方法。此法简便，湖南农业大学硕士论文荷叶总生物碱提取、纯化及生物活性研究药中大部分成分可被不同程度的提出，但含挥发性及有效成分遇热易破坏的中药不宜用此法。
2.4.1.4热回流法
热回流法最大的特点在于通过溶剂的蒸发与回流，使得每次与原料接触的溶剂都是纯溶剂，从而大大提高了萃取动力，达到提高萃取速度和效果的目的。但提取效率不高，受热易破坏的成分不宜使用此方法。
2.4.1.5连续回流法
此法是利用索氏提取器，多次提取生物碱，可以反复利用溶剂，提取效率高，且操作方便。连续提取法提取液受热时间长，因此对受热易分解的成分也不适用。
2.4.2新技术的采用
2.4.2.1酶法
植物细胞壁组成物质纤维素以及许多植物药材细胞内含的果胶等物质能阻止细胞内有效成分的溶出，且造成提取液粘稠。应用纤维素酶、果胶酶等作用于植物药材，使细胞壁及细胞质中的纤维素、果胶等物质降解，减小有效成分从细胞内向提取介质扩散的传质阻力，促进有效成分的提取。这种方法的实质是通过酶解反应强化传质过程。吕雪斌等[38]从积实中提取辛弗林工艺研究中，通过提取时加入果胶酶，结果显示加入纯果胶酶的辛弗林提取率为80.9%，加入复合果胶酶的辛弗林提取率达86.6%，均较缺酶者高，说明酶解促进辛弗林的溶出。
2.4.2.2微波辅助提取法
微波辅助提取法是使用合适的溶剂在微波反应器中从天然药用植物、矿物、动物组织中提取各种化学成分的技术和方法。在提取过程中，一方面微波辐射过程使高频电磁波穿透溶剂到达物料内部。由于吸收微波能细胞内部温度迅速上升，使其细胞内部压力超过细胞壁的膨胀承受能力，导致细胞破裂，胞内有效成分自由流出，在较低的温度条件下被溶剂捕获并溶解。另一方面，微波所产生的电磁场加速了被提组分趋向溶剂界面的扩散速率，缩短了有效成分的分子由物料内部扩散到溶剂界面的时间，从而使浸提速率提高数倍，同时还降低了浸提温度，最大限度地保证浸提的质量[39l。如从羽扇豆中微波辅助提取鹰爪豆碱，在优化实验条件下，微波辅助提取可将产率由传统的52%提高到80%，且省时、省溶剂[401。范志刚等141】
采用微波技术对麻黄中麻黄碱的浸出量进行了考察，结果麻黄碱提取率由常规煎煮法的0.183%提高到0.485%。与传统的方法相比，微波可以对体系中的一种或几种组分进行选择性加热，故可以使目标组分直接从基体分离，因此微波技术具有良好的选择湖南农业大学硕士论文荷叶总生物碱提取、纯化及生物活性研究性，速度快，产品质量好。微波技术具有显著的优势，在实际生产中具有安全节能的潜力。但是该技术只适用于对热稳定的物质如生物碱、黄酮、昔类等。
2.4.2.3超声波辅助提取技术
根据超声波具有空化、粉碎、搅拌等特殊作用，在超声场中，物料吸收声能温度升高，有效成分的溶解加速。超声空化产生的瞬间高压造成生物细胞壁及整个生物体破裂，同时超声波产生的振动作用加强了胞内物质的释放、扩散及溶解。被浸提的物质在被破碎瞬间，生物活性保持不变，同时提高破碎速度和提取率。如以石灰水作溶剂，用超声从黄连中提取30min所得提出率比浸泡24h高50%[42]。李慧等使用超声波辅助浸提北草乌生物碱，可以大大提高生物碱的提取收率，缩短浸提时间，并且能很好地保持生物碱的特性和品质。因此超声提取技术具有提取时间短、产率高、无需加热、低温提取有利于有效成分的保护等优点。
2.4.2.4超临界萃取技术
二氧化碳超临界萃取是中草药有效成分提取分离中最常用的一种，适用于提取非极性的亲脂性物质。而生物碱往往具有一定的极性，因此对生物碱的超临界萃取需通过大幅度提高萃取压力或在萃取时加入少量极性溶剂作夹带剂，提高生物碱在超临界二氧化碳中的溶解度，提高和维持萃取的选择性。如在咖啡碱的提取中，纯超临界CO2几乎不能从干燥的咖啡豆中萃取出咖啡碱。而预先加入水，可减弱咖啡碱与咖啡母体间化学健的强度，使咖啡碱游离出来溶于超临界CO2之中I伺。与传统提取方法相比，超临界萃取最大的优点在于可在近常温条件下提取分离不同极性、不同沸点的化合物，几乎保留药材中所有的有效成分，没有有机溶剂残留。因此，其产品纯度高，收率高，操作简单，节约能源。但高压技术和夹带技术还远远不够成熟，尚待进一步研究。
2.4.3生物碱的纯化方法
生物碱的粗提液中不仅含有生物碱及其盐类，还含有大量的脂溶性和水溶性杂质，必须进行分离纯化。
2.4.3.1有机溶剂萃取法
对于水或酸水提取液，用碱液(氨水、石灰水或石灰乳)将其碱化，使其中的生物碱盐转变成为游离生物碱，再用有机溶剂(如乙醇，乙醚、氯仿等)把游离的生物碱萃取出来。对于有机溶剂萃取液，首先减压回收溶剂，用稀酸水溶解，将不溶性杂质除去，再将溶液碱化，使用有机溶剂进行萃取。溶剂萃取技术是提取分离的经典技术，其优点是简单有效，容易放大，缺点是分离效率和纯度低，溶剂污染湖南农业大学硕士论文荷叶总生物碱提取、纯化及生物活性研究环境，操作安全性差。
2.4.3.2树脂法
树脂法包括离子交换树脂法和大孔吸附树脂法。离子交换树脂对吸附质的作用是通过静电引力和范德华力达到分离和纯化的目的。在生物碱的纯化中使用的是阳离子交换树脂。生物碱盐阳离子交换到树脂上从而与非碱性的化合物分离，再用碱水洗脱得到生物碱。大孔吸附树脂的结构与离子交换树脂类似，它的吸附作用主要依靠自身和被吸附介质之间的范德华力，通过巨大的比表面积进行物理吸附的，具有比表面积大、吸附容量大、吸附速度快、选择性好、再生处理方便等特点，特别适合于从水溶液中分离低极性或非极性的化合物。由于使用大孔树脂可避免离子交换树脂在解吸时需用酸、碱或盐类洗脱剂，引入杂质，给后面的分离造成不便等问题，目前大孔树脂在中草药化学成分的分离纯化中的应用已越来越受到人们的重视，在天然产物提取分离研究与生产中的应用日益广泛。用大孔树脂分离提取生物碱已有
较多的研究:廖小雪[45]用大孔树脂分离麻黄生物碱;秦学功等人[46]使用大孔树脂DF01从苦豆子浸提液中吸附分离生物碱;黄建明等用大孔树脂吸附法提纯草乌生物碱，从实验结果看，纯化前总固形物中生物碱的含量为1.23%，纯化后总固物中的总生物碱的含量为22.77%，纯度提高了近20倍，且生物碱的洗脱率达95%左右。研究表明，使用大孔吸附树脂工艺简单，能耗小，产品质量稳定且有良好的生理活性。
2.4.3.3膜分离技术
膜分离是借助膜在分离过程中良好的选择性、渗透作用，使液固颗粒或混合液中不同分子量的组分得以分离。超滤是现在医药工业中应用较多的一种膜分离技术。根据液体中的分子大小和形状，以膜为过滤介质，依靠一定的压力和流速，通过膜的筛分作用，在分子水平上进行分离，迫使大分子杂质被截留，小分子的特质透过。近年来正逐渐地被用于中药成分的分离、纯化、精制。
2.4.3.4高速逆流色谱
高速逆流色谱技术是一种较新型的液一液分配技术，其原理是基于组分在旋转螺旋管内的相对移动而互不混溶的两相溶剂间分布不同而获得分离。己在分离纯化生物碱、黄酮、菇类、木脂素、香豆素等成分的研究中获得成功[48]。高速逆流色谱分离法具有两大突出优点:线圈中固定相不需要载体，因而消除了气液色谱中由于使用载体而带来的吸附现象;特别适用于制备性的分离，每次进样体积较大，进样量也较多。
从中草药中提取生物碱的方法有多种，选用何种方法主要是根据生物碱的性质存在状态，以及目的是要进行系统研究还是为了获得某些药用生物碱等因素而定生物碱在植物体中多以盐的形式存在，而弱碱性或中性生物碱则以不稳定的盐或离碱的形式存在。生物碱盐类一般不溶于亲脂性溶剂而溶于水或醇。已有的荷叶生物碱的提取方法均为以有机试剂作为提取溶剂，操作复杂，且有机试剂可同时取得到荷叶中所含黄酮类、靴质类、有机酸类成分，终产品含杂质较多，纯化困难本试验以稀盐酸作为提取溶剂，荷叶总生物碱可以形成生物碱盐正离子形式，溶性能好，提取效率高，所含杂质少，节省试剂。为了得到较纯的总碱，在酸水提时结合有机溶剂萃取，利用亲脂性生物碱溶于亲脂性有机溶剂，而其盐溶于水的质，将酸水提取液用氢氧化钠碱化，使生物碱盐转变成游离碱，再用亲脂性有机剂氯仿萃取，合并有机溶剂萃取液，浓缩即得荷叶总生物碱。
微波辅助提取技术，简称微波提取技术，是近年来发展起来的一种新方法，己被应用于多种植物成分的提取155]，其独特的特点首先体现在微波的选择性，极性较大的分子可以获得较多的微波能，利用这一性质可以选择性地提取极性分子，使目标组分直接被分离出，从而使产品的纯度提高，质量得以改善。其次，微波提取大大降低了提取时间，提高了提取速度。最后，可供选择的溶剂较多，同时减少了溶剂的用量，节省能源。另外，可避免长时间高温引起的样品分解，从而有利于热不稳定成分的提取。
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9：00&22：00
生物碱提取分离方法研究进展
2014年9期目录
&&&&&&本期共收录文章20篇
　　摘要：生物碱是一类具有显著生物活性的含氮有机化合物，是许多药用植物的有效成分。利用现代技术对天然产物中的生物碱进行提取分离，对于开发其药用价值，阐明药效物质基础具有重要意义。因此生物碱的提取分离方法备受人们关注，本文对近年来生物碱提取分离方法进行综述。 中国论文网 /6/view-6621850.htm　　关键词：生物碱；提取；分离 　　生物碱（alkaloids）是广泛存在于自然界植物中的一类重要天然活性物质。大多数生物碱具有较复杂的氮杂环结构，显碱性，有生理活性。它的发现始于19世纪初，是人们研究最早且最多的一类天然有机化合物。目前已发现生物碱约6000余种，并且仍以每年约100多种的速度递增。大多数生物碱都具有、抗肿瘤、抗癌、抗炎、抗病毒以及抗血小板凝集、抗心律失常以及抗高血压等心血管疾病的作用，因此，在卫生、医药等领域，它有着巨大的应用潜力。随着生物碱类药品需求的增加。对从大量的含有生物碱的药用植物中提取、分离出生物碱单体的技术提出了更高的要求，探索和筛选高效分离技术成为近年来人们研究的热点。本文通过阐述生物碱提取技术。进而介绍相关研究的应用。 　　一、生物碱提取方法 　　1.1 按提取溶剂不同分类 　　1.1.1 水用水作为提取溶剂，成本低廉，操作方便，但是提取液体体积大，浓缩较为困难。 　　1.1.2 酸水提取法。本法可用于提取碱性弱不能溶于水的生物碱，通过酸与生物碱成盐增加溶解性而达到提取目的。博落回生物碱的提取可采用1.5%盐酸，回流提取，合并多次提取液，加浓氨水至pH为9～10，静置，滤集沉淀，即得博落回粗碱。 　　1.1.3 醇类溶剂提取法。游离生物碱或者盐均可溶于甲醇、乙醇，配合酸水-碱化-萃取法可以除去脂溶性杂质。 　　1.1.4 亲脂性有机溶剂提取法。大多数游离生物碱为亲脂性化合物，可用氯仿、苯、二氯甲烷、乙醚等溶剂提取，提取前将药材用少量碱水润湿，以便使生物碱游离，亦可增加溶剂对植物细胞的穿透力。 　　1.2 按提取方法不同分类 　　1.2.1 连续回流提取。该法是回流提取的发展，具有溶剂用量少，操作简便，提取效率高的特点。 　　1.2.2 浸渍法。该法是将中药粗粉装在适当容器中，用水或者稀醇浸渍药材一定时间，反复数次，合并浸渍液，减压浓缩即可。该提取过程不用加热，适用于挥发性或受热易破坏以及含淀粉或粘液质较多的成分，但是提取时间长，效率不高。 　　1.2.3 渗漉法。为浸渍法的发展，此法在提取过程中随时保持浓度差，故提取效率高于浸渍法。采用75%乙醇渗漉提取槟榔中生物碱，使槟榔碱及槟榔次碱均提取较完全。 　　1.2.4 超声提取法。超声波是一种高频机械波，超声波可增大物质分子运动频率和速度，增加溶剂的穿透力，从而提高提取效率，缩短提取时间。 　　二、生物碱分离方法 　　2.1 硅胶柱色谱法。硅胶是偏酸性的无色颗粒，性质稳定，硅胶柱色谱适用范围广，绝大多数生物碱可采用该法分离。 　　2.2 高效液相色谱法。高效液相色谱法是由经典液相色谱法发展而来的一种高效分离手段，具有分离效能高、灵敏度高、分析速度快等特点，在分离高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物方面显示出优势，现在已经广泛应用于天然产物的分离、检测等方面。马忠武经过硅胶柱色谱、反相ODS柱层析以及高效液相色谱从中草药钩吻中分离得到12个单体化合物，其中两个经过结构解析，确认为gelsemine和koumine。 　　2.3 大孔吸附柱色谱法。大孔树脂是一类没有可解离基团，具有多孔结构，不溶于水的固体高分子物质。它可以通过物理吸附有选择地吸附有机物质而达到分离的目的。近年来大孔吸附树脂在中药材有效成分的分离纯化方面起到了巨大的作用。 　　2.4 膜分离技术。膜分离技术是20世纪60年代后迅速崛起的一项高效分离技术，其采用半透膜作为选择障碍层，根据各组分透过膜的迁移率不同，允许某些组分透过而保留混合物中其他组分，从而实现混合物中各组分的分离。该技术在常温下操作，适用于热敏性物质，该分离方法是物理过程，不发生相的变化、不需加入化学试剂，并且选择性好，有着传统法无可比拟的优势。近年来，膜分离技术在生物碱的分离与纯化过程中的应用研究十分活跃。用W/O型乳状液膜分离技术成功分离出荷叶粗提物中3种生物碱：荷叶碱、N-去甲基荷叶碱、O-去甲基荷叶碱，萃取率分别达到了95.6%、100%和97.9%，充分显示出了该技术良好的应用前景。 　　三、生物碱纯化技术 　　根据生物碱溶解性、极性、成本等因素，生物碱的分离方法可以灵活运用。可采用现代、先进的分离方法，如树脂吸附法、色谱分离等方法。 　　3.1离子树脂吸附法。离子交换树脂是一类具有离子交换功能的高分子材料。在溶液中它能将本身的离子与溶液中的同号离子进行交换。按交换基团性质的不同，离子交换树脂可分为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂。在生物碱的纯化中一般使用的是阳离子交换树脂。离子交换树脂中的氢离子能与生物碱盐阳离子进行交换。从而与非碱性的化合物分离，再用碱水洗脱得到生物碱。迟玉明等以角蒿总生物碱溶液为对象，以其主要有效成分角蒿酯碱为指标，研究了阳离子交换树脂纯化角蒿总生物碱的方法，包括树脂类型的选择、氨水浓度和乙醇浓度对洗脱效果的影响。实验结果表明强酸性阳离子交换树脂对角蒿生物碱成分的交换能力较强。且被树脂吸附的生物碱成分可用氨性乙醇溶液快速洗脱。 　　3.2高效液相色谱。高效液相色谱是在经典液相色谱法基础上发展起来的一种新型分离、分析技术。高效液相色谱由于使用了细颗粒、高效率的固定相和均匀填充技术，高效液相色谱法分离效率极高，柱效一般可达每米10块理论板。同时，流动相可选择范围广，它可用多种溶剂作流动相，通过改变流动相组成来改善分离效果。此外，采用了梯度洗脱装置，应用范围广，可用于高沸点、相对分子质量大、热稳定性差、性质和结构类似的生物碱的分离及分析。 　　3.3分子印迹技术。分子印迹技术是20世纪末出现的一种高选择性分离技术，通过印迹、聚合、去除印迹分子三步制备分子印迹聚合物（MIPs），以其特定的分离机理而具有极高的选择性，可以作为高度专一的固相萃取材料。刘岚等先合成聚苯乙烯种子，经两步溶胀和超声聚合得到粒度均匀的MIPs，对茶碱有良好的特异吸附性。 　　四、小结 　　生物碱是一类具有显著生理活性的含氮有机化合物，许多药用植物中富含生物碱。是中药的重要组部分。生物碱有效成分的分离与纯化是中药开发的难点与关键，新技术的研究与开发能大大提高中药化学成分的收率与质量，节约大量的时间和能源。目前，某些分离纯化技术尚存在一定的局限性，如分离产量低、纯化成本高等问题。特别是一些分离纯化技术尚处在实验室研究阶段。如何将这些新技术应用到生产中，还有许多问题需要解决，更需要研究单位和企业联手，解决生产中遇到的问题。随着科学技术的高速发展，越来越多的高新技术将会运用到生物碱的提取分离研究上。这些高新技术具有传统方法无法比拟的优点。对提高生物碱制剂质量、减少服用剂量、提高生产效率、降低环境污染等将起到积极地推动作用。（作者单位：长春东方职业学院） 　　参考文献： 　　[1]范伏田，等.博落回生物碱的提取及分离工艺[J].南昌大学学报，）： 　　[2]邓远辉，杨柳，周蓓，等.微波用于中药黄连的提取[J].数理医药学杂志，2002 　　[3]姜忠义，吴洪.膜技术在中药有效部位和有效成分提取分离中的应用[J].离子交换与吸附，2002
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