（11分）2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：（1）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于
工程技术范畴。除了上述方法，有些目的基因可以从基因文库中获取。基因文库包含
等类型，其中前者的基因中含有启动子。（2）图中③过程中，能促进农杆菌移向植物细胞的物质是
类化合物。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA
的特点。（3）植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外，还可采取的方法是
（任举一例）。（4）对目的基因转录和翻译产物的检测分别采用
技术。（5）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制酶作用位点），据图分析：①人工改造时，要使抗虫基因表达，在上图所示基因表达载体中还应添加
。②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的之一是除去或破坏质粒上的
（填相应基因的简写字母），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是
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（11分）2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：（1）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于
工程技术范畴。除了上述方法，有些目的基因可以从基因文库中获取。基因文库包含
等类型，其中前者的基因中含有启动子。（2）图中③过程中，能促进农杆菌移向植物细胞的物质是
类化合物。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA
的特点。（3）植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外，还可采取的方法是
（任举一例）。（4）对目的基因转录和翻译产物的检测分别采用
技术。（5）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制酶作用位点），据图分析：①人工改造时，要使抗虫基因表达，在上图所示基因表达载体中还应添加
。②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的之一是除去或破坏质粒上的
（填相应基因的简写字母），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是
（11分）2009年10月，我国自主研发的转基因抗虫水稻“华恢1号”获得农业部颁发的安全证书。下图表示该抗虫水稻主要培育流程，据图回答：（1）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于
工程技术范畴。除了上述方法，有些目的基因可以从基因文库中获取。基因文库包含
等类型，其中前者的基因中含有启动子。（2）图中③过程中，能促进农杆菌移向植物细胞的物质是
类化合物。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA
的特点。（3）植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外，还可采取的方法是
（任举一例）。（4）对目的基因转录和翻译产物的检测分别采用
技术。（5）组建理想的载体需要对天然的质粒进行改造。下图是天然土壤农杆菌Ti质粒结构示意图（示部分基因及部分限制酶作用位点），据图分析：①人工改造时，要使抗虫基因表达，在上图所示基因表达载体中还应添加
。②人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的之一是除去或破坏质粒上的
（填相应基因的简写字母），保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是
科目:最佳答案见解析解析
试题分析：（1）杀虫基因（crylA）是人们根据几种Bt毒蛋白的分子结构，设计并人工合成的，这属于蛋白质工程技术范畴。除了上述方法，有些目的基因可以从基因文库中获取。基因文库包含基因组文库和部分基因文库等类型，其中前者的基因中含有启动子。（2）图中③过程中，能促进农杆菌移向植物细胞的物质是酚类化合物。Ti质粒是农杆菌中的一种质粒，其上有T－DNA，把目的基因插入Ti质粒的T－DNA中是利用T－DNA可转移至受体细胞的特点。（3）植物基因工程中将目的基因导入受体细胞的方法除了农杆菌转化法之外，还可采取的方法是基因枪法、花粉管通道法。（4）对目的基因转录和翻译产物的检测分别采用分子杂交、抗原—抗体杂交技术。（5）人工改造时，要使抗虫基因表达，在上图所示基因表达载体中还应添加启动子。人工改造时用限制酶Ⅱ处理，其目的之一是除去或破坏质粒上的tmr、tms，保证T-DNA进入水稻细胞后不会引起细胞的无限分裂和生长。若限制酶Ⅱ切割DNA分子后形成的黏性末端为，则该酶识别的核苷酸序列是CTGCAG（或GACGTC）。考点：本题考查基因工程的相关知识，意在考查考生理解所学知识的要点，把握知识间的内在联系的能力。
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[ti质粒]在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组入Ti质粒上的T ti质粒
在植物基因工程中，用土壤农杆菌中的Ti质粒作为运载体，把目的基因重组入Ti质粒上的T-DNA片段中，再将重组的T-DNA插入植物细胞的染色体DNA中。(1)科学家在进行上述基因操作时，要用同一种________分别切割质粒和目的基因，质粒的黏性末端与目的基因DNA片段的黏性末端就可通过________而结合。(2)将携带抗除草剂基因的重组Ti质粒导入二倍体油菜细胞，经培养、筛选获得一株有抗除草剂特性的转基因植株。经分析，该植株含有一个携带目的基因的T-DNA片段，因此可以把它看做是杂合子。理论上，在该转基因植株自交F1代中，仍具有抗除草剂特性的植株占总数的______，原因是___________。(3)种植上述转基因油菜，它所携带的目的基因可以通过花粉传递给近缘物种，造成“基因污染”。如果把目的基因导入叶绿体DNA中，就可以避免“基因污染”，原因是_________________。题型：读图填空题难度：中档来源：同步题(1)限制性核酸内切酶
碱基互补配对(2)3/4 雌雄配子各有1/2含抗除草剂基因，受精时，雌雄配子随机结合(3)叶绿体遗传表现为母系遗传，目的基因不会通过花粉传递而在下一代中显现出来考点：考点名称：转基因生物的安全性转基因生物的安全性：1、转基因生物存在安全性问题的原因(1)目前对基因的结构、基因间的相互作用及基因的调控机制都了解得相当有限。(2)目的基因往往是异种生物的基因。(3)外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的。 2、转基因生物的安全性争论：（1）基因生物与食物安全：反方观点：反对“实质性等同”、出现滞后效应、出现新的过敏原、营养成分改变正方观点：有安全性评价、科学家负责的态度、无实例无证据（2）转基因生物与生物安全：对生物多样性的影响反方观点：扩散到种植区之外变成野生种类、成为入侵外来物种、重组出有害的病原体、成为超级杂草、有可能造成“基因污染”正方观点：生命力有限、存在生殖隔离、花粉传播距离有限、花粉存活时间有限（3）转基因生物与环境安全：对生态系统稳定性的影响反方观点：打破物种界限、二次污染、重组出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通过食物链进入人体正方观点：不改变生物原有的分类地位、减少农药使用、保护农田土壤环境3、理性对待转基因技术：趋利避害，不能因噎废食。考点名称：基因、蛋白质和性状的关系基因、蛋白质和性状的关系：1、基因通过中心法则控制性状，包括两种方式：（1）通过控制酶的合成控制代谢过程，间接控制生物体的性状例如：a．镰刀型细胞贫血症：血红蛋白基因突变→血红蛋白结构异常→红细胞呈镰刀状蔗糖多→水分保留少。b囊性纤维病：CFTR基因缺失3个碱基→CFTR蛋白结构异常→功能异常（2）可通过控制蛋白质的结构直接控制生物的性状。例如：a．豌豆粒型：豌豆淀粉分支酶基因异常（插入外来DNA序列）→不能正常合成淀粉分支酶→淀粉少→皱粒。b．白化病：酪氨酸酶基因异常→缺少酪氨酸酶→制约酪氨酸转化为黑色素→白化病 知识拓展：1、生物的有些性状是受单基因控制的（如豌豆的高茎和矮茎，由一对等位基因控制），而有些性状是由多对基因来决定的（如人的身高）。2、生物的性状由基因决定，还受环境条件的影响，是生物的基因和环境共同作用的结果，即表观型= 基因型+环境条件。 考点名称：基因工程的基本操作程序基因工程的基本操作程序：1、目的基因的获取（1）目的基因是指： 编码蛋白质的结构基因。（2）获取方法：①从基因文库中获取；②人工合成（反转录法和化学合成法）；③PCR技术扩增目的基因。2、基因表达载体的构建（1）目的：使目的基因在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传至下一代，使目的基因能够表达和发挥作用。（2）组成：目的基因+启动子+终止子+标记基因。如图：①启动子：是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的首端，是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动基因转录出mRNA，最终获得所需的蛋白质。②终止子：也是一段有特殊结构的DNA片段，位于基因的尾端。③标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。常用的标记基因是抗生素基因。（3）基因表达载体的构建过程：3、将目的基因导入受体细胞（1）转化的概念：是目的基因进入受体细胞内，并且在受体细胞内维持稳定和表达的过程。（2）常用的转化方法：生物种类植物细胞动物细胞微生物细胞常用方法农杆菌转化法显微注射技术Ca2+处理法受体细胞体细胞受精卵原核细胞转化过程将目的基因插入到Ti质粒的T-DNA上→农杆菌→导入植物细胞→整合到受体细胞的DNA→表达将含有目的基因的表达载体提纯→取卵（受精卵）→显微注射→受精卵发育→获得具有新性状的动物Ca2+处理细胞→感受态细胞→重组表达载体与感受态细胞混合→感受态细胞吸收DNA分子（3）重组细胞导入受体细胞后，筛选含有基因表达载体受体细胞的依据是标记基因是否表达。4、目的基因的检测和表达（1）首先要检测转基因生物的染色体DNA上是否插入了目的基因，方法是采用DNA分子杂交技术。（2）其次还要检测目的基因是否转录出mRNA，方法是用标记的目的基因作探针与mRNA杂交。（3）最后检测目的基因是否翻译成蛋白质，方法是从转基因生物中提取蛋白质，用相应的抗体进行抗原--抗体杂交。 （4）有时还需进行个体生物学水平的鉴定。如转基因抗虫植物是否出现抗虫性状。知识点拨：1、构建基因文库的目的为了在不知目的基因序列的情况下，便于获得所需的目的基因。 2、PCR技术：是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术。PCR扩增是获取目的基冈的一种非常有用的方法，也是进行分子鉴定和检测的一种很灵敏的方法。目的：通过指数式扩增获取大量的目的基因。 3、基因文库中不是直接保管相应基因，基因文库中的基因保存在受体菌中。 4、在基因工程的四个操作步骤中，只有第三步将目的基因导入受体细胞不需碱基互补配对，其余三个步骤都涉及碱基互补配对。5、原核生物繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，有利于目的基因的复制与表达，因此常用大肠杆菌等原核生物作为受俸细胞。 6、植物细胞的全能性较高，可经植物组织培养过程成为完整植物体，因此受体细胞可以是受精卵也可以是体细胞；动物基因工程中的受体细胞一般是受精卵。7、转化的实质是目的基因整合到受体细胞染色体基因组中，从而使受体生物获得了新的遗传特性的现象，从其变化的实质看，这种变异属于可遗传变异中的基因重组。 知识拓展：1、基因文库的构建：（1）概念①基因组文库：含有一种生物的全部基因。将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中储存，各个受体菌分别含有这种生物的不同的基因，称为基因组文库。 ②cDNA文库：只包含了一种生物的部分基因。 （2）构建过程基因组文库的构建cDNA文库的构建2、人工合成目的基因（1）反转录法：（2）人工合成目的基因3、PCR技术扩增目的基因①原理：DNA双链复制②过程：第一步：加热至90～95℃DNA解链；第二步：冷却到55～60℃，引物结合到互补DNA链；第三步：加热至70～75℃，热稳定DNA聚合酶从引物起始互补链的合成。欢迎您转载分享：
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