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山西汉族人群YSTR基因座DYS576和DYS641遗传多态性及法医学应用_NoRestriction.pdf 41页
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山西汉族人群YSTR基因座DYS576和DYS641遗传多态性及法医学应用_NoRestriction.pdf
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--------------------------Page1------------------------------山西医科大学硕士学位论文山西汉族人群Y-STR基因座DYS576和DYS641遗传多态性及法医学应用姓名：张慧丰申请学位级别：硕士专业：法医物证学指导教师：梁景青--------------------------Page2------------------------------遗传多态性及法医学应用研究生：张慧丰专业：法医物证导师：梁景青摘要目的亲子鉴定提供参考数据，并探讨其法医学应用。一例男性尸体的血液及几种组织，进行同一性检验；随机抽取山西汉族人群中30例无关系的家系血样，进行突变观察；收集常见的几种动物的个体组织或血液样本，进行种属检DNA经PCR扩增，扩增产物进行聚丙烯酰胺凝胶电泳，筛出等位基因并测序，制备等位荐的原则命名各等位基因，最后进行数据统计分析，得出这两个基因座在山西汉族人群的多态性分布情况。及各种组织检测结果与2个基因座分型分别一致；30例女性样本DNA未见扩增产物；30例两代家系观察未见突变；动物检测未见扩增产物。较高应用价值。l关键词Y-STR，山西汉族人群，DYS576，DYS64本课题受到山西省自然科学基金资助(项目编号：)本课题受到山西省高校科技研究开发自筹项目资助(项目编号：)--------------------------Page3------------------------------州医科人学硕Ij学位论文GeneticoftheY二STRlociDYS576andPolVmorphismstudyDYS64linChineseHanofShanxiPopulationABSTRACTlociinofDYS576aJldDYS64ofObjectiveThrou曲theInVestigationgeneticpolymo印hismtheHalloftheiraIlddistributioningenepopulationpopulationShanxi，studyp01ymo印hismShallxiHallmaleinordert0referencedataforforensicindiVidualpopulation，proVidea11dtoitsforensicidentification，patemitytestingexploreapplication．1MethodsW．eselected205uIlrelatedmaleindividuals’bloodmlofmdomlyhealtllys锄plesChineseHanofSh甜Ⅸi．Onem觚’sbloodaIldseveral虹ndsofhistissuespopulationorgaJlizationtheselected30unrelatedwereconductofselected，too，foridentit)，teSt。Wehealtllymdomlyindividualwomen’sblood1formale—specificteSts．Tllinys锄pleml，EDTA孤ticoagul肌t，usedofwhosehasbeencon丘rmedwerecaSesoftwocollected，generationsparent．childrelationship也eirbloodusedformutationobser、，e．Wecollectedsevemls锄ples、Ⅳereorusedfortest．TheDNAf．romtllemateriala_boveweretissuebloods锄plesspeciesgenomicPCR嘶tllmelociDYS576aIldDYS64lofex仃acted，aIld锄plifiedbyprimers．TheproductsPCRwerewitha11eleof也eseY．STRlocianaJyzedpolyaC巧l锄idegelelec仃ophoresis．EachlociwerewaSandmealleleladderswereconstmcted．AllelesoftlleseY．STRsequencedGenetics．nominatedtorecommendationsoftlleIntemationalofForensicaccordingSocietytlledata、vaSstatisticaloutthedistributionoftheset、^，oFinallyaIl甜ysed，comepolymo叩hismiIloflociHaIlSh甜1Xi．p
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抗大豆抗原蛋白-conglycinin单克隆抗体的制备及初步应用.pdf69页
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抗大豆抗原蛋白-conglycinin单克隆抗体的制备及初步应用
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摘要 本研究以半抗原为免疫原，成功制各了特异性的抗大豆即ongIychtin单克隆抗体，并在定
量检测、亲和层析和体外小肠上皮细胞结合试验中进行了初步应用。研究共包括四个试验。试
单克隆抗体 Mab6G4 。经竞争性、非竞争性酶联免疫吸附法 ELISA 和Wcstcm Blotting等
方法鉴定，结果表明：Mab
和常数达6．9X 109 L／mol，但与其结构或功能类似物glycinin无明显的交叉反应；抗体能识别
13-conglycinin分子中的a和a’亚基。由此可知，制备的Mab
定量检测，为探讨13-conglydnin在仔猪消化道内的分布及箕致敏机理提供了一个潜在的分析工
具。试验2，以单克隆抗体 Mab
争性ELISA方法。结果表明，根据Mab6 34的标准校正曲线，抑制抗原与抗体结合50％时 n咖L，检测限为2．0ng／mL：经精密度和回收辜分析，Mab
lB-conglycinin的浓度 Ic，o 为4．7 6G4与cNBr活化
为即onglycinin的定量检测提供了一个有效工具。试验3，将单克隆抗体Mab 4B琼脂糖凝胶偶联后制各免疫亲和桂，用亲和层析的方法分离纯化大豆中的
的Sepharosc
理奠定了基础．试验4，以单克隆抗体F 曲’ 2片段为工具，应用间接免疫荧光染色法分析了大 6 34
邱-conglycinin在7日龄仔猪十二指肠、空肠和回肠上皮细胞上的结合情况，并检验Mab
的应用效果。结果表明，大豆p-conglycinin能广泛结合于仔猪十二指肠、空肠和回肠上皮细胞，
并证实了所制备的单抗M曲6G4可应用于细胞定位分析和体内代谢研究。综合上述试验，得出
如下结论：以大豆13-conglydnin分子口’亚基上的一段抗原表位肽作为半抗原制备的单克隆抗体
表现出较强的特异性和亲合力。将其应用于大豆13．．conglycinin的定量检测，分离纯化以及
13-conglycinin在细胞与组织中的定位分析均具有很
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