分批培养的最佳继代时期是继发性红细胞增多症生长处于什么

定义/分批培养
是指在一个密闭系统内投入有限数量的营养物质后,接入少量微生物菌种进行培养,使微生物生长繁殖,在特定条件下完成一个生长周期的微生物培养方法。相对于分批培养,还有补料分批培养和 连续培养。补料分批培养是指在分批培养过程中,间接或者连续地补加新鲜培养基的培养方法。连续培养是以一定的速度向培养系统内添加新鲜的培养基,同时以相同的速度流出培养液,从而使培养系统内培养液量维持恒定,使微生物能在接近恒定状态下生长。
过程/分批培养
在接种后,分批培养一般经过四个时期:刚接种的时候,出现一个不生长的时期,这个时期称为迟缓期,在工业生产中可以通过采用适当接种量,以缩短迟缓期;之后细胞的生长率逐渐加大,然后达到一个常数---最大生长率,这个时期称为对数生长期;随着底物逐渐消耗,其浓度成为生长限制因素,因此增速变缓,这个时期称为衰减期;当生长率降低到零的时候,为稳定期,这个时期微生物群体仍然具有活力,并能产生称为次级代谢产物的产物,所以这一时期也可叫做最大群体期。
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悬浮细胞培养
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分批培养物
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分批培养(batch culture):是指把细胞分散在一定容积的培养基中进行培养,当培养物增殖到一定量时,转接继代,建立起单细胞培养物。
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1-分批式培养(Batch culture)是指细胞和培养 基一次性加入到培养容器或生物反应器内进行培
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...素 的降解的良好实验体系; (4) 多数悬浮细胞缺乏叶绿体、色素,对酶和次 生物质的分离及纯化十分有利 2、成批培养(batch culture) 是指在除了气体和挥发性代谢产物可以同外界空气 交换以外的密闭容器中,进行分散细胞的培养。
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分批再循环培养
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反复分批培养
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Firstly, the processing conditions of batch culture of recombinant bacteria in 5L fermenter, including whether adding trace element and vitamin to culture media and so on were optimized.
首先在5L发酵罐中,对工程菌DH5α/pBV220间歇培养时,是否在培养基中添加微量元素和维生素等工艺条件进行了优化,确定出间歇培养的最优培养条件。
参考来源 -
- 引用次数:5
In fed-batch culture, the best fed volum was 60% of the working volum, the best time was peak time of hydrogen production, in above conditions, YUAN-3 kept higher growth and hydrogen-producing activity.
补料培养的最佳补料体积为发酵液体积的60%左右,最佳的补料时间为产气的高峰期,在此条件下投加细菌可以保证细菌具有较高的生长和产氢活性,并可以缩短延滞期。 连续培养能够不断将发酵产物排出,引进新鲜培养基,避免底物的抑制。
参考来源 - 自凝集产氢细菌代谢特性及扩大培养研究
- 引用次数:12
There were no obvious lag stage in batch culture of Artemisia annua L hairy root,7~15 days after inoculation was the exponential stage,the growth rate of 11th day was the highest,and the cultures reached stationary stage at 20th day.
青蒿发根在分批培养中没有明显的迟滞期,接种后第7天进入指数生长期,第11天生长最快,第20天进入稳定期。
参考来源 -
- 引用次数:3
参考来源 -
一次性培养
分批培养物
- 引用次数:1
参考来源 - 淡水枝角类和轮虫生态及批量培养技术的研究
一次性培养
&2,447,543篇论文数据,部分数据来源于
batch culture
【微生物学】分批培养(法),成批培养(法)
以上来源于:《21世纪大英汉词典》
Microbial cultivation methods can be classified into batch culture, semi-continuous culture and continuous culture.
微生物的培养方式分为分批培养、半连续培养和连续培养,其中,分批培养应用最为广泛。
At the same time, two other optimal control models are formed taking nonlinear dynamic system in continuous and batch culture as state equations separately.
同时又分别以连续和间歇发酵非线性动力系统为状态方程,建立了两个非线性最优控制模型。
The maximum frequency of gamete induction was achieved at late lag stage and late exponential growth stage of batch culture, and the rate of hypuozygote formation was as high as 70%.
批量培养的迟滞期和指数生长期末细胞的诱导效率最高,合子产率可达70%。
$firstVoiceSent
- 来自原声例句
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感谢您的反馈,我们会尽快进行适当修改!青钱柳悬浮培养细胞三萜酸积累、分离鉴定及其降糖机制研究--《南昌大学》2011年博士论文
青钱柳悬浮培养细胞三萜酸积累、分离鉴定及其降糖机制研究
【摘要】:青钱柳(Cyclocarya paliurus (Batal.) Iljinsk)为我国特有的胡桃科青钱柳属珍稀濒危植物,零星分布于我国南方各省,可用于保健食品、医药、园林绿化、工业用材等多个领域。研究表明,青钱柳叶含三萜、黄酮、多糖、皂苷及各种微量元素等多种功能活性成分,是具有很高利用价值的天然保健食品资源,但其繁育十分困难,资源稀缺严重制约了其开发利用。本文研究了青钱柳细胞悬浮培养及其三萜酸积累规律,从悬浮培养细胞中提取分离出了主要的三萜酸并进行了结构鉴定,同时对其降糖作用效果及机制进行了研究,旨在探索以青钱柳细胞悬浮培养方式生产三萜酸类降糖功能因子的可行性,为深度开发和利用青钱柳资源、生产三萜酸类降糖功能食品提供理论依据。
以青钱柳无菌幼叶诱导愈伤组织,通过长期的筛选和继代培养,获得了疏松易碎、生长旺盛、适合于悬浮培养的优良愈伤组织,转入悬浮培养后,再经反复的筛选、继代和优化培养条件,建立了良好的细胞悬浮培养体系。该培养体系最佳继代时间为接种后第8天,最大细胞干重产量出现在第10天,最高总三萜酸产量出现在第14天。在保持MS培养基中总氮源浓度及铵态氮和硝态氮比例的同时,将磷酸盐、钙离子和镁离子浓度分别调整至1.875 mmol·L-1、2 mmol·L-1和2 mmol·L-1,可获得较高的总三萜酸产量。以三氯化铈和水杨酸对悬浮细胞进行诱导,总三萜酸产量分别可提升35.70%和22.31%。悬浮培养细胞总三萜酸、熊果酸和齐墩果酸产量分别可达1179.85 mg·L-1、443.64 mg·L-1和159.00 mg·L-1。
本文首次对青钱柳悬浮培养细胞中的主要三萜酸进行了提取、分离和鉴定。以乙酸乙酯为提取溶剂超声辅助提取悬浮细胞总三萜酸,得率高且杂质少,提取物易于纯化,优化后的主要工艺参数为提取时间40 min、提取温度50℃、料液比1:10,优化条件下总三萜酸提取得率达5.56%。经大孔树脂吸附、硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶层析、半制备高效液相色谱和重结晶等分离纯化,从总三萜酸粗提物中获得了5个单体三萜酸,经HPLC、TLC、RRLC-TOF/MS、1H NMR、13C NMR和DEPT等检测分析,化合物Ⅰ-V分别被鉴定为熊果酸、齐墩果酸、白桦脂酸、2αl-羟基熊果酸、2a-羟基齐墩果酸,其中白桦脂酸和2α-羟基齐墩果酸是首次在青钱柳中得到分离、鉴定。
本文以3T3-L1脂肪细胞为模型,在前脂肪细胞、成熟脂肪细胞、胰岛素抵抗脂肪细胞多个层次上进行了青钱柳悬浮培养细胞三萜酸降糖作用效果研究。试验结果表明:(1)TTA(总三萜酸)、UA(熊果酸)、OA(齐墩果酸)、BA(白桦脂酸)、CA(2α-羟基熊果酸)对3T3-L1前脂肪细胞增殖没有促进作用,2.5μg·mL-1 MA(2α-羟基齐墩果酸)有明显的促进作用;(2)TTA、UA、OA、BA对前脂肪细胞葡萄糖消耗没有促进作用,而CA、MA在浓度为2.5至5μg·mL-1时有促进作用,并且在没有胰岛素刺激的情况下也能显著提高葡萄糖消耗;(3)5μg·mL-1的TTA、UA、OA能极显著地促进前脂肪细胞分化,而5μg·mL-1的CA明显地抑制分化,BA和MA则基本无影响;(4)TTA、UA、OA、CA和MA均对成熟脂肪细胞的葡萄糖消耗具有较好的促进作用,且在无胰岛素存在的条件下也能提升葡萄糖消耗,表明三萜酸促进成熟脂肪细胞葡萄糖消耗可能存在与Ros(罗格列酮)不同的作用机制;(5)TTA、UA、MA能防止Dex(地塞米松)所诱导的胰岛素抵抗的形成,OA和CA虽然不能防止胰岛素抵抗形成但能减轻抵抗的程度,而BA对胰岛素抵抗的形成没有影响;(6)TTA和UA能改善已经形成胰岛素抵抗细胞的抵抗状态,具有较好的胰岛素增敏作用,MA、OA、CA也有一定的增敏效果,但BA对抵抗状态没有改善作用;(7)各三萜酸在合适的浓度下,均能显著地减少胰岛素抵抗脂肪细胞培养上清液中的FFA(游离脂肪酸)的含量,这也可能是三萜酸改善胰岛素抵抗、促进葡萄糖消耗的作用机制之一。
在全面研究三萜酸降糖作用效果的基础上,选择了效果较好的TTA 7.5μg·mL-1组、UA 5μg·mL-1组、OA 5μg·mL-1组和MA 5μg·mL-1组进行进一步的降糖机制研究,通过检测三萜酸对胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞中PPARγ、CAP、Glut4、Resistin和IRS-1五个胰岛素信号传导相关关键靶点的mRNA表达水平,初步探索其作用的分子机理。试验结果表明:(1)UA可能通过两条途径增强胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞的胰岛素敏感性、促进葡萄糖消耗:一是上调PPARγ及其下游基因Glut4 mRNA的表达,二是提高IRS-1 mRNA的表达;(2)OA可能是通过下调Resistin mRNA的表达来发挥降糖作用;(3)MA可能通过提高胰岛素抵抗3T3-L1脂肪细胞CAP和IRS-1 mRNA的表达来增强胰岛素敏感性、促进葡萄糖消耗,虽然MA没有表现出促进PPARγmRNA表达的活性,但还是明显促进了CAP mRNA的表达,提示CAP的表达除受PPARγ调控之外还可能存在其它调控途径;(4)TTA为各三萜酸的混合物,其降糖作用的效果和机制基本上是各三萜酸作用的综合体现,一是通过促进PPARγmRNA的表达来提高其下游CAP、Glut4 mRNA的表达;二是上调IRS-1 mRNA的表达;(5)青钱柳三萜酸在改善胰岛素抵抗、促进葡萄糖消耗上存在与Ros不一样的作用机制。
综上所述可得出如下结论:(1)青钱柳悬浮培养细胞中含熊果酸、齐墩果酸、白桦脂酸、2α-羟基熊果酸、2α-羟基齐墩果酸五种主要的三萜酸;(2)青钱柳细胞悬浮培养可用于熊果酸、齐墩果酸等三萜酸的生产;(3)青钱柳悬浮培养细胞三萜酸具有较好的降糖作用效果;(4)青钱柳悬浮培养细胞三萜酸可通过提升PPARy、CAP、Glut4、IRS-1 mRNA的表达、下调Resistin mRNA的表达水平来实现降糖作用。
【学位授予单位】:南昌大学【学位级别】:博士【学位授予年份】:2011【分类号】:X173
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固定体积培养介质细胞悬浮培养实验图像显微镜
&&& 悬浮培养的类型&&& 分批培养  分批培养指在固定体积的培养介质中进行的细胞悬浮培养。在培养过程中?细胞分裂和细胞生长使得悬浮培养物的生物量不断增加。当培养环境(可利用的营养和氧气)中出现限制因子时,细胞停止生长,生物量便不再增加。
&&& 培养时间的模式曲线&&& ①滞后期:此期为细胞分裂做准备。&&& ②指数期:细胞分裂速度最快。&&& ③线形期:细胞分裂速度减慢,细胞伸长生长速度增加。&&& ④减速期:细胞分裂和细胞伸长速率都减小。&&& ⑤稳定期:细胞数目和大小保持恒定。  当细胞被转移到新鲜培养基中开始培养时,细胞就处于滞后期,这是分批培养的最开始阶段,此时期的细胞还没有分裂。滞后期的细胞可用来分析特定代谢物的合成和某种生理活动的速率。紧跟滞后期的是细胞分裂期(即指数期),此时期持续的时间很短,指数期时,每单位生物量浓度的生物量增加是一定的且是可以测量的。生物量通常是指每毫升培养物中的细胞数目。一般地,在细胞分裂到3―4代后,细胞生长开始降低,最后,细胞数目达到稳定期,此时细胞干重开始下降。稳定期是分批培养中细胞生长周期的最后阶段,此时生物量和细胞数量都没见有明显的增加。培养时可以通过频繁(周期为2―3d)地进行亚培养而使细胞维持在指数生长期。由于细胞能利用胞内的储备物和死亡细胞所释放的可再利用代谢物,所以细胞可以存活几天。稳定期细胞的稳定性取决于生长限制因子的种类和特点(如因氮缺乏而达稳定期的细胞的存活时间比碳缺乏的要长)。处于稳定期的细胞被转移人新的培养基进行继代培养后,细胞就依次通过滞后期、很短暂的指数生长期、相对生长速率下降时期,接着又再次进入稳定期。进入末期前,细胞的体积在增大。一般按照惯例,每次继代培养都是开始于相对较高的细胞密度,所以再次进入稳定期前,细胞只进行有限的分裂(细胞数目加倍)。  
  一般来说,细胞悬浮培养的目的是获得生长速率较快、均一的细胞,而且所有细胞都是活的。在适当的培养基中频繁地进行继代培养,获得的细胞就可以同时具有这些特点。如果悬浮培养的细胞是用于做实验,则继代培养的时间间隔不要超过一周。
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