无性生殖_百度百科
无性生殖是一类不经过两性生殖细胞的结合，由母体直接产生新个体的生殖方式。可以分为（细菌及）、（、等）、（等）、（等），具有缩短植物生长周期，保留母本优良的作用。像水螅出芽，和无心插柳柳成荫等生命现象，其实就是生物在进行无性生殖。
无性生殖简介
无性生殖定义
不经过两性（配子）的结合，由母体直接产生不改变遗传性状的新。
无性生殖分类
无性生殖分为：、、、、。
无性生殖优点
缩短植物生长周期；
2.保留农作物的优良性状，增加一些新的优点；
3.增加农作物产量。
无性生殖缺点
较，容易因为细菌入侵全体死亡。
无性生殖繁殖方式
无性生殖分裂生殖
分裂生殖又叫裂殖，是生物由一个母体分裂出新子体的生殖方式。生出的新个体，大小和形状都是大体相同的。在中，这种生殖方式比较普遍。例如，、、、细菌都是进行分裂生殖的。
草履虫的分裂生殖过程
无性生殖出芽生殖
又叫芽殖，是由母体在一定的部位生出芽体的生殖方式。芽体逐渐长大，形成与母体一样的个体，并从母体上脱落下来，成为完整的新个体
水螅的出芽生殖过程
。和(环境恶劣时水螅也进行有性生殖。)常常进行出芽生殖。
无性生殖孢子生殖
有的生物，身体长成以后能够产生一种细胞，这种细胞不经过两两结合，就可以直接形成新个体。这种细胞叫做孢子，这种生殖方式叫做孢子生殖。例如根霉，它的直立的顶端形成孢子囊，里面产生孢子。孢子落在阴湿而富含有机质的温暖环境中，就能够发育成新的根霉。一般的和真菌都是这种方式。如、、。
无性生殖营养生殖
由植物体的（根、叶、茎）产生出新个体的生殖方式，叫做营养生殖。例如，马铃薯的块茎、蓟的根、草莓匍匐枝、秋海棠的叶，都能生芽，这些芽都能够形成新的个体。
能够使后代保持亲本的性状，因此，人们常用分根、扦插、嫁接、压条、高压等人工的方法来繁殖花卉和果树。
在自然状态下进行，叫做自然营养繁殖。如草莓匍匐枝，秋海棠的叶，马铃薯的块茎；在人工协助下进行营养繁殖，叫做人工营养繁殖。如扦插、嫁接
扦插：把枝条剪成小段，插入土中，生根发芽后成为新植株。
嫁接：把一株植物的枝条（或芽）接到另一株植物的枝干上，将两者的形成层对准，使它们彼此愈合起
莲藕的营养生殖
来，长成为一个植株。
接穗：接上去的芽或枝
砧木：被接的植物体
成活原理：利用形成层的再生能力。
成活关键：注意使接穗的形成层与砧木的形成层密合在一起。这样两个形成层分裂出来的细胞，就把接穗与砧木合成.
植物的需要的条件 比如扦插，除去光照，水分，温度，湿度等环境条件外，用作扦插的植物茎段需要具备的条件有：1.茎段(保留两节)，上方切口水平，下方切口斜上；2.叶片：上一节去掉部分，下一节去掉全部。
无性生殖组织培养
具有全能性。 根据这个理论，用植物的， 可以完成植物的繁殖。的大致过程如下：在无菌的条件下，将植物器官、组织、细胞切下，放在适当的人工培养基上培养，这些器官或组织就会进行，形成新的组织。不过，这种组织没有发生，在适当的光照、温度和一定的营养物质与植物激素等条件下，这部分细胞便开始分化，产生组织器官，进而发育成一棵完整的植株。
植物的组织培养不仅取材少，培养周期短，繁殖率高，脱毒，而且还便于自动化管理。这项技术已在果树和花卉的快速繁殖、培育无病毒植物等方面得到了广泛的应用。例如，一个兰菊花的茎尖，可以在一年内产出40万株兰花苗。又如，长期进行无性繁殖的植物，体内往往积累大量的病毒，从而影响植物的产量和观赏价值，经研究发现，只有和根尖中不含有病毒，因此，人们利用茎尖进行组织培养，便得到了多种植物如（马铃薯、草莓、菊花）的无病毒株，取得可观的经济效益。
无性生殖克隆（Clone)
一个共同前体通过无性繁殖而形成的一群相同的细胞或个体。对于，则指一个基因反复扩增后产生的多个拷贝。
先将含有遗传物质的供的核移植到去除了细胞核的卵细胞中，利用微电流刺激等使两者融合为一体，然后促使这一新细胞分裂繁殖发育成胚胎，当胚胎发育到一定程度后，再被植入动物子宫中使动物怀孕，便可产下与提供细胞者基因相同的动物。这一过程中如果对供体细胞进行，那么无性繁殖的动物后代基因就会发生相同的变化。
克隆技术不需要雌雄交配，不需要精子和卵子的结合，只需从动物身上提取一个单细胞，用人工的方法将其培养成胚胎，再将胚胎植入雌性动物体内，就可孕育出新的个体。这种以出来的克隆动物，具有与单细胞供体完全相同的特征，是单细胞供体的“复制品”。英国英格兰科学家和美国俄勒冈科学家先后培养出了“”和“克隆猴”
。的成功，被人们称为“历史性的事件，科学的创举”。有人甚至认为，克隆技术可以同当年原子弹的问世相提并论。
无性生殖植物例子
椒草：椒草的叶片养在水里就能够形成新的根系，发出芽和根，并长成新的植株。
水养的椒草
马铃薯：马铃薯块茎发芽，可移栽。
无性生殖其他说明
1、无性生殖的方法：嫁接，扦插，压条，克隆。
2、单细胞生物大部分进行分裂生殖，原生动物也能进行有性生殖。
3、“出芽生殖”中的“芽”是指在母体上长出的芽体，而不是高等植物上真正的芽的结构。比如：马铃薯利用芽进行繁殖是利用块茎进行繁殖，它是而不是。从本质上讲，“芽体”和母体是一样的，只不过芽体小一些。
4、无性生殖中的孢子生殖中的“孢子”是无性孢子，和体细胞有着相同的数或DNA数。因此，无性孢子只可能通过或来产生，而不可能通过来产生。
5、营养生殖是利用植物的营养器官来进行繁殖，只有高等植物具有根茎叶的分化，因此，它是高等植物的一种无性生殖方式，低等的植物细胞不可能进行营养生殖。 1997年英国科学家用克隆技术培育的绵羊多莉就是其中的一例。我国在研究上，也取得了较大的成就。例如，在多莉出生后不久，我国克隆山羊成功率是克隆绵羊多莉的10~20倍。关注今日：0 | 主题：236117
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【求助】人血红细胞里面有DNA吗？
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这个帖子发布于5年零233天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
问题已解决悬赏丁当:10
现在有一个科研项目，外方写的protocol里面要留病人的血红细胞，做这个疾病的遗传学研究，但是人的红细胞里面没有细胞核，那就没有DNA才对，问了一些搞分子生物学的也说不清楚，请问人血红细胞里面有DNA吗？怎么做遗传学的？请尽量给出参考文献或权威出处
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成熟红细胞既没有细胞核，也没有线粒体，所以正常成熟RBC是没有DNA的，但是某些疾病（如多种不同原因的贫血）的患者外周血中存在幼稚RBC，这些RBC是有细胞核的。
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但是我们做的是呼吸疾病，不存在血液系统疾病，所以很难理解
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遗传学研究是很宽泛的说法，用什么材料做，什么技术做都是问题。我觉得你应该把外方PROTOCOL里面相关的片段摘录一下给大家看看，以便了解对方的目的是什么。这样也不会造成课题资料泄密。此外，呼吸也是一个很宽泛的说法，除了系统层面的呼吸，我们都知道还有细胞水平的呼吸问题，这两个概念就相去很远了，是不是跟你们课题的外方合作者的要求有关呢？
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未至三十期 遗传学研究是很宽泛的说法，用什么材料做，什么技术做都是问题。我觉得你应该把外方PROTOCOL里面相关的片段摘录一下给大家看看，以便了解对方的目的是什么。这样也不会造成课题资料泄密。此外，呼吸也是一个很宽泛的说法，除了系统层面的呼吸，我们都知道还有细胞水平的呼吸问题，这两个概念就相去很远了，是不是跟你们课题的外方合作者的要求有关呢？谢谢解答，PROTOCOL里面很简单，就是要求抗凝管抽血后去除血浆，留取红细胞，我们做的是慢性阻塞性肺疾病，不关细胞水平的呼吸问题，我觉得是不是留取红细胞的过程中还存在一些白细胞，但是他们又说是留红细胞去做遗传学分析，要留取白细胞的话最好先分离白细胞才对，很怪
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我感觉遗传学分析不仅仅是DNA水平的分析，蛋白水平也是，对于RBC而言，所含的Hb不管是含量改变，还是Hb组成改变，都应该算是遗传学的改变。
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slytjiaofei战友说得很对，蛋白水平也是一个重要的研究层面。建议楼主上网搜索一下，RBC遗传学研究，看看都有些什么样的文献，这样可能可以解决你的疑惑。另外突然想起一个之前没有提到的问题，不知道你们提取的RBC是在国内进行检测，还是送国外，按现在的法律规定。含遗传学物质的标本（例如血样本和细胞样本）不得随意出境，实际上就我所知有不少国外的研究者和国内团队合作都有获取遗传物质标本的目的在内，有的中方合作者在合作之初没有考虑周详，导致科研成果拱手让人，损失不可谓不惨重，建议你们了解一下相关的规定，避免损失。
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未至三十期 slytjiaofei战友说得很对，蛋白水平也是一个重要的研究层面。建议楼主上网搜索一下，RBC遗传学研究，看看都有些什么样的文献，这样可能可以解决你的疑惑。另外突然想起一个之前没有提到的问题，不知道你们提取的RBC是在国内进行检测，还是送国外，按现在的法律规定。含遗传学物质的标本（例如血样本和细胞样本）不得随意出境，实际上就我所知有不少国外的研究者和国内团队合作都有获取遗传物质标本的目的在内，有的中方合作者在合作之初没有考虑周详，导致科研成果拱手让人，损失不可谓不惨重，建议你们了解一下相关的规定，避免损失。这个我们倒是有考虑，毕竟都知道这东西很敏感，肯定是明确国内做的，而且这么多血样，要出境海关这一关没那么容易过
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如果从外周血中提取DNA，应该是提取有核的白细胞中的DNA；
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关于丁香园细胞核里的DNA怎么出去细胞核外_生物吧_百度贴吧
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细胞核里的DNA怎么出去细胞核外收藏
求解释 谢谢！！！高一新生
世界领先的DELFIA/LANCE/ALPHA,应用于激酶,GPCR,细胞因子,生物标记物,分子相互作用,报告基因检测等,为生命科学研究与药物研发行业提供完整解决方案的全球顶尖服务商
你是要干什么。。。提取DNA？
是出去？？自己出去还是提取
一般不出去，有mRNA运送遗传信息
核膜上的核孔可以选择性透过核酸（以及蛋白质之类的大分子）。另外，分子量过大（大于六万？的蛋白质）一般就难以通过核孔进出。目前假定是体积大于核孔复合体有效通路的蛋白质会改变构象，以长条状的形式进出核孔；或者是与核孔周围一些受体相作用从而扩大孔径。至于核酸本身就是线状的，个人猜测应该没那么麻烦需要改变形态进出。外来DNA进入细胞核的例子有逆转录等（如AIDS之类的），具体机制不清楚。至于出来的话。。。不清楚有没有，暂时没想到，不过一般不会出来吧。。。估计就算出来应该也是过与某些蛋白质作用从而由核孔介导出细胞核，而不是单纯的“漏出来”（进去也是一样）。一般的话都是在细胞核内合成RNA然后将RNA转运出细胞核再翻译蛋白质的，而不是DNA出去。至于核外DNA（叶绿体、线粒体）是独立复制的，只是会受到细胞核内基因一定程度上的调控而已。比如我记得当细胞内能量不足的时候（ADP与ATP的比值达到一定的时候）就会激活一些酶，然后通过某些信号通路一环影响一环最终激活核内某些基因的表达，从而促使线粒体DNA的自我复制以及线粒体的分裂。。。
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1.75亿学生的选择
细胞核中不是只有DNA么,那么碱基在细胞核中不就是只有4种么?
细胞核中只有DNA,不错.但是,转录也是发生在细胞核中的呀...转录,就是mRNA形成的过程,就会有碱基U的参与,所以细胞核中有5种碱基：A、G、C、T、U 注意：问的是碱基,不是核苷酸.碱基只有5种,但核苷酸有8种.
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好好查查高中生物书啊
那RNA去哪里转录啊……
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在乙肝病毒的复制过程中，病毒DNA进入宿主细胞核，在DNA聚合酶的作用下，两条链的缺口均被补齐，形成超螺旋的共价、闭合、环状DNA分子（covalently closed circularDNA，cccDNA）。细胞外乙型肝炎病毒DNA是一种松弛环状的双链DNA（relaxed circularDNA，rcDNA）分子。cccDNA是病毒前基因组RNA复制的原始模板，虽然其含量较少，每个肝细胞内只有约5～50个拷贝，但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义，只有清除了细胞核内的cccDNA，才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态，是抗病毒治疗的目标。
cccDNA乙型肝炎病毒cccDNA检测方法及应用价值
细胞外DNA是一种松弛环状的双链DNA（relaxed circularDNA，rcDNA）分子，其两条链均不是闭合的，其中负链较长，约3200个碱基，含有病毒基因组的全长基因，在其5’起始端与3’末端之间有一个数个的“缺刻”(nick)；正链较短，有较大的“缺口”(gap)，其3’末端不固定，故长度是可变的，约为负链长度的50%～100%。在乙肝病毒的复制过程中，病毒DNA进入宿主细胞核，在DNA聚合酶的作用下，两条链的缺口均被补齐，形成超螺旋的共价、闭合、环状DNA分子（covalently closed circularDNA，cccDNA）。cccDNA是乙肝病毒前基因组RNA复制的原始模板，虽然其含量较少，每个肝细胞内只有约5～50个拷贝，但对乙肝病毒的复制以及感染状态的建立具有十分重要的意义，只有清除了细胞核内的cccDNA，才能彻底消除乙肝患者病毒携带状态，是抗病毒治疗的目标。
cccDNA乙肝病毒cccDNA的检测方法
cccDNA和rcDNA在结构和理化特性上有三点不同：①rcDNA在正链与负链上均有缺口或缺刻，只是部分区域互补故能形成环状结构，但非超螺旋结构；而cccDNA两条链均是完整的，二者共价互补，形成超螺旋结构。②rcDNA能与蛋白质共价结合，cccDNA则不能。③由于缺口或缺刻的存在，rcDNA可以被一些核酸酶如外切核酸酶Ⅲ(exonuclease Ⅲ)、绿豆核酸酶(mung beannuclease)等降解成寡核苷酸或单核苷酸，而cccDNA则由于是超螺旋且双链结构均是完整的，一般不会被上述酶降解。上述差异是设计和建立cccDNA检测技术的基础。本文就有关cccDNA 常用检测方法作简要介绍。
1.1 细胞内cccDNA的抽提与纯化
最常用的抽提细胞内cccDNA的方法是蛋白质－去污剂沉淀法，其原理是基于rcDNA和cccDNA与蛋白质结合能力的差异。rcDNA能与蛋白质共价结合，与绝大多数细胞染色体DNA一起形成沉淀，而cccDNA不能与蛋白质结合故游离于上清中，用酚氯仿抽提上清即可得到cccDNA。根据笔者的经验，该方法的主要缺点是：抽提较为费时，一般需要4～5小时；酚氯仿抽提环节多、得率不高；对于冻存的富集细胞（pellet）难以充分裂解，单裂解这一步可能需要3～4小时甚至更长时间。此外，在上清中实际仍然含有少量的rcDNA，而在沉淀中实际上也存在着一部分cccDNA。
为进一步分离cccDNA、rcDNA和单链DNA，可以对抽提产物进行纯化。以酶最为常用。外切核酸酶Ⅲ是一种3’→5’外切酶，对带有钝端、5’突出端或有缺口的双链具有特异性，而不能降解带有3’突出端（至少4个碱基）的双链DNA。绿豆核酸酶则以内切方式降解单链DNA或RNA，而保持双链DNA的完整性（二者的比活性&1000），可用于选择性切除双链DNA的突出单链末端，以及切除单链DNA或RNA。也可单用绿豆核酸酶酶切rcDNA，或先用外切核酸酶Ⅲ将rcDNA降解成单链，然后再用绿豆核酸酶酶切。该方法也有其缺点：如抽提产物被稀释，降低了检测敏感度；绿豆核酸酶的反应缓冲液对PCR反应有抑制作用等。
我们尝试用小量抽提试剂盒抽提去抽提HepG2.2.15细胞内的cccDNA，结果发现得率比上述所用方法均要高，操作也简便，所有操作在30分钟内就可完成。
1.2 cccDNA的定性检测
既往绝大多数文献报道的是用Southern blot对cccDNA进行定性检测，该方法是分子生物学的经典方法，但技术要求较高，敏感度低。
近年来，也有较多文献报道用PCR技术对cccDNA进行检测。但是，由于PCR技术灵敏度极高，rcDNA和cccDNA的序列又具有高度的同源性，因此在用PCR技术检测cccDNA时，必须确保只能扩增cccDNA而rcDNA不被扩增。目前利用rcDNA和cccDNA结构上的差异可以解决这一问题。由于rcDNA的正链和负链上均存在缺口，故可以设计跨越两个缺口的引物，使rcDNA不会被扩增，而cccDNA由于是完整的双链结构则可以被选择性扩增。同时可设计另一对不跨越缺口的引物或只跨越一条链的缺口的引物同时检测cccDNA和rcDNA。Kock等成功地用这种选择性PCR的方法在检测感染细胞内的cccDNA和rcDNA。
此外，为进一步提高检测的灵敏度，可用套式PCR(nested PCR)的方法。
但是有报道认为跨缺口引物对两种DNA的选择性不是绝对的，在PCR检测cccDNA时，起始模板量不能过高，否则rcDNA也有可能被扩增，Kock等发现每个PCR反应管中HBV DNA的量在1pg（约6×105拷贝）时能达到最佳的灵敏度与选择性，因此在分析前应估计标本中HBVDNA的量。虽然套式PCR更为灵敏，但由于需取PCR产物进行再次扩增，因此在操作中要注意防止PCR产物污染，避免假阳性。
1.3 cccDNA的定量检测
在定性检测的基础上，可以进一步对cccDNA进行定量检测。仍以PCR定量分析技术中，尤其是竞争PCR技术的敏感性和精确度高。方法是在PCR反应管中加入一种已知量的、能与野生模板等效扩增的内参照，内参照是经过突变处理的，其两端尤其是引物退火区的序列与野生模板相同。PCR扩增后通过一定的方法将野生片段与突变片段区分开，分别计算其绝对量，或求出其相对比值，就可以推算PCR扩增以前野生模板的量。
He等建立了实时荧光定量PCR检测cccDNA的方法。他们将TaqmanMGB探针设计在负链缺刻的下游，与负链互补结合。对cccDNA，在上游引物的引导下，Taq酶到达TaqmanMGB探针所结合的位点，利用其5’→3’外切活性将探针切断，3’端的淬灭基团失去对5’端的发光基团的抑制作用，从而产生荧光信号。每扩增一个cccDNA分子，就会产生一个荧光信号，PCR仪可对产生的信号进行实时监测，根据荧光信号的强弱对cccDNA进行定量。对rcDNA，由于上游引物引发的链延伸不能通过负链缺刻，故不能使TaqmanMGB探针被Taq酶切断产生荧光信号。该方法的特异性比选择性PCR进一步提高，可以消除高rcDNA背景可能产生的非特异性扩增。该方法的检测低限可达100个拷贝，灵敏度比目前应用的任何一种其它方法都高。所有检测在2小时内可完成。
还有其他一些更为敏感的检测方法，如Shao等报告的两步法对cccDNA进行实时荧光定量。其设计与He等的方法有异曲同工之处，即都是利用rcDNA与cccDNA分子结构上是否完整来有效地将二者区分开来，实现对cccDNA的特异性检测。该方法在荧光探针位置的选择上更符合荧光PCR的要求，即探针越靠近引物效果越好，这样检测到的荧光信号质量和实时扩增曲线形状可能更佳，而在He等的方法中探针与上游引物点之间的距离则至少需要在230个碱基以上。但是，该方法存在与套式PCR类似的缺点，即需要分两步操作，单链延伸反应管开盖后极有可能造成产物污染。
cccDNA乙肝病毒cccDNA检测的临床意义
2.1 评价抗乙肝病毒药物的新指标
目前临床上评价干扰素、核苷类似物这些抗乙肝病毒药物时存在一个很大的问题，即其评价指标主要是肝功能的改善与否、血清乙肝病毒DNA水平的变化以及肝组织的病理学改变等。诚然，这些指标对临床医生判断患者病情而言非常重要和实用，也是临床医生选用抗乙肝病毒药物时的依据，然而对于何时停用抗病毒药物、停用抗病毒药物后乙肝病毒是否会重新复制活跃导致乙肝复发则缺乏客观而有效的指标。开展肝细胞内乙肝病毒cccDNA的动态的定量监测可以部分解决这个问题。治疗前后内乙肝病毒cccDNA的含量的变化应该纳入到抗乙肝病毒药物评价的指标体系中来，从一定意义上说，只有能够彻底清除乙肝病毒cccDNA的药物，才能算是真正“有效”的抗病毒药物。
Schultz等用鸭－γ(DuIFN-γ)分别在DHBV感染前后作用于原代培养鸭肝细胞，发现100U/ml的DuIFN-γ可使细胞内cccDNA水平下降至1/10～1/20。在DHBV感染前1天加DuIFN-γ，感染后4天细胞内仍然可以检测到cccDNA，但仅相当于不加药对照组感染后1天的水平，说明在DuIFN-γ作用下，新感染病毒的rcDNA仍然可以转化为cccDNA，但子代rcDNA通过细胞内通路扩增形成cccDNA的过程受到抑制。Mason等以治疗WHV感染的土拨鼠，结果发现可使血清病毒的滴度下降至初始水平的0.3%甚至更多，但在维持治疗3～12个月后，95%的土拨鼠肝脏细胞中仍然能检测到病毒，cccDNA水平无明显改变，但有3只土拨鼠感染肝细胞的比率和肝细胞内cccDNA的水平有显著下降（给药组2只，对照组1只），作者认为这可能是免疫清除的结果而非药物的作用。Dandri等[15]以不同剂量(1μmol/L、10μmol/L、100μmol/L)的阿德福韦(adefovir)作用于原代培养的WHV感染土拨鼠肝细胞，发现均可使WHVDNA合成下降90%，病毒颗粒的分泌量下降98%，但对cccDNA的合成没有影响，对包膜蛋白的分泌和RNA的合成无作用。即使在培养基中加入表皮生长因子作用14天以诱导细胞转化（turnover）发生分裂，但细胞内cccDNA水平仍无变化，提示cccDNA可被从母代细胞转运到分裂形成的子代肝细胞中。L-Fd4C(2',3'-dideoxy-2',3'-didehydro-beta-L-5-fluorocytidine)是近年来发现和研究较多的核苷类抗病毒药物，其体外抗病毒活性至少较拉米夫定强10倍。Zoulim等用Fd4C作用于原代培养的鸭肝细胞，发现它对逆转录酶的抑制作用强于拉米夫定等其它胞苷类似物，具有持久的抑制病毒复制的作用，但对cccDNA的水平没有影响。当用Fd4C处理病毒感染的鸭和土拨鼠时，对和DNA的合成也强于拉米夫定，但是停药后很快复发，因为cccDNA在内持续存在。上述结果均说明，尽管核甘类药可以抑制HBVDNA复制，但不能清除cccDNA。
除和核苷类似物外，也有人研究了其他药物对cccDNA的影响。Turin等用细胞周期阻断剂丁酸钠作用于体外培养的鸭肝细胞。丁酸钠是一种细胞分裂抑制剂，能可逆地将细胞周期阻断于G0/G1期。他们发现虽然它不能阻止起始的病毒基因组转变为cccDNA,但可以抑制随后的cccDNA扩增。但这种作用是可逆的，一旦撤除丁酸钠，cccDNA水平又将上升。Thermet等用包含DHBV大包膜蛋白基因的质粒作为治疗性DNA疫苗治疗慢性携带DHBV的鸭，发现可以显著减少病毒的复制，更有意义的是，在一些鸭（7/30）的肝细胞内，cccDNA已被完全清除。治疗性DNA疫苗也许是一种清除HBV感染肝细胞内的cccDNA、减少复发的有前景的方法。其它旨在阻断病毒在细胞内复制、转录、翻译乃至释放的某一个环节的抗病毒药物则很难清除cccDNA，因为cccDNA池已经在感染内形成，而肝细胞是相当稳定的几乎不分裂的细胞，即使肝细胞发生分裂，cccDNA还可以被分配到子代细胞中去，并通过负反馈调节机制最终保持稳定。
2.2 评价抗乙肝病毒是否能感染肝外组织的客观指标之一
乙肝病毒不仅仅是一种嗜肝病毒，一些肝外组织中也可检测到乙肝病毒DNA，如肾脏、胰腺以及（peripheralblood mononuclearcell,PBMC）等。早就有人发现乙肝病毒可以感染白细胞,而这种免疫细胞的感染似乎有利于病毒逃避，从而导致机体清除乙肝病毒的能力下降。关于PBMC能否被乙肝病毒感染的问题目前仍有争议，其中一个重要的原因是没有确立PBMC被感染的标准。我们认为把PBMC细胞内是否存在cccDNA作为判断感染的标准是最可靠的。cccDNA的形成是乙肝病毒的侵入细胞后在细胞内进行复制的起始步骤，也是转录合成前基因组RNA(pregenomicRNA,pgRNA)的前体，是建立病毒感染状态的最重要标志，没有cccDNA的形成也就没有其后的一系列过程。Kock等用乙肝病毒去感染体外培养的PBMCs时，发现不能在细胞内检测到cccDNA，相反，如果转染的是肝细胞，则非常容易检测到cccDNA。此外，在的肝组织内，能检测到cccDNA和rcDNA，而在其PBMC中，则只能检测到rcDNA。认为乙肝病毒是不能感染PBMC，即使PBMC中检测到乙肝病毒，也只是血液的病毒DNA与PBMC表面牢固结合，不易被PBS等洗涤下来，抽提细胞所得到的病毒DNA其实并不存在于细胞内；或病毒仅仅是被PBMC所“吸收”(absorption)，并没有建立真正意义上的感染状态。这一实验结果给我们很多启发，也加深了对乙肝病毒感染的认识。
2.3 评价乙肝患者病情
我们用选择性荧光定量PCR对93例乙肝患者血清作回顾性分析时，发现24例患者血清cccDNA呈阳性，其中急性乙肝1例，慢性乙肝（轻度）6例，慢性乙肝（中度）6例，慢性乙肝（重度）3例，2例，慢性乙肝（重型）6例，其中慢性乙肝（中度）以上的病例占70%以上。虽然经过统计学分析还不能看出显著差异，样本量还不够大，血清cccDNA与病情的轻重是否存在某种关系还有待于进一步的深入研究。但是，从理论上推测，既然存在于胞质和线粒体中的转氨酶等酶类在肝细胞被破坏时能释放到血液中，那么存在于肝细胞核内的cccDNA分子在肝细胞变性、坏死时应该也可以释放到血液中，而且病情越严重，变性坏死的细胞越多，对于同一个患者而言，在某一时间段内，其血液中的cccDNA水平应该也相应地越高，对判断病情有意义。目前通过来监测乙肝患者肝组织中的cccDNA水平变化存在着一定困难，因而监测血液中的cccDNA的动态变化也许更具有现实意义。当然，其中还存在一些问题有待研究和解决，比如血液中的cccDNA水平远远低于肝组织中的cccDNA水平，也远远低于血液中的的rcDNA水平，因此必须进一步提高cccDNA定量检测的灵敏度。
cccDNA展望
目前看，我们对HBVcccDNA的认识有待提高。在检测技术上有许多问题需要解决，比如，如何进一步提高灵敏度，如何避免rcDNA同时被扩增（国内有些文献报告的结果可能忽视了这一问题），如何简化操作步骤，从而能够被广泛应用等。检测或监测cccDNA的临床意义也有待挖掘，比如，可以通过细胞和动物模型，来评判新药的抗病毒作用；HBV感染基础上发生的，其病期、病情和预后能否通过cccDNA水平获取一定信息；肝外组织感染的问题也可以通过检测组织细胞中是否存在cccDNA得到解释；基因治疗或免疫治疗的“靶向”可以定位于cccDNA；cccDNA对染色体是否起中用值得探索，这对阐述肝细胞的发生机制可能有益。