问一下，双手肌肉萎缩,大拇指使不上力气,使用筷子不带劲...
来自：河北省 张家口
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病情分析： 肌肉萎缩是指横纹肌营养不良，肌肉体积较正常缩小，肌纤维变细甚至消失。神经肌肉疾肥大。肌肉营养状况除肌肉组织本身的病理变化外，更与神经系统有密切关系。脊髓疾病常导致肌肉营养不良而发生肌肉萎缩。一般可使用补肾养血、活血化瘀的中药配合针灸按摩的方法调理。
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病情分析：
平山病的病程自限,预后是良好的.目前有以下的治疗方法：（1）颈托治疗：早期诊断早期带颈托治疗,能缩短病程,缓解临床表现.建议必须尽可能长时间带颈托治疗.（2）手术治疗：研究表明做硬脊膜成形术加脊髓松解术,能改善近期和远期效果.
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病情分析：
肌肉萎缩一般平时多参加锻炼，保持乐观愉快的情绪，合理调配饮食结构，饮食宜高蛋白、富含维生素、钙、锌，瘦肉、鸡蛋、鱼、虾仁、动物肝脏、排骨、木耳、蘑菇、豆腐、黄花菜等可适当多食，少吃或忌食过辣、过咸、生冷等不易消化和有刺激性食品。
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腰椎间盘突出
股骨头坏死
强直性脊柱炎君，已阅读到文档的结尾了呢~~
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双肌牛的性状特征及双肌基因的研究进展
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3秒自动关闭窗口延边大学与韩国科学家转基因 新型双肌性状改良猪诞生
编辑：张桂鸣
[导读]吉林延边大学官网显示，韩国中央电视台kbs1频道5月29日在新闻中报道了该校转基因动物与胚胎工程吉林省重点实验室尹熙俊教授研究团队科研成果——“双肌性状改良猪培育”。
中国和韩国科学家组成的研究团队宣布，通过基因改造的方法培育出新型的瘦肉猪&&&双肌性状改良猪&（意即两倍肌肉的猪），并希望成为世界上第一个通过审批的、供人类消费的基因工程动物。
美国当地时间6月30日，国际学术期刊《自然》在其官方网站披露了这一消息，并称研究人员尚未发表研究成果。
这一基因改造动物不同于传统意义上的&转基因&。基因改造的意义更广泛，泛指生物体的基因组被人为修改，包括&转基因&。而&转基因&特指将一种生物的一些基因导入到另一种生物中，常常涉及多个基因。
韩国首尔大学的分子生物学家金振秀（音译）带领的研究团队只改变了猪的一个基因就培育出了&双肌性状改良猪&。金振秀认为，该动物自然情况下也能发生这样的基因变异，&通过常规的育种手段，我们可能得耗费几十年，达到同样的效果&，而现在，研究人员只是按了&快进键&。
与转基因相比，金振秀研究团队对新型瘦肉猪进行的基因改造就少得多。研究人员希望有关部门能够放松监管，使其成为首批被人类消费的基因工程动物。
由于担心基因改造对环境和健康可能造成负面影响，目前还没有基因工程动物被批准上市的先例。能够快速生长的转基因三文鱼此前被认为很接近监管部门的最终批准上市，但美国食品药品管理局（fda）目前仍未放行。
6月10日，加拿大和瑞典的研究人员发表研究论文称，转基因三文鱼对野生三文鱼的威胁仍不明朗。现在就进行环境释放，可能是不明智的选择。
培育双肌性状改良猪的关键是mstn基因，该基因抑制肌肉细胞的生长，但在一些动物，如牛、狗中，该基因发生变异，导致肌肉细胞疯长，肌肉异常发达。
金振秀研究团队从猪的胚胎细胞入手，用靶向基因敲除技术&talen&，敲除掉了mstn基因，然后由其合作伙伴接手。中国吉林延边大学的动物克隆专家、教授尹熙俊将这个基因改造后的细胞的&核&，移植到另一头猪的卵细胞中，克隆出小猪，他们一共克隆了32头。
金振秀研究团队尚未发表上述研究结果。但海纳&尼曼称，从照片上看，这些基因改造的猪具有典型的&两倍肌肉&的性状。海纳&尼曼在德国罗福乐研究所工作，是对猪进行基因改造的先驱。
尹熙俊称，这些猪的瘦肉率和产肉率都比普通品种高，但他们也遇到一些问题，32头猪中只有13头的寿命超过8个月，2头现在还活着，但只有其中1头被认为是健康的。
金振秀希望把最终培育出的&两倍肌肉&的猪的精子卖向中国市场，因为这里对猪肉的消费量很大，并且消费数量在增加。金振秀同时认为，中国目前的监管氛围也对他有利，&我认为中国会开先河&。
吉林延边大学官网显示，韩国中央电视台kbs1频道5月29日在新闻中报道了该校转基因动物与胚胎工程吉林省重点实验室尹熙俊教授研究团队科研成果&&&双肌性状改良猪培育&。
本报综合消息
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吉ICP备号-2 吉B-2-4- E-mail：双肌臀大白猪肌肉组织差异表达基因的研究--《中国农业大学》2004年硕士论文
双肌臀大白猪肌肉组织差异表达基因的研究
【摘要】：
瘦肉率是肉用家畜最重要的经济性状之一。双肌臀大白猪因其背部肌肉丰满，臀部肌肉也较普通猪明显发达，故现在倍受养猪业的关注。本研究试图利用分子生物学手段，找到影响双肌臀性状形成和发育的基因，从而大大加快双肌臀性状的选育工作。
对实验猪只的体尺参数统计显示，在选定的4对全同胞猪中，双肌臀组的腿臀围显著大于非双肌臀组(|Pr＞F|=0.0319)，体重在0.10水平上也有显著差异(|Pr＞F|=0.0830)，而体长、体高和胸围三项指标则差异不显著。
本实验取同一胎次全同胞中的双肌臀猪(SJ)和非双肌臀猪(FSJ)的背最长肌分别建立RNA池，利用抑制性消减杂交技术(SSH)建立了双肌臀猪肌肉组织的消减cDNA文库。该文库共包括768个克隆，其中有效的克隆为686个，占克隆总数的89％。对整个文库测序分析，共获得587条有效序列。利用BLAST在线软件与Genbank数据库进行同源序列比较，其中有69条序列找不到同源序列。结合Genbank EST数据库和Tigr Porcine EST数据库的比对结果，从中筛选出11个新EST序列，它们可能代表了新基因，或者由于序列位于变异丰富的3’端而无法查到与其他物种基因的同源性。
用放射性同位素杂交方法对整个消减cDNA文库进行差异筛选，并利用扫描图象分析系统对杂交图像进行分析。结果显示：两对探针(差减探针和反转录探针)杂交结果一致且每对探针杂交信号强度相差2倍以上的克隆共有16个，两个反转录探针没有杂交信号而两个差减探针杂交信号强度相差2倍以上的克隆有33个。
结合测序分析和差异筛选结果，发现了两个差异表达EST：一个是全新EST，另一个EST已有报道但功能未知。在其它比对出来的差异表达的基因中，已知与肌肉发育密切相关的基因有：猪心脏型α-原肌球蛋白(cardiac α-tropomyosin)、肌浆球蛋白重链2b(MHC 2b)、肌浆球蛋白重链2x(MHC 2x)、猪乳酸盐脱氢酶A(LDH-A)、猪氟烷(RYR1)基因和人类胰岛素生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)。Northern杂交显示：MHC 2x和MHC 2b的mRNA在双肌臀大白猪肌肉组织中的表达水平明显高于非双肌臀大白猪。MHC的类型是肌纤维分型的重要依据之一，其中MHC 2b和MHC 2x对应的肌纤维均为白肌纤维。这说明双肌臀猪肌肉组织中白肌纤维的比例要高于红肌纤维。LDH-A差异表达也间接证明了这一点。
中国农业大学硕十学位论文摘要
鱼鱼旦旦旦旦旦旦旦鱼旦旦旦鱼旦旦旦旦旦旦妇..
定量PCR检测结果显示，RYRI、CAMKZG和IGFBP7基因在SJ RNA池的表达量都比对照
的FsJ RNA池中的表达量要高;480、695和882三个克隆在双肌臀猪肌肉中也有上调表达的趋
势。因此，这几个基因的上调表达很可能与双肌臀性状的发生关系密切。
根据研究结果，我们可以得到以下结论:双肌臀猪之所以比非双肌臀猪的肌肉发育肥大，含
有较高比例的直径较粗的白肌纤维至少是重要原因之一。另外，cardiaca一troPomyosin、RYR卜
IGFBP一7、CAMKZG基因和202、292、480、695及882号克隆等相关基因也可能是影响双肌性
状的候选基因。
【关键词】：
【学位授予单位】：中国农业大学【学位级别】：硕士【学位授予年份】：2004【分类号】：S828【目录】：
ABSTRACT6-11
第一章 文献综述11-28
1 肌肉过度发育的研究进展11-17
1.1 肌肉生长发育的过程11
1.2 肌肉过度发育的机理研究11-12
1.3 肌肉过度发育的分子机理研究12-16
1.4 双肌性状的研究进展16-17
2 基因差异表达的研究方法17-27
2.1 差别筛选(Differential Screening)18
2.2 消减杂交(Subtractive Hybridization)18-19
2.3 mRNA差异显示技术(Differential Display RT-PCR, DD RT-PCR)19-20
2.4 RNA任意引物PCR(RNA arbitrarily primed PCR, RAP PCR)20-21
2.5 代表性差示分析(Representational Differential Analysis, RDA)21-22
2.6 基因表达的系列分析(Serial analysis of gene expression, SAGE)22
2.7 抑制性消减杂交(Suppression subtractive hybridization, SSH)22-25
2.8 交互扣除RNA差别显示技术(RSDD)25-26
2.9 差异消减展示(Differential subtraction display, DSD)26
2.10 cDNA芯片技术26-27
3 研究意义27-28
第二章 材料与方法28-51
1 实验材料28-29
1.1 实验动物28
1.2 采样方案28
1.3 样品采集注意事项28-29
2 实验方法29-51
2.1 实验药品29
2.2 试剂的配制29-30
2.3 主要仪器设备30-31
2.4 总RNA的提取31-32
2.5 总RNA的纯化32-33
2.6 总RNA池的建立33
2.7 Poly A~+ RNA的分离与纯化33-34
2.8 RNA的一链合成34
2.9 抑制消减杂交34-41
2.10 消减cDNA文库的构建41-42
2.11 消减cDNA文库的差异筛选42-45
2.12 cDNA文库的测序、序列分析及文库功能聚类分析45
2.13 重组质粒DNA的小量提取45-46
2.14 PCR产物凝胶回收方法46-47
2.15 测序反应47-48
2.16 Northern杂交48-49
2.17 荧光定量PCR验证49-51
第三章 结果与分析51-66
1 实验猪体尺数据的分析51
2 筛选双肌臀性状的假定模型51-52
3 RNA的提取、纯化与mRNA的分离52-54
3.1 总RNA的提取52
3.2 总RNA的纯化52-53
3.3 mRNA的分离与纯化53-54
4 抑制性消减杂交54-57
4.1 ds cDNA合成和RsaⅠ酶切效果的检测54
4.2 接头连接效率的检测54-55
4.3 PCR扩增产物分析55
4.4 消减效率的检测55-57
5 消减cDNA文库的构建57
6 消减文库的全文库测序与分析57-58
7 消减文库比对结果的聚类分析58
8 消减文库的差异筛选58-60
9 测序结果与差异筛选的综合分析60-61
10 总RNA的Northern杂交61-62
11 荧光定量PCR检测62-66
第四章 讨论66-71
4.1 双肌臀猪标准制定的问题66
4.2 抑制消减杂交的缺点对本研究的影响66-67
4.3 差异表达基因的探讨67-70
4.4 消减cDNA文库假阳性问题70-71
第五章 结论71-73
5.1 消减cDNA文库的构建与差异筛选71
5.2 文库测序结果与分析71
5.3 测序与差异筛选综合分析71-72
5.4 Northern杂交和定量PCR验证72-73
参考文献73-79
附录1 文库序列BLAST分析结果79-97
附录2 消减文库中的全新EST序列97-101
附录3 分析软件及网站101-102
附录4 消减cDNA文库的功能聚类分析102-104
缩略词104-105
致谢105-107
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