我试过感受态DH5a、HB101载体用过PMD19、PMD18、PMD20还囿TOYOBO公司的Plus但是没有一次连上的而且大多数时候菌都长的很少还基本是蓝斑... 我试过感受态DH5a、HB101
而且大多数时候菌都长的很少 还基本是蓝斑
而且大多数时候菌都长的很少 还基本是蓝斑
1.与载體连接时加大目的基因DNA量，以提高与载体的连接效率而且可以按倍数扩大连接反应体积，如25ul加大到50ul
2.保证你的感受态细胞效率没问题必要的时候可以做个阳性对照（加没有酶切的质粒载体）
3.转化过程中的冰浴要用碎冰加水，以保证温度从热水浴中取出感受态后要迅速放入冰浴中。
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