技术最早是用于扩增一段特异的
後来也将其用于样本中特异的
片段有无或非很粗的相对定量
技术则是为了测定样本中特异的
片段相对及绝对量,是一种测定特异的
如测萣病人样本中病原体的含量、
后通过电泳也可以进行定量,其实是将
样本中模板定量相混了近两年没有人再讲这类的话了。
荧光染料即可其信号强度也很好,还可以进行融解曲线分析等但缺点是只
能在一个反应管内进行一种
反应的检测,另一个问题是非特异性扩增會影响
实验结果当然也有一些技术解决这些问题,后面会讲到对于研究人员来讲,
如果需要检测的基因很多而每个反应管中进行一種
如果需要进行多通道实验,即在一个反应管中进行
种或以上的反应则要选择
其他的方法,最常用的是
这两种都是探针的方式,
由于增加了探针的特异性因此其扩增曲线反映的就是特异性产物的扩增曲线,
不含有非特异性扩增的成分因此商业用途的检测试剂盒大都采用这一技术,以
减少非特异性产物造成错误结论的可能性其缺点在于探针成本较高,有时设计
的探针并不合适有造成损失的可能性。并且要进行较多的实验条件的优化这
两种探针技术用于商业目的时都有专利问题,
权的成本相对较低但只是据说。
探针它也可进荇多通道实验,但它没有
方法的增加探针特异性的功能因此只能是一种折中的方案,