联想笔记本怎么设置DLOS U盘启动【windows7吧】_百度贴吧
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联想笔记本怎么设置DLOS U盘启动收藏
用U盘作启动项，调整一般有两种方法：（1）一个是开机时候的按下快捷键，调整硬件启动顺序，选择你的U盘。这要看你主板的型号，现在一般都是开机按F11或F12，华硕的是F8。
(2)另外一个是在BIOS里面调整启动顺序:启动计算机，按“DEL”键，进入主板BIOS界面。看你主板说明书，选择引导次序。以Award BIOS型主板为例：进入主板BIOS界面，选择“Advanced BIOS Features”(高级BIOS功能设定)，在“Advanced BIOS Features”页面，选择“Boot Sequence”(引导次序)，按“回车”键，进入“Boot Sequence”界面，有“1st/2nd/3rd Boot Device”(第一/第二/第三启动设备)选项，此项可让你设置BIOS要载入操作系统的启动设备的次序，选择“1st Boot Device”(用“Page Down”或“Page Up”键将其设置为“USB HDD”，按ESC键退回到BIOS的主菜单，按F10保存并退出BIOS，重新启动计算机
技嘉的主板：开机后，出现画面快速按下“Delete”键进入BIOS画面，按方向键“↓”选择“Advance BIOS Features”然后再按Enter键。接下来画面请看图，按方向键“↓”选择“First Boot Device”再按Enter键弹出一个长方形框，按方向键移动到“USB HDD”再按Enter键，然后再按“F10”键保存。还有一些是: AMI 8.0 型的主板:1、启动计算机，当看到启动画面时，按“DEL”键进入BIOS；2、按左右方向键移动到BOOT菜单；3、在BOOT菜单中找到“1st Boot Device”设置项，将其值改为“ATAPI CD ROM”，然后按&F10&键保存退出即可。就可以实现U盘引导系统了。希望对你有所帮助，祝你成功，快乐！
bios快捷启动
登录百度帐号推荐应用N乙酰DL蛋氨酸过瘤胃有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究-共享资料网
N乙酰DL蛋氨酸过瘤胃有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究
新疆农业大学 硕士学位论文 N-乙酰-DL-蛋氨酸过瘤胃有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的 研究 姓名：武安泉 申请学位级别：硕士 专业：动物营养与饲料科学 指导教师：杨开伦
摘要本文采用四个试验，分剐研究Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸（Ｎ．Ａｃｅ哼１―Ｍｅｍｉｏｎｉｎｅ，ＮＡＭ）在不同ＰＨ值、 人＿『：＝瘤胃发酵体系、绵羊瘤胃投注不同量条件下的表观降解率，以及研究ＮＡＭ的不同投注量对绵 羊瘤胃消化代谢的影响。试验一：将ＮＡＭ（Ｏ．７５扎）在ｐＨ２＿３和ｐＨ６．５，于３９．５℃水浴条件下分别放置ｏ、１．５、３、６、９、１２小时，测定不同ｐＨ条件下ＮＡＭ的累计表观降解率。结果显示：１２小时ＮＡＭ累计表观降解率为１．２４％左右。试验二：将０、０。２、０．４、Ｏ．６克ＮＡＭ添加于人工唾液和瘤胃液混合液（体积比２：１）中，于 ３９．５℃水浴条件下分别培养ｏ、１．５、３、６、９、１２小时，以研究人工瘤胃发酵条件下ＮＡＭ的累计 表观降解率及不同添加量对体外发酵的影响。结果显示：１２小时的表观降解率平均值为３．９８～４．３４％， １２小时的累计表观降解率为６．６】～７．５１％，组间差异不显著（ｐ＞Ｏ．０５）。不同添加量的ＮＡＭ不影响 ｐＨ值，氨态氮，乙、丙、丁酸和微生物蛋白浓度，但随着ＮＡＭ添加量的增加，有降低ｐＨ值，提 高氨态氮，乙、丙、丁酸浓度的趋势。 试验三：选用４只体重４０ｌ（ｇ左右，安装永久性瘤胃、十二指肠瘘管的新疆美利奴羯羊，每天两 次间隔１２小时经瘤胃瘘管投注Ｏ、２、３、４克ＮＡＭ，采用４×４拉ｒ方设计，以聚己二醇（ＰＥＧ）为液 相标记物测定瘤胃稀释率，研究投注后Ｏ、１．５、３、６、９、１２小时ＮＡＭ的表观降解率以及对瘤胃 液稀释率、前胃消失率、瘤胃外流量的影响。结果显示：投注２、３、４克ＮＡＭ，１２小时瘤胃平均 表观降解率分别为６７，Ｏ％，７２．７％，７３．８％，尤其４克投注组显著高于２克组１０％（ｐ＜Ｏ，０５）；投注６、 ８克／天ＮＡＭ显著降低瘤胃稀释率３４．６％，４７．９％（ｐ＜ｏ．０５）；投注４、６、８克，天ＮＡＭ，每天到达十 二指肠的量分别为０．７２、０．９４、】．０８克，前胃消失率分别为８２．１％、８４．３％、８６．５％，１２小时的瘤胃外流量分别为Ｏ．５０、０．５９、Ｏ．６５克。与每天投注４克相比，８克厌组显著提高每天十二指肠到达量５０％和瘤胃外流量３０％（ｐ＜Ｏ．０５），但不影响前胃消失率。 试验四：选用４只体重４０ｋｇ左右，安装永久性瘤胃、十二指肠瘘管的健康新疆美利奴羯羊， 每天经瘤胃瘘管平分两次间隔１２小时投注０（对照组）、４、６、８克ＮＡＭ，采用４×４拉丁方设计， 研究ＮＡＭ不同投注量对绵羊瘤胃消化代谢的影响。结果显示：与对照组相比，６．８克，天ＮＡＭ显著 降低瘤胃ｐＨ值（ｐ＜０．０５）。不影响氨态氮浓度（ｐ＞ｏ．０５），但显著地提高乙酸、丙酸、总挥发性脂 肪酸浓度分别为２６．１％００．１％（ｐ＜０．０５）、４３．６％一１０２ｒ３％（ｐ＜０．０５），１３ｆ３％一３８．３％（ｐ＜Ｏ。０５）。瘤胃 投注ＮＡＭ不影响绵羊对玉米秸秆采食量，但可以提高干物质、纤维素、半纤维素的消失量和消失 率，尤其每天８克ＮＡＭ显著提高干物质、半纤维素的前胃消失量１２．２％和２９．６％（ｐ＜０．０５），消失ｌＩＩ率分别提高６．６、１２．２百分点（ｐ＜Ｏ．０５），不影响日粮蛋白消化和微生物蛋白台成。 上述结果表明：在本试验条件Ｆ，ＮＡＭ在ｐＨ２．３、ｐＨ６．５、人工瘤胃发酵条件Ｆ稳定存在。ＮＡＭ 在绵羊瘤胃中的表观降解率为６７％～７３．８％，１２小时的瘤胃外流量分别为Ｏ．５０、Ｏ．５９、Ｏ．６５克．每天 到达十二指肠景为Ｏ．７２～１．０８克，均随投注量增加而升高。Ｏ．２～Ｏ．６克的ＮＡＭ添加量不影响人工 瘤胃发酵体系的ｐＨ值，氨态氮、乙酸、丙酸、丁酸和微生物蛋白的浓度。瘤胃投注６～８克ＮＡＭ 对瘤胃发酵、干物质、粗纤维的消化有改善作用，不影响饲料蛋白消化和微生物合成。关键词；Ｎ－乙酰－ＤＬ一蛋氨酸，绵羊，瘤胃，表观降解率，消化代谢ＡｂｓｔｒａｃｔＦｏｕｒ ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ ｗｅｒｃ ｃｏｎｄｕｃｔｅｄ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｍｅ ａｐｐａｒｅｎｔ ｄｅＦａｄａｔｉｏｎ ｏｆＮ－ＡｃｅＩｙｌ－Ｍｅ也ｉｏｎｉｎｅ（ＮＡＭ） ｕｎｄｅｒ ｔｈｅ ｃｏｎｄｉｔｉｏｎ ｏｆ ｄｊ丘ｂｒｅｎｔ ｐＨ Ｖａｌｕｅ，ｉｎ Ｖｉ打ｏ ｓｉｍｕｌａｔｉｎｇ九ｌｍｅｎ ｉｎｆｕｓｉｏｎ，ｒｅｓｐｅｃ廿ｖｅｌ ｙ’ｆｂｍｅｎｔ鲥ｏｎｓｙｓｔｃｍ，ａｒＩｄ ｉｎ仃ａｒｕｍｉｎａｌｏｎ卸ｄｔＯ咖ｄｙｍｅｅ位吣ｏｆ ｄｉ髓啪ｔｄｏｓａｇｅｓ ｏｆ ＮＡＭｍｍｅｎ ｄｊｇｅｓｔｉｏｎ卸ｄｍｅｔ曲Ｏｌｉｓｍ ｉｎ ｓｈｅｅｐ．Ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｌ．ＮＡＭ（Ｏ．７５班）ｗ越ｓｏｌｖｅｄ ｉｎｂｕ仃ｅｒｓｏｆｐＨ２．３舭ｄ ｐＨ６．５柚ｄｃｕｌｔｕｒｅｄ ａｔ ３９．５℃ｔｏ ｓ“ｌｄｙ 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产所需的小肠蛋白质（氮基酸），而不能满足高产反刍动物的产奶和增重需要。由于瘤胃微生物对蛋 白质和氨基酸的降解作用。从而改变了日粮的蛋白、氨基酸供应类型。反刍动物小肠氨基酸供应不 仅需要合适的比例，而且要有一定的供应量才能满足动物的需要。近年来的一些研究表明，蛋氨酸 是反刍动物生长、生产的第一、二限制性氨基酸。为了提高反刍动物小肠的蛋氨酸的有效供应量， 人们采用各种不同的方法对蛋氮酸进行处理，比如通过脂肪包被氨基酸法、聚合物胶囊包被氨基酸 法、酵母富集氨基酸法、以及氨基酸类似物（盐类）和金属螯合物法等，上述处理方法可以起到一 定的耐瘤胃降解的作用，但也存在自身缺陷，比如氨基酸处理后耐瘤胃降解，在小肠过保护现象， 或者在动物采食的过程中咀嚼．出现氨基酸的释放，因此研发新型的反刍动物氨基酸添加剂显得很 有必要。本文采用蛋氮酸的化学衍生物――ＩＮ．乙酰－ＤＬ－蛋氪酸作为实验材料，研究Ｎ．乙酰－ＤＬ－蛋氨 酸在不同ｐＨ值、人工瘤胃发酵、绵羊瘤胃投注条件下的稳定性，以及Ｎ．乙酰－ＤＬ．蛋氮酸的不同添 加量对绵羊瘤胃消化代谢的影响，为绵羊对Ｎ－乙酰．ＤＬ－蛋氮酸的利用可行性提供必要的试验数据和 科学依据。符 丐、 缩略语表ＡＡ ＮＨ３．Ｎ Ｃａ ＣＦ ＣＰ ＣＥ Ａｍｉｎｏ Ａｃｉｄ口氨基酸 氨态氮 钙 粗纤维 粗蛋白 纤维素 干物质 脱氧核糖核酸 内源性分泌蛋白 必需氨基酸 半纤维素ＬｉｑＩｌｉｄＡｍｍｏｎｉａ Ｎｉ仃ｏｇｅｎＣａｌｃｉ哪Ｃｒｕｄｅ Ｆｉｂｅｒ Ｃｒｕｄｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ ＣｅｌｌｕｌｏｓｅＤＭＤＮＡ ＥＥＰ ＥＡＡ ＨＣ ＨＰＬＣＤｒｙＭａｎｅｒＤｅｏｘ河ｂｏｎｕｃｌｅｉｃ ＡｃｉｄＥｎｄｏｇｅｎｕｓＥｘｃ删ｏｎ ＰｍｔｅｉｎＥｓ∞ｍｉａｌ Ａｍｉｌｌｏ Ａｃｉｄ Ｈｅｍｉｃｅｌｌｕｌｏ∞Ｈｉｇｌｌ ＰｅｒｆｏＨｒｍｃｅＣｈｒｏｍａｔｏ鲫ｈｙ高效液相色谱法 代谢蛋白 蛋氨酸 微生物蛋白 美国国家科学委员会 Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸 有机物 聚乙二醇 磷 核糖核酸 瘤胃非降解蛋白 三氯乙酸 挥发性脂肪酸ＭＰ ＭＥＴ ＭＣＰＮＲＣＭｅｔａｂｏｌｉｚａｂｌｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｍｅｔｌｌｉｏｎｉｎｅ Ｍｉｃｒｏｂｉａｌ ＰｒｏｔｅｉｎＮａｔｉｏｍｌＲｅｓｅａｒｃｈ ＣｏｕｎｃｉｌＮＡＭ ＯＭＰＥＧ Ｐ ＲＮＡ ＲＵＰ ＴＣＡ ＶＦＡＮ―Ａｃｃｔｙｌ－ＤＬ―Ｍｅｔｌｌｉｏｎｉｎｅ０ｒｇａｌｌｉｃＭａ他ｒＰｏｌｙｅｍｙｌｅｎｅ ＧｌｙｃｏｌＰｈｏｓｐｈｏｍｓＩＨｂｏｎｕｃｌｅｉｃ Ａｃｉｄ Ｒ．Ⅶ【ｎｅｎ Ｕｎｄｅｇｒａｄａｂｌｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｒｉｃｌｌｌｏｒｏａｃｅｔｉｃ Ａｃｉｄ 、ｂｌａｔｉｌｅ Ｆａｔｂ，ＡｃｉｄｓＶ¨ｌ独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得 的研究成果。尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中 不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得新疆农业大 学或其他教育单位的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对 本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名：≯≮妄缸时间：知９‘年多月孕日关于学位论文使用授权的说明本人完全了解新疆农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：新 疆农业大学有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和电子文 档，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文，允许论 文被查阅和借阅。本人授权新疆农业大学将学位论文的全部或部分内容编 入有关数据库进行检索，可以公布（包括刊登）论文的全部或部分内容。 （保密的学位论文在解密后应遵守此协议）研究生签名：多己宴尊，ｖ时间：洲年‘月乒日翩虢匆叠他１１帆蹦年彦月６日新疆农业大学硕士学位论文第一章文献综述反刍动物小肠可利用氨基酸的供应模式１．１目前。反刍动物癯胃内蛋白质消化和代谢的途径已经基本清楚，但对一些氨基酸的具体代谢途 径和特点仍在继续研究之中。反刍动物瘤胃内栖居着大量的微生物，包括细菌、原虫和真菌，当饲 料蛋白质进入瘤胃后，一部分被微生物降解为寡肽、氨基酸和氨，瘤胃微生物荐利用发酵生成的挥 发性脂肪酸（、ｂｌａｔｉｌｅ Ｆａｔｔｙ ＡｃｉｄＳ．Ⅵ１Ａ）作为碳架，并利用瘤胃发酵释放的能量（ＡＴＰ），将这部 分寡肽、氨基酸、氨和经唾液分泌的尿素分解的氨一起合成微生物蛋白，这些微生物蛋白和饲料中 非降解蛋白随食糜后送进入真胃和小肠，被动物分泌的消化酶分解成小肽或游离氨基酸，供动物机 体利用。总之，供应反刍动物小肠可吸收氨基酸主要有３部分，即瘤胃微生物蛋白质（ＭｉｃｒｏｂｉａｌＰｒｏｔｅｉｎ，ＭｃＰ）、瘤胃非降解蛋白质（Ｒｌ皿ｅｎ Ｕｎｄｅ伊ａｄａｂｌｅ Ｐｒｏｔｅｉｎ，ＲｕＰ）（包括小肽）和内源 分泌的蛋白质（Ｅｎｄｏｇｅ硼ｓＥｘｃｒｅｔｉｏｎ Ｐｒｏｔｅｉｎ，ＥＥＰ），这就构成了小肠中的代谢蛋白质（ｍ吐ａｂｏＩｉ％ｂｌｅ ｐｒａｔｅｉｎ，ＭＰ），即：能够被瘤胃以后消化的真蛋白质和被小肠吸收的氨基酸部分。动物需要的营养物质是氨基酸而不是蛋白质本身，氨基酸是合成蛋自质的基本单位，小肠吸收的氨 基酸对于奶牛、绵羊进行维持、生长、繁殖和泌乳等生命活动非常重要（ＮＲｃ，２００１）。１．１．１饲料非降解蛋白质日粮蛋白质的降解，主要取决于日粮蛋白质分子结构，蛋白质的溶解性和在瘤胃内的滞留时问 等因素（韩正康，１９８８）。粗饲料的滞留时间相对较长，未被降解就离开瘤胃的粗饲料蛋白质则很少， 动物性蛋白质（如鱼粉）快速降解部分很少，所以大部分蛋白质未被降解而通过瘤胃到达小肠，经过瘤 胃发酵的非降解饲料蛋白质与原来相比，其氨基酸组成有所改变，这与各种氮基酸耐降解能力不同 有关。多数氨基酸含量与原样中含量无显著差异，植物性饲料的非降解蛋白质氨基酸组成变化较大。 进入十二指肠中饲料来源的氨基酸数鼍与饲料的降解率有关，采用不同方法测定得出的结果差别较 大，这主要是因为蛋白质在瘤胃降解受诸多因素影响，其中最主要的因素是饲料本身的蛋白质结构 特性、饲料加工处理、尼龙袋的选择、饲喂制度和环境温度等。１．１．２微生物蛋白Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究微生物蛋白是反刍动物小肠可利用蛋白质的主要来源，包括源自于瘤胃的细菌、原虫和真菌。 影响小肠微生物蛋白供应量的因素很多，与可发酵能的供应呈线性关系，另外还受降解氮和内源氮 利用及能氮平衡（冯仰廉，２００４）等影响，支链氨基酸和异位有机酸对微生物也有调节作用。瘤胃 内微生物的分解也直接影响小肠微生物蛋白的供应，其中原虫对细菌的吞噬作用是细菌蛋白分解的 主要因素，这种吞噬作用增加了氮在瘤胃内的周转和消耗。甄玉国（２００１）在综述里提出在大量饲 喂粗饲料日粮条件下，控制瘤胃原虫数量和种群的新观点，认为控制瘤胃原虫数量和种群不仅有利 于瘤胃内纤维物质降解，而且可提高进入绵羊十二指肠的含氮物质流量，改善进入十二指肠氨基酸 的平衡模式。 关于瘤胃微生物蛋白质的氨基酸组成问题，入们的认识也不一致。郝正里等（１９９９）指出在上 个世纪８０年代以前。人们认为瘤胃微生物蛋白的氨基酸组成是恒定的，不受日粮变化的影响。瘤胃 微生物合成蛋白质的过程中，与高等动、植物一样，也是按照ＤＮＡ规定的模式进行的。Ｈｏｌｍｅｓ等 （１９５３）用纸上层析法测定饲喂精料与粮料绵羊瘤胃菌体蛋白的氨基酸组成，并同时与喂卵蛋白者 进行比较，发现１５种氨基酸基本相同。ｗｅＪｌｅｒ（１９５７）用四种不同的日粮饲喂反刍动物，测出瘤胃 原虫与细菌蛋白质的各种氨基酸含量和比例都很恒定．不同种的瘤胃细菌蛋白质的氨基酸组成也基 本一致。Ｐｕｒｓｅｒ和Ｂｕｅｃｈｌｅｒ（１９６６）测定生长在无选择性培养基上的９种瘤胃细菌的氨基酸含量， 结果表明，蛋白质的氨基酸组成在不同的菌种间无差异。Ａｒａｍｂｅｌ等报道了纯培养的１７个瘩胃细菌种的氨基酸组成和核酸含量，在革兰氏阳性和阴性细菌间，氨基酸组成也没有差异，ＡｒⅫｂｅｌ（１９８２）研究了瘤胃细菌的６２个氨基酸测定值，也证实了ｗｅＩｌｅｒ的结论。 然而后来实验表明瘤胃微生物蛋白质的氨基酸组成是不同的，继而提出瘤胃微生物的氨基酸组 成是可变的观点。研究表明，瘤胃细菌和原虫的氨基酸组成有一定的差异，细菌的蛋氨酸含量较高， 而原虫的赖氨酸含量较高，不同菌种之间也有差异，不能用固定的平均值来评定不同日粮条件Ｆ瘤 胃微生物氮基酸的供应量。沈向真（２００３）认为国际上对微生物蛋白质的测定方法尚无统一标准， 常用的方法都需要采用差速离心分离微生物样品，将瘤胃原虫随饲料残渣一起弃掉，这样测定山来 的瘤胃微生物蛋白一般为细菌蛋白，如果要研究原虫对微生物蛋白质组成的作用，有必要对现行的 微生物分离和测定方法加以改进。１．１．３内源性蛋白质到达十二指肠的内源蛋白质包括两个部分：（ｉ）来自唾液中的黏蛋白，口腔、食道、瘤、网胃的２新疆农业大学硕士学位论文脱落的上皮细胞，这些蛋白质一部分被瘤胃微生物降解，其中降解的蛋白质被瘤胃微生物利用，而 非降解的蛋白质进入小肠。（２）来自瓣胃和真冒脱落的上皮，分泌到真胃的消化酶，这些蛋白直接进 入小肠，构成了到达小肠的内源蛋白。迄今为止尚无可靠的对内源蛋白质产生量的评定方法和参数， 更难以区分被微生物利用的内源蛋白质和进入小肠的内源蛋白质（冯仰廉，２００４）。１．２瘸胃内氨基酸的代谢１．２．１瘤胃内氨基酸的降解ｗａｌｌａｃｅ（１９９７）综述了饲料蛋白质在瘤胃内降解的过程。在原虫、真菌、细菌所分泌的蛋白 酶的水解作用下，快速降解为寡肽和氨基酸，寡肽在氨肽酶的作用下又被降解为为二肽、三肽。随 后在二肽、三肽酶的作用下裂解为游离的氨基酸。氨基酸自身的代谢是大多数日粮蛋白组分代谢的 第三步。氨基酸脱氪基后剩下的碳架可被用于各种挥发性脂肪酸的合成，一般来说，细菌脱氨作用 可为自身的生长提供能量，尽管通过脱氨基作用可产生一定的ＡＴＰ．但无论是混合细菌还是纯细菌 培养栖瘤胃普雷沃氏菌、埃氏巨球型菌都未发现有较多的生成，这表明脱氨过程生成的能量仅可用 于细菌的维持需要。 Ｂｌａｄｅｎ（１９６１）在计算主要的氨产生菌生成氨的速率时发现，与牛瘤胃混合细菌生成氢的活 力相比，主要产氨菌活力甚微。他们同时从中分离到一组比其他细菌产氨活力更强的菌株．这些细 菌具多糖降解活性．可通过发酵氨基酸来维持生长。研究还表明这些菌对莫能霉素高度敏感，当动 物摄入离子载体类添加剂后，瘤胃中氨浓度明显ｒ降，该现象表明这些菌是动物体内主要的氨产生 菌，包括消化链球菌，厌氧菌、嗜氨梭菌。目前一般认为，对细菌而言，氨基酸的脱氨基作用是由 数量大而脱氨酶活性低和数量少和脱氨酶活性高的蛋白降解菌共同完成的。通常情况下前者起主要 作用。 纤毛虫具有较强的脱氨基作用，大多数纤毛虫能利用蛋白质和氨基酸产生氨。一般来说，混合 纤毛虫的这种特性是细菌的３倍。正常绵羊瘤胃氨浓度是去纤毛虫绵羊的２倍。纤毛虫的脱氨基作 用主要是针对一些数量较少的氨基酸，主要有谷氨酰胺、瓜氨酸、精氨酸和鸟氨酸，但对谷氪酸、 天冬氨酸和组氨酸无脱氮作用，除生成氨外，原虫降解氨基酸还可以生成其它产物，如降解苏氨酸 和甲硫氨酸生成２一羟基丁酸和２－氨基丁酸；降解赖氨酸可以生成哌可酸。有报道表明，某些属原虫 不能利用胞外氨基酸，但观察发现对氨基酸又有脱氨作用，并可以释放哌可酸。纤毛虫对外源氨基 酸的代谢速度受氨基酸转运的限制．目前一般通过观测完整原虫吞噬的细菌蛋白中氨基酸的脱氨基３Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究速度来检测原虫脱氨基活性。通过比较几种原虫利用细菌蛋白和外源游离氨基酸的生长速率时发现? 仅在上述两种底物上生长速度相似，而其他的种属在有细菌存在时生长更快。 在细菌生跃过程中，不同的细菌利用不同的氨基酸，这使得不同动物或者同一动物采食不同日 粮时氨基酸脱氨基的模式有所不同。该现象与动物瘤胃中存在的细菌种类有关，一些瘤胃微生物如 链球菌和内毛虫能以较均衡的方式发酵培养基中的大部分氨基酸．而丁酸弧菌和新月状菌则为选择 性作用。利用混合细菌研究发现。当氮基酸以肽的形式出现而非游离氨基酸形式存在时，单一菌株 利用氨基酸模式稍有改变。在纯培养中，氨基酸的降解产物主要是短的支链挥发性脂肪酸。１．２．２瘤胄内氨基酸的台成代谢很多研究表明瘤胃细菌能利用氮源和碳源合成氨基酸。Ｌｏｏｓｌｉ等（１９４９）曾给山羊和绵羊饲喂 仅含尿素的纯化日粮，数天后发现ｌｏ种必需氨基酸比日粮内的含量增多９－２０倍，证明在瘤胃内有大 量的氨基酸合成；随后在犊牛上的实验也获得相似的结果。Ｄ∞ｃａｎ（１９５３）应用瘤胃细菌纯培养研究发现缬氨酸为瘤胃黄化球菌（且订ａ＂国ｏｊ巩固所合成；产琥珀酸拟杆菌（Ｆｆ６，Ｄ６∞泖＆∽加ＤｇＰ＂∞）合成苯丙氨酸；居瘤胃厌气拟杆菌（最，Ⅲｊ口丘Ｄ』ａ）、埃氏胨链球菌（尸印ｅｏｓｆ，印｝口口Ｄｃｃ圃及黄化球菌利用异戊酸合成亮氨酸。韩正康（１９８８）应用ｓ”标记研究发现乳牛瘤胃合成蛋氨酸，其量相当可 观，估算合成速度为每天３０．６０毫克，千克体重。ｓｃｈｅｉ６ｎｇｅｒ等（１９７６）曾经报道在瘤胃内某些细菌 可以合成氨基酸，如Ｍｅｇ∞ｐｈ∽ｒａ的亚株、链球菌属（ｓ打印ｒＤｃＤｃｃ＂）的分离株１９Ｄ和真杆菌属（而６ｗ｝＂Ｊ∞）分离亚株可以合成蛋氨酸，链球菌属（ｓ￡姆ｐｆｏ∞ｃｃ＂）的分离株１２Ｄ可以合成丝氨酸。Ｂｒｙａｍ等（１９６２）和ＡｌＪｊｓｏｎ等（１９６２）研究发现瘤胃主要的纤维素分解细菌如：瘤胃黄化球菌、产琥珀酸拟杆菌、以及白色牛厌氧拟杆菌（肋如Ｄ∞ｃｃ＂ａ』６“ｓ）能够合成支链氨基酸。如：以异戊酸，２．甲基丁酸，异丁酸分别合成亮氨酸、异亮氨酸和缬氨酸。这一报道与Ｄａｎｃａｎ（１９５３）报道的结果一致。Ａｌｌｉｓ彻等（１９６２）还研究发现胁阳ｆｅ』厶脚如ＪｃＤ扫和腑韶单妇ⅢＰＪｓ幽ｎｊｊ这两种细菌可以产生支链的脂肪酸，并以此合成支链的氨基酸。与此同时Ｏｎｏｄｅｍ等（１９７３）在瘤胃中 加入二氨基庚二酸，结果瘤胃纤毛虫以此合成赖氨酸。ｏｋｕｕｃｈｉ（１９９３）发现微生物可以以吲哚酸为 原料合成色氨酸。ｗａｄｕｄ（２００１）的研究表明用脒唑化合物为碳架可以合成组氨酸。ｏｒ＿Ｒａｓｈｉｄ（２００１） 在瘤胃内以高丝氨酸为碳架得到了苏氨酸。以上诸多研究表明瘤胃细菌可以合成相当数量的氨基酸。１．３氨基酸在瘤胃的降解率４新疆农业大学硕士学位论文氨基酸在瘤胃的表观降解率很高。由于研究方法的局限．一般用表观降解率来体现，它反映的 是氨基酸脱去氨基、碳架裂解、粘附于细菌上或者被细菌所吞噬、被细菌所合成或者通过瘤胃壁直 接吸收的综合效应。它通过某种氨基酸在瘤胃内的浓度消长变化来描述。 一些关于氨基酸在瘤胃降解率的实验研究表明，氨基酸的降解率不仅取决于氨基酸之间的相互 作用，还有微生物互作效应，可能还与研究方法（指的是体外实验和体内实验）有关。Ｓｃｈｅ墒ｎｇｅｒ 等（１９７６）将从瘤胃分离出５株细菌，接种在含１４种生理水平氨基酸的培养基上，体外进行１８小时纯培养，他发现埘堙唧＾ｗ，口、链球菌属（ｓ虮ｐ，口∞ｃｃｍ）的分离株１９Ｄ和真杆菌属（西加ｃ耙ｒｆｍ）分离亚株对苏氨酸的降解率１００％，对缬氨酸、亮氨酸和异亮氨酸的降解率大于８１％，而对其它氨基 酸的降解率都接近或者超过５０％。丁酸弧菌亚株除了不能利用甘氨酸外．能够全部降解丝、天冬、 谷氨酸，而对其它氨基酸的降解率在１３．７７％，乳酸杆菌除了不能利用色、酪氨酸外对其它的氨基酸 都可降解，其降解率在８－１００％之间。由此可见，单株细菌并不能利用所有的氨基酸，而且不同的氨 基酸的降解率也不同，中性、酸性氨基酸降解率最高。由此可提示：日粮氨基酸的降解程度也取决 于瘤胃内的优势菌群。表ｌ 必需氟基酸浓度１．６ｍＭ在单独和添加其它必需氨基醺两种条件下， 经６小时培养后的表观降解率（％）引目ＣＭｕｐ且哥¨９７６）一注：同行肩标相同字母差异不显著?大写字母为ｐ＜０ ０Ｉ，小写字母为ｐ＜０ ０５显著水平。ｃＭｕｐａ等（１９７６）用瘤胃混合微生物，给予生理剂量的氨基酸进行体外纯培养、安装瘤胃瘘管的肉牛瘤冒进行灌注试验，研究氮基酸的表观降解率。研究表明体外、体内试验氨基酸的降解趋势 一致。体内试验的降解率是体外实验的１．５倍。而且在含蛋氨酸的培养基中加入缬氨酸，蛋氨酸的５降解率降低一倍。尤其值得注意的是将含单个氨基酸的培养基中加入必需氨基酸，蛋氨酸和缬氨酸 的降解率下降将近一倍，而且给定的氨基酸的降解率在经历６小时的培养，其降解程度都很大（见 表１）。 从表１可以看出，添加其它必需氨基酸除了明显降低缬氨酸、蛋氨酸的表观降解率外，对其他 的氨基酸没明显的影响。在同等条件下，在上述几种必需氮基酸的培养基中加入非必需氨基酸，对 必需氨基酸降解率没有明显影响，这可能是氨基酸互作效应的结果。同时从表ｌ可以看到上述几种 氮基酸经过６小时的发酵，其表观降解率在７９一ｌＯＯ％。 在奶牛实验上将１８种氨基酸单独经瘤胃瘘管投注或混合投注。发现氨基酸在瘤胃表观降解率也 很高。ｖｅＩＩｅ等（１９９７）将１８种氨基酸按照不同浓度梯度（７５、１５０、３００、６００ｍｍ０１）经瘤胃瘘管单独 投注，在投注后的ｌ小时，丝氨酸、天冬酰胺、谷氨酰胺和谷氨酸的降解率最高，酪氨酸、缬氨酸、 精氨酸和组氨酸的最低，尤其在加入７ｓ ｍｍｏＩ，相当于瘤胃氨基酸浓度ｌｍＭ时，氨基酸降解率在 ４０．９５％，其平均值为４５％；在投饲后的前８小时，氨基酸降解率在最高剂量，其平均降解率从７９％ 上升到９１％，这可能与供给量有关。氨基酸的降解率如下图ｌ中的Ａ、Ｂ、ｃ、Ｄ所示。 从图２中１８种氨基酸的表观降解率随时间变化规律来看，都有随着剂量的升高表观降解率有降 低的趋势。对于丝、苏、谷、天冬氨酸和天冬酰胺、谷氮酰胺在投注后２小时表观降解率处于７０．９０％ 之间，而后趋于稳定；除蛋氨酸和组氮酸的高剂量在４小时后略有上升外，赖、丙、亮、异亮、甘、 脯、精、酪和缬氨酸在４小时后已经趋于稳定降解率在７０％以上。 Ｖｅｌｌｅ等（１９９８）将１８种氨基酸每一种分荆与８种非必需氨基酸按照７５、１５０、３００ｍｍ０１量混合， 使得氨基酸总量为６００ｍｍｏｌ，经瘤胃混合投注，在投注后ｌ小时，各剂量必需氨基酸的瘤胃表观降 解率平均值为２６％，而单独投注为４５％，而非必需氨基酸的相应值分别为３４％和５４％。在投饲后的 ８小时，各剂量的必需氨基酸在瘤胃表观降解率的平均值为７８％。而单独投注时为８４％。非必需氨 基酸的相应值为８９％和８７％。从该实验可以得出两点提示：一、大部分氨基酸在投注后８小时降解 率相当高；二、在体内实验氨基酸的表观降解率可能与氨基酸之间的互作效应有关。 Ｓｕｌｕ等（１９８９）在饲喂高和低粗料日粮中添加分别不同梯度的赖氨酸、酪氨酸、蛋氨酸和异亮 氨酸，其添加量分别为赖氮酸２７３～５４７～８２０ｍｍｏｌ，酪氨酸为”６～４９６～３２８ｍｍｏｌ，异亮氨酸为３８１～７６２～１１４３ ｍｍｏＩ，蛋氨酸为３３５ ｍｍｏｌ，经过１ｌｈ后，在最低剂量水平高低两种粗料日粮下，赖氨酸、酪氨酸、异亮氨酸和蛋氨酸的降解量分别为２３２和２０９ ｍｍｏｌ，２３９和２４７ ｍｍｏＪ．２８７和３３３ｍｍｏｌ，２２６和２５９ ｍｍｏｌ。其表观降解率分别为７５、８２、６３、６９％：而且降解率随着添加剂量的增加而降低。ｃｏｔｔＩｅ和ＶｅＩｌｅ（１９８９）在饲喂干草的绵羊经瘸胃瘘管投注２．５～１５９不同梯度的赖氨酸、苏氨酸和蛋氨６新疆农业大学硕士学位论文酸，三种氨基酸在２４ｈ内瘤胃袁观降解率平均值分别为９０％、７０％和８３％。Ｖｏｌｄｅｎ等（１９９８）在６ 头处于产乳高峰期以及随后６个月产乳期的安装瘤胃瘘管高产奶牛日粮中，添加赖氨酸、蛋氨酸和 苏氨酸研究三种必需氨基酸在瘤胃的表观降解率，扣 ∞％ ∞帕叶―１训 畜＿―１ ～―豳懈阱Ｈ槲辩譬轴 一●■ Ｓｌ己●§■＿‘ｔＩＰ“Ｓ一―¨妇科Ｈ¨Ｈ 吼瑚Ⅱ瓣 一慧眦ｍ融嘲Ⅷ嘲Ｈ眦¨且 脚∞ ∞ 的 ∞ 帅 ∞０～ｌ臃¨ 融Ｈ 瑚Ｎ日扭铀一■Ｈ媳¨嘲叫科阱Ｈ¨且坤一Ｉ母Ｈ融嘲Ｍ瞄陛篮．～一ｌ既雠融瞄雕Ｎ褂瑚Ｍ甜址计 一■国吼圈瞄掰啊醐融啉盥哪 一■墨嘲掰戮翳甜醚眺醚腿嘛 一■啊髓研瞄嗡融 融嘲埘■■ 阻嘲融髓 翻基 一■弱圈税啪尉嘲啊眺踊且曲一■月鞋磷翳鞋雕峨辩壁 一■口嘲秘剐捌翻抖秘Ｍ¨黼胁一＿国戳翻鞠弼崩融翳赫ｗ 一■思礴猕瑚翎嘲聊圈陵ｍ凰伽 一■阻吼瑚日黼嘲翻褂酎凰州 一＾●同瑚饵嘣圈嘲腰阱睫噩机 一摊峰静ｉ葛毒置。悬ｔＩ五；善●古ｏ一曩啊瑚嗣Ｈ门瓣班Ｍｕ艇妇一囊鞫蚓 翊列鞫叠＿藿 一■酬嘲斟阱搿时雠睫Ⅱ∞ 一■朔糊翻副刊划戮封龇一―日斟划埘搦擒掰Ｈｍ¨ Ｈ盟脚 一■眄酗豳¨ 刖¨封ｍ～■ 圈剃划引列纠砌¨ 址椰一■曩酗瑚潮翻 秘挝…一■恿融髑豳¨Ｈ吼州 挝ｍ一■曩瑚翔鞠捌猢料翻挝№一■●砚嘲吲唰嗣料瞄Ｍ眦¨扭铆～■ 函啊日圈嘲目礴且 一■氍融戮踊群麓腿羹№蚺～■ 酎嘲尉 醐唰翻且 一●圈耐嘲 豳Ｈ且脚 一■融埘时髓Ｎ铺融ｍ时皿审 妇 一ｔ■曩雕圃瞄鞠潮黼盥呻 一ｌＩ融既畦陵氍饼盥：墨ｉ●． ０ｓＥ●■ｉ＿ ｘ●ｔ－‘ ａ● ■ 、｝●ｒｊ■ ，【～―融圉嘲围列国瞰斟黝叠斯～■鼠髓翻 燃髓目鞠翻艇 ～■飘 描翻捌翔弱嘲飘“一■羁悄啊圈 搠嫩瑚 琳一■日瑚瞄嘲啊嘲圈瞄阿Ｈ盟嘶一■ｌ髓融隧瞄圈嘲瑚圈凰 一■ 凸瑚嘲闰圈Ｈ秘列鞫勰佃一―■斟畦辟瞪臣隧匿一■ 皿Ⅸ隧 瞄瞰圉嘲哪麒～ 一―■ａ瞄礴瑚髓瞄链匿 一■ 臻曩搿融斟 且 一■曩嚣憎Ｈ隧嚣疆毪鬣拇 ～■ 鼻Ｈ懿瞄圈Ｍ盥 一■ 霹鞫嗣攒塌吼盥 一■ ―酎翻捌蜕且 ，Ｉ●１｜ｔｊ●Ｊ１Ｉｌｔｊ 一■ 瑚 嘲瞄圈啊酎啊¨瑚盟琦 一―■甜鼠融麓潮搬基即 一ｃ■●盼礴隧暖嘲嘲捌翻埘呻Ｅｉ々艺＆ｊｌｇ口Ｓ图１经瘤胃单独投注１８种氨基酸后１小时的裹观降解率． Ａ、Ｂ、ｃ、Ｄ分别为每一种氪基酸在７５、１５０、３００和６００衄ｏｌ剂量的表观降解率。 黑色：降解率．灰色：过瘤胃率。每种氨基酸的添加剂最为１００、２００、４００、８００ｍｍｏＩ。结果表明，在两个不同饲喂水平阶段，三种氨 基酸的表观降解率均随着添加剂量的增加而下降，进而过瘤胃率增加。在两个不同的饲喂阶段，苏 氨酸表现为相对最高的降解率；蛋氨酸的相对降解率在高饲喂水平时显著低于赖氨酸的降解率，而 在低饲喂水平下蛋氨酸降解率高于赖氨酸的降解率，在８ｈ的平均降解率苏氨酸、蛋氨酸、赖氨酸的 表观降解率分别为８３．３％，７７．９％和７９．５％．氨基酸的外流量在添加后８ｈ内，随着添加剂量的增加 而增加，尤其在添加后的ｌｈ外流量最大。７Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究１ｗＴ堆＾ｈ宣，＿■巴ｌｔＩ掌甚●，芒ｊＩｌｉＩ■毫ｌ●５￡｛ｔ０ｉ；ＢＩｅ｝Ｄｔ｛艺ｉｌ■５―ｉｒ●ｌ￡‘■ｉ，Ｅ●｛（引白ⅦＩｌｅ等（１９９７）其中一一７５ｍｏｌ◆一一１５瑚竹ｌＯ★～３００哪帅ｌ口…６００ ｍ国ｚ单独经窟胃瘘管投注１８种氨基酸后８小时的累计表现降解率折线圈。痊 荔一瑟８新疆农业大学硕士学位论文１．４动物对氨基酸化学衍生物的利用反刍动物小肠氨基酸来自瘤胃微生物蛋白、饲料非降解蛋白和非常有限的内源性蛋白质。随着 反刍动物生产性能的提高，人们不断追求高蛋白的乳品和高产优质肉类产品，仅靠微生物蛋白和饲 料非降解蛋自来提供氨基酸，不足以满足动物产乳、产肉、产毛的需要，而且也不可能完全满足ｌｏ 种必须氨基酸的平衡。由于瘤胃微生物对日粮蛋白的强烈降解作用，在日粮中添加优质蛋白和氨基 酸来提高小肠蛋白和氨基酸量．并不能得到满意效果。人们试图采用提高瘤胃非降解蛋白质在日粮 蛋白中的比例．瘤胃非降解蛋白质比例的提高。可以提高到达小肠的饲料非降解蛋白质的量，但是 存在着明显缺陷。提高日粮非降解蛋白的比例后，使得瘤胃可降解蛋白的比例下降，就导致瘤胃微 生物合成蛋白的可利用氮源供应不足，降低了微生物蛋白产量。而且微生物蛋白氨基酸的相对比例 与生产动物产品的比例比较接近，如果用谷物蛋白来提供饲料非降解蛋白质，或者对饲料蛋白进行 特殊处理后，一方面会缺乏蛋氨酸和赖氨酸，也会出现蛋白质过保护不易消化吸收的缺陷，国外有 人曾总结８８个在奶牛日粮中提高饲料非降解蛋白的实验，其效果并不确切，只有１７个实验报道具有 提高产奶量和乳蛋白百分比。 研究表明氨基酸在瘤胃内的降解率很高，采食后８小时达到十一二指肠的量平均仅有２０％左右 （ｖｅｌｌｅ，１９９７）。为了提高日粮中氨基酸到达十二指肠的量肠。直接向日粮添加氨基酸将会受到瘤胃 微生物的降解，使动物并不能有效利用氨基酸。根据氨基酸分解的一般规律，大部分氨基酸的分解 代谢起始于Ⅱ－ＮＨ２的脱氨基作用（沈同等，１９９３），从理论上讲，只要通过一定的化学反应在氨基酸 的ｑ－ＮＨ２ ｌ连匕一个化学基团（称为保护基团）把氦基酸的ａ．ＮＨ２封闭（ｂ１０ｃｋｉｎｇ）起来，就可能 会阻断氨基酸的分解过程。氨基酸的ａ小删２、＊ＣｏｏＨ及侧链上某些基团极具活泼性，能与许多化 学试剂反应（陶慰孙等，１９９５），形成许多氨基酸衍生物。化学修饰试剂不同．所得到的相应氨基酸 衍生物不同，因而也就具有不同的理化及营养特性．因此，必须对化学修饰试剂进行筛选。首先， 化学修饰试剂对动物及其产品不能有安全隐患：其次，形成的这种氨基酸化学衍生物能在动物某些 组织经特定酶的作用使氨基酸衍生物转化为相应的氨基酸。同时。形成的这种氨基酸化学衍生物能 在动物小肠吸收，再经体内某些组织经特定酶的作用使氨基酸衍生物转化为相应的氨基酸，就可以 被动物所利用，也可以达到提高动物可利用氨基酸的目的。目前大多数的研究主要集中在对蛋氨酸 化学衍生物的利用上。１．４．１禽类对蛋氨酸化学衍生物的利用９Ｎ．乙酰．Ｄｏ蛋氨酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究Ｐａｒｓｏｎｓ等（１９８１）在９日龄雄性火鸡无蛋氨酸的基础日粮中添加蛋氨酸的五种化学衍生物和等摩 尔蛋氨酸，通过多元回归分析法研究蛋氨酸衍生物对体增重的影响，推算其生物学效价，结果表明： ＤＬ．蛋氨酸砜（ＤＬｍｅｔｈｉｏｎｉｎｅ ｓｕＩｐｈｏｎｅ）、Ｄｏ蛋氨酸亚砜（ＤＬ－ｍｅｔｌｌｉｏｎｉｎｅ ｓｕｌｐｈｏｘｉｄｅ）、ＤＬ－蛋氨酸乙内酰（ｍｅｔ岫ｄａＨｔｏｉｎ）、ＤＬ－油酰基蛋氨酸（Ｎ．ｏｌｅｏｙｌ－ＤＩ ｍｅｔｈｊｏｎ访ｅ）和蛋氨酸羟基类似物钙盐（ｍｅ也ｉｏｎｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙ∞ａＩｏｇＩｌｅ ｃａＩｃｉｕＩｎ）的相对生物学效价分别为３、５９、－１０、７７和９３。由此可见与蛋氨酸相比， ＤＬ一蛋氨酸砜和ＤＬ．蛋氨酸乙内酰几乎没有生物学活性．而ＤＬ．蛋氨酸亚砜仅有部分活性，但ＤＬ一油酰 基蛋氨酸和蛋氨酸羟基类似物钙盐的生物学活性与蛋氪酸无显著差异。Ｂｕｎｅｒｙ等（１９７７）在无蛋氨 酸的仔鸡日粮中添加Ｎ．油酯酰－ＤＬ．蛋氨酸、Ｎ．棕榈酰．ＤＬ－蛋氨酸、Ｎ一羟甲基蛋氨酸钙、Ｎ．甲酰－ＤＬ． 蛋氨酸以及Ｎ．辛酰．ＤＬ广蛋氪酸和Ｎ．癸酰基－ＤＬ．蛋氨酸的混合物（按物质的量１：１进行配比）等蛋氨酸 衍生物，结果表明：蛋氨酸衍生物添加量（相当于０．１％蛋氨酸）时均可以促进仔鸡的生长，而高于 该添加量的蛋氨酸衍生物对仔鸡生长无益。Ｂａｌ【ｅｒ（１９７９）用鸡生长试验研究不同旋光性乙酰化蛋氨 酸的可利用性，结果发现Ｎ－乙酰．Ｌ．蛋氨酸具有和蛋氨酸一样的营养价值，Ｄ．型却不能改善日增重。Ｍｕｒ砌ａ乜ｕ等（１９８４）在不含硫氨基酸的纯台日粮中，添加等摩尔的蛋氨酸钠盐和蛋氨酸羟基类似物饲喂自来杭公雏鸡，结果发现蛋氨酸羟基类似物的生物学效价是ＤＬ蛋氮酸的７０％。１．４．２大鼠对蛋氨酸化学衍生物的利用Ｆｍｄｍａｎ等（１９８８）在大鼠日粮中添加蛋氮酸及其１６种｛｝ｉ生物研究对大鼠增重的影响，结果表明Ｎ－乙酰．Ｌ－蛋氮酸，Ｎ－甲酰一Ｌ．蛋氨酸和Ｄ．蛋氨酸可以很好的被大鼠利用，Ｎ一乙酰．Ｄ－蛋氨酸和蛋氨 酸的二肽的利用率在４＿４０％。Ｈｅｇｅｄｍ等（１９９２）在大鼠日粮中添加１．５和３．０９，ｋｇＤＬ一蛋氨酸，ＤＬ． 蛋氦酸羟基类似物，和ＤＬ―ｓ．甲基－蛋氮酸一锍盐酸盐，结果表明：三种处理都显著提高增熏、饲料转 化率，和蛋白质的利用率。Ｂｏｇｇｓ等（１９７５）在不舍硫氮基酸的大鼠日粮中添加Ｎ一乙酰一Ｌ一蛋氨酸、 Ｎ．乙酰．Ｄ．蛋氨酸、Ｌ一蛋氮酸和Ｄ．蛋氨酸，研究乙酰化蛋氨酸的生物秘用性。试验表明Ｎ．乙酰．Ｌ．蛋氨酸、Ｌ－蛋氨酸、口蛋氨酸能够同等显著地提高日增莺、采食量和蛋白利用率，Ｎ．乙酰．Ｌ广蛋氨酸可以代替日粮中的蛋氨酸。Ｒｏｔｍｃｋ等（１９７７）研究日粮中过量的Ｎ．乙酰．Ｌ．蛋氨酸和Ｌ－蛋氨酸对生 长大鼠的影响。研究发现当日粮添加０．３％Ｌ－蛋氮酸和等摩尔的Ｎ一乙酰．Ｌ．蛋氨酸．动物可以健康生 长．但当蛋氨酸高于此水平增重下降．而且在高水平下Ｎ．乙酰，Ｌ．蛋氨酸的不良影响弱于Ｌ一蛋氨酸。 Ｂｏｇｇｓ等（１９７８）研究乙酰化蛋氨酸的生物利用性发现Ｎ．乙酰－Ｌ一蛋氨酸可以充分被大鼠利用，并 可以促进大鼠的生长，同时研究发现在缺乏含硫氨基酸的可食蛋白里添加Ｎ－乙酰．Ｌ．蛋氪酸，它可以Ｏ新疆农业大学硕士学位论文像蛋氮酸～样被人所利用，提高该蛋白质的品质。并且在大鼠增重试验中发现在日粮中添加ＤＬ－蛋氨 酸、Ｌ－蛋氨酸、Ｄ．蛋氨酸、Ｎ＿乙酰．ＤＬ．蛋氨酸、Ｎ．乙酰．Ｄ－蛋氨酸、Ｎ?乙酰一Ｌ一蛋氨酸等乙酰化的衍 生物除Ｎ．乙酰．Ｄ一蛋氨酸外，其他的可以和单体氨基酸一样可以促进大鼠的增重（见表２）。表２在大鼠日粮中分别添加ＤＬ－蛋氯酸，Ｌ－蛋量酸，ｐ蛋氯酸，Ｈ一乙酰一ＤＬ－蛋氯酸，Ｎ一乙酰－Ｄ一蛋氯酸．Ｎ一乙蕺一Ｌ－ 蛋氯酸的大鼠体增重（ｇ） 日粮中的蛋氮酸和相当于蛋氮酸的衍生物添加水平Ｏ体增重（ｇ）２６．６±＆３０．４％ＤＬ－蛋氨酸 ０．４％Ｌ－蛋氨酸０ ４％Ｄ－蛋氪酸６４ Ｏ±１６．３６４．８±１４．０５３．９±１０．５Ｏ．４％Ｎ．己酰．Ｄｂ蛋氨酸 ０．４％Ｎ－乙酰－Ｌ?蛋氨酸０ ４％Ｎ－乙酰－Ｄ镬ｆ氯酸 ６２．７士９．５２３．９士０．６引自ＢｏＥｇｇ等（１９７８）．Ｂｐ鹊ｓ等（１９７８）采用同位素示踪技术研究了Ｎ．乙酰－Ｌ．蛋氨酸的代谢情况。将ｃ”标记的Ｎ－乙 酰－Ｌ一蛋氨酸通过口服和腹腔注射研究分子中乙酰基团水解代谢途径，用ｃ”标记的乙酸钠作对照．裹３在采食Ｎ一乙酰一Ｌ一蛋氨酸和Ｌ一蛋氨酸后２４小时，ｓ３５在不同组织分布的回收率（％）弓Ｉ白Ｂｏｇｇｓ等【１９７８）。Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究示踪测定Ｎ．乙酰．Ｌ．蛋氨酸中乙酰基团的代谢途径，结果显示：两种添加方式都能得到乙酰基团从Ｎ－ 乙酰－Ｌ．蛋氨酸水解程度很大，在２４小时由乙酰基代谢为二氧化碳的代谢累计率达到８０％以上，与乙 酸钠中碳原子代谢累计率相当的结论。说明乙酰基和乙酸钠中的碳原子代谢的途径、程度一致。用 ｓ”标记的Ｎ．乙酰．Ｌ．蛋氨酸和ｓ”标记的ｋ蛋氨酸相比较，研究发现Ｎ一乙酰一Ｌ．蛋氨酸分子中的蛋氨酸 的ｓ３５在不同组织分布的回收率非常接近（见表３）。 从表３可以看出，Ｎ．乙酰．卜蛋氨酸和Ｌ蛋氪酸中硫不论在组织和代谢产物中都具有相近的分布率。也就是说两种化合物中蛋氨酸分子的代谢途径及程度一致。可见Ｎ．乙醣Ｌ一蛋氨酸可以象Ｌ－蛋氪酸一样可以被利用。 在对Ｎ一乙酰－Ｌ－蛋氨酸的乙酰化酶活性研究发现不同组织器官、同一器官的不同位置，以及种属 之间也存在很大差异。在大鼠器官组织中，肾脏的乙酰化酶的活性最高，在肌肉、脾脏、胰腺中无 活性，心脏和肺的活性较低，肾脏的乙酰化酶的活性是肝和脑组织的８．９倍。（如表４）表４大鼠不同组织对Ｎ一乙酰一Ｌ一蛋氨酸水解率 组织 水解率 ｕｍ０１水解的Ｈ一乙酰一Ｌ一蛋氮酸／ｍｇ组织／，Ｊ、时 肾 肝 脑 心 肺““５“４舟ｌ。ｌ卫ｏ肭 眦 帐引自Ｇ聊ｇ吼ｎ（１９６１）Ｃｈｅｍｌｓ廿ｙｏｆＡｍｍｏＡｃｊｄｓＶｏＩＺｃｈａｐｅｒ２０。ｏｏＢｏｇｇｓ（１９７８）将鸡、大鼠、和猴子的小肠按照从前向后的顺序等分８段，结果发现在不同的肠段 酶的活性也有差异（见表５）。从表５可以看出大鼠和鸡小肠段向后延伸酶的活性下降，而猴子的 刚好相反。而且猴子小肠的乙酰化酶活性均比大鼠和鸡的高，可能灵鲢类动物具有更高的利用Ｎ．乙 酰－Ｌ一蛋氨酸的能力。１．４３仔猪对蛋氨酸化学衍生物的利用１２新疆农业大学硕士学位论文Ｄ∞ｂｅｅｓ等（１９８４）在仔猪日粮中按照每公斤活重添加２ｍｍｏｌＬ－蛋氨酸、Ｎ一乙酰－Ｌ一蛋氨酸和Ｎ．乙酰．Ｄ．蛋氨酸。前两者可以明显地提高门静脉和腔静脉的蛋氨酸水平，具有相同的效应。周国安 等（２００４）报道，日粮中添加０．２％的Ａｌｉｍｅｔ可平均降低系酸力６％～７％，通过降低饲料的ｐＨ值， 能够减少饲料在被动物摄食前的细菌污染。并报告德国Ｇｏｔｔｉｎｇｃｎ大学Ａｂｅｌ在代谢笼里用３０ ｋｇ仔猪进 行试验，使用Ａｌｉｍｅｔ代替ＤＬ．蛋氨酸提高了氮的贮留，显著地降低了尿氮的排出。裹５大鼠、鸡、猴子不同肠段乙酰化酶的水解活性（咖ｏＩ永解的Ｎ－乙酰．ｂ蛋氪酸，ｍｇ组绷小时）引自ＢｏＥｇｉ等（１９７９）．注：酶活力用每小时每毫克小腑组织水解Ｎ一己酰山蛋氮酸的徽摩尔数袁示－１．４．４人对蛋氨酸化学衍生物的利用ｓｔｅｇｉｎｋ等（１９８０）在５名健康成年人的膳食中添加Ｏ．０６０５ ｍｍｏｌ，ｋｇＬ．蛋氢酸、Ｎ－己酰－Ｌ一蛋氨 酸，受试者食用后血浆Ｌ．蛋氨酸浓度升高，并且没有得到Ｎ－乙酰－Ｌ－蛋氨酸释放到血浆，和分泌到 尿液中的结论。Ｓｔｅｇｉｌｌｌ（等（１９８２）在ｌ周岁幼儿禁食的条件下服用Ｌ－蛋氨酸、Ｎ一乙酰－Ｌ蛋氨酸， 结果表明在幼儿血浆中蛋氨酸浓度明显升高。但是血浆Ｌ＇蛋氨酸浓度大约是成年人的一半，可能小 孩对Ｎ．乙酰．Ｌ．蛋氨酸的代谢速度比成年人要快得多。ｚｅｚｕｌｋａ等（１９７６）在成年人以大豆分离蛋白为主要蛋白源的食物中添加Ｌ．蛋氨酸、Ｄ蛋氨酸ｌ三Ｉ及Ｎ．乙酰－Ｌ一蛋氢酸，经过９天的适应期后，测得的结果是Ｌ－蛋氨酸和Ｎ．乙酰．Ｌ－蛋氨酸能够提高氮存留。１．４．５反刍动物对蛋氨酸化学衍生物的利用Ｎ．己酰－ＤＬ．蛋氨酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究反刍动物对氨基酸化学衍生物利用的研究主要集中在蛋氨酸的化学衍生物上，主要是蛋氨酸羟 基类似物、Ｎ．羟甲基一蛋氨酸。以及蛋氨酸羟基类似物的钙盐方面。 Ｂｅｌ∞ｃｏ（１９７１）研究蛋氨酸羟基类似物（ＭＨＡ或者ＨＭＢ）在瘤胃液中的稳定性和在犊牛的肝肾组织转化的情况，采用放射标记技术发现加｛Ａ在瘤胃内降解很少，在体外培养４小时，蛋氨酸降解率为４５％．而ＭＨＡ仅降解９％。相应的标记ｃ０２的含量蛋氨酸为ｔ２％，而ｈｍＡ为４％。同时发现犊牛的肝肾组织可以将蛋氨酸羟基类似物转化为蛋氨酸。Ｋ０ｅｎｉｇ等（１９９９）研究ＨＭＢ在癯胃内的表观 降解率，给乳牛饲喂９０克ＨＭＢ，１ｈ后有５０％的过瘤胃，其中有４４．６％的ＨＭＢ可以被小肠吸收。动物 采食６ｈ后血浆蛋氨酸浓度达到最高值。这一试验表明ＨＭＢ可以被小肠吸收。并且被代谢为蛋氨酸。 ｖａ’Ｚｑｕｅｚ等人（２００１）用体外连续发酵技术研究ＨＭＢ在瘤胃液的降解情况。结果显示在１６．７小时的 固相物存留时间有４３．２％的ＨＭＢ过瘤胃，固相物存留２５小时的过瘤胃率为２Ｉ．６％。Ｋｏｅｎｉｇ等（２００２） 在泌乳母牛上用液态ＨＭＢ研究它在瘤胃内的降解和可利用性，每天在日粮中添加２５克、５０克ＨＭＢ， 采用回归法计算出饲喂后２４小时平均有３９．５％的ＨＭＢ过了瘤胃，有２２％到达十二指肠．大约１７．６％经 瓣胃吸收，血浆中的蛋氨酸最高浓度在投饲后３小时和６小时出现，而且随添加量升高，瘤胃降解率 不受投饲量的影响。 Ｐａｎｅｒｓｏｎ和Ｋｕｎ烈１９８８）用体外法研究瘤胃微生物对蛋氨酸和蛋氨酸羟基类似物的代谢，结果表明 蛋氨酸羟基类似物、蛋氪酸羟基类似物铵盐、蛋氨酸羟基类似物酰胺的降解率都显著地低于蛋氨酸 的降解率，蛋氨酸羟基类似物的甲酯和蛋氨酸羟基类似物乙酯迅速转变为虽氨酸羟基类似物后降解， 同时蛋氪酸羟基类似物的碳架比蛋氨酸的碳架消失速率要慢得多。高红建（２００２）向瘸胃添加＿Ｎ．羟甲基蛋氨酸钙后，显著地降低了瘤胃液ＮＨ３．Ｎ浓度（ｐ＜Ｏ．０５），血浆中游离Ｍｅｔ浓度比对照组显著升高（ｐ＜０．０１），血浆中含硫ＡＡ（Ｍｅｔ十ｃｙｓ）与对照组相比，有增高趋势（（ｐ＜ｏ．１），血浆尿素Ｎ有降低的趋势 （ｐ＜ｏ．１）．白蛋白和总蛋白浓度有升高的趋势（ｐ＜０．１）：段红伟（２０００）研究表明Ｎ－羟甲基蛋氢酸钙在 瘸胃中比较稳定，瘤胃中投放Ｎ―ＨＭＭ－Ｃａ提高了血液总游离氨基酸水平。然而关于Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨 酸能否在绵羊瘤胃稳定存在的报道很少，而且结论很不一致。Ａｍｏｓ（１９７４）的体内试验结果表明：Ｎ． 乙酰一ＤＬ．蛋氨酸在真胃的回收率很低：而Ｄｉｇｅｎｉｓ（１９７４）的体外实验结果表明Ｎ一乙酰．ＤＬ＿蛋氨酸可以 稳定存在。前者的真雹强收率低。是由于在瘤冒内降解还是在瘤胃经瘤胃壁吸收，目前还不清楚， 而后者的结论，也有待证实。１４新疆农业大学硕士学位论文１．５反刍动物小肠理想氨基酸模型反刍动物小肠理想氪基酸模型指的是到达小肠供给动物吸收的氨基酸的组成和比例与动物维 持、生产所需的氨基酸的数量和比例相等的配比关系。陈勇等（２０００）指出，瘤胃微生物的活动改 变了到达十二指肠的蛋白质形式和数量，因此反刍动物的蛋白质代谢和需要量十分复杂。当微生物 蛋白质的合成受到限制或动物的氨基酸需要量很高时，仅靠微生物蛋白质不能满足反刍动物维持和 生产（如生长、泌乳等）的需要。可吸收氨基酸之间的平衡是影响蛋白质利用效率（合成肌肉和其它产 品）的最重要因素。它往往耍与动物的生产状态相联系，以及要考虑到达小肠微生物蛋白氨基酸组 成及含量，日粮蛋白来源等因素。１．５．１微生物蛋白氨基酸的组成与含量与动物产品相比较在假定瘤胃微生物和动物产品蛋白质中的氨基酸含量比较稳定，则瘤胃微生物的赖氨酸比例对 奶、＋肉、毛中的比例都比较合适，但是蛋氨酸、缬氨酸、组氨酸、亮氨酸的缺口在１４％以上；而组 氨酸对牛羊肉的缺口在３４％以上。瘤胃微生物氨基酸占小肠总氨基酸的比例，奶牛约３５?蜘ｖ６６％：绵 羊约为６０％曲０％，虽然瘤胃微生物对动物提供大量蛋白质，但动物所需的蛋白除了微生物所提供外， 须由日粮非降解蛋白质来满足或者添加氢基酸来满足。１．５．２反刍动物小肠限制性氨基酸反刍动物限制性氨基酸的确定往往采用对比动物产品和食糜氨基酸组成的差异进行计算。也可 以采用化学得分和必需氨基酸指数以便更清楚地比较。化学分数表示某一特定必需氨基酸与体组织 相应氨基酸的比值；必需氨基酸指数是指９种必需氨基酸的总和与体蛋白质（或动物产品）中相应 必需氮基酸总和之间的比值。 一般认为蛋氨酸和赖氨酸是反刍动物限制性氨基酸，究竟哪一个是第一＃＆制性氮基酸往往与日 粮中过瘤胃蛋白的来源有关。研究表明以玉米蛋白为主要过瘤胃蛋白的日粮时，赖氨酸为第一限制 性氨基酸，这时提高小肠赖氨酸水平则乳蛋白显著增加；而当以豆粕为主要过瘤胃蛋白源时，蛋氨 酸是第一限制性的。当以玉米豆粕型日粮饲喂泌乳奶牛，蛋氨酸为第一限制性氨基酸。除了蛋氮酸、 赖氨酸外，学者们采用消化道全灌注法研究了其他必需氨基酸的限制性，结论不很一致。Ｆｒ∞ｅｒ等 （１９９１）用消化道全灌注法发现，组氨酸是继赖氨酸、蛋氨酸之后的第三限制性氨基酸。然而Ｌｉｕ等Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氮酸瘤胃保护有效性投对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究（２０００）用氨基酸吸收率评价氨基酸的限制顺序，得出的结论是，苯丙氨酸和异亮氨酸是继赖氨酸、 蛋氨酸之后的限制性氨基酸。这种差异可能由于评价方法，日粮成分之间的不同所引起的。１．６本研究的意义和必要性本文就Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸在瘤胃降解和对绵羊瘤胃消化代谢的影响展开研究。尽管反刍动物具 有瘤胃消化的特殊性，但是小肠对营养物质消化吸收和单胃动物类似。作为蛋氨酸的另一化学衍生 物――－Ｎ．乙酰－ＤＬ一蛋氨酸，可以被大鼠、鸡、猴子等单胃动物利用，而且在某些组织中具有较强的 乙酰化酶活性，这就为绵羊小肠对其利用成为可能。绵羊采食Ｎ．乙酰一ＤＬ一蛋氨酸后，可能会受到瘤 胃微生物的降解，关于Ｎ．乙酰－ＤＬ－蛋氮酸能否在绵羊瘤胃稳定存在的报道很少，而且结论很不一致。 Ａｍｏｓ（１９７４）的体内试验结果表明：Ｎ一乙酰?ＤＬ－蛋氨酸真冒的回收率很低，；两Ｄｉｇｅｎ汉１９７４）的体外实 验结果是Ｎ．乙酰一ＤＬ．蛋氮酸可以稳定存在。前者的真胃回收率低。是由于在瘤胃内降解还是经瘤胃 壁吸收，目前还不清楚；而后者的结论，也有待证实，所以很有必要做这方面的研究。 为了提高动物的生产性能，一味地在反刍动物日粮中添加蛋白质或者氨基酸，不仅造成蛋白质 的浪费，还会对环境增加氮的排放量污染环境。在当今世界蛋白质供应紧缺，人们环保意识提高的今天，开发研究新型反刍动物饲料氨基酸添加剂势在必行。本文采用蛋氨酸的化学衍生物――Ｎ．乙酰－ＤＬ－蛋氨酸，试图探究其在瘤胃稳定性以及对绵羊瘤胃环境和营养物质消化代谢的研究．以便为 绵羊对Ｎ．乙酰－ＤＬ．蛋氨酸的可利用性研究和开发新型反刍动物氨基酸添加剂，提供必要的数据和技 术支持。１６新疆农业大学硕士学位论文第二章材料与方法２．１试验一不同ｐＨ值对Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸稳定性影晌的研究２．１．１试验药品及缓冲液Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸（Ｎ．Ａｃｅｔｙｌ．ＤＬ．ＭｅｔＩｌｉｏｎｉ∞，ＮＡＭ）购自国内某氨基酸有限公司，纯度不低 于９８．５％。不含其它任何氨基酸。 缓冲液１：ｐＨ ２．３的磷酸二氢钠．柠檬酸缓冲液。 缓冲液２：ｐＨ６，５的磷酸二氢钾一氢氧化钠缓冲液， 缓冲液ｌ配制方法：先配制０．２ｍｏｌ，Ｌ的磷酸二氢钠２５０ｍ】，和ｏ．１ｍｏｌ／Ｌ的柠檬酸溶液ｌ０００ｍｌ， 然后按照ｖ＿＆：§＊＊《：Ｖ＃¨＊＊＝１．２４：１８．７６的体积比混合到理想体积，然后用上述两种溶液，将ｐＨ 值调整为２．３备用。 缓冲液２配制方法：先配制Ｏ．２ｍｏＩ／Ｌ的磷酸二氢钾５００ｍｌ，和Ｏ．２ｍｏｌ，Ｌ的氢氧化钠溶液５００ｍｌ， 然后按照５体积磷酸二氢钾溶液和２．３６５体积的氢氧化钠溶液混合，再加水稀释到２０体积，然后用 上述两种溶液，将ｐＨ值调整为６．５备用。 以上缓冲液的配制参考张龙翔（１９８２）＜＜生化实验技术＞，２．１．２试验设计及方法将１５．Ｏ ｍｇ左右的Ｎ－乙酰一ＤＬ．蛋氪酸（ＮＡＭ）准确称量后，然后加入预热的缓冲液２０ｍｌ，然后置于水浴锅中孵育，在缓冲液中加入Ｍ乙酰一ＤＬ一蛋氨酸溶解后，摇匀取０．５ｍＪ液体存放于ｅｐＰｅｎｄｎｒｆ管中，记为Ｏ小时点。在加入后的０、１．５、３、６、９、１２ｈ采样。在ｐＨ ２－３和６．５分别设计三个重复。２．１．２．１Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸的测定向盛放样品的ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中加入ｏ．５ｍｌ甲醇（分析纯级），涡旋混匀１０秒钟后．放置冰箱待测。 测定方法采用高效液相色谱法（ｈｉｇｈ ｐｅｒｆｏｎｎ柚ｃｅ 见附录１。２．１．２。２ ｌｉｑｕｉｄｃｈｍｍａｔｏｇｒａｐｈｙ，ＨＰＬｃ）进行，具体测定方法Ｎ一乙酸一ＤＬ－蛋氨酸降解率计算ＮＡＭ的稳定性用其在不同时间点的表观降解率来表示。 计算方法：任何点的ＮＡＭ降解率＝『（Ｏ时刻测得ＮＡＭ浓度一任一时刻的ＮＡＭ浓度）÷０时１７Ｎ－乙酰．ＤＬ．蛋氨酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究刻测得ＮＡＭ浓度］×１００％２．１．３数据统计实验数据用平均数±标准差表示，使用Ｅｘｃｅｌ软件进行平均数分析２．２试验二在人工胃发酵条件下Ｎ一乙酰一ＤＬ－蛋氨酸的表观降解率及其对 某些发酵参数影响的研究２．２．１试验材料２．２．１．１Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸购自国内某氨基酸有限公司，其纯度为９８．５％以上。本品不含任何氨基酸。 ２．２．１．２瘤胄液 瘤胃液取自４只每天饲喂４００９混合精料，自由采食玉米秸秆的健康新疆美利奴细毛羯羊，混合 精料每天等量饲喂两次，自由饮水。瘤胃内容物采集后，用四层纱布过滤，将滤液直接盛丁预先装满 二氧化碳并预热的医用输液瓶中，然后盖紧瓶塞放在预热的３９℃左右的保温桶中。带回实验室备用。 ２．２．１．３人工唾液按照Ｍｃ．Ｄｏｕｇｕｌｌ（１９４８）的配方。配制方法：１Ｌ人工唾液中Ｎａ２ＨＰ０４?１２Ｈ２０：９．３９’Ｎ枷Ｃ０３：９．８９，Ｎａｃｌ：Ｏ．４７９，ＫｃＩ：０．５７９＇Ｍｇｓ０４?７Ｈ２０：０．１２ ｇ，ｃａｃｌ２：Ｏ．０４９。先将除ｃａｃＪ２以外的物质充分溶解，再将ｃａｃｌ２溶解后倒入前者溶液中。使用前向其中通入二氧化碳，使其ｐＨ在７．３５ 左右。并在３９℃的水中温浴３０分钟。 ２．２．１．４培养营养底物 淀粉３９．氯化铵ｏ．１７２９９．无水硫酸钠Ｏ．０２６９９，以上试剂为分析纯。２，２．２试验方法２，２．２．１试验设计 将Ｎ－乙酰－Ｄ、Ｌ?蛋氨酸按照０、Ｏ．２、ｏ．４、０．６９设为四个处理，分别为试验一、二、三、四组。将 试验一组作为对照组，设四个重复。１８新疆农业大学硕士学位论文２．２．２．２培养方法 将培养底物和准确称量后的Ｎ．乙酰．Ｄ、Ｌ．蛋氨酸置于３００ｍｌ锥形瓶中，加入６０ｍｌ瘤胃液和１２０ｍ１ 人工唾液，并尽量厌氧操作，盖紧瓶塞置于水浴摇床上，３９．５℃左右进行培养，缓慢摇动摇床。并在培 养开始（计为Ｏ时刻）和混匀后１．５、３、６、９、１２ｈ，采集样品约２０ｍｌ，立即测定ｐＨ值，并记录。 ２．２．２．３样品保存： 采集的样品盛放在６０ｍｌ聚乙烯塑料瓶中，加入２―３滴饱和氯化汞后，盖上盖子立即放入冰箱冻存。 ２．２．２．４指标测定 ｐＨ值：用∞ｄｅｌｓＡ７２０ｐＨ计直接测定；氨态氮的测定：按照高民，冯宗慈（１９９３）用比色法进行； 微生物蛋白测定：按照赵小刚（２００４）的方法： 挥发性脂肪酸的测定：测定方法见附录２： Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸的测定：测定方法见附录２。 ２．２．２．５数据统计 数据采用平均数±标准差（Ｚ±ＳＤ）表示。采用ｓｐｓｓｌｌ．ｏ统计软件进行双因素方差分析，显著性 检验采用邓肯氏新复极差法。２．３试验三瘤胃投注不同量Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸对其在瘤胃内表观降解率等指 标影响的研究２．３．１实验动物和实验设计本试验选取４只体重约４０Ｋｇ装置永久性瘤胃瘘管和十二指肠瘘管的新疆美利奴羯羊，采用４ ×４拉丁方设计，在４期试验中每天每羊分别经瘤胃投注０、４、６、８９Ｎ一乙酰－ＤＬ．蛋氨酸，以研究 Ｎ－乙酰一ＤＬ．蛋氨酸在瘤胃表观降解率及对其他相关指标的影响。每期试验预试期１４天，正试期６天。 正试期前三天采集瘤胃液．后三天采集十二指肠食糜。以聚乙二醇（ＰＥ６）为液相标记物计算十二指肠 液相物流量。２．３．２实验日粮与实验动物的饲养管理动物均单圈饲喂，每天于０８：００和２０：ｏｏ分别给每只羊饲喂２００克混合精料，羊只自由采食粉Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究碎的玉米秸秆，先精料后粗料，少喂勤添，自由饮水。在羊只采食混合精料的同时，每次将０、２、 ３、４９的Ｎ一乙酰．ＤＬ．蛋氨酸经瘤胃瘘管投注，每天两次。混台精料和粉碎玉米秸秆的概略养分含量 见表６。表６混合精科和粉碎玉米秸秆的概略养分古量（％，干物质计）２．３．３液相标记物的投放本实验采用ＰＥＧ作为液相标记物，以测定癯胃稀释率和十二指肠液相流量。 测定瘤胃稀释率的ＰＥＧ投放：在预试期第１０天早晨动物饲喂后，将１０９ＰＥＧ溶解于１００ｍｌ水中， 经瘤胃瘘管一次性灌注，用少量的水冲洗后一并加入。将加入后的１小时记为０时刻，在加入后的 ０、０．７５、１．５、２．５、３．５、５、６、７．５、９、１１小时点．采集瘤胃液２５ｍｌ。用２００目尼龙袋过滤。然 后将过滤后的瘤胃液盛放于聚乙烯塑料瓶中冷藏保存。 测定十二指肠液相流量的ＰＥＧ投放：参照张乃峰（２００２）的方法略作改进。将配制的３０９／Ｌ的 ＰＥＧ溶液，从预试期的第１ｌ天开始，每天每隔６ｈ经瘤胃瘘管灌注５０ｍｌ上述溶液，连续灌注直至每 期十二指肠液采样结束。２．３．４样品采集２．３．４．１瘤胃液采集与保存 在正试期第卜３天早晨饲喂精料前记为Ｏ时，在饲喂精料后的第Ｏ，ｌ＿５，３，６，９和１２ｈ各采 集瘤胃内容物２５ｍｌ，然后用２００目尼龙袋过滤，在滤液中加入两滴饱和氯化汞，轻摇混匀，放入装 有冰块的保温筒中保存。样品带回试验室后。放入一２０℃冰箱内保存，瘤胃液连续采集三天。 ２．３。４．２十二指肠食糜样品的采集与保存 在正试期的后三天采集十二指肠食糜样品。分别丁．正试期第四天的８：００，１４：００，２０：ｏｏ，２：ｏｏ， 第五天的６：００，１２：００，１８：ＯＯ，２４：００．第六天的４：００，１０：ｏｏ，１６：ｏｏ，２２：００，各采集十二指肠食 糜２０ｍｌ。将每只羊１２个时间点的食糜等量混匀，于一２０℃冰箱内保存，待测。新疆农业大学硕士学位论文２．３．５指标测定２．３．５．１癌胃液、十二指肠液中ＰＥＧ浓度测定 准确称取上述０、０．７５、１．５、２．５、３．５、５、６、７．５、９、１１小时点瘤胃液和混匀的十二指肠溶 冻样品１．００００９左右置于试管中，然后按照比浊法测定其中的ＰＥＧ含量。具体测定方法如下： ２．３．５．１．１样品处理 取１毫升瘤胃液，依次加入１ｍ】０．３ Ｎ氢氧化钡、１ｍ１５％七水硫酸锌和０．５毫升１０％二水氯化钡， 加蒸馏水３―５ ｍｌ，于４０００转／分离心１０分钟后将上清液倒入已称量的５０ ｍｌ烧杯中，再加入蒸馏水 于试管中将沉淀搅起．离心收集上清液，如此重复２次，将收集的上清液用水定量到２５９左右，记 录重量，混匀。２．３．５．１．２Ｐ阱标准曲线制作取ＰＥＧ标准液（９０微克／毫升）０、１、１．５、２、３、４和５ｍｌ，加蒸馏水至５ｍｌ，其ＰＥＧ含量分别 为０、９０、１３５、１８０、２７０、３６０和４５０ｕｇ／ｔｕｂｅ。加入三氯乙酸一氯化钡显浊液５ｍｌ，加塞后来回颠倒 ４次，静置３０分钟后，将试管再轻轻来回颠倒４次，在４２０ｍ分光光度计上测出浓度（ｃｏｎｃ）和光 密度（ＡＢｓ），根据数值作出标准曲线。 ２．３．５．１＿３样品测定 取样品处理液５ｍｌ移入试管，向试管中加入上述显浊液５毫升．塞紧后轻轻地来回颠倒４次， 静置３０分钟。显浊液每隔１分钟加１管，以保证在随后的测定时各管的静置时间完全一样。静置到 ３０分钟，将试管再轻轻来回颠倒４次，在４２０ｎｍ处测定光密度值（浊度值），记录。１分钟后再测一 下样品。利用标准曲线计算ＰＥＧ的含量。 ２．３．５．２瘤胃液及十二指肠液肛乙酰一ＤＬ一蛋氨酸浓度（ＮＡＭ）测定 采用ｃ１８反相高效液相色谱法（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定瘤胃液和十二指肠液中Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸，具 体测定方法见附录２。 样品处理：用ｌｍＬ移液枪移取Ｏ．５ｍｌ过滤瘤胃液加入到１．５ｍｌＥｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，如果瘤胃液为冷冻样品，须先充分解冻和混台均匀，然后加入０．５ ｍ１分析纯甲醇，封盖后旋涡混合１０秒，在４℃冰箱中放置ｌＯｍｉｎ后于１００００转份离心ｌｏｍｉｎ，用移液枪小心吸取上清液转入到另一Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，用１０山进样器准确吸取２ｐｌ样品液进样测定。如果不能及时测定，可先将上清液冷冻保存。２．３．６数据计算２２．３．６．１癌胃稀释率的计算 将０、ｏ．７５、１．５、２．５、３．５、５、６、７，５、９、１１小时点的瘤胃液中ＰＥＧ浓度和相应时问，根据最小二乘法拟台曲线方程ｃ＝ｃ。?ｇ。，，于是瘤胃液体积矿＝筹，其中?ｃ－即刻的ＰＥＧ浓度，ｃｏ：ｏ时刻的ＰＥＧ浓度，ｋ为瘤胃液稀释率，Ｖ为瘤胃液体积，Ｍ为投注的ＰＥＧ的量。在本实验中 上述拟合曲线方程的拟合度，＞０．９０。 ２．３．６．２十二指肠流量等指标的计算十二指肠液相流量（Ｉ则ａｙ，ｓｈｅ印）＝每天经瘤胃ＰＥＧ投放量（ｇ，ｄａｙ，ｓｈｅｅｐ）÷十二指肠食糜中ＰＥＧ的含量（ｇ／ｋｇ） 每天到达十二指肠ＮＡＭ（ｇ）＝十二指肠液相流量（ｋｇ，ｄ甜，ｓｈｅｅｐ）×十二指肠食糜中ＮＡＭ含量（鲫（ｇ）ＮＡＭ在前胃的消失率＝【（每天投注的ＮＡＭ（酚一每天到达十二指肠的ＮＡＭ（ｇ）÷每天投注的ＮＡＭ （ｇ））】×１００％ ＮＡＭ在瘤胃的表观降解率的计算模型：ＮＡＭ在不同时间间隔的外流量（ｏｕｔｆｌｏｗ＾ｎｔｅｒｖａｌ）＝（时间段起始ＮＡＭ浓度一时间段最终ＮＡＭ浓度）×瘤胃液的稀释率（％）×时间段（ｈ）ＮＡＭ在不同时间间隔的表观降解量（ｄｅｇｍｄａｔｉｏ州ｉｎｔｅｒｖａＪ）＝［（时间段起始浓度一时间段最终浓度）×瘤胃液体积卜ＮＡＭ在不同时问问隔的外流量 ＮＡＭ在不同时间间隔的表现降解率（ｄｅｇｒａｄａｔｊｏｎ ｒａｔｅ）＝（ＮＡＭ在不同时间间隔的表观降解量÷投注量）×１００％２．３．７数据统计所有数据均采用平均数±标准差（ｉ±ｓＤ）表示，并采用ＤＰＳ统计软件进行三因素方差分析并采用邓肯氏显著性检验。２．４试验四瘤胃投注Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究２．４．１试验动物与试验设计新疆农业大学硕士学位论文本试验选取４只体重约４０Ｋｇ装置了永久性瘤胃瘘管和十二指肠瘘管健康的新疆美利奴羯羊， 采用４×４拉丁方设计，在４期试验中每天每羊分别经瘤胃投注０、４、６、８克Ｎ－乙酰－ＤＬ－蛋氨酸， 以研究其对瘤胃消化代谢的影响。每期试验预试期１４天．正试期６天。正试期的前三天采集瘤胃液 后三天采集十二指肠食糜。以木质素为内源标记物，计算十二指肠食廪干物质流量。２．４．２试验日粮与试验动物的饲养管理动物均单圈饲喂，每天于０８：００和２０：ＯＯ分别给每只羊饲喂２００克混合精料，羊只自由采食粉碎 的玉米秸秆，先精料后粗料，少喂勤添，自由饮水。在羊只采食混合精料的同时，每次将Ｏ、２、３、 ４克的Ｎ－乙酰?ＤＬ－蛋氨酸经瘤胃瘘管投注，每天两次（间隔１２小时）。混合精料和粉碎玉米秸秆的概 略养分含量见表７。表７混合精科和粉碎玉米秸秆的概略养分含量（％，千物质计）２．４．３样品采集与保存２．４．３．１剩料、饲料样品的采集与保存 止试期每日早晨饲喂精料前收集剩余粗料，阴干后称重记录，按照四分法取样，编号后密封保 存。混合精料从料桶不同点，每天采集混合后，按照四分法采样，编号后密封保存。玉米秸秆样品， 每天称取秸秆饲料时随机从大堆取样后，混合，按照四分法采集样，编号后密封保存。 ２．４．３．２瘸胃液的采集与保存 在正试期第１－３天早晨饲喂精料前记为。时．在饲喂精料后的第０，１．５，３，６，９和１２ｈ各采集 瘤胃内容物２５ｍ１，立即测定ｐＨ值（ＭｏｄｅｌｓＡ７２０ｐＨ计），然后用２００目尼龙袋过滤，将滤液盛放在６０ｍＩ聚乙烯塑料瓶中，向滤液中加入两滴饱和氯化汞轻摇混匀，放入装有冰块的保温筒中保存。 样品带回试验室后，放入－２０℃冰箱内保存，瘤胃液连续采集三天。 ２．４．３．３十二指肠食糜样品的采集与保存 在正试期的后三天采集十二指肠食糜样品。分别于正试期第四天的８：ｏｏ，１４：００，２０：００，２：Ｏｏ． 第五天的６：ＯＯ，１２：００，１８：ｏｏ，２４：ＯＯ。第六天的４：００，１０：００，１６：００，２２：００，各采集十二指肠食糜Ｎ．乙酰－ＤＬ．蛋氮酸瘤胃保护有效性及对绵羊瘤胃消化代谢影响的研究２０ｍｌ。将每只羊１２个时间点的食糜等量混匀，于一２０℃冰箱内保存，待测。２．４．４样品测定瘤胃液样品测定：瘤胃液ｐＨ用ＭｏｄｅｌｓＡ７２０ｐＨ计直接测定。ＮＨ３．Ｎ浓度采用氧化镁蒸馏法测定（南京土壤研究所，１９７８），每次瘤胃液蒸馏量为２ｍＩ。瘤胃液中乙酸、丙酸和丁酸含量参考丁明 玉等（１９９７）、赵景婵等（２００１）和赵建军等（１９９３）的方法，采用ｃ１８反相高效液相色谱法（ＲＰ．ＨＰＬＣ） 进行分离，外标法定量，并加以改进。用ｌｍＬ移液枪移取Ｏ．５ｍｌ过滤瘤胃液加入到１．５ｍｌ Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，如果瘤胃液为冷冻样品。须先充分解冻和混合均匀。然后加入０．５ ｍ１分析纯甲醇，封盖后旋 涡混合１０秒，在４℃冰箱中放置ｌｏｍｉｎ后于ｌ００００转／分离心ｌｏｍｉｎ，用移液枪小心吸取上清液转入 到另一Ｅｐｐｅｎｄｏｒｆ管中，用１０ｐ１进样器准确吸取２山样品液进样测定。如果不能及时测定，可先将 上清液冷冻保存。 食糜、饲料样品的测定： 将食糜解冻后直接取样，用于ＮＨ，．Ｎ、ＤＮＡ和ＲＮＡ含量的测定。食糜样品中ＤＮＡ、ＲＮＡ含量的测定方法见赵小刚等（２００４）。将部分解冻食糜称量后，加数滴盐酸混 匀后于７５℃烘干，称重粉碎后用于粗蛋白、木质素等的分析。食糜及饲料中的干物质、有机物、粗 蛋白、木质素、纤维素、半纤维素等含量的测定均采用动物营养常规分析方法（杨胜，１９９３．张丽英 ２００２）。食糜中氨态氮的测定采用氧化镁蒸馏法（南京土壤研究所，１９７８），每次测定食糜用量为５ 克。每个测定重复三次。２．４．５计算与统计分析食糜流量的计算。用木质素标记法计算十二指肠食糜流量，即：食糜流量（ｋｇ刎ｓｈｅｅｐ）＝采食的木质素鼙（鲥，ｓｈｅｅｐ），食糜中的木质素量（ｇ，ｋｇ）本试验中用木质素标记法所测得的绵羊十二指肠食糜流量为７．９４～１１．８１（平均为９．８７）ｋ∥弘ｈｅ印。食糜中微生物蛋白量的计算。按细菌体含量Ｄ１ｑＡ３．１％（李阜棣等，２０００），粗蛋白含量４７％进行计算（韩兴泰等，１９９８）。计算公式为：ＭｃＰ（ｐ晚）＝”ＤＮ＾ｖ，Ｖ，／Ⅱ们．０３１ｘＯ．４７ｍＤＮ＾为比色时每管中ＤＮＡ的量，“ｇ加ｂｅ；Ｖ是试样分解液总体积，ｍ１；Ｖ’是比色所用分解液体 积，ｍ１；Ｏ．０３１是细菌中所含ＤＮＡ比例；０．４７是瘤胃微生物平均含粗蛋白比例．ｍ是所取的食糜量。到达十二指肠的（表观）饲料（粗）蛋白质量的计算方法为２４新疆农业大学硕士学位论文到达十二指肠的饲料蛋白（ｇ）＝６．２５×（到达十二指肠的总氮量（ｇ）一到达十二指肠盼微生 物氮量（ｇ）一到达十二指肠的ＮＨ３－Ｎ量（ｇ））?纤维素、半纤维素在前胃的消化量为摄入量减去到达小肠的量。２．４．６数据统计试验数据均以平均值土标准差（ｉ±５Ｄ）表示，应用ＤＰｓ统计分析软件对试验数据进行三因素方差分析．显著性比较采用邓肯氏新复极差法。第三章结果３．１试验一不同ｐＨ值对Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸稳定性影响的研究３．１．１在ｐＨ ２．３。ｐＨ ６．５，Ｔ＝３９．５。ｃ条件下Ｎ一乙酰一ＤＬ－蛋氨酸的降解率在ｐＨ２．３，ｐＨ６．５条件下，Ｎ－乙酰－ＤＬ一蛋氨酸很稳定。由表８可知，Ｎ－乙酰－ＤＬ－蛋氨酸在经历 １２小时孵育，其表观降解率分别在Ｏ．５４％～１．２４％，ｏ．４９％～１＿２３％。随着时间的延长，有升高趋势。但 １２小时其累计降解率仅为１％左右。由此可见，Ｎ－乙酰?ＤＬ一蛋氨酸在这两个ｐＨ值条件下可以稳定存 在。袭８ Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸在不同ｐＨ值条件下的降解率（％）３．２试验二在人工瘤胃发酵条件下Ｎ一乙酰啪Ｌ一蛋氨酸的表观降解率及其 对某些发酵参数影响的研究３．２．１不同添加量的Ｎ一乙酰一ＤＬ＿蛋氨酸在体外发酵体系的表观降解率由表９可知：不同添加量的Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸，其表观降解率在１２小时内平均值在３．９８％～４．３４％ 之间，添加量对其表观降解率影响差异不显著（ｐ＞Ｏ．０５），但随着添加量的增加，表观降解率有下降趋 势。从发酵后的１．５ｈ到１２ｈ，０．２、ｏ．４、Ｏ．６９添加量组的表观降解率分别在２．６９％～７．５１％，２．４５％～ ７．６６％，２．３１％～６．６１％之间，每组均随时间延长表观降解率升高。从发酵后１２ｈ的表观降解率来看，其 各组降解率在７％左右，可见Ｎ－乙酰．ＤＬ．蛋氨酸在体外发酵条件下相当稳定。亵９不同水平的Ｎ一乙酰一ＤＬ－蛋氟酸在体外发酵体系的表观降辟（％，ｎ；－４）注：小写字母表示ｐ＜ｏ ０５显著水平．同行之问相同肩标差异不显著．下同３．２．２Ｎ一乙酰一Ｄ卜蛋氨酸的不同添加量对发酵体系ｐＨ值的影响添加不同水平的Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸培养体系ｐＨ值变化见表ｌＯ。从平均值上看，各组ｐＨ值在 ６．２２～６．３４之间，添加不同水平的Ｎ一乙酰＿ＤＬ一蛋氨酸有降低ｐＨ值的趋势，但组间差异不显著（ｐ ＞Ｏ．０５）。在培养即刻，０．４、Ｏ．６９添加组ｐＨ值分别为６．７４、６，７７，与Ｏ添加组相比分别下降３％， ２．６％差异显著（ｐ＜Ｏ．０５）。这种差异可能与Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸本身酸性有关。在３ｈ，Ｏ．６９添加组ｐＨ 值６．５６显著地低于Ｏ添加组，降低２．１％（ｐ＜０．０５）；在培养的６ｈ，０．４、０．６９添加组的ｐＨ值６．２５、 ６．２２比Ｏ添加组低３％、３．４２％，差异显著（ｐ＜０．０５）。每组的州值均随培养时间的延长而降低，新疆农业大学硕士学位论文表现为同样的趋势。在９、ｌｚｈ内的ｐＨ值各组之间无显著差异，这可能是发酵底物中的淀粉持续发 酵产酸对ｐＨ值的影响起主导作用的结果。袭１０卜乙酰一ＤＬ一蛋氯酸的不同添加■对培养体系ｐＨ值的影响（ｎ：４）３．２．３Ｎ一乙酰一ＤＬ－蛋氨酸的不同添加量对发酵体系氨态氮浓度的影响由表１１可知，Ｎ?乙酰．ＤＬ－蛋氨酸的添加不同量不影响培养液中氨态氮浓度。各组氨态氨浓度均随 时问的延长而降低，表现为相同的变化趋势。从平均值上看，各组浓度在１７．１～１８．９ ｍｇ，１００ｍｌ之间， 各组间无显著差异（ｐ＞ｏ．０５）．但有随添加量的增多，呈上升趋势。在培养的１２ｈ，Ｏ．６９添加组的氨氮 浓度８．５ ｍｇ，ｌｏｏｍｌ显著的高于Ｏ添加组３．６ｍｇ，１００ｍｌ（ｐ＜Ｏ．０５）。氨态氮是瘤胃微生物发酵体系的一 项综合指标，它的高低受含氮物质的分解释放氮和微生物利用氨态氮合成微生物蛋白等因素共同作用的 结果。在发酵的前９ｈ各组氨态氨差异不显著，说明Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸对氨态氮浓度没有明显的贡献， 然而在发酵的１２小时点试验４组的氨态氮浓度显著高于对照组，这可能与部分Ｎ．乙酰．ＤＬ．蛋氨酸降解 有关。３．２．４Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸的不同添加量对发酵体系微生物蛋白的影响Ｎ一乙酰－ＤＬ－蛋氨酸的不同添加量对发酵体系微生物蛋白量的影响见表１２。添加０．２￣ｏ．６卅乙酰－ＤＬ堪｝氮酸不影响发酵体系微生物蛋白量。微生物蛋白量１２ｈ的平均值为２．７１￣３．０６ｍｇ，ｍｌ，各组问无 显著差异（ｐ＞Ｏ．０５），但各组有随培养时间的延长，微生物蛋白量有增加的趋势。袅１１ Ｎ一乙酰一ＤＬ一蛋氨酸的不同添加量对发酵体系氨态氮浓度的影响如ｇ／１００ＩＩｌｌ．ｎ＝４）添加最 添加后的０ｈ１．５Ｏ０２０４０．６２６１±１．Ｏ ２７．９±Ｉ．５２５２４－３±８．３ ２４．１±５．５ ２３．１±６．３ １５．５±５．５ ｌＯ．２±３．７５２７．７±２９２８．８±２０２９．５±３．６２５２８．４±３．４２２．１±ｌ ６３５±３．６ｌ±４．６６１８．１±７．６ １２．１±７．５１５．６±２．８１７．４±３ ５ １２．１±３．１ ８．５±２１ ４１８．９±９ ５９１ｌ ４±３．５１２３．６土２妒１７．１±９．１０±２ ９由６７±３ ２南 ６±８．１２ｈ小时的平均值１７．３±８．８１８３．２．５卜乙酰一ＤＬ一蛋氨酸的不同添加量对挥发性脂肪酸浓度的影响如表１３所示，在人工瘤胃发酵条件下，添加Ｎ－乙酰．ＤＬ．蛋氮酸不影响乙酸、丙酸、丁酸和总 挥发性脂肪酸的浓度。乙酸、丙酸、丁酸和总挥发性脂肪酸的浓度的平均值分别在８０．４４～１００．９９ｍｍｏｌ，Ｌ．１８．４２～２０．０５ ｍｍｏｌ，Ｌ，５．２４～６．６３ ｍｍｏｌ，Ｌ和１０５．２１～１２４．６５ｍｍｏｌ几之间，不同的添加量对各种酸浓度无显著性影响，但随添加量的增加，有提高乙、丙、ｒ酸浓度的趋势。从乙、 丙、丁酸随时间变化来看，均有随着时间发酵时间的延长，各种酸浓度不断升高，尤其是在发酵６ｈ 后，总挥发性脂肪酸，乙酸，丙酸浓度急剧增加，这可能是发酵所产生的酸不能像瘤胃上皮一样被 吸收而积累所致。２８新疆农业大学硕士学位论文 表１ ３ Ｎ一乙酰一ＤＬ＿蛋氨酸的不同添加量对体外发酵体系挥发性脂肪酸浓度的影响（ｍｏＩ儿．ｎ：４） 添加量 添加后（ｈ）０ １．５ ２８ ０８±１０４２ ３０ ３８±４．６６ ３９．４