PCR反应的过程很重要中会有4℃到95℃的变化,在高温的情况下反应液会蒸发通过热盖105℃左右,可以保证PCR管上端温度始终大于反应液的温度由于高温处压强大于低温处压強,液体不会向上蒸发从而避免反应液蒸发发造成的损失或反应不完全。
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较好的PCR仪反应金属槽可以达到的温度茬-4℃~98℃之间,而PCR反应进行阶段温度循环控制更多处于Taq酶活性最适温度72℃与DNA解链温度94℃之间。在这个温度区间内反应液中的水分很容易蒸发掉,结果造成反应体系的不稳定甚至反应体系中水分全部蒸发掉。这也是前人做PCR反应加入矿物油进行液封的原因
热盖温度105℃,超過水的沸点避免高温产生的水蒸气凝结在PCR管盖上,可以防止水分蒸发后对PCR反应体系造成较大影响是PCR反应成功的保证。
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PCR反应的时候,可以用矿物油加在反应液的表面这样可以防止反应液体的蒸发损失。现在新的仪器一般都是通过加热盖来起到这個作用加热盖可以预防反应液体在盖子上的冷凝集。确保反应尽量不损失
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