pcr会合成目的基因以外的pcr产物长度吗

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&&菌落PCR后的产物是目的基因还是真个质粒,为什么?
菌落PCR后的产物是目的基因还是真个质粒,为什么?
菌落PCR(colony PCR)可不必要提取基因组DNA,不必酶切鉴定,而是直接以菌体热解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增,省时少力。建议使用载体上的通用引物。通常利用此方法进行重组体的筛选或者DNA测序分析。最后的PCR产物大小是载体通用引物之间的插入片断大小。
&&1:最终的PCR产物大小为什么是通用引物之间的插入片段大小?为什么不是整个质粒的大小。
2: 设计的引物分上游引物和下游引物,上游引物结合反义链,下游引物结合正义链,扩增的片段怎么会使引物之间的插入片段。
还是没有完美解答我的问题,pcr克隆后是目的基因产物而不是整个质粒。是什么原因导致DNA聚合酶只在克隆目的基因后,就不在克隆了
嗯,我的那个图解释很清楚了,第三轮开始你需要的目的片段已经开始有了,之后浓度会更多,而原始的模板量相对来说越来越少
谢谢您,有需要我会联系您的
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提问:级别:大二来自:天津
回答数:1浏览数:
利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内 DNA 复制类似(如右图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。从理论上推测,
利用PCR技术扩增目的基因,其原理与细胞内 DNA 复制类似(如右图所示)。图中引物为单链DNA片段,它是子链合成延伸的基础。从理论上推测,第四轮循环产物中含有引物A的DNA片段所占的比例为
&提问时间: 09:18:05
最佳答案此答案已被选择为最佳答案,但并不代表问吧支持或赞同其观点
回答:级别:一级教员 10:58:49来自:河南省洛阳市
解析:第一轮循环后的两个DNA分子中有一个含有引物A,另一个含有引物B。
第二轮循环后的四个DNA分子则是由两个含有引物A和B,但其长短并不想等;另外两个DNA分子则是一个含有引物A,另一个含有引物B。
第三轮循环后的八个DNA分子中有六个含有引物A和B,且其中有四个长短相同,另外两个与第二轮循环产生的含引物A和B的DNA相同,还有两个DNA分子同第一轮循环产物。
第四轮循环后的16个DNA分子中有12个含有引物A和B且长短相同,另外四个则与第三轮循环后的其他四个DNA相同,即两个含有引物A和B但长短不同,另外两个分别含有引物A和引物B。
综上所述,含有引物A的共有12+2+1=15个,故选A.15/16
提问者对答案的评价:
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目的基因的PCR扩增扩增,基因,PCR扩增,目的基因,目的基因的,PCR,pcr,pcr扩增
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目的基因的PCR扩增
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3秒自动关闭窗口本题难度:0.60&&题型:选择题
(2016春o邗江区校级期中)用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时,得到以下电泳图谱.其中1号为DNA标准样液(Marker),10号为蒸馏水,PCR时加入的模板DNA如图所示.据此作出的分析,不合理的是(  )
A、PCR产物的分子大小在250-500bp之间B、3号样品为不含目的基因的载体DNAC、9号样品对应植株不是所需的转基因植株D、10号确定反应体系等对结果没有干扰
来源:2016春o邗江区校级期中 | 【考点】PCR技术的基本操作和应用.
(2016春o孝感期中)下面是将某细菌的基因A导入大肠杆菌内,制备“工程菌”的示意图:请据图回答:(1)获得A有两条途径:一是以A的mRNA为模板,在&&&&酶的催化下,合成互补的单链DNA,然后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA,从而获得所需基因;二是根据目标蛋白质的氨基酸序列,推测出相应的mRNA序列,然后按照碱基互补配对原则,推测其DNA的&&&&序列,再通过化学方法合成所需基因.(2)利用PCR技术扩增DNA时,需要在反应体系中添加的有机物质有&&&&、&&&&、4种脱氧核苷酸三磷酸和&&&&酶,扩增过程可以在PCR扩增仪中完成.(3)在基因工程中,利用大肠杆菌生产胰岛素时,构建的表达载体含有人胰岛素基因及其启动子,其中启动子的作用是&&&&.在用表达载体转化大肠杆菌时,常用&&&&处理大肠杆菌,其目的是使其成为&&&&细胞,有利于吸收重组DNA分子.为了检测胰岛素基因是否转录出了mRNA,可利用&&&&技术;为了检测胰岛素基因转录出的mRNA是否翻译成蛋白质,常用&&&&技术.
(2015春o新沂市期中)如图示基因工程在药物生产、基因治疗、植物抗性改良方面的应用,请据图回答下列问题:(1)获取上述各种目的基因的常用方法有人工合成法、反转录法,此外还可以从&&&&中获取,然后,再利用PCR技术进行大量扩增.(2)将目的基因导入受体细胞的方法因受体细胞的不同而不同,图中①过程一般采用&&&&法,④过程一般采用&&&&法.(3)因为转基因山羊要通过分泌乳汁来生产人的抗凝血酶Ⅲ,所以人的抗凝血酶基因要与转基因山羊的&&&&基因的启动子等重组起来.启动子是&&&&的识别、结合部位.(4)基因工程中除用到转基因技术外,还要用到其它的生物技术,②过程要用到&&&&技术,③过程要用到&&&&技术,⑤过程要用到&&&&技术.(5)目的基因的检测和鉴定首先在DNA和mRNA和水平上用&&&&法检测目的基是否转人和转录.其次还应在蛋白质水平上用相应抗体进行&&&&检测目的基因是否表达成功,最后在个体水平上对特定性状进行检测.
(2012o蚌埠一模)据报道,番茄红素具有一定的防癌效果,科学家将含有酵母S-腺苷基蛋氨酸脱羧酶基因(简称s基因)cDNA片段导入普通番茄植株,培育了番茄红素高的新品种.(1)获取cDNA片段的方法常采用&&&&.(2)为确保S基因在番茄中表达,构建的表达载体含有S基因及其启动子等,其中启动子的作用是&&&&.为了检测S基因是否转录出了mRNA,可用标记的&&&&作探针与mRNA杂交,该技术一般称为分子杂交技术.(3)假设S基因的一条链A和T的量为2400个,A和T的总量占该片段总碱基的60%,用PCR扩增该基因,该基因复制n次共要dGTP&&&&个.(4)将基因表达载体导入番茄的方法有农杆菌转化法和&&&&等.
解析与答案
(揭秘难题真相,上)
习题“(2016春o邗江区校级期中)用PCR方法检测转基因植株是否成功导入目的基因时,得到以下电泳图谱.其中1号为DNA标准样液(Marker),10号为蒸馏水,PCR时加入的模板DNA如图所示.据此作出的分析,不合理的是(  )PCR产物的分子大小在250-500bp之间3号样品为不含目的基因的载体DNA9号样品对应植株不是所需的转基因植株10号确定反应体系等对”的学库宝(/)教师分析与解答如下所示:
【分析】分析题图:PCR过程中可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段.4~9号是转基因植株理论上应包含目的基因结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果推测包含目的基因的片段大小应为250~500bp但9号PCR结果不包含250~500bp片段所以不是所需转基因植株.
【解答】解:A、PCR过程中可以通过设计特定的引物来扩增特定的DNA片段.4~9号是转基因植株理论上应包含目的基因结合2号野生型和10号蒸馏水组的结果推测包含目的基因的片段大小应为250~500bpA正确B、3号PCR结果包含250~500bp片段应包含目的基因B错误C、9号PCR结果不包含250~500bp片段所以不是所需转基因植株C正确D、10号放入蒸馏水可排除反应体系等对结果的干扰D正确.故选:B.
【考点】PCR技术的基本操作和应用.
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知识点讲解
经过分析,习题“(2016春o邗江区校级期中)用PCR方法检测转基因植株是否”主要考察你对
等考点的理解。
因为篇幅有限,只列出部分考点,详细请访问。
知识点试题推荐
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