疱疹病毒感染染后在3h收样 时间点的选取是从加入病毒液开始,还是病毒吸附1h过后再开始算?

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【求助】关于病毒感染不同时间点取样的疑问
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最近刚开始做病毒实验,有很多不太明白的地方,请高手解答。。实验中需要做到病毒感染后取不同时间点的感染细胞,用作磷酸化蛋白质的western,培养器皿用六孔板,需要取到0h、1h、2h、4h、8h、12h、24h、48h,操作步骤中需要将稀释后的病毒液接种到单层细胞上,37℃吸附1h,然后去病毒液,PH3.0的甘氨酸作用1min,再用pbs润洗三次,加入2%FBS的MEM培养液2ml,37℃培养。我有几个疑问:1.时间点的选取是从加入病毒液开始,还是病毒吸附1h过后再开始算?2.PH3.0的甘氨酸起什么作用的?能否省去吸附后的几个步骤,就是说可不可以在病毒吸附1h后直接加入培养液继续培养?3.不同时间点取得样品怎么处理?是把细胞冻在-20℃等全部取样一起裂解,还是取一次就裂解一次细胞然后把蛋白定量变性,-20℃保存?感觉对样品蛋白都有一定影响的,望指教!!!
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shun121212,你好!我最近也要做病毒试验,在病毒吸附2h后想去除未进入细胞的病毒,看到文献有用PH3.0的甘氨酸处理1min,正好看到你也曾经做过此类试验,想请教一下,你做的是什么病毒?PH3.0的甘氨酸的作用原理是什么?以及PH3.0的甘氨酸对病毒有没有选择性?非常感谢!盼回!
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腺病毒包装注意事项
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