817肉鸡打油苗油苗打多少最合适

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2018-01-20 00:43 标签： 817肉鸡打油苗

全球范围内最严重的家禽传染病の一也是我国所有鸡病中危害最大的一种，被国际兽疫局列为 A 类 传染病新城疫常呈败血症，主要特征是呼吸困难、下痢、神经机能紊亂、黏膜和粘膜出血该病发 病急、致死率高，对养禽业的发展构成严重的威胁预防该病最有效的措施是接种鸡新城疫疫苗，目 前鸡新城疫疫苗灭活疫苗主要为油乳剂灭活疫苗存在黏度高、不易吸收、副作用大等问题。通过改 变疫苗佐剂可以有效解决这个问题本研究通过采用新型无油佐剂替代矿物油佐剂制备新城疫灭活疫 苗，提高疫苗的安全性确保疫苗的效力。 本研究利用新型佐剂配制鸡新城疫灭活疫苗免疫 7 日龄SPF 鸡和商品817肉鸡打油苗，分别在免疫后不同 的时间翅静脉采血检测血清中新城疫病毒的 HI 抗体效价，评估新城疫新型佐剂滅活疫苗的免疫效力 1 材料与方法 1.1 1.1.1 试验用疫苗 新型佐剂新城疫灭活疫苗，简称新疫苗；新城疫油佐剂疫苗简称油苗；新城疫灭活疫苗商品苗。 1.1.2 试验动物 1 日龄商品817肉鸡打油苗购自华都孵化场；7 日龄SPF 鸡，购自梅里亚实验动物中心 1.1.3 1%的 SPF 鸡红细胞由本实验室制备。使用 10ml 注射器采血前先吸入 3ml 抗凝剂（肝素），翅静 脉采血至 10ml转移到 20ml 的离心管中，1500r/min离心 15min，利用pH7.2 的 PBS 缓冲液洗涤三 次制备新鲜的 1%的鸡血红细胞，4 ℃冰箱保存不超过 5d 新城疫血凝抑制标准检测抗原，购自中监所；油苗配制白油、司盘-80、吐温-80均达到分析纯级 别；新疫苗配制佐剂由本实验室洎行配制；无菌检验培养基，硫乙醇酸盐培养基 （TG ）、酪胨琼脂 （GA ）、 葡萄糖蛋白胨培养基（GP ） 156 实验研究 1.2 1.2.1 新疫苗的制备：将新城疫抗原，毒价为 108.8EID50/0.1ml与疫苗佐剂按照一定比例混合，乳化 30min 取样接种到GA、GP、TG 培养基，无菌检验合格后分装，4 ℃保存 油苗的配制：将白油与抗原按照 7:3 的比例进行混合，在其中加入适量的司盘-80 和吐温-80在均 质机中搅拌 30min，取一滴滴于盛有清水的平皿中油滴不扩散为准。取样接种到 GA、GP、TG 培养 基无菌检验合格后，分装4 ℃保存。 1.2.2 1.2.2.1 疫苗免疫 7 日龄SPF 鸡 将新疫苗、油苗和商品苗三种疫苗免疫 7 日龄SPF 鸡每组免疫 15 只，每只免疫 0.2ml同時设 置 5 只空白对照。免疫后 7d、14d、21d 、28d 、35d、42d 采血分离血清，检测新城疫 HI 抗体效价 1.2.2.2 疫苗免疫 1 日龄817肉鸡打油苗 25 μl 抗 原，并做 2~4 个重复孔然后将忼原进行 2 倍系列稀释，稀释后每孔在加入 25 μl PBS最后再加入 1%鸡红细胞悬液 25 μl，用微量振荡器混匀室温（约 20 度）静置 20~40

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