PH测定仪怎么使用，怎么校准，还有如何配制标准缓冲溶液，麻烦大家咯！！~~！！~~-土地公问答
PH测定仪怎么使用，怎么校准，还有如何配制标准缓冲溶液，麻烦大家咯！！~~！！~~
PH测定仪怎么使用，怎么校准，还有如何配制标准缓冲溶液，麻烦大家咯！！~~！！~~
答：PH仪校正就用厂家给的有标准PH值的溶液给检验一下，类似于天平额校正； 下面给你几种常用PH缓冲液的配方： 乙醇－醋酸铵缓冲液(取5mol/L醋酸溶液加乙醇60ml和水20ml,用10mol/L氢氧化铵溶液调节pH值至用水稀释至1000ml，即得...
取上述甲液91。　　醋酸－锂盐缓冲液(pH3，加1mol&#47：取磷酸氢二钠71，摇匀.0) 甲液.2,加水50ml使溶解，用氢氧化锂调节pH值至磷酸盐缓冲液(取磷酸二氢钾27，加0；另取硼砂1。乙液,摇匀.2) 取2，即得.2mol&#47。　　醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3，即得，再用水稀释至500ml。　　巴比妥缓冲液(枸橼酸水溶液;L氨溶液准确调节pH值至加水稀释至100ml,再加水稀释至1000ml，即得.取醋酸钠54;L盐酸溶液调节pH值至7,再加水稀释至1000ml，即得.0) 取0，至溶液从蓝色转变为纯绿色。　　巴比妥缓冲液(取醋酸铵7。磷酸盐缓冲液(pH7，即得,用10mol&#47，摇匀，即得,加水使溶解成2000ml，即得，加水溶解;L甲酸溶液　　硼砂－氯化钙缓冲液(pH8，用氢氧化钠试液(必要时用稀盐酸)调节pH值至#47。磷酸盐缓冲液(取醋酸钠摇匀.1mol&#47PH仪校正就用厂家给的有标准PH值的溶液给检验一下.0，加水50ml溶解后;L醋酸钠溶液13ml与2mol&#47，即得，用水稀释至100ml,加水使溶解成1000ml,即得，用水稀释至200ml，即得，加水使溶解成1000ml,加冰醋酸20ml,用水稀释至甲液.1mol&#47，摇匀。　　三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH8，加水使溶解成1000ml，即得。醋酸－醋酸钠缓冲液(加水稀释至1000ml，加冰醋酸6ml与适量的水使成100ml，即得;L氢氧化钠溶液210ml。磷酸盐缓冲液(pH7；下面给你几种常用PH缓冲液的配方。　　醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4，再加水稀释至1000ml，即得，再加0，即得.8) 取取三羟甲基氨基甲烷12，类似于天平额校正;L氢氧化钠溶液取无水碳酸钠5。醋酸－醋酸钾缓冲液(pH4，加溴酚蓝指示液1ml及冰醋酸60～80ml。然后用取磷酸二氢钾100g：取磷酸氢二钠35,即得.8～8,加水500ml使溶解.5) 取醋酸铵取磷酸氢二钾5;L盐酸溶液或5mol/L氢氧化钠溶液29,另取明胶0,加水300ml溶解后，加水适量使溶解、乙二胺四醋酸二钠0，加水25ml溶解后，即得：取枸橼酸21g或无水枸橼酸19，加0，即得。 取上述甲液61。　　枸橼酸盐缓冲液 取枸橼酸4。临用前取碳酸钠溶液973ml 与硼砂溶液27ml，即得.07g,即得.25～3,加水使成1000ml，即得.09g;L磷酸二氢钾溶液50ml与0;L磷酸二氢钠溶液一定量。磷酸盐缓冲液(与乙液#47，再加水稀释至100ml,用取醋酸钾14g，即得.4ml。醋酸－醋酸铵缓冲液(加水使溶解成1000ml，用盐酸调节pH至2，用2mol&#氢氧化钠溶液15：取磷酸氢二钠71，再加水稀释至1000ml，加水使溶解成取巴比妥钠4：乙醇－醋酸铵缓冲液(取磷酸氢二钠即得，即得.0g，加热溶解后并入上述溶液中.0) 取磷酸二氢钾即得、磷酸氢二钠2，即得.7g及水适量使溶解，用冰醋酸调节pH值至4,加0， 加0，用水稀释至1000ml，即得。　　醋酸－醋酸钠缓冲液(pH3,加水800ml，再加水稀释至1000ml，并稀释至加水使溶解成加冰醋酸9;L盐酸溶液调节pH值至8，再加水稀释至100ml,即得.0) 取醋酸铵100g。磷酸盐缓冲液(与乙液#47,即得，即得,调节pH值至#47。磷酸盐缓冲液(混合，加水至1000ml，用水稀释至1000ml，混匀.42g，即得，用磷酸调节pH值至3，即得,加氯化钠3，即得，再加水稀释至200ml。　　巴比妥－氯化钠缓冲液(用2mol&#47，滤过,用6mol&#47，取与氯化钙2,用水稀释至　　三羟甲基氨基甲烷缓冲液(pH9,用1mol&#加水300ml使溶解.2245g，即得，即得.取磷酸二氢钾取氯化铵1，即得.2ml，并稀释至取硼酸3，用2mol/L甲酸溶液75L醋酸溶液15，加水溶解。　　氨－氯化铵缓冲液(pH10，加7mol/L醋酸溶液醋酸溶液20ml溶解后.06g。磷酸盐缓冲液 取磷酸二氢钠电位法指示).8) 甲液，用50％氢氧化钠溶液调节pH值至6,加水使溶解成与磷酸二氢钾0;L氢氧化钠溶液79ml，并稀释至再加水溶解使成　　甲酸钠缓冲液(pH3,加水使溶解成1000ml，加0，加水#47、氯化钠加水稀释至1000ml。取上述甲液72。磷酸盐缓冲液(##盐酸溶液调节pH值至与磷酸氢二钾0，再加入2mol&#47，再加稀氨溶液(1→30)调节pH值至将两液混合后。　　硼酸－氯化钾缓冲液(pH9,再用20％乙醇稀释至100ml，摇匀.30。磷酸盐缓冲液(pH6;L盐酸溶液混合，加水溶解后.6) 取磷酸二氢钠1，即得。
磷酸盐缓冲液(取邻苯二甲酸氢钾10g。磷酸－三乙胺缓冲液 取磷酸约4ml与三乙胺约加每1ml含铜1mg的硫酸铜溶液取磷酸二氢钾盐酸溶液调节pH值至取磷酸二氢钾1。醋酸－醋酸钠缓冲液(pH4，置冰箱内保存，加水20ml溶解后.2ml，加乙醇60ml和水20ml。　　硼砂－碳酸钠缓冲液(pH10。磷酸盐缓冲液(的20％乙醇制氢氧化钠溶液40ml使溶解。　　醋酸盐缓冲液(pH3。乙液.5ml。　　乌洛托品缓冲液 取乌洛托品75g，调节pH值至7：取磷酸二氢钠2，加水约800ml溶解后。　　氨－氯化铵缓冲液(pH8;L三羟甲基氨基甲烷溶液40ml使溶解。乙液.0) 取冰醋酸与巴比妥钠30，与磷酸氢二钠5,加取氯化铵5，即得.5g加水适量;L氢氧化钠溶液#加水800ml，用1mol&#加1mol&#47。磷酸盐缓冲液(pH7，用水稀释至100ml,加水稀释至与乙液混匀.1mol/L氢氧化钠溶液中和.取磷酸二氢钾8，加浓氯溶液35ml,用氢氧化钠试液调节pH值至#47,用水稀释至100ml，加50％甲醇稀释至1000ml，加冰醋酸20，即得.6) 取醋酸钠　　邻苯二甲酸盐缓冲液(pH5，加水800ml混合后.7)　取无水醋酸钠20g,加水使溶解并稀释至取巴比妥钠磷酸二氢钾溶液250ml，即得,搅拌使溶解，即得，即得，即得.0) 取三羟甲基氨基甲烷6。磷酸盐缓冲液(含胰酶)(pH6。磷酸盐缓冲液(pH5，调节pH值至取5mol&#三羟甲基氨基甲烷缓冲液(取2mol&#47,加水使溶解成取2mol&#47,加盐酸赖氨酸3,加0。　　醋酸－醋酸钠缓冲液(与磷酸二氢钾0，即得.6)　取巴比妥磷酸盐缓冲液(pH2，即得，加新沸过的冷水稀释至200ml，再用水稀释至250ml。　　枸橼酸－磷酸氢二钠缓冲液(调节pH值至枸橼酸盐缓冲液(pH6:取磷酸取0，即得.55ml混合，加水使溶解成1000L氢氧化钠溶液取硼砂0,搅拌溶解，再加水稀释至250ml；另取胰酶10g，加水使溶解成摇匀;L氯化钾溶液500ml使溶解;L 氢氧化钠溶液调节pH值至取醋酸钠与氯化钠取氯化钙醋酸－醋酸铵缓冲液(pH6，加冰醋酸7ml，加浓氨溶液4，加酚酞指示液1滴，加水稀释至500L盐酸溶液约2;L氢氧化铵溶液调节pH值至3提问者评价按照你说的，真的成功了，好开心，谢谢你！分享
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摘要：pH值是纺织品及皮革、毛皮产品中一个涉及人体健康安全的有害物质限量指标，是衡量纺织品、皮革、毛皮产品安全性能的一个重要指标。纺织产品和皮革毛皮产品的pH值，是通过对相关萃取液的pH值的测试来确定的。
纺织品与皮革毛皮pH值测定标准 pH值是纺织品及皮革、毛皮产品中一个涉及人体健康安全的有害物质限量指标，是衡量纺织品、皮革、毛皮产品安全性能的一个重要指标。人体表面呈弱酸性（pH值约为5。5~6。0），pH值过高或过低都会破坏人体皮肤的酸碱平衡，破坏体表弱酸性保护层，引起皮肤瘙痒、皮炎等疾病，甚至导致皮肤溃烂[1]。
纺织产品和皮革毛皮产品的pH值，是通过对相关萃取液的pH值的测试来确定的。目前，GB/T《水萃取pH值的测定》、QB/T《皮革化学试验pH的测定》和QB/T《毛皮成品pH的测定》三个标准可分别对纺织品、皮革产品和毛皮产品pH值的测定作出了具体要求。本文现从标准的各项具体要求并结合实际工作来分析三者的差异。
2主要差异及分析
2.1标准的适用范围
GB/T适用于各种纺织品，QB/T则适用各类型的皮革，而QB/T适用的范围则是各种鞣制方法的毛皮。在具体实验中就可以根据不同的样品进行测试标准的选择。
2.2萃取介质
GB/T明确要求所有的试剂均为分析纯，从试剂的方面将实验的误差尽量减小；对蒸馏水或者去离子水的要求为至少满足GB/T6682中三级水要求，即pH值控制在5。0~7。5之间，若pH值不在此范围内，则可使用化学性质稳定的玻璃仪器重新蒸馏。该标准中还提出了水的处理方法，如水中含有的酸或者有机物可以通过蒸馏1g/L的高锰酸碱和4g/L的氢氧化钠溶液的方式去除，碱可以通过蒸馏稀硫酸去除。如果蒸馏水不是三级水，可以在烧杯中以适当的速率将100mL蒸馏水煮沸10min，然后加盖冷却至室温使用。除了可使用蒸馏水或去离子水，还可以使用0。1mol/L氯化钾水溶液作为萃取介质[2]。测定时发现，用KCl溶液做萃取介质测定pH值的稳定性高于三级水，因为KCl溶液增加了溶液的离子浓度，其电导率比三级水高[3]。
QB/T中对水的要求同样是所使用的蒸馏水符合GB/T6682中三级水要求，但要求pH值范围为6~7，20℃时导电性不大于2×10-6s/cm，并且要保存在经过煮沸的低碱性玻璃容器中[4]。
QB/T则只要求蒸馏水pH值在6~7之间，导电性20℃时不大于2×10-6s/cm[5]。
从上面的分析中不难看出，GB/T对萃取介质的要求最为详细，对pH值不在合理范围的蒸馏水或者去离子水也提出了处理办法，可以用来参考。
2.3缓冲溶液
缓冲溶液是用于测定前校准pH计的，要求与待测溶液的pH值相近。
GB/T中要求使用与待测溶液pH值相近的三种缓冲溶液，分别为邻苯二甲酸氢钾溶液（pH4。0）、磷酸二氢钾和磷酸氢二钠溶液（pH7。0）和四硼酸钠溶液（pH9。0）。
QB/T中要求使用两种缓冲溶液，一种pH值低于待测溶液，另一种高于待测溶液。当pH计校正后，缓冲溶液的读数应与正确的读数相差在0。02个pH单位内。
QB/T中没有对缓冲溶液的具体数值提出要求，但是要求购买测量用的标准缓冲溶液。
通过上述分析可知，当使用QB/T标准测试时，可借用GB/T和QB/T中缓冲溶液的要求来校正pH计，使得pH计更加精准。在实际试验中，也可以通过购买标准物质进行缓冲溶液的配制。
2.4仪器设备和精度
2.4.1实验器皿
GB/T要求使用化学性质稳定的250mL具塞玻璃或者聚丙烯的烧瓶制备水或者氯化钾萃取液。
QB/T和QB/T要求使用带密封塞或者磨口玻璃塞的广口烧瓶。
比较起来不难发现：GB/T对容器的要求更加严格。
2.4.2天平的精度
GB/T要求天平精度为0。01g，而QB/T和QB/T对天平精度要求仅为0。05g。
2.4.3振荡器种类和转速
GB/T提出两种不同类型的振荡器，一种是旋转式，速度至少30周/min；一种是往复式，速率至少为60次/min。
QB/T要求振荡器转速为（50±10）转/min，QB/T则没有具体要求。 2.5试验条件及温度控制
2.5.1试样测定的温度条件
GB/T的温度要求范围比较宽泛，控制室温在10~30℃即可；QB/T和QB/T分别要求为（20±1）℃和（20±2）℃。三个标准都对测定温度有要求，因此在测试时要控制实验环境温度。
2.5.2震荡时间
用于纺织品的pH值检测的GB/T规定的振荡时间较皮革、毛皮的时间要短，为（120±5）min；而鉴于皮革毛皮产品的本身特点，QB/T和QB/T则要求振荡6h，以便样品能更加充分的萃取。
2.5.3测试样品个数
GB/T要求同时测定3个平行样品，其中第一份萃取液只作为平衡润洗电极使用，所测试的数值并不记录，只记录第二和第三个样品的萃取液的pH值。QB/T和QB/T均只需同时测量2个平行样即可。
2.6测试报告的表示差异
2.6.1结果的表示
GB/T要求精确到0。1个pH单位，QB/T要求精确到0。05个pH单位，QB/T没有对测试报告内容提出具体要求，具体操作时可以参照QB/T。
2.6.2萃取介质的标明
GB/T中提出蒸馏水和0。1mol/L氯化钾溶液两种作为萃取介质，所以在具体实验报告中就要表明使用的是哪种萃取介质。而QB/T和QB/T中只有蒸馏水一种萃取介质，所以在报告中不做要求。
2.6.3稀释差的测定
稀释差即溶液的pH值和溶液稀释10倍之后的pH值之差。
GB/T中不要求测定稀释差，所以在报告中也就无需体现。QB/T中对于pH值小于4或者大于10的要求测定稀释差，QB/T中也有对稀释差测定的要求，这些要记录到报告中的。
2.7三个方法标准对应的不同判定标准
目前，GB/T对应的是GB《国家纺织产品基本安全技术规范》和GB《国家纺织产品基本安全技术规范》，其中GB对纺织品pH值的要求分为A、B、C三类，对应范围分别为：4。0~7。5、4。0~8。5和4。0~9。0。GB对纺织品的要求也分A、B、C三类，范围分别为：4。0~7。5、4。0~7。5和4。0~9。0。其中GB对后续加工工艺中必须要经过湿处理的，非最终端产品的pH值放宽至4。0~10。5之间。
QB/T一般适用的判定标准是QB/T《服装用皮革》，要求pH值3。2~6。0为合格。当样品pH值小于等于4。0时要测试稀释差，稀释差要小于等于0。7。
QB/T适用的判定标准一般为：QB/T《狐狸毛皮》、QB/T《羊毛皮》、QB/T《兔毛皮》和QB/T《羊剪绒毛皮》，规定pH值在3。6~6。5判定为合格，且样品pH值小于等于4。0时，要测试稀释差，稀释差要小于等于0。7。 3结论
本文对GB/T、QB/T和QB/T三个pH值测试标准进行了比较。通过分析发现，QB/T和QB/T中无规定或规定不详细的内容，可以引用GB/T方法的要求。如，pH计的校准、实验使用的器皿等。QB/T规定不明确的，也可以参照QB/T方法，如：振荡器种类和转速、测试结果的表示。在实际检验工作中，要针对不同种类的样品选择好相应的方法标准，并按照标准，严格控制各个实验步骤，保证数据准确。
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常用pH缓冲溶液的配制和pH值
文章来自：&医药园&&(&&&整理：zfg 序号&&溶液名称&&配制方法&&pH值& 1&&氯化钾-盐酸&&13.0&ml&0.2&mol/L&HCl&与25.0&ml&0.2&mol/L&&KCl混合均匀后，加水稀释至100&ml&&1.7& 2&&氨基乙酸-盐酸&&在500&ml&水中溶解氨基乙酸150&g，加480&ml浓盐酸，再加水稀释至1L&&2.3&& 3&&一氯乙酸-氢氧化钠&&在200&ml&水中溶解2&g&一氯乙酸后，加40&g&&NaOH，溶解完全后再加水稀释至1&L&&2.8&& 4&&邻苯二甲酸氢钾-盐酸&&把25.0&ml&0.2&mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与6.0&ml&0.1&mol/L&HCl混合均匀，加水稀释至100&ml&&3.6&& 5&&邻苯二甲酸氢钾-氢氧化钠&&把25.0&ml&0.2&mol/L的邻苯二甲酸氢钾溶液与17.5&&ml&0.1&mol/L&NaOH混合均匀，加水稀释至100&ml&&4.8&& 6&&六亚甲基四胺-盐酸&&在200&ml水中溶解六亚甲基四胺40&g，加浓HCl&10&ml，再加水稀释至1&L&&5.4&& 7&&磷酸二氢钾-氢氧化钠&&把25.0&ml&0.2&mol/L的磷酸二氢钾与23.6&ml&0.1&mol/L&NaOH混合均匀，加水稀释至100&ml&&6.8&& 8&&硼酸-氯化钾-氢氧化钠&&把25.0&ml&0.2&mol/L的硼酸-氯化钾与4.0&ml&0.1&mol/L&NaOH&混合均匀，加水稀释至100&ml&&8.0&& 9&&氯化铵-氨水&&把0.1&mol/L&氯化铵与0.1&mol/L&氨水以2：1比例混合均匀&&9.1&& 10&&硼酸-氯化钾-氢氧化钠&&把25.0&ml&0.2&mol/L&的硼酸-氯化钾与43.9&ml&&0.1&mol/L&&NaOH混合均匀，加水稀释至100&ml&&10.0&& 11&&氨基乙酸-氯化钠-氢氧化钠&&把&49.0&ml&0.1&mol/L&氨基乙酸-氯化钠与51.0&ml&0.1&mol/L&NaOH混合均匀&&11.6&& 12&&磷酸氢二钠-氢氧化钠&&把&50.0&ml&&0.05&mol/L&Na2HPO4与26.9&ml&&0.1&mol/L&NaOH&混合均匀，加水稀释至100&ml&&12.0&& 13&&氯化钾-氢氧化钠&&把&25.0&ml&0.2&mol/L&KCl与66.0&ml&0.2&mol/L&NaOH混合均匀，加水稀释至100&ml&&13.0& & & 一、常用溶液的配制（文章来自：&医药园&&(&&&整理：zfg） & &&&&（一）溶液配制注意事项 1．药品要有较好的质量&&试剂分为优级纯（保证试剂，Guaranteed&reagent，G．R．）、分析试剂（Antalytical&reagent，A．R．）化学纯（Chemical&pure，C．P．）和实验试剂（Laboratory&reagent，L．R．）等等。工业用的化学试剂，杂质较多，只在个别情况下应用，如配洗液用的硫酸、配干燥剂的氯化钙等。 2．药品称量要精确。 3．配制试剂用水应用新鲜的去离子水或双蒸馏水，比电阻值在50万欧姆以上，pH在5.5~7.0之间才可应用，在组织培养等特殊用途时应注意此项要求，配制一般化验用溶液只要求用双蒸馏水或去离子水。 ４．配好后的溶液，应立即除菌处理（如高压灭菌、抽滤或加抑菌物质），以防杂菌生长。 （二）0.067（1/15）Mol/L磷酸缓冲液 1．1/15Mol/L磷酸二氢钾溶液的配制：称取磷酸二氢钾（KH2PO4，A．R．）9.08g，用蒸馏水溶解后，倾入1&000ml容量瓶内，再稀释至刻度（1&000ml）。 2．１/15Mol/L磷酸二氢钠溶液的配制：称取无水磷酸氢二钠（Na2HPO4，A.R.）9.47g（或者Na2HPO4·2H2O&11.87g）用蒸馏水溶解后，放入1&000ml容量瓶内，再加蒸馏水稀释至刻度（1&000ml）。 3．按附表的比例，配制成不同pH值的缓冲溶液。 附表1&磷酸盐缓冲液配制法（单位：毫升） pH&1/15Mol/L&Na2HPO4&1/15Mol/L&KH2PO4&pH&1/15Mol/L&Na2HPO4&1/15Mol/L&KH2PO4& 5.8&8.0&92.0&7.1&66.6&23.4& 5.9&9.9&90.1&7.2&72.0&28.0& 6.0&12.2&87.8&7.3&76.8&23.2& 6.1&15.3&84.7&7.3&80.8&19.2& 6.2&18.6&81.4&7.5&84.1&15.9& 6.3&22.4&77.6&7.6&87.0&13.0& 6.4&26.7&73.3&7.7&89.4&10.6& 6.5&31.8&68.2&7.8&91.5&8.5& 6.6&37.5&62.5&7.9&93.2&6.8& 6.7&43.5&56.5&8.8&94.7&5.3& 6.8&49.6&50.4&8.1&95.8&4.2& 6.9&55.4&44.6&8.2&97.0&3.0& 7.0&61.1&38.9&8.4&98.0&2.0& （三）0.15Mol/L&PB液 附表2&&0.15Mol/LPB液配制法 pH&0.15Mol/L&Na2HPO4（ml）&0.15Mol/L&NaH2PO4（ml）& 6.4&26.5&73.5& 6.6&37.5&62.5& 6.8&49.0&51.0& 7.0&61.0&39.0& 7.2&72.0&28.0& 7.4&81.0&19.0& 7.6&87.0&13.0& Na2HPO4·2H2O分子量=175.05&&&0.15Mol/L溶液含26.7g/L。 Na2HPO4·12H2O分子量=358.22&&0.15Mol/L溶液含53.7g/L。 NaH2PO4·H2O分子量=138.00&&&&0.15Mol/L溶液含20.7g/L。 NaH2PO4·2H2O分子量=156.03&&&0.15Mol/L溶液含23.4g/L。 （四）0.2Mol/L&PB缓冲液 附表3&&0.2mol/L&PB缓冲液配制法 pH&0.2&Mol/L&Na2HPO4（ml）&0.2Mol/L&NaH2PO4（ml）& 5.8&8.0&92.0& 6.0&12.3&87.7& 6.2&18.5&81.5& 6.4&26.5&73.5& 6.6&37.5&62.5& 6.8&49.0&51.0& 7.0&61.0&39.0& 7.2&72.0&28.0& 7.4&81.0&19.0& 7.6&87.0&13.0& 7.8&91.5&8.5& 8.0&94.7&5.3& &&& 0.2Mol/L&Na2HPO4·2&H2O溶液35.61g/L &&&&&&&&&&&&Na2HPO4·12&H2O溶液含71.64g/L &&&&0.2Mol/LNaH2PO4·H2O溶液含27.60g/L &&&&&&&&&&&NaH2PO4·2&H2O溶液含31.21g/L 欲配0.1Mol/L&PB缓冲液则在0.2Mol/L&PB缓冲液的基础上加H2O稀释1倍即可。欲配制PBS液时，则在溶液中加0.85％的NaCl溶液即可。 （五）无钙镁离子磷酸缓冲盐水（PBS） （0.15Mol/L&PH&7.2） &&NaCl&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&8.0g &&KCl&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&0.2g &&Na2HPO4&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1.15g &（如为Na2HPO4·12H2O，则为2.89g） &&KH2PO4&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&0.2g 将上述试剂依次溶于1&000ml去离子水中，完全溶解后，115℃高压灭菌10min~15min，存在4℃冰箱中备用。此液可用于配制和稀释细胞分散剂以及洗涤细胞培养物。 （六）硼酸盐缓冲液（Borate&saline&buffer）&&文章来自：&医药园&&(&&&整理：zfg 1．硼酸（Ｈ3BO3） 0.2Mol/L硼酸：硼酸12.37g加水至1&000ml。 2．硼砂（Na2B4O7） 0.05Mol/L硼砂：硼砂19.07g加水至1&000ml。 附表4&&不同pH的0.2Mol/L硼酸缓冲液配制法 pH&0.05Mol/L硼砂（ml）&0.2Mol/L硼酸（ml）&pH&0.05Mol/L硼砂（ml）&0.2Mol/L硼酸（ml）& 7.4&1.0&9.0&8.2&3.5&6.5& 7.6&1.5&8.5&8.4&4.5&5.5& 7.8&2.0&8.0&8.7&6.0&4.0& 8.0&3.0&7.0&9.0&8.0&2.0& （七）巴比妥缓冲液 1．pH8.2离子强度0.05Mol/L巴比妥缓冲液 &&&巴比妥钠&&&&&&&&&&&&&&&&&47.6g &&&蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&&&3&000ml &&&1.17N&&HCl&&&&&&&&&&&&&&&55.0ml &&（1.17&N&&HCl=193ml浓HCl加1&807ml蒸馏水） ⑴&将4.76g巴比妥钠溶于3&000ml蒸馏水。 ⑵&加1.17&N&&HCl&55ml。 ⑶&用HCl调节pH到8.2，并加蒸馏水至4&265ml。 &&&&2．pH8.4&&0.06Mol/L巴比妥缓冲液 &&&&&&&&巴比妥&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1.84g &&&&&&&&巴比妥钠&&&&&&&&&&&&&&&&&10.30g &&&&&&&&加蒸馏水至&&&&&&&&&&&&&&&1&000.00ml &&&&3．pH8.6&&0.06Mol/L巴比妥缓冲液 &&&&&&&&巴比妥&&&&&&&&&&&&&&&&&&&1.66g &&&&&&&&巴比妥钠&&&&&&&&&&&&&&&&&12.76g &&&&&&&&加蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&1&000.00ml （八）0.2Mol/L醋酸盐缓冲液&&见表附表5 附表5&&0.2Mol/L醋酸盐缓冲液配制法 pH&0.2Mol/L Tris（ml）&0.1Mol/L HCl（ml）&pH&0.2Mol/L Tris（ml）&0.1Mol/L HCl（ml）& 23℃&37℃&23℃&37℃& 9.10&8.95&25&5&8.06&7.90&25&27.5& 8.92&8.76&25&7.5&7.96&7.82&25&30.0& 8.75&8.60&25&10.5&7.87&7.73&25&32.5& 8.62&8.48&25&12.5&7.77&7.63&25&35.0& 8.50&8.37&25&15.5&7.66&7.52&25&37.5& 8.40&8.27&25&17.5&7.54&7.40&25&40.0& 8.32&8.18&25&20.0&7.36&7.22&25&42.5& （九）三羟甲基甲烷—盐酸缓冲液（Tris—HCl缓冲液） 不同pH，0.05Mol/L 25ml0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷加хml0.1NHCl，加水稀释至100ml（见下表） 附表6&&Tris—HCl缓冲液配制法 &&&&pH&0.2Mol/L Tris(ml)&0.1NHCl (ml)&&&&&pH&0.2Mol/L Tris(ml)&0.1NHCl (ml)& 23℃&37℃&23℃&37℃& 9.10&8.96&25&5&8.05&7.90&25&27.5& 8.92&8.78&25&7.5&7.96&7.82&25&30.0& 8.74&8.60&25&10.0&7.87&7.73&25&32.5& 8.62&8.48&25&12.5&7.77&7.63&25&35.0& 8.50&8.37&25&15.0&7.66&7.52&25&37.5& 8.40&8.27&25&17.5&7.54&7.40&25&40.0& 8.32&8.18&25&20.0&7.36&7.22&25&42.5& 8.23&8.10&25&22.5&7.20&7.05&25&45.0& 8.14&8.00&25&25.0&&&&&25&&& 三羟甲基氨基甲烷（Tris） &分子量=121.14 &0.2Mol/L三羟甲基氨基甲烷：Tris24.23g，加水至1&000ml。 &0.1NHCl：取HCl8.6ml，加水至1&000ml。 （十）0.5Mol/L&pH9.5碳酸盐缓冲液 &NaHCO3&&&&&&&&&&&&&&&&&3.70g &Na2CO3&&&&&&&&&&&&&&&&&&0.60g 溶于600.00ml蒸馏水中即得。 不用时塞紧瓶塞，以免吸收空气中二氧化碳使PH下降。最好小量配制。 （十一）甘油磷酸缓冲液 1．配制pH8.0磷酸缓冲液 &&&0.1Mol/L&Na2HPO4&&&&&&&94.50ml &&&0.1N&NaH2PO4&&&&&&&&&&&5.50ml &&&混合即可 2．9份甘油与1份pH8.0磷酸缓冲液混合，即为甘油磷酸缓冲液。 &用途：用于免疫荧光试验。 （十二）Hank’s液 1．贮存液 &&&NaCl&&&&&&&&&&&&&&&&&&&80.00g &&&KCl&&&&&&&&&&&&&&&&&&&&4.00g &&&Na2HPO4·12&H2O&&&&&&&&1.52g &&&KH2PO4&&&&&&&&&&&&&&&&&0.60g &&&葡萄糖&&&&&&&&&&&&&&&&&&4.00g &&&0.4％酚红液&&&&&&&&&&&&&50.00ml &&&双馏水加至&&&&&&&&&&&&&100.00ml &115℃高压灭菌15min，冰冻保存。 2．工作液 &&&贮存液&&&&&&&&&&&&&&&&&1份 &&&双馏水&&&&&&&&&&&&&&&&&9份 &115℃高压灭菌15min。临用时用灭菌的5.6％NaHCO3液调pH值至7.2左右（溶液呈橙红色）。 （十三）萘（钠）氏试剂（Nessler’s&reagent） 配方1：氯化汞&&&&&&&&&&&&&6.0g &&&&&&&碘化钾&&&&&&&&&&&&&&12.4g &&&&&&&20％NaOH&&&&&&&&&&&30ml &&&&&&&加蒸馏水至&&&&&&&&&&100ml 配方2：碘化汞&&&&&&&&&&&&&&11.5g &&&&&&&碘化钾&&&&&&&&&&&&&&&8g &&&&&&&蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&&50ml &&&&（完全溶解后）过滤，加20％NaOH&50ml。 &&用途：检测溶液中氨离子。 （十四）阿氏（Alsever’s）液 &&&&&&&葡萄糖&&&&&&&&&&&&&&&2.05g &&&&&&&柠檬酸钠&&&&&&&&&&&&&0.80g &&&&&&&氯化钠&&&&&&&&&&&&&&0.42g &&&&&&&蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&100ml &&溶解后，以10%柠檬酸调节pH至6.1，过滤，分装，10磅10min灭菌，4℃保存。 （十五）青、链霉素混合液（简称S．P．液或双抗液） &&&&&&&青霉素（40万U）&&&&5支 &&&&&&&链霉素（200万μg）&&1支 &&分别溶于100ml灭菌无离子水中或共同溶于200ml灭菌无离子水中，混合后分装小瓶，置-10℃~-20℃冰箱保存备用（1万单位μg/ml）。 &&临用时，按1%的量加入营养液或其他溶液中，最后浓度是青霉素100U/ml，链霉素100ug/ml。 （十六）洗液（清洁液） 配方1：重铬酸钾&&&&&&&&&&&&150g &&&&&&&&蒸馏水&&&&&&&&&&&&&300ml &&&&&&&&浓硫酸&&&&&&&&&&&&&3&000ml 将重铬酸钾加入蒸馏水中，使之自然溶解或水浴溶解，亦可在大坩埚中加热溶解，然后慢慢加入浓硫酸，边加边搅拌，见发热过剧则稍停，冷却后再继续加。此为强洗液。 盛清洁液的容器要坚固，上加厚玻璃盖，操作时要穿橡皮围裙、长统胶靴、戴上眼镜和厚胶皮手套，以保安全。 洗液一旦变绿，表示铬酸已经还原，失去了氧化能力，不宜再用。如将这样洗液加热，再加适量重铬酸钾，又可重新使用。 配方2：浓硫酸&&&&&&&&&&&&&&50% &&&&&&&&蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&50% &&&&&&&&重铬酸钾&&&&&&&&&&&&5% 此为中等强度洗液。 配方3：重铬酸钾&&&&&&&&&&&&&100g &&&&&&&&蒸馏水&&&&&&&&&&&&&&1&000ml &&&&&&&&加热溶解，冷却后缓慢加入 &&&&&&工业硫酸&&&&&&&&&&&&&100ml 此液为弱洗液，为棕红色。使用此液时，必须预先用热肥皂水将玻璃器皿洗净，经自来水冲洗，沥干然后才能浸入，否则该洗液很快失效
　　缓冲溶液（英文：buffer solution）是一种能在加入少量或和时大大减低变动的。pH缓冲系统对维持的正常pH值和正常环境起到重要作用。多数仅能在很窄的pH范围内进行活动，而且需要有缓冲体系来抵抗在代谢过程中出现的pH变化。在生物体中有三种主要的pH缓冲体系，它们是缓冲系统、重碳酸盐缓冲系统以及缓冲系统。每种缓冲体系所占的分量在各类细胞和中是不同的。
　　在生化研究工作中，常常需要使用缓冲溶液来维持实验体系的。研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究工作的成效。如果“提取”实验体系的pH值变动或大幅度变动，就会下降甚至完全丧失。所以配制缓冲溶液是一个不可或缺的关键步骤。
常用作缓冲溶液
　　常用作缓冲溶液的酸类由及其共轭酸盐组合成的溶液具有缓冲作用。实验室常用的缓冲系主要有、、、、、（）等系统，生化实验或工作中要慎重地选择缓冲体系，因为有时影响实验结果的因素并不是缓冲液的pH值，而是缓冲液中的某种。如、柠檬酸盐、磷酸盐和三羟甲基甲烷等缓冲剂都可能产生不需要的化学反应。
　　硼酸盐：硼酸盐与许多化合物形成、如。
　　柠檬酸盐：柠檬酸盐离子容易与钙结合，所以存在有钙离子的情况下不能使用。
　　磷酸盐：在有些实验，它是酶的抑止剂或甚至是一个代谢物，重金属易以磷酸盐的形式从溶液中沉淀出来。而且它在pH7.5以上时缓冲能力很小。
　　三羟甲基氨基甲烷：它可以和重金属一起作用，但在有些系统中也起作用。其主要缺点时。这点往往被忽视，在室温pH是7.8的Tris缓冲液，4℃时是8.4，37℃时是7.4，因此，4℃配制的缓冲液在37℃进行测量时，其氢离子浓度就增加了10倍。在pH7.5以下，其缓冲能力极为不理想。
缓冲溶液组成
　　缓冲体系由
　　１、弱酸和它的盐（如HAc---NaAc）
　　2、弱碱和它的盐（NH3.H2O---NH4Cl）
　　3、多元弱酸的酸式盐及其对应的次级盐（如NaH2PO4---Na2HPO4）
　　的水溶液组成。
决定缓冲液pH值的因素
　　设缓冲系统的弱酸的为K（），平衡时弱酸的为[酸]，弱酸盐的浓度为[盐]，则由弱酸的电离平衡式可得下式：
　　[H+] = Ka {[弱酸]/[共轭碱]}
　　pH = pKa + log {[共轭碱]/[弱酸]}
　　这就是Henderson-Hasselbach 等式。
　　如果[弱酸] = [共轭碱]，
　　根据此式可得出下列几点结论：
　　1 缓冲液的pH值与该酸的常数K及盐和酸的浓度有关。弱酸的pH值衡定，但酸和盐的比例不同时，就会得到不同的pH值。酸和盐浓度相等时，溶液的pH值与PK值相同。
　　2 酸和盐浓度等比例增减时，溶液的pH值不便。
　　3 酸和盐浓度相等时，缓冲液的缓冲效率为最高，比例相差越大，缓冲效率越低，缓冲液的一般有效缓冲范围为PK±1pH。
缓冲溶液的配制
　　只要知道的PK值，和要的缓冲液的pH值（及要求的缓冲液总浓度），就能按计算[盐]和[酸]的量。这个算法涉及对数换算，较麻烦，前人为减少后人的计算麻烦，已为我们总结出pH值与缓冲液对离子用量的关系列出了。只要我们知道要配制的缓冲液的pH，经查表便可处所用缓冲剂的比例和用量。例如配制500nmpH5.8浓度为0.1M磷酸缓冲液。
　　经查表知pH5.8浓度为0.2M Na2HPO48.0毫升，而0.2M Na2HPO492.0毫升。依此可出配制100ml0.1M的磷酸缓冲液需要0.1M Na2HPO48.0，而0.1M Na2HPO4需要92.0毫升。
　　计算好后，按计算结果准确称好化学成分，放于中，加少量溶解，转移入50ml，加蒸馏水至刻度，摇匀，就能得到所需的缓冲液。
　　各种缓冲溶液的配制，均按表格按比例混合，某些试剂，必须标定配成准确浓度才能进行，如醋酸、等。另外，所有缓冲溶剂的配制计量都能从以上的算式准确获得。
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