为何4K电影不采用U盘作为慢病毒载体构建

PAX2和包膜质粒p MD2.G共同转染293 T细胞,包装表達IκBα-DN的重组慢病毒,并用梯度稀释法检测病毒滴度以慢病毒IκBα-DN感染293 T细胞,通过免疫印迹检测IκBα蛋白的表达量。将慢病毒IκBα-DN感染已转染有NF-κB虫荧光素酶报告质粒的293 T细胞,24 cells,HUVECs),以检测IκBα-DN在NF-κB信号通路中的功能。结果:限制性内切酶鉴定以及核酸序列比对证实重组质粒p CDH-IκBα-DN构建成功通过三质粒包装系统包装表达IκBα-DN的重组慢病毒,病毒滴度约为3×107efu/m L。以慢病毒IκBα-DN感染293 T细胞,免疫印迹结果表明胞质中IκBα蛋白的表达量明显升高。虫荧光素酶报告实验结果提示,重组慢病毒介导的IκBα-DN能有效抑制NF-κB的活性在表达KSHV v FLIP的HUVECs中,IκBα-DN也能显著减弱NF-κB通路信号。结论:成功构建的含IκBα-DN序列的慢病毒能够有效地感染293 T细胞和内皮细胞,且初步结果提示IκBα-DN能增加胞质内IκBα的含量,并进一步抑制NF-κB信号的传递

苐25卷第1 20巧年1月 江苏大学学报〔医学版) 。““1寸Jiangsu University (Medicine Edition) Vol. 25 No. 1 Jan. 20巧 显性负相重组慢病毒慢病毒载体构建的构建及其 在 NF KB信号通路中的功能验证 路尧,严沁卢春 《南京医科大学病原生物学系,江苏南京2 [ 00四〕 巨的:构建表达显性负相结构丨K 4》N 冫的重组慢病毒慢病毒载体构建并检测其对 核转錄因子、B巛“1。;“ “- kappa NF*B)信号通路的影响方法:扩增片段并插入至 CMV吓主Fl慢病毒载体构建中将构建的pCDH4KBa-DN重组质粒与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.〔;共同轉染293 T细胞包装表达的重组慢病毒,并用梯度稀释法检测病毒滴度以慢病毒感染293 T细 胞通过免疫印迹检测蛋白的表达量将慢病毒 感染已转染有虫荧光素酶报告质粒的293 T 细胞,24 h后检测》N对活性的影响进一步用慢病毒感染表达卡波氏肉瘤病毒、这“一““、sociated h。叩巛。、,KSHV)编碼的病毒FHCE抑制蛋白(击FHCE、F凵p〕的人脐静脉内庋细胞株〔艹凵]冖n南山a [ cells,HUVECs)'以检测信号通路中的功能结果:限制性 构建成功通过三质粒包装系统包裝表达 内切酶鉴定以及核酸序列比对证实重组质粒的DH N IKBu-DN 重组慢病毒病毒滴度约为3 × 1伊以慢病毒N感染293 T细胞,免疫印迹结果表明胞质中醑白的表达量明显升高虫荧光素两报告实验结果提示重组慢病毒介导的辰4》N觥有效抑制的活性在表达KSHV正凵p的HUVECs中,N也能显著减弱NF*B通路信号结论:荿功构建的含丨K丬〕N序列的慢病毒 能够有效地感染293

慢病毒慢病毒载体构建可稳定表達构建稳转株,缺点是慢病毒载体构建容量小4K以内

真核慢病毒载体构建、腺病毒慢病毒载体构建是不行的,瞬转

还有腺相关病毒可鉯表达相对长时间,但慢病毒载体构建容量也不大

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