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重新安装浏览器,或使用别的浏览器新人求助:菌液PCR后提质粒鉴别的目的是什么(提质粒,菌液,质粒提取,条带) - DNA技术 - 生物秀
标题: 新人求助:菌液PCR后提质粒鉴别的目的是什么(提质粒,菌液,质粒提取,条带)
摘要: [新人求助:菌液PCR后提质粒鉴别的目的是什么(提质粒,菌液,质粒提取,条带)] 各位大侠,请问在T-A克隆后做PCR鉴定如果没有条带的话,是不是有必要做一下质粒提取?(在PCR不稳定的条件下)质粒提取后直接跑胶的话是什么样子的?有插入片段的质粒条带和空载条带区别是什么?怎么从质粒提取的电泳图上看出哪个是插入目的条带的样品?新手提问,见笑,谢过各位了! 关键词:[质粒提取 条带 提质粒 菌液 克隆 目的条带 质粒]……
各位大侠,请问在T-A克隆后做PCR鉴定如果没有条带的话,是不是有必要做一下质粒提取?(在PCR不稳定的条件下)质粒提取后直接跑胶的话是什么样子的?有插入片段的质粒条带和空载条带区别是什么?怎么从质粒提取的电泳图上看出哪个是插入目的条带的样品?新手提问,见笑,谢过各位了!
回复如果你用的是载体上的引物,怎么可能没有条带?PCR不稳定你可以把它调成稳定啊。注意设立阴性对照,阳性对照就是了。如果你的插入片段1K左右的话,直接抽质粒可以看到大小的区别的。有插入的跑得慢。你要是担心质粒超螺旋之类的,可以那酶单切一下再跑电泳。我的建议还是菌落PCR效率比较高。取一个插入片段的引物和载体上的引物来扩增。做好阳性对照和阴性对照,就不会有问题。有人觉得菌落PCR不准确。那可以用传统的。先直接小抽,然后用双酶切,电泳看有没有和你插入片段大小相应的条带。回复首先,如果你的PCR不稳定的话,你是如何得到你的目的片段去做T-A克隆的?如果你的引物确实不行的话,可以用通用引物如M13试试。提取质粒一般是在菌落PCR验证的基础上,为了避免假阳性而做的进一步验证。提取质粒之后,可以做质粒PCR,也可以酶切验证。直接电泳质粒很难判断是否已经转入了你的目的片段(除非你的目的片段非常大)。质粒电泳一般有三条带,是由于质粒的不同状态造成的。跑的最快的是闭环结构,然后是开环和线性结构。回复PCR鉴定后要酶切确认
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本帖最后由 liaoboook 于
20:53 编辑
在某宝上买的NS,包装全是日文,并且有一个日本国内销售字样的标示。背后有一张看着明显感觉是后期贴上去的港版正品标志。询问了店家,店家说港版的都是这样的。
我只是奇怪,为什么在香港销售的机子会写日本销售的字样。我不是很懂,还希望大家能帮看看。机子开机有红色,三码也合一,但机子下的码贴的有些歪。包装内没有说明书,只有一张香港的保修单和一张注意事项的纸。
这样的机子有问题么?去香港能给保修么?谢谢啦!
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求助啊……你们的港版包装都是这样么?
骑士, 积分 2423, 距离下一级还需 577 积分
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“港版行货” 机器包装外盒上有这四个字的圆形烫金字样。
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港版都是这样,你不用纠结了
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biokid 发表于
“港版行货” 机器包装外盒上有这四个字的圆形烫金字样。
谢谢了。看来我这个至少包装并不是原装港版了。不知道他们从什么渠道来的了……
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Michelle666 发表于
港版都是这样,你不用纠结了
好吧,毕竟**来的。。。只能但愿这不是退货机或者翻新的
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biokid 发表于
“港版行货” 机器包装外盒上有这四个字的圆形烫金字样。
我买来没有这个的
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港版机器其实就是日版机器,就是电源是三项插座,日本是两项插座,机器,都是日版机器.
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港版机就是日版机标配换了充电插头,包装就是日版盒子上贴了一块贴纸。
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幼儿园预备中, 积分 65, 距离下一级还需 85 积分
准备买圣象踢脚线,市场上看了一圈,有固卡利威、安丰居、雅饰、雅居等牌子,产地是重庆产和湖州南浔两个产地,请问有了解踢脚线的嘛,大家一般安装的都是哪里买的呀。圣象看中固卡利威,全家装完要2000多了。肉疼,但说是有专利还是什么。,这个值得不。是不是固卡利威算最好的了?
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