发酵液中葡萄糖发酵化学方程式剩余量(残糖量)的检测我采用菲林试剂,乳酸菌发酵液(分泌EPS)斐林试剂检测残糖可以吗

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固定化红曲霉液体发酵lovastatin的研究
research on liquid fermentation of immobilized monascus strains.pdf
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文档介绍:
—錾苟=卸固定化红曲霉液体发酵的研究班,.啵琄疞,乙醇班,。壁塑科技年第总第·王新惠醮镉主要实验材料养基为:大米粉:.Ⅶ甌.红曲霉作为发酵食品用菌在中国具有悠久的历史,如制备红曲米、腐乳及利用其色素作为天然着色剂等。世纪年代,日本和美国的研究人员相继从红曲霉培养液中分离出一种能够强力抑制胆固醇合成的活性物质,并命名为,现称宸ニ“翻,这一重大发现引起了世界的轰动,掀起了研究红曲霉的热潮。本文采用海藻酸钠固定化红曲霉孢子,利用固定化细胞发酵生产,研究其发酵特性,为进一步工业化生产提供参考基础数据。牧嫌敕椒菌种:红曲霉菌株实验室保藏恍泵媸怨鼙2培养基:麦芽汁琼脂斜面培养基;孢子培养基为:大米粉%,;液体发酵培疞,甘油实验方法红曲霉孢子的固定化将红曲霉菌株又值叫泵媾嘌希嘌加入适量无菌水洗涤,收集孢子悬浮液,加入灭菌的玻璃珠,于℃充分振荡培养孢子悬浮液稀释至×觯痬S嫒人渲.ズT逅崮,在℃灭菌H∨ǘ任.觯痬的红曲霉孢子悬浮液与已灭菌的%海藻酸钠溶液充分混匀,用何⒆⑸淦鞯渭又.サ腃溶液中造粒梦蘧逑垂潭ɑ咦雍螅匦乱%的芤汗潭詈笥梦蘧逑次,用于发酵。.烨咕甑囊禾迮嘌接入游离的红曲霉孢子悬浮液于的液体发酵培养基中,℃振荡痬嘌测定其的含量。.烨构潭ɑ赴囊禾⒔将固定化的红曲霉孢子明胶珠接入的液体发酵培养基中,于℃振荡定其的含量。含量的测定标准曲线的绘制市售粒胶囊,用%乙醇溶解,经定量滤纸过滤,收集滤液,真空浓缩干燥至粉末。精确称.畉.长江师范学院生命科学与技术学院,重庆;啥即笱称芳庸に拇ㄊ≈氐闶笛槭遥拇成都摘要:以红曲霉为研究材料,采用海藻酸钠包埋法固定化红曲霉高产菌株。将其与游离细胞的发酵进程进行比较,分析了固定化细胞的发酵特性及发酵稳定性。结果表明,固定化细胞和游离细胞具有相似的前期发酵过程和最高值,但定化细胞表现出更长的稳定期和更好的稳定性。关键词:微生物;红曲霉;固定化细胞;发酵特性;中图分类号:;;文献标识码:文章编号:———.,%,%,猦,—·,簃;;籪疞,..作者简介:王新惠彩Γ饕4邮路肿游⑸镉趾头⒔凸こ痰难芯亢徒萄А,珻;甋:.籐、
蔷壁塑苎苎垫塑敷塑偷┛讯崂菪陀慵堕竺呈垒坚型旦塑∑整堡坐:舛n?瞻籽焙挠玫谋曜计咸烟侨芤禾寤础趸俨一测定残糖量时耗用的标准葡萄糖溶液体积。舛ǚ⒔鸵褐衎£型拿丽尸固定化红曲霉的发酵特性分析取提纯的标准样品溶于乙醇制备成/谋曜佳芬骸T俜直鹣∈统/乙醇溶液作为对照样,测呈。绘制标准曲线蟮孟咝.发酵液中含量的测定发酵结束后,采用ㄔご痬离心,收集上清液,用乙酸乙酯萃取次,合并有机溶液,于真空浓缩机中℃浓缩至干,用少许苯溶解干燥物,待苯挥发后,加入%掖既芙狻取溶解液于处测吸光值。.刑橇康牟舛取斐林溶液甲和斐林溶液乙各,用%的葡萄糖溶液滴定空白样,测得用去葡萄糖溶液的体积。取待测液加入浓蠓淙粗妫サ腘鱬,定容,吸取到的三角瓶恐性は燃屿林甲、斐林乙各校肙.サ钠咸烟侨芤旱味ǎ体积式中:,,——残糖量;值的测定采用岫燃撇舛ā峁敕治红曲霉固定化细胞与游离细胞发酵的曲线采用相同的发酵条件发酵院烨笻游离细胞和固定化细胞进行发酵,每隔含量,结果见图由图芍#诜⒔颓捌冢卫胩赴裙潭ɑ赴产稍高,到发酵中期游离态细胞和固定化细胞几乎同时进入产物合成旺盛期,贝锏礁叻澹卫细胞和固定细胞产分别达到/⒔螅卫胂赴锖铣闪靠J枷降,而固定化细胞产物合成量仍然保持稳定。对固定化红曲霉赴信嘌刻觳舛ǚ⒔液的残糖量、值、含量,结果见图由图芍#⒔凸檀笾驴煞个阶段,第一阶段为褰肟焖俸奶瞧冢拇锏阶芴堑以上,同时伴随着少量的合成,值也降低,此时主要是菌体进行生长繁殖,需要消耗大量的糖以满足快速生长的需要;第二阶段为大量合成的时期,菌体耗糖速率大大降低,开始上升;第三阶段为~褰胛榷ㄆ冢琇俊值及耗糖量趋于稳定。固定化红曲霉发酵稳定性分析对固定化红曲霉赴蟹峙畏⒔停扛舛ǚ⒔鸵褐蠰坎⒏慌嘌峁见图固定化细胞与游离细胞相比,其显著的优势就是发酵结束后可回收重复使用。由图芍#潭ɑ烨赴馗捶⒔次连续发酵浞⒔筒鶯—牧炕疚榷ǎ⑽衷/稀5孀欧⒔批次的增加,固定化细胞受到破环的程度益严重,导致产的能力逐渐下降。然而,固定化红曲霉细胞在多批发酵中表现出较好的稳定性,适应现代化工/标准曲线,℃、图烨构潭ɑ赴胗卫胂赴姆⒔蚅图⒔凸蘈ǘ取安刑橇壳荓伦5图.发酵时间拿删据鼷曼世袋.量苗趔\甇凹△四∞》●
和小球菌锄樱堡丝ト型鲞:丝叠重垦塑垒壁垫堡主塑圣鏖丝型丝菌苚凇姆椒ù偈蛊咸丫平衅还崛樗梅鹿辄为主,由于品种特性的原因,在发酵启动形成皮盖℃,如果温度低于℃,会使苹果酸乳酸发酵速度过后,梅鹿辄的皮盖较松软,易于通过循环和臃⒆慢,并难于进行完全,进而影响酒体的风味和稳定性;如用带走热量;赤霞珠的皮盖较紧密,不易通过:挥发果温度高于℃,容易使有害微生物参与苹果酸乳酸发带走热量。特别是大型发酵罐果浆装量较多,皮盖层较厚酵,也会造成挥发酸升高;或因有害微生物代谢产生不良时,应更加注意赤霞珠发酵液的温度控制,做到提前预风味物质,降低酒体质量。特别是酒精发酵不完全判、适时降温。另外,同一产区成熟度良好的赤霞珠葡萄疞以上脑平衅还崛樗岱⒔透Q细窨中酚类物质含量往往高于梅鹿辄葡萄,因此赤霞珠葡萄制好发酵温度。发酵温度可以比梅鹿辄略高。对于酒精含量不同的葡萄酒苹果酸乳酸发酵温度控不同酵母添加量的发酵温度控
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发酵工程(全套课件451P).ppt 451页
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一、发酵工程定义及在生物技术中的地位 二、发酵工程发展简史 三、发酵工业的特点及其应用范围 四、工业发酵的类型与典型过程 五、发酵工程前沿及应用前景 何谓发酵?
ferver:发泡、沸腾
fermentation 发酵现象的本质 显微镜观察:微生物
著名的巴斯德实验:微生物作用
著名的毕希纳实验:酵素(酶)的作用
2. 发酵工程概念?
--微生物细胞加工技术过程优化与放大
传统发酵工程:利用微生物的生长和代谢活动来大量生产人们所需产品的过程理论与工程技术体系。该技术体系主要包括菌种选育与保藏、菌种扩大生产、代谢产物的生物合成与分离纯化制备等技术集成。
现代发酵工程:是将DNA重组及细胞融合技术、酶工程技术、组学及代谢网络调控技术、过程工程优化与放大技术等新技术与传统发酵工程融合,大大提高传统发酵技术水平,拓展传统发酵应用领域和产品范围的一种现代工业生物技术体系(新一代工业生物技术)。
强调现代生物技术、控制技术和装备技术在传统与现代发酵工业领域的集成应用。 3. 发酵工程在生物技术中的地位
生物技术:应用自然科学和工程学的原理,依靠生物及其细胞的催化作用,将物料进行加工以提供产品或为社会服务的技术。 生物技术体系 (一)发酵工程发展简史 1900以前
自然发酵阶段
纯培养技术的建立
通气搅拌纯培养发酵技术的建立
诱变技术与代谢控制发酵技术的建立
开拓发酵原料时期(石油发酵时期) 1970年以后
进入基因工程菌发酵时期,以及细胞
大规模培养技术的全面发展。
近年来,以现代生物技术和过程工程技术为基础的
现代发酵工业突飞猛进。 自然发酵阶段 主要是酿造工业 主要产品:酒、酒精、醋、
啤酒、干酪、酸乳等 17世纪,能在容量为1500桶(一桶约136升)的
木质大桶中进行第一次真正的大规模酿造
1757年应用温度计;1801 使用原始热交换器
主要特点:嫌气发酵,非纯种培养 ,产品质
量不稳定 纯培养技术的建立 Koch首先发明固体培养基,建立细菌
的纯粹培养 Petri创造一种培养皿(petri dish)用于
微生物平板分离 Winograsky和 Beijerink发明富集培
养法,分离特定的微生物 主要产品:酵母、甘油、乳酸、丙酮丁醇等 纯培养技术的建立 第一次世界大战, Weizmann 发明了丙酮丁醇发酵,建立了真正的无杂菌发酵。 在面包酵母的生产中首先采用了分批补料培养技术
主要特点:纯培养为主、嫌氧发酵,产品产量
质量控制水平大大提高
通气搅拌发酵技术的建立 标志:纯种培养深层发酵生产青霉素
主要技术进展: 通气搅拌解决了液体深层培养的供氧问题。 无菌空气、培养基灭菌、无污染接种、大
型发酵罐的密封与抗污染设计解决了耗氧
发酵中的杂菌污染问题。
通气搅拌发酵技术的建立 主要特点:耗氧发酵实现规模化纯培养发
酵,一系列过程工程技术创新 意义: 推动抗生素工业乃至整个发酵工业快速发展 建立了完整的好氧发酵放大技术及装备 奠定了现代发酵工业的理论和实践基础
代谢控制发酵技术的建立 基于代谢途径及其调控实现微生物菌种选育和控制发酵。
代谢控制发酵技术:应用生物化学的代谢知识和遗传学理论,选育微生物突变株,从而调控微生物代谢,大量积累目标发酵产物。 主要应用:氨基酸及核苷酸等基于初生代谢产物
的发酵生产,以及有机酸 、抗生素等
开拓新的发酵原料时期 目的:以烃类为碳源生产微生物细胞作为饲
料蛋白质的来源
技术进步: 发展了高压喷射式、强制循环式等多种发
酵罐及其发酵技术
计算机和自动控制技术的运用:灭菌和发
酵过程自动控制,促进发酵工业朝连续化、
自动化方向发展
开拓新的发酵原料时期 特点: 解决发酵原料及人畜争粮问题;
规模和自动化程度显著提高,能耗过大。
基因工程阶段(现代发酵工业新阶段) 主要标志
基因工程产品生产以及基因工程技术应用 世界上已批准上市的基因工程药物有几十种,如:胰岛素、人生长激素等。 基因工程阶段(现代发酵工业新阶
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发酵液中糖的测定
请问发酵液中总糖、还原糖、残糖的概念及测定方法?为什么要测这三个指标?
那总糖、还原糖、残糖三者之间有什么关系呢
我有更好的答案
斐林法如果你想测葡萄糖就用葡萄糖试剂盒总糖可用酸水解法即双水解原理还原性糖类的醛基在碱性溶液中能将二价铜还原成亚铜,剩余的铜在酸性溶液中与碘化钾反应析出游离碘,用标准的硫代硫酸钠溶液滴定(因铜离子在碱性溶液中沉淀,故加人酒石酸钾钠使之形成络离子防止沉淀发生),利用空白与样品滴定之Ho—一CHCoOK Cu(OH)2 + I Ho—一CHCoONa 差,推算出糖(以葡萄糖计)含量,如系多糖(淀粉、糊精)可先经酸水解后生成单糖。2 反应方程式W + ^ (C6H1o05)n n(C6H1206) (淀粉) (葡萄糖) CUSP4+2NaOH—一Cu(OH)2 +Na2SO4 0一CHCOOK ——cu( I +2H20 0一CHCOONa 0一CHCOOK + 2cu( I +NaoH+H2o——O卜_CHCOONa 酬一+2:2Cu +4KI 2cuI +2K2so4+I2 3 仪器3.1 移液管5ml、0.5ml。3.2 刻度离心管lOml。3.3 水浴锅、离心机。· 32 · 2Na2S203+I2——+N......
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