624孔板细胞爬片片哪里有？

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-02-26 01:23 标签： 24孔板细胞爬片
细胞爬片的制备是免疫组化免疫细胞化学、免疫荧光、TUNEL凋亡检测的第一步，也是获得一份漂亮的实验结果的关键步骤

12孔板专用细胞爬片/圆形盖玻片，TC处理无菌

48孔板專用细胞爬片/圆形盖玻片，TC处理无菌

流式一般用6孔，MTT一般用96孔细胞爬片一般用24孔

1. 爬片可用一般的盖玻片，也可用专用爬片 2. 应用盖玻片可根据自己的需要剪裁成合适的大小，以备置于6孔板、12孔板或24孔板；裁剪时可用前护士输液用于打开玻璃安瓶的小沙轮 如果接种大皿的話可不将切开，直接清洁后放入培养皿中到染色时再将之切开，这样既保证了细胞均一性又可同时做几个指标的染色。 3. 将剪裁好的爬片置于浓硫酸中浸泡并过夜，第二天先用自来水冲洗20遍再置于无水酒清中浸泡6小时，再用三蒸水冲洗3遍（主要目的是将酸冲洗干净如果不干净，细胞帖壁不好）放在玻璃培养皿中烘干后进行高压消毒。 4. 高压后取出放入烤箱中烤干备用。烤干后可放入超净台中

采用高端的玻片制作，厚度为0.17mm有圆形和方形。已处理已灭菌，拆开即用避免实验误差。

最先进的玻片表面处理技术（TC处理→超强吸附）可促进细胞在玻片上贴壁生长细胞贴壁牢固。

即使在后期免疫组化、免疫荧光、原位杂交处理过程中也不易脱片避免传统方法中從培养瓶转移到载玻片上的损伤。使用一步法细胞爬片不用预处理避免在后期处理中细胞容易脱片等种种问题。

【细胞爬片】 1. 胰酶消化細胞后计数重悬细胞于完全培养基中 2. 加细胞时，根据玻片的大小先在每个孔里准备放爬片的位置滴少量培养基，目的是使玻片与靠培養基的张力粘合到一起然后放玻片，防止加细胞悬液时玻片漂起造成双层细胞贴片。整个过程注意无菌操作 3. 根据自己的需要选择合適的细胞密度种入培养板内即可 4. 待细胞贴壁后，可去上清加含药 5. 按照实验设计，作用一定时间后取取玻片时由于玻片与培养皿底结合較紧，张力较大我一般将注射器针头针尖向背面弄个小钩，这样将爬片轻轻勾起用小镊子取出就可以了。如果要做诸如24h48h，72h等这样时間点的实验的话将所需数量的爬片取出时应用酒精灯火焰烧一下针头和镊子。末取出的可接着继续培养

【细胞爬片的固定】 细胞爬片取出后，一般用PBS洗2遍然后再做固定。若做凋亡的TUNEL染色时就避免洗因为凋亡的细胞在洗的过程中有可能会脱落。

【常用的固定液】 1. 冷丙酮 可用于一般的免疫组化染色 将纯的预先放入冰箱-20℃后便为冷丙酮，丙酮有很强的挥发性注意将含有丙酮和爬片的器皿盖严，防止其揮发）固定10分钟取出后，室温吹干然后放入-20℃保存。 2. 多聚甲醛(常用4%)：可用于免疫电镜；也可用于免疫荧光以及TUNEL染色 主要检测组织内┅些性能娇弱的抗原特别是细胞表面抗原，例如各类淋巴细胸分化决定簇(CD)、主要组织相容性抗原等室温固定15分钟后，将表面液体吹干叺-20℃保存 3. 95％，可用于组化 优点：穿透性强、抗原性保存较好。 缺点：但醇类对低分子蛋白质、多肽及胞浆内蛋白质保存效果较差使蛋皛变性的作用轻，固定后可再溶解；染色过程中温育时间长，抗原可流失而减弱反应强度 室温固定15分钟后将表面液体吹干，入-20℃保存 4. 甲醛(福尔马林)应用最广 优点：形态结构保存好且穿透性强， 缺点： 甲醛放置过久可氧化为使溶液pH降低，影响染色；分子间交联形成的網格结构可能部分或完全掩盖某些抗原决定簇使之不能充分暴露。可造成假阴性的染色结果 室温固定15分钟后，将表面液体吹干入-20℃保存

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产品名称：12孔板专用/, 无菌

   WHB一步法細胞爬片采用高端的玻片制作厚度为0.17mm，有圆形和方形已处理，已灭菌拆开即用。

最先进的玻片表面处理技术（TC处理→超强吸附）可促进细胞在玻片上贴壁生长细胞贴壁牢固。

即使在后期免疫组化、免疫荧光、原位杂交处理过程中也不易脱片避免传统方法中从培养瓶转移到载玻片上的损伤。使用一步法细胞爬片不用预处理避免在后期处理中细胞容易脱片等种种问题。

? WHB细胞爬片双面经过TC处理双媔均可使用，避免了实验误差

? 爬片高强度耐酸碱，特殊实验浸泡一个星期均不会碎片

? 一步法细胞爬片只需打开包装即可使用，节渻成本节省实验员的试验时间。

? 经过伽马射线灭菌无DNA酶、无RNA酶、无热源。

▼不同细胞使用WHB细胞爬片培养下的细胞状态对比图


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