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Kit)是一种利用荧光探针DCFH-DA进行活性氧檢测的试剂盒DCFH-DA本身没有荧光,可以自由穿过细胞膜进入细胞内后,可以被细胞内的酯酶水解生成DCFH而DCFH不能通透细胞膜,从而使探针很嫆易被装载到细胞内细胞内的活性氧可以氧化无荧光的DCFH生成有荧光的DCF。检测DCF的荧光就可以知道细胞内活性氧的水平
注意事项: 探针装載后,一定要洗净残余的未进入细胞内的探针否则会导致背景较高。
探针装载完毕并洗净残余探针后可以进行激发波长的扫描和发射波长的扫描,以确认探针的装载情况是否良好DCF的激发光谱和发射光谱请参考下页图谱。
尽量缩短探针装载后到测定所用的时间(刺激时间除外)以减少各种可能的误差。
为了您的安全和健康请穿实验服并戴一次性手套操作。
1. 装载探针 对于刺激时间较短(通常为2小时以内)的细胞先装载探针,后用活性氧阳性对照或自己感兴趣的药
2. 检测 对于原位装载探针的样品可以用激光共聚焦显微镜直接观察或收集细胞后用荧光分光光度计、荧
4. 其它说明 阳性对照可以按照1:1000的比例使用例如装载好探针嘚细胞共1毫升,可以加入1微升的阳性对照