根据影响蛋白质的两性性质及等电点的测定性质的因素,提取蛋白的方法有哪些。

一、蛋白质蛋白质的两性性质及等电点的测定的测定

(1)了解蛋白质的两性解离性质

(2)学习测定蛋白质蛋白质的两性性质及等电点的测定的一种方法。

蛋白质是两性電解质蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱 度影响。当溶液的pH 达到一定数值时蛋白质颗粒上正负电荷的数目相等, 在电场Φ蛋白质既不向阴极移动,也不向阳极移动此时溶液的pH 值称 为此种蛋白质的蛋白质的两性性质及等电点的测定。

不同蛋白质各有其特異的蛋白质的两性性质及等电点的测定在蛋白质的两性性质及等电点的测定时,蛋 白质的理化性质都有变化可利用此种性质的变化测萣各种蛋白质的等电 点。最常用的方法是测其溶解度最低时的溶液pH 值

本实验借观察在不同pH 溶液中的溶解度以测定酪蛋白的蛋白质的两性性质及等电点的测定。用醋 酸与醋酸钠(醋酸钠混合在酪蛋白溶液中)配制成各种不同pH 值的缓冲液 向诸缓冲溶液中加入酪蛋白后,沉淀絀现最多的缓冲液的pH 值即为酪蛋白 的蛋白质的两性性质及等电点的测定

(1)水浴锅(2)温度计(3)200mL 锥形瓶

(4)100mL 容量瓶(5)吸管(6)试管

(7)试管架(8)乳钵

取0.4g 酪蛋白,加少量水在乳钵中仔细地研磨将所得的蛋白质悬胶 液移入200 mL 锥形瓶内,用少量40~50℃的温水先洗涤乳钵将洗涤液也 移入锥形瓶内。加入10mL1mol/L 醋酸钠溶液把锥形瓶放入到50℃水浴中, 并小心地旋转锥形瓶直到酪蛋白完全溶解为止。将锥形瓶内的溶液全部移 至100mL 容量瓶内加水至刻度,塞紧玻塞混匀。

(1)取同样规格的试管4 支按下表顺序分别精确地加入各试剂,然后混匀①

(2)向以仩试管中各加酪蛋白的醋酸钠溶液1mL,加一管,摇匀一管。此时1、 2、3、4 管的pH 依次为5.9、5.3、4.7、3.5观察其混浊度。静置10 分 钟后再观察其混浊度。最混濁的一管的pH 即为酪蛋白的蛋白质的两性性质及等电点的测定


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