阴离子交换过程剂的活性基团带正电荷 这句话对吗

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2019-09-19 03:10 标签： 离子交换

chromatography,一、原理,离子交换过程层析是用離子交换过程剂（具有离子交换过程性能的物质）作固定相利用它与流动相中的某种离子进行可逆的交换性质来分离子型混合物的层析方法,,低盐,高盐,分离结束,去吸附,,带电荷,不同蛋白质在特定pH值下有不同带电特性,,胶体,洗脱,与树脂结合力,离子交换过程树脂如何分离蛋白质,二、離子交换过程剂的类型,在惰性载体上引入带有电荷的活性基团 （一）按活性功能基团带电荷性质不同 阳离子交换过程剂 —— 带负电荷，与陽离子交换过程 阴离子交换过程剂 ——带正电荷与阴离子交换过程 阴离子交换过程树脂对化学试剂及热都不如阳离子交换过程树脂稳定。,,,胶体,,胶体,1.离子交换过程树脂： (1)类型 聚苯乙烯树脂：,（二）按载体种类不同,,苯乙烯,二乙烯苯,,母体,交联剂,聚丙烯酸—阳离子交换过程树脂 甲基丙烯酸 二乙烯苯 特点：高交换量 pH8 羧基不完全解离,,（2）离子交换过程树脂的性质,①、一般离子交换过程剂的特性 多孔性：疏松、多孔网状活性基团在网孔内 不溶性：不溶于稀酸、稀碱、有机溶剂 稳定性： 离子交换过程性：具相当数量的可交换或带电基团,②、交换量：指交換剂中可交换的离子数,③ 、交联度： 合成树脂时所用的交联剂在原料总重量中所占的百分比 交联度越大 树脂的网孔越小 膨胀性小 交换量少 茭联度越小 树脂的网孔越大 膨胀性大 交换量大 膨胀性增加易引起树脂的机械变形破损,,苯乙烯+二乙烯苯 ? 聚苯乙烯 （单体） （交联剂） 二乙烯苯 交联度 = ———————— × 100% 苯乙烯 + 二乙烯苯,目数： 离子交换过程树脂的颗粒直径大小,Dowex50 为20-50目 Dowex 100 149?m Dowex 50 297?m Dowex 20 840?m,目数越大表示直径越小,阳离子交换过程树脂 强酸型 磺酸基 -SO3-H+ 中等酸型 磷酸根 -O-PO2H2 亚磷酸根 -O-POH2 弱酸型 羧基 -COOH 阴离子交换过程树脂 强碱 季胺基团 [-N+(CH3)3] 弱碱 叔胺、仲胺、伯胺基团,（3）可引入的解离基团,（4）离子交换过程树脂对离子的亲和力,（4）离子交换过程树脂对离子的亲和力,①阳离子树脂 电价数：Na+Ca++Al+++Ti++++ 原子价数相同，原子序数 Li+Na+K+Pb+ 一般pH4条件下使用,具有羧甲基,2.离子交换过程纤维素,3.离子交换过程凝胶—分离大分子物质 如：葡聚糖（Sephadex） 聚丙烯酰胺（PAG） 琼脂糖（Sepharose）,操作过程： 1.装柱 2.離子交换过程 3.洗脱,,※带电荷量少亲和力小的先被洗脱下来 ※带电荷量多，亲和力大的后被洗脱下来,三、操作注意点,（一）离子交换过程劑的选择 原则： 根据被分离物质的性质选择—同一性质离子交换过程剂中选用对被分离物质各组分之间结合力差异大的型号交换剂,1.被分离粅质带何种电荷 2.被分离物质分子的大小 大分子物质选用凝胶其次选用纤维素,考虑因素：,根据分离过程的实验条件 强酸强碱—应用广泛 弱酸型—只能在碱性范围内使用 弱碱型—只能在酸性范围内使用,3.被分离物质所处的环境 4.被分离物质的物理化学性质 5.被分离物质的大概数量,原則： 不能发生化学反应，避免使样品变性,（二）缓冲液的选择,原则： 所用洗脱液比吸着物质具有更活泼的离子或基团 改变pH或离子强度 增强洗脱液与离子交换过程剂的结合力 降低分离物与离子交换过程剂的结合力 洗脱方式：梯度洗脱,(三)洗脱剂,四、应用,分离多肽蛋白、氨基酸、核酸及其他带电的生物分子,实验： 离子交换过程层析分离氨基酸,,一、原理：,※Dowex50阳离子交换过程树脂,pH 4.2 ++,pI 9.7 Mr 147,pI 2.97 Mr 133,一、操作注意点：,1、装柱和加样同凝胶層析 2、洗脱液（NaOH和柠檬酸）别混淆 3、控制流速：20滴/min,指出2个洗脱峰分别出现在几号管 分别是哪个氨基酸？,三、结果要求：,

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