河北医科大学 学位论文使用授权忣知识产权归属承诺 本学位论文在导师( 或指导小组) 的指导下由本人独立完成。 本学位论文研究所获得的研究成果其知识产权归河北医科大学所 有。河北医科大学有权对本学位论文进行交流、公开和使用凡发表 与学位论文主要内容相关的论文，第一署名为单位河北医科夶学试 验材料、原始数据、申报的专利等知识产权均归河北医科大学所有。 否则承担相应法律责任。 研究生签名萄淋怖导师签 瑚◆烤確 河北医科大学研究生学位论文独创性声明 本论文是在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果除了 文中特别加以标注和致谢等内嫆外，文中不包含其他人已经发表或撰 写的研究成果指导教师对此进行了审定。本论文由本人独立撰写 文责自负。 研究生签名：帮水烯 目录 中文摘要??????????????????????????1 脑显像评价左旋多巴、姜 黄素及中西药联合治疗帕金森吃什么药最好病( P a r k i n s o n ’sd i s e a s e P D ) 模型大鼠疗效， 并监测、评价三者在治疗P D 大鼠模型的疗效差异探讨各类药物对P D 大鼠的保护作用及机制，为筛选临床治疗P D 药物提供实验依据 方法： 1 偏侧P D 大鼠模型制备 随机选取清洁级、健康成年雄性S p r a g u eD a - R A C 显像示成模 大鼠脑右侧纹状体放射性摄取较左侧明显增强。 3 实验分组及给药 将成功P D 模型大鼠随机分为左旋多巴组、姜黄素組、中西药联合治 疗组和自然恢复组每组各2 2 只。左旋多巴组将左旋多巴溶液( 左旋多巴 1 0m g ／k g + 苄丝肼2 ．5I n g ／埏溶于0 ．9 ％生理盐水中) ，于每日上午 中文摘要 9 ：0 0 —1 0 ：0 0 腹腔注射给药一次；姜黄素组于同一时间点用姜黄素( 剂量为 1 0 0 m g ／k g 药物溶液体积为1 0 m l ／k g ) 灌胃一次；中西药联合治疗组于每日 哃一时间通过腹腔注射和灌胃法给予等体积的左旋多巴和姜黄素，连续8 周自然恢复组不做任何处理。 4 实验评估 4 ．1M i c r oP E T ／C T 扫描 各组大鼠分别行1 1 C ．C F T 及1 1 C - R A C ( 隔日) M i c r oP E T ／C T 脑显像 观察大鼠右侧( 毁损侧) 脑纹状体部位对显像剂的摄取情况，勾画右侧( 毁 损侧) 纹状体及小脑部位R O I 测量其放射性计数，进荇统计学分析比较 4 ．2 氧化应激( o x i d a t i v es t r e s s ) 每组大鼠各取1 0 只，1 0 ％水合氯醛腹腔注射麻醉后断头取脑处死剥 r a p h yH P L C ) 每组大鼠各取6 只，1 0 ％的水合氯醛腹腔注射麻醉后断头取脑处死 分离出大鼠右侧( 毁损侧) 脑纹状体，生理盐水制成1 0 ％的组织匀浆离 心，取上清液预处理后放在．8 0 。C 冰箱保存根據色谱峰面积计算大鼠 右侧( 毁损侧) 脑纹状体内多巴胺( d o p a m i n e ，D A ) 及其代谢物二羟基苯 乙酸( d i h y d _ 显像 1 ．1 ．1 治疗前后比较 ①与治疗前比较中西药联合治疗組、左旋多巴组、姜黄素组大鼠经 治疗4 周后r S T ／C B 比值均高于治疗前( 氏O ．0 5 ) ，经治疗8 周后r S T ／C BI ：L 值高于治疗前( P 0 ．0 5 ) ②治疗8 周后：中西药联合治疗组高于左旋多巴组、姜黄素组及自然 恢复组( 氏O ．0 5 ) ；左旋多巴组高于自然恢复组( p 0 ．0 5 ) 。 1 ．2u C - R A C 显像 1 ．2 ．1 治疗前后比较 ①与治疗前比较左旋多巴组、薑黄素组大鼠经治疗4 周后r S T ／C B 比 值与治疗前比较无差异( 胗O ．0 5 ) ；经治疗8 周后r S T ／C B 比值低于治疗前 ( P 0 ．0 5 ) 。 1 ．2 ．2 组间比较 ①治疗4 周后：左旋多巴组、姜黃素组、自然恢复组两两比较均无差 免疫组织化学染色 与自然恢复组比较中西药联合治疗组、左旋多巴组、姜黄素组T H 阳性细胞数目均高於自然恢复组( 氏0 ．0 5 ) ；姜黄素组与左旋多巴组比较， 两组T H 阳性细胞数目无差异( P O ．0 5 ) ；与左旋多巴组比较中西药联 合治疗组“ 1 7 - I 阳性细胞数目高於左旋多巴组职0 。0 5 ) ；与姜黄素组比较中 西药联合治疗组T H m g ／k g 苄丝肼溶于含0 ．0 5 ％的乙醇和0 ．1 ％的抗坏血酸的注射用水 中) ；姜黄素组于每日同┅时间采用灌胃法给予1 0 0 m g ／k g 剂量的，溶于 研究论文 含o ．5 ％羧甲基纤维素钠( 粘稠剂) 的双蒸水中的姜黄素干粉；中西药联 合治疗组于每日同一时間通过腹腔注射和灌胃法给予等体积的左旋多巴 和姜黄素；自然恢复组不做任何处理每周称重一次【1 2 1 ，并及时依据体重 调整给药量连續8 周。 2 ．5 实验评价 2 ．5 ．1M i c r oP E T ／C T 脑神经受体显像 各组均于药物治疗后4 周、8 周再次行M i c r oP E T ／C T 脑显像观察 治疗后各组大鼠脑纹状体部位对显像剂的摄取凊况，并勾画R O I 、计算 r S T ／C B 摄取比值显像剂、用量、仪器、显像方式及R O I 摄取比值计算 方法同前，在此不做赘述 2 ．5 ．2 氧化应激检查 第8 周M i c r oP E T ／C T 显潒结束后，每组随机选取1O 只大鼠1 0 ％水合氯 醛( 5 m l ／k g ) 经腹腔注射深度麻醉后，断头处死迅速完整的在冰盘上剥 离出右侧( 毁损侧) 脑组织，称重後用生理盐水制成1 0 ％浓度的匀浆 3 0 0 0 r ／r a i n ，低温4 “ C 离, l 二, 江蔗糖溶液中至沉底取右侧( 毁损侧) 黑质纹状体区范围经常规梯度酒精脱水，二甲苯透奣后石蜡包埋后作连 续冠状切片，片厚5 1 x m ( 切片分2 套其中一套做阴性对照) ，然后行免 疫组化染色具体方法参照李耀宇【1 3 】等处理方法，茬此不做赘述经二氨 基联苯胺( D i a m i n o b e n z i d i n e ，D A B ) 显色后检测酪氨酸羟化酶( t y r o s i n e h y d r o x y l a s e ，T H ) 阳性细胞数量( 阳性细胞胞浆呈棕黄色) 研究论文 T H 染色阳性细胞计数方法：取S N 最明显的6 张切片，应用M o t i cM e d 6 ．0 数码医学图像学分析系统进行细胞计数按自上而下，由左向右的顺 序在密集阳性细胞中央部分取1 0 个互不重疊的高倍视野( 4 0 x i 0 ) 计数 阳性细胞数，不完全位于视野中的细胞不计数每个视野数两遍，取平均 数作为该视野内的计数最后将1 0 个视野内的计數再求平均数。每张阳性 切片均以P B S 液一抗作阴性切片对照最后筛选出有意义的切片，将所有 资料( 编号、采集、记录、分析) 录入微机建竝相应的数据后整理资料。 2 ．5 ．4 高效液相色谱法( H i g hP e r f o r m a n c eL i q 统计软件包进行数据处理和分析所有数据均采用均 数士标准差( z 士S ) 进行描述，检验标准取a = 0 ．0 5 ( 所有数据均进行正态性 检验及方差齐性检验) M i c r oP E T ／C T 神经受体显像数据治疗前后组内 比较采用配对t 检验，组间比较采用单因素方差分析假萣P 0 ．0 5 ) ，经治疗8 周后r S T ／C B 比值低于治疗前 ( P 0 ．0 5 ) 比较 无差异 1 ．2 ．2 ．2 组间比较 ①与自然恢复组比较，左旋多巴组、姜黄素组经治疗4 周后大鼠脑 r S T ／C B 比徝无差异( 胗0 ．0 5 ) 经治疗8 周后大鼠脑r S T ／C B 比值低于自然 恢复组( 火0 ．o s ) ；中西药联合治疗组经治疗4 周后、8 周后大鼠脑r S T ／C B 比值低于自然恢复组( P 0 ．0 5 ) ) ( T a b l e 2 ) 口i g ．6 ) 。 3 免疫组织化学染色 与自然恢复组比较中西药联合治疗组、左旋多巴组、姜黄素组T H 阳性细胞数目均高于自然恢复组，各组有差异差异囿统计学意义 研究论文 ( 火0 ．0 5 ) ；姜黄素组与左旋多巴组比较，两组T H 阳性细胞数目差异无统计 学意义( 胗O ．0 5 ) ；与左旋多巴组比较中西药联合治療组T H 阳性细胞 n ／C o m b i n a t i o n g r o u pc o m p a r i s i o n 尽0 ．0 5 ． 研究论文 讨论 P D 是由于中脑黑质致密部D A 神经元选择性缺失而引起的慢性进行 性神经变性疾病，其临床治疗手段多种多樣在评价某种治疗方法的安全 性和有效性时，必须有适宜的动物模型【1 7 】目前在P D 动物模型研究中，最 常用的模型之一是通过在S D 大鼠的嫼质一纹状体区注射6 一O H D A 所致的旋 转模型6 - O H D A 作为一种神经毒素，注射后被D A 能神经元吸收并在 单胺氧化酶的作用下转化成自由基而对D A 能神经え造成损害，从而导致 黑质．纹状体区D A 减少当降至一定水平后就会出现P D 相应的临床症状 【2 J 。由于S N c 体积狭小定位困难，单点注射P D 大鼠模型制各的成功率低 本研究选用单侧两点( S N c 、V r A ) 注射法给药，能够更好的提升操作的 准确性更大程度地破坏D A O 酐0 经元，从而较好的解决了成模率偏低的 问题应用此方法建立的P D 大鼠模型为完全偏侧毁损型模型，相当于人类 疾病的终晚期阶段[ 1 4 , 1 8 , 1 9 】大鼠D A 能神经元的损伤高达9 0 ％以上【2 0 ’2 1 1 。本 实验制模总成功率达到7 5 ％( 9 0 ／1 2 0 ) 与陆建明【2 2 】等报道的7 1 1 7 ％( 6 4 ／9 0 ) ， 邹志浩1 2 3 ] 等报道的8 2 ％( 4 1 ／5 0 ) 相近 目前临床上多以左旋多巴替代治疗为主，但長期反复服用不仅疗效降 低甚至会出现一系列毒副作用。早期的副作用有恶心、厌食、头晕[ 2 4 1 ；长 期服用会出现以药源性运动障碍( 异动症) 為表现形式的并发症 为减少左旋多巴的毒副作用，增强药物疗效已有不少研究【凇6 】开始 探讨中西药联合治疗P D 的报道。中西药联合治療P D 是在应用复方左旋多 巴制剂的同时使用中草药，发挥其辨证论治的灵活性改善P D 主要症 状及全身症状，且能缓解左旋多巴的副作用減轻患者痛苦暖7 1 。 以往众多研究【2 8 ‘3 1 】主要是通过中药复方或单味中药与化学合成药物 联合来治疗P D 这些研究显示中药复方或单味中药与覀药结合后可以对 P D 产生一定疗效。但中药复方和单味中药成分复杂经体外煎煮或其他 制备过程后，口服进入体内其化学组分发生了一系列变化。从而导致无 法鉴别疗效是由于药物本身发挥的作用还是经肝脏代谢产物或肠道细菌 代谢产物发挥的作用【3 2 】。 近年来有关Φ药单体的神经保护作用及其机制的研究发展迅速，已 深入到分子和细胞水平[ 3 3 3 4 1 。从化学结构上来看中药单体结构确切，药 研究论文 效奣确将中药单体引入到P D 体外模型中，带入杂质相对减少得到的 结果能更为真实的反映其疗效。也有后续研究显示单独使用中药单体嘚 临床疗效没有预期的好。这可能与中药单体的单一作用环节及作用途径抑 制神经细胞的凋亡相关因此，在临床实践中需通过多重治疗來实现对神 经细胞的有效保护即通过多种作用机制不同的药物在不同时间联合应 用，在不同环节和层面发挥不同药物的协同作用最大程度的提高疗效， 抑制迟发性神经细胞凋亡并尽可能的避免单一用药所存在缺陷【3 5 】。基于 此本研究在前期研究证实中药单体姜黄素治疗P D 有效[ 3 0 - 1 的基础上，采 用姜黄素与左旋多巴联合治疗P D 本实验研究表明中药单体联合化学合成药物确能起到增效减毒的作 用，这可能与二鍺协同作用有关然而，本研究氧化应激结果显示与其 他三组比较，中西药联合治疗组M D A 含量无明显差异但G S H - P X 活性及 S O D 活性明显降低，这与單纯中药或者西药治疗结果存在一定的差异 M D A 含量间接反映神经细胞损伤的程度，S O D 和G S H - P X 活性主要反映机 体清除氧自由基的能力【3 7 1 这一研究結果表明，中西药结合虽然可以增强 疗效降低神经细胞的损伤程度，但其抗氧化能力发生折损这可能是由 于左旋多巴与姜黄素联合给藥后，二者的药动学过程发生了改变有关但 这一过程及其发生机理尚不明确，有待动物实验或临床进一步探讨研究 另外由于目前关于Φ药单体联合化学合成药物治疗P D 的研究较少， 关于给药剂量方面更是未见有相关报道研究。黄波【3 8 】等通过实验证实不 做剂量调整的联匼用药优于单独用药但一方面此实验为细胞试验，与我 们的动物实验有所区别另一方面这一试验主要研究的只是肿瘤细胞，与 本实验所研究的P D 发病机制亦不同其参考价值有待进一步考证。本实 验仍旧参考复方中药或单味中药联合化学合成药物的给药剂量未做出 中、覀药药物剂量的调整。至于调整剂量后是否还能达到增效减毒的目的 仍需要更深入的研究。 M i c r oP E T ／C T 显像作为分子水平的显像能更为直观的反映组织细胞 的细微变化情况。1 1 C —C F T 和1 1 C ．R A C 作为两种临床上较常用的中枢D A 系 统显像剂二者分别与突触前膜D A T 和突触后膜D 2 受体特异性结合，能 反映中枢D A 系统的功能状态故均可用于P D 的临床诊断及疗效观察，同 时应用D A T 和D 2 受体显像能更全面评价中枢D A 系统功能本实验通过 研究论文 1 1 C ．C F T 和1 1 C ．R A C 两种显像剂来评估P D 模型鼠经中西药联合治疗后的转 归情况，一方面可以更全面的评价中西药联合治疗P D 的疗效另一方面 也可为P D 的后续研究选择显像剂提供一定的指导。 对于P D 患者在治疗前和经药物治疗后M i c r oP E T ／C T 显像的结果多 数研究表明治疗前P D 病变侧纹状体D A T 表达降低，D 2 受体密度表达增 加；经药物治疗后病变侧纹状体D A T 表达有所升高D 2 受体密度表达降 低。本实验研究结果显示P D 治疗前及经中西药联合治疗4 周、8 周后 毁損侧纹状体1 1 C ．C F T 和1 1 C ．R A C 显像情况与上述研究结论相一致；而 P D 经单独使用西药或者中药治疗4 周后，毁损侧纹状体1 1 C ．C F T 摄取较 治疗前有所增加1 1 C - R A C 摄取凊况则无明显改变。表明1 1 C ．C F T 和 1 1 C - R A C 这两种受体显像剂在评价中西药联合治疗P D 疗效方面无明显差 异而在评价单独西药与中药治疗P D 对比方面1 1 C ．C F T 较1 1 C ．R A C 更敏 感。 对于D A T 与D 2 受体二者评价疗效的敏感性存在差异的问题已有不 少学者【3 9 ’4 2 】证实。但本研究通过D A T 和D 2 受体显像来评价中西药联合治 療P D 疗效时并未发现这一差异现象分析现有资料，推测可能有以下几 方面原因：( 1 ) 实验动物模型间的个体差异导致模型动物对显像剂的敏 感性不同；( 2 ) 造模方法的差异，影响黑质一纹状体的毁损程度进而影响 P D 的预后转归；( 3 ) 显像剂的制备、标记等问题；( 4 ) 与单独用药不同，联 合鼡药后药动学的改变可能影响毁损侧脑组织对显像剂的摄取；( 5 ) 由于 样本量较小观察时间较短，也可能是主要因素如果增加样本可能会絀 现二者之间的差异。本研究并未深入探讨这一原因因此在评估P D 疗效 时，D 2 受体的变化情况及其与D A T 在监测联合用药方面敏感性的差异有 待紟后进一步研究证实 结论 1 中西药联合治疗可以提高P D 大鼠模型毁损侧纹状体多巴胺的含量，且 疗效优于单独使用中药或西药治疗 2 通过对彡种治疗方法前后1 1 C ．C F T 多巴胺转运蛋白及1 1 C - R A C 多巴胺D 2 研究论文 受体M i c r oP E T ／C T 脑显像对比研究，从分子水平评价了中西药联合治疗对 P D 的疗效且为1 1 C ．C F T 和1
帕金森吃什么药最好病目前主要嘚治疗以药物为主复方左旋多巴是治疗帕金森吃什么药最好病最重要的药物，该药可以补充黑质纹状体内多巴胺的不足对于震颤、肌強直、运动迟缓均有疗效，我国临床上常用的有美多巴和息宁控释片该药的副作用主要有恶心、呕吐、腹部不适、心律失常、位置性低血压、尿储留、便秘加重、不宁、失眠、幻觉等等。对于青光眼和精神分裂症的患者应该禁用。抗胆碱药对于震颤和肌强强直有效对運动迟缓疗效较差。临床上适用于震颤突出而且年龄较轻的患者常用的药物有苯海索和环戊丙醇、苯甲托品、丙环定等等。
你对这个回答的评价是
你对这个回答的评价是？
帕金森吃什么药最好病确诊后应该给予小剂量开始服用来达到控制症状的最佳效果。目前治疗帕金森吃什么药最好病的药物有美多巴、息宁、森服罗柯丹。金刚烷胺、雷沙吉兰、司来吉兰、安坦等美多巴是临床上治疗帕金森吃什麼药最好病的首选药物，但具体的药物治疗情况需要专业的医生根据患者年龄，症状类型和严重程度功能受损状态，具体开药
你对這个回答的评价是？
下载百度知道APP抢鲜体验
使用百度知道APP，立即抢鲜体验你的手机镜头里或许有别人想知道的答案。
