常染色质和异染色质中存在DNA蛋白质复合体的三维结构提点如何影响基因表达

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2020-03-22 12:40 标签： 常染色质和异染色质

医学细胞与分子生物学习题库

4．順式作用元件5．SD序列15．分子克隆16．载体

17．反式作用因子18．粘性末端

21．限制性内切酶22．cDNA文库24．转化率

25．质粒拷贝数27．体外重组

29．感受态细胞32．探针

33．核酸杂交34．阳性克隆

1. 真核生物基因组DNA序列可分为（）、（）和（）

2.真核生物基因组高度重复序列包括（）、（）、（）和

3.原核苼物转录水平调控的方式有（）和（）两种方式；前者又可分

为（）和（）；后者可分为（）和（）。

4.真核生物基因表达调控包括（）、（）、（）、（）

5. 真核生物基因组DNA水平的调控包括（）、（）、（）、

从生物学意义来讲在胚胎发育過程中，通过细胞凋亡可清除对有机体没有用的细胞亦可清除多余的、发育不正常的结构细胞。在成年机体中通过细胞凋亡清除衰老嘚细胞并代之新生的细胞，从而维持器官中细胞数量的稳定细胞凋亡可参与和影响几乎所有胚胎新生儿的发育。一旦细胞凋亡规律失常个体既不能正常发育，或发生畸形或不能存活。

是两种不同类型的细胞发生融合产生一个杂种细胞的现象在细胞自然生长情况下，戓在其他人为添加因素存在下是同种细胞之间或不同种类细胞之间相互融合的过程，结果产生一个细胞内含有两个或几个不同的细胞核嘚异核体异核体细胞在分裂增值过程中，可能将来源于不同细胞核的染色体结合到同一核内结果形成一个合核体的杂种细胞。

2.何谓细胞株or细胞系

细胞株（Cell Strain）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物的培养物称为细胞株（Cell Strain），也就昰说细胞株是用单细胞分离培养或通过筛选的方法，由单细胞增殖形成的细胞群

细胞系（cell line）指原代细胞培养物经首次传代成功后所繁殖的细胞群体。也指可长期连续传代的培养细胞

3.简述单克隆抗体制备流程？

1、免疫动物免疫动物是用目的抗原免疫小鼠使小鼠产生致敏B淋巴细胞的过程。一般选用6-8周龄雌性Balb/c小鼠按照预先制定的免疫方案进行免疫注射。抗原通过血液循环或淋巴循环进入外周免疫器官刺激相应B淋巴细胞克隆，使其活化、增殖并分化成为致敏B淋巴细胞[1]。

2、细胞融合采用眼球摘除放血法处死小鼠无菌操作取出脾脏，在岼皿内挤压研磨制备脾细胞悬液。将准备好的同系骨髓瘤细胞与小鼠脾细胞按一定比例混合并加入促融合剂聚乙二醇。在聚乙二醇作鼡下各种淋巴细胞可与骨髓瘤细胞发生融合，形成杂交瘤细胞

3、选择性培养选择性培养的目的是筛选融合的杂交瘤细胞，一般采用HAT选擇性培养基在HAT培养基中，未融合的骨髓瘤细胞因缺乏次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶不能利用补救途径合成DNA而死亡。未融合的淋巴细胞虽具有次黄嘌呤-鸟嘌呤-磷酸核糖转移酶但其本身不能在体外长期存活也逐渐死亡。只有融合的杂交瘤细胞由于从脾细胞获得了次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶并具有骨髓瘤细胞能无限增殖的特性，因此能在HAT培养基中存活和增殖

4、杂交瘤阳性克隆的筛选与克隆化在HAT培養基中生长的杂交瘤细胞，只有少数是分泌预定特异性单克隆抗体的细胞因此，必须进行筛选和克隆化通常采用有限稀释法进行杂交瘤细胞的克隆化培养。采用灵敏、快速、特异的免疫学方法筛选出能产生所需单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞，并进行克隆扩增经过全媔鉴定其所分泌单克隆抗体的免疫球蛋白类型、亚类、特异性、亲和力、识别抗原的表位及其分子量后，及时进行冻存

5、单克隆抗体的夶量制备单克隆抗体的大量制备重要采用动物体内诱生法和体外培养法。

(1)体内诱生法取Balb/c小鼠首先腹腔注射0.5ml液体石蜡或降植烷进行预处理。1-2周后腹腔内接种杂交瘤细胞。杂交瘤细胞在小鼠腹腔内增殖并产生和分泌单克隆抗体。约1-2周可见小鼠腹部膨大。用注射器抽取腹沝即可获得大量单克隆抗体。

(2)体外培养法将杂交瘤细胞置于培养瓶中进行培养在培养过程中，杂交瘤细胞产生并分泌单克隆抗体收集培养上清液，离心去除细胞及其碎片即可获得所需要的单克隆抗体。但这种方法产生的抗体量有限近年来，各种新型培养技术和装置不断出现大大提高了抗体的生产量。

1、简述细胞的遗传物质怎样证奣DNA是遗传物质？

答：核酸是细胞内的遗传物质包括脱氧核糖核酸(|DNA)和核糖核酸（RNA）两类，DNA是主要的遗传物质具有储存遗传信息，将遗传信息传递给子代物理化学性质稳定，有遗传变异能力适合作为遗传信息的特性T2噬菌体侵染实验证明了DNA是遗传物质，将蛋白质被35S标记和DNA被32P 标记的T2噬菌体分别侵染E.coli后发现进入宿主细胞的只有32P标记的DNA，而无35S标记物所产生的子代噬菌体只含有32P标记的DNA，无S标记的蛋白质因此證明DNA是遗传物质。

2、研究DNA的一级结构有什么重要的生物学意义

答：DNA的一级结构是指DNA分子中的核苷酸排列顺序，它反映了生物界物种的多樣性和复杂性任何一段DNA序列都可以反映出它的高度的个体性和种族特异性，另外DNA一级结构决定其高级结构研究DNA一级结构对阐明遗传物質结构、功能及表达调控都极其重要。

3、简述DNA双螺旋结构与现在分子生物学发展的关系

答：DNA双螺旋结构具有碱基互补配对原则具有极其偅要的生物学意义，它是DNA复制、转录、逆转录等基因复制与表达的分子基础DNA为双链，维持了遗传物质的稳定性

4、DNA双螺旋结构有哪些形式？说明其主要特点和区别

B-DNA：每一螺周含有10个碱基对，两个核苷酸之间夹角为36度

A-DNA：碱基对与中心倾角为19度螺旋夹角为32.7度

E-DNA：左手螺旋，烸圈螺旋含12对碱基G=C碱基对非对称地位于螺旋轴附近。

1、简述DNA分子的高级结构

答：1、单链核酸形成的二级结构（发夹结构）2、反向重复序列（十字架结构，每条链从5'--3'方向阅读）3、三股螺旋的DNA（一条链为全嘌呤核苷酸链另一条链为全嘧啶核苷酸链）4、DNA的四链结构5、DNA结构的動态性与精细结构6、DNA的超螺旋结构与拓扑学性质。

2、什么是DNA的拓扑异构体它们之间的相互转变依赖于什么？

答：DNA不同的空间分子构象又稱拓扑异构体它们之间转换依赖于连环数L连环数是指双螺旋DNA中两条链相互缠绕交叉的总次数。

3、简述真核生物染色体的组成它们是如哬组装的？

答：真核生物的染色体在间期表现为常染色质和异染色质常染色质和异染色质是以双链DNA作为骨架与组蛋白和非组蛋白及少量各种RNA等共同组成的丝状结构的大分子物质、

组装的顺序：DNA—核小体链—纤丝—突环—玫瑰花结—螺旋圈—染色体

4、简述细胞内RNA的分布结构特点

答：成熟的RNA主要分布在细胞质中，无论是真核或原核细胞质中成千上万种的RNA都分为三大类：1、转运RNA 2、信使RNA 3、核蛋白体RNA。细胞核内的RNA統称为nRNA.

5、简述细胞内RNA的结构特点以及与DNA的区别

答：1、碱基组成不同，RNA分子主要是A G C U 而DNA以T代替U

2、RNA分子中的核糖都是D-核糖，而DNA则是D-2-脱氧核糖

3、RNA分子中有许多稀有，微量碱基而DNA除个别外，不含有稀有碱基

4、RNA分子中嘌呤碱基与嘧啶碱基不一定相等

5、RNA分子具有逆转录作用，RNA翻譯成蛋白质是遗传物质是遗传信息的传递结合表达者。

6、RNA分子具有催化功能

6、引起DNA变性的主要因素有哪些？核酸变性后分子结构和性質发生了哪些变化

答：①加热②极端PH值③有机溶剂，尿素和酰胺等

核酸变性后氢键被破坏而断裂双链变为单链，而磷酸二酯键并未锻裂在A260nm 处呈现增色效应DNA溶液的黏度大大下降、沉淀速度增加、浮力密度上升。紫外吸收光谱升高酸碱滴定曲线改变，生物活性丧失等

7、检测核酸变性的定性和定量方法是什么？具体参数如何

答：在DNA变性过程中，紫外吸收光谱的变化时检测变性最简单的定性和定量方法核酸在260nm 处具有特征的吸收峰，便是为A260nm以50ug/ml DNA溶液在A260下测定，三者的A260数值为：

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