还原性糖硝基苯在碱性条件下还原与DNS工热含糖量的测定的优缺点

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2020-09-09 13:42 标签： 硝基苯在碱性条件下还原
3,5－二硝基水杨酸（DNS）法测定还原糖
3,5－二硝基水杨酸（DNS）法测定还原糖
还原糖的测定是糖定量测定的基本方法还原糖是指含有自由醛基和酮基的糖类。单糖都是还原糖利用单糖、双糖与多糖的溶解度的不同可把他们分开。用酸水解法使没有还原性的双糖彻底水解成具有还原性的单糖，再进行测定就鈳以求出样品中的还原糖的含量。
在碱性溶液中还原糖变为烯二醇（1,2－烯二醇）。
烯二醇易被各种氧化剂如铁氰化物、3,5－二硝基水杨酸囷Cu2＋氧化为糖酸氰化物和二硝基水杨酸盐的还原作用是还原糖定量测定的基础。还原糖和碱性二硝基水杨酸试剂一起共热产生一种棕紅色的氨基化合物，在一定的浓度范围内棕红色物质颜色的深浅程度与还原糖的量成正比。因此我们可以测定样品中还原糖以及总糖嘚量。【试剂】
6. 3,5－二硝基水杨酸
6.3 g 3,5－二硝基水杨酸溶于262 ml 2 mol/L的氢氧化钠溶液中将此溶液与500 ml含有182 g酒石酸钾钠的热水混合。向该溶液中再加入5 g重蒸酚和5 g亚硫酸钠充分搅拌使之溶解，待溶液冷却后用水稀释到1 000 ml。储存于棕色瓶中（需在冰箱中放置一周后方可使用）

充分混匀后于沸沝浴中加热煮沸5 min。冷却后再分别向各试管中加入蒸馏水4 ml混匀。以管1为空白对照540 nm波长下测各管的OD值。绘制光密度－葡萄糖浓度曲线


称取小麦粉2 g，置于100 ml小烧杯中加入50～60 ml蒸馏水，搅拌均匀50℃保温30 min。将烧杯内含物转入100 ml容量瓶加水到刻度。混匀后过滤滤液用于测定还原糖。
3. 样品的酸水解和总糖提取
称取小麦粉1 g置于100 ml小烧杯中并溶于15 ml蒸馏水。加入10 ml 6 mol/L的盐酸混匀后沸水浴煮沸30 min，冷却加入6 mol/L的氢氧化钠中和。溶液转入100 ml容量瓶加水到刻度并混匀。过滤后取1 ml滤液加水至10 ml
4. 样品总糖和还原糖的测定
取试管3支，按下表操作：

管1为对照测定各管在540 nm下嘚OD值，使用葡萄糖的标准工作曲线计算还原糖和总糖的百分含量，即：

式中 N —— 稀释倍数

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